基于腫瘤微環(huán)境的納米靶向載體研究進(jìn)展

陳 曦，祝星宇，馬博樂(lè)，陳雨晴，閻雪瑩（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，哈爾濱 150000）

基于腫瘤微環(huán)境的納米靶向載體研究進(jìn)展

陳 曦＊，祝星宇，馬博樂(lè)，陳雨晴，閻雪瑩#（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，哈爾濱 150000）

目的：為納米靶向載體研制提供參考。方法：以“腫瘤微環(huán)境”“納米靶向載體”“靶向治療”“pH sensitive”“Enzyme responsive””Redox responsive”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2005－2016年在PubMed、Elsevier、SpringerLink、中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)中的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)腫瘤組織微環(huán)境的特點(diǎn)和腫瘤微環(huán)境響應(yīng)性納米載藥系統(tǒng)研究進(jìn)行綜述。結(jié)果與結(jié)論：共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)235篇，其中有效文獻(xiàn)39篇。腫瘤組織微環(huán)境主要特點(diǎn)包括微酸性、酶代謝異常、細(xì)胞內(nèi)外存在還原性差異、存在影響腫瘤血管生成的因子和信號(hào)通路等?；谏鲜鎏攸c(diǎn)，分別研究出基于腫瘤滯留效應(yīng)設(shè)計(jì)的納米載體、pH響應(yīng)型納米載體、還原響應(yīng)型納米載體、酶響應(yīng)型納米載體、溫度響應(yīng)型納米載體。與這些單響應(yīng)載體比較，腫瘤微環(huán)境多重刺激響應(yīng)型納米載體更能充分發(fā)揮不同腫瘤微環(huán)境響應(yīng)性物質(zhì)之間的特點(diǎn)，對(duì)實(shí)現(xiàn)藥物的特異性遞送更有意義，這也將是今后的主要研究熱點(diǎn)。

腫瘤微環(huán)境；納米載藥系統(tǒng)；靶向治療；環(huán)境響應(yīng)性

近年來(lái)，隨著對(duì)腫瘤微環(huán)境的深入研究，人們發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境是一個(gè)低pH值、缺氧并有多種免疫細(xì)胞組成的復(fù)雜結(jié)構(gòu)[1]，對(duì)腫瘤的生成、增殖及轉(zhuǎn)移具有重要的調(diào)控作用。據(jù)此，針對(duì)不同的細(xì)胞和靶點(diǎn)來(lái)設(shè)計(jì)新型藥物載體來(lái)對(duì)抗腫瘤已經(jīng)是一種新的策略。常用的腫瘤微環(huán)境刺激因子有pH、還原性物質(zhì)、酶濃度、三磷酸腺苷（ATP）。利用腫瘤微環(huán)境的靶向治療，可以達(dá)到廣譜、低毒、耐藥性小的目的，并且能有效地切斷腫瘤細(xì)胞與其微環(huán)境的相互作用，更高效地抑制腫瘤細(xì)胞增殖。筆者以“腫瘤微環(huán)境”“納米靶向載體”“靶向治療”“pH sensitive”“Enzyme responsive””Redox responsive”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2005－2016年在PubMed、Elsevier、SpringerLink、中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)中的相關(guān)文獻(xiàn)。結(jié)果，共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)235篇，其中有效文獻(xiàn)39篇?，F(xiàn)對(duì)腫瘤組織微環(huán)境的特點(diǎn)和腫瘤微環(huán)境響應(yīng)性納米載藥系統(tǒng)研究進(jìn)行綜述，以期為納米靶向載體研制提供參考。

1 腫瘤組織微環(huán)境的特點(diǎn)

1.1 腫瘤組織微酸環(huán)境

正常組織細(xì)胞通過(guò)線粒體的氧化分解提供細(xì)胞所需要的能量，而腫瘤細(xì)胞則通過(guò)糖酵解途徑供能，這個(gè)過(guò)程稱之為“Warburg效應(yīng)”[2]。腫瘤細(xì)胞糖酵解途徑產(chǎn)生大量的乳酸，為了維持pH穩(wěn)定，細(xì)胞將乳酸外排，從而產(chǎn)生微酸環(huán)境[3-4]。相對(duì)于正常組織和細(xì)胞外的pH值（7.4），腫瘤組織細(xì)胞外環(huán)境pH值（6.5～6.8）要低一些，而腫瘤細(xì)胞內(nèi)pH值更低。這種微酸環(huán)境為納米載體研制提供了新的策略[5]。

1.2 腫瘤組織中的酶

腫瘤微環(huán)境中包含參與腫瘤發(fā)生和發(fā)展的酶，根據(jù)酶的特點(diǎn)為腫瘤微環(huán)境酶響應(yīng)型藥物載體設(shè)計(jì)提供了新的方法。例如，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）在腫瘤組織中特異性表達(dá)，與腫瘤的侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有著密切聯(lián)系。Zhu L等[6]用MMP-2可剪切的短肽（序列為Gly-Pro-Leu-Gly-Ile-Ala-Gly-Gln）與聚乙二醇（PEG）連接，使靶向基團(tuán)避免網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬，到達(dá)腫瘤組織，極大地提高了藥物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的積累量。腫瘤藥物載體中另一個(gè)常用的連接鍵是可以被溶酶體中組織蛋白酶B（Cat-B）剪切的四肽（Gly-Phe-Leu-Gly）。正常組織中Cat-B在溶酶體中被6-磷酸甘露糖受體識(shí)別并活化，而腫瘤組織中Cat-B由于無(wú)法進(jìn)入溶酶體，以酶原形式存在于細(xì)胞質(zhì)或外排至細(xì)胞外。處在微酸環(huán)境中的Cat-B被激活，從而參與胞外基質(zhì)的降解和腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。在多種腫瘤模型中均發(fā)現(xiàn)，Cat-B的表達(dá)量和活性是正常組織中的3～9倍[7]。

1.3 還原環(huán)境

由于腫瘤細(xì)胞內(nèi)、外環(huán)境具有電位差異，導(dǎo)致腫瘤組織存在一定的還原性，這也為納米靶向藥物載體響應(yīng)釋放提供了另一種方式。細(xì)胞內(nèi)外還原環(huán)境的差異主要是因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)某些巰基物質(zhì)的存在，例如NADPH/ NADP+、硫蛋白和谷胱甘肽等。細(xì)胞內(nèi)多種細(xì)胞器，例如胞質(zhì)溶膠、線粒體和細(xì)胞核等，均含濃度非常高的谷胱甘肽（GSH，2～10mmol/L），是細(xì)胞外液體和血液中（約2～20 nmol/L）的100～1 000倍[8]。因此，GSH已經(jīng)被確認(rèn)為是一種理想的引發(fā)藥物載體解離和藥物快速釋放的細(xì)胞內(nèi)刺激元素。在藥物載體的中引入“二硫鍵”是建立GSH響應(yīng)型藥物載體的一種最為常用的方法。將基于雙硒鍵的氧化還原敏感的高分子材料作為載體，該載體在細(xì)胞外保持相對(duì)穩(wěn)定，然而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的還原環(huán)境的存在下，雙硒鍵發(fā)生斷裂，導(dǎo)致高分子材料的快速降解和負(fù)荷物質(zhì)的快速釋放[9]。

1.4 腫瘤血管生成

腫瘤組織中有許多因子和信號(hào)通路，其對(duì)血管生成有重要的影響[10]。腫瘤細(xì)胞通過(guò)在細(xì)胞質(zhì)中生成腫瘤微血管，通過(guò)這些微血管，腫瘤細(xì)胞與腫瘤微環(huán)境之間進(jìn)行信號(hào)傳遞[11]。殷香保等[12]以PEG-聚乳酸（PLA）為載體包載三氧化二砷（As2O3），并偶聯(lián)腫瘤血管抑制因子血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（VEGFR-2），研究荷瘤裸鼠不同組織中藥物濃度及腫瘤抑制率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，藥物在不同組織中的分布具有明顯差異，腫瘤組織中藥物濃度明顯高于其他組織；VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA組的腫瘤抑制率分別為對(duì)照組的2.7倍及As2O3組的2倍。可以看出腫瘤血管的生成是腫瘤微環(huán)境的重要特征，探究腫瘤微血管生成誘導(dǎo)和抑制因子，能夠?yàn)樾滦图{米靶向載體研究提供新的策略。

2 腫瘤微環(huán)境響應(yīng)性納米載藥系統(tǒng)

2.1 基于腫瘤EPR效應(yīng)設(shè)計(jì)的納米載體

由于正常組織與腫瘤組織血管內(nèi)皮細(xì)胞排列致密程度不同，腫瘤組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞間隙大于正常組織，結(jié)構(gòu)完整性差并且淋巴回流缺失，會(huì)造成大分子物質(zhì)在腫瘤組織具有選擇性的高通透性和滯留性，這種現(xiàn)象稱為EPR效應(yīng)。EPR效應(yīng)，即實(shí)體瘤的高通透性和滯留效應(yīng)，指的是相對(duì)于正常組織，某些尺寸的分子或顆粒更趨向于聚集在腫瘤組織的性質(zhì)。腫瘤組織存在EPR效應(yīng)見(jiàn)圖1。

圖1 腫瘤組織的EPR效應(yīng)

大多數(shù)人類腫瘤組織環(huán)境均存在EPR效應(yīng)。需要指出的是，基于EPR效應(yīng)設(shè)計(jì)的藥物載體在腫瘤組織中的被動(dòng)靶向性依賴于腫瘤血管的孔徑。因此，設(shè)計(jì)的藥物載體的尺寸通常應(yīng)該小于400 nm，大于此尺寸的顆粒不易穿透腫瘤血管，達(dá)不到在腫瘤部位富集的目的[13-14]；而小于10 nm的粒子在體內(nèi)循環(huán)中容易被腎捕獲而清除，同樣也不利于藥物載體在腫瘤部位的富集。這是基于EPR效應(yīng)設(shè)計(jì)藥物載體時(shí)必須注意的。

目前上市的脂質(zhì)體藥物Doxil?和Myocet?即是采用實(shí)體瘤的EPR效應(yīng)設(shè)計(jì)的藥物載體。Myocet?是非PEG脂質(zhì)體，平均尺寸在180 nm，臨床上主要聯(lián)合其他化療試劑使用治療乳腺癌[15]；Doxil?是PEG化脂質(zhì)體，較普通脂質(zhì)體在體內(nèi)有更長(zhǎng)的滯留時(shí)間，其平均粒徑在100 nm左右，臨床上主要用于治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌、晚期卵巢癌、卡波西氏肉瘤等[16]。Abraxane?-白蛋白結(jié)合型紫杉醇類藥物，借助EPR效應(yīng)治療聯(lián)合化療失敗后的轉(zhuǎn)移性乳腺癌或輔助化療6個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)的乳腺癌、轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌和胰腺癌等[17]。以上這些基于EPR效應(yīng)設(shè)計(jì)的藥物載體，既可以使藥物更多地集中在腫瘤組織，也可以改善患者生活質(zhì)量。

2.2 pH響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)

利用腫瘤組織相對(duì)于正常組織具有較低pH值的這個(gè)特點(diǎn)，可將藥物運(yùn)送到目標(biāo)位置，使在血液中處于“沉默”狀態(tài)的藥物在腫瘤部位蓄積，受到腫瘤微酸環(huán)境的影響，使pH響應(yīng)性化學(xué)鍵斷裂或使電荷解離等，暴露出“激活”狀態(tài)的藥物載體或者藥物分子，可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的攝取，從而提高抗腫瘤效果和降低毒性。目前設(shè)計(jì)響應(yīng)型載體一般有2種方法：一種方法是利用一些不穩(wěn)定化學(xué)鍵的特點(diǎn)制備載體，其在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定，然而在腫瘤微酸環(huán)境下，化學(xué)鍵可發(fā)生斷裂，使藥物得到釋放或促進(jìn)載體與腫瘤細(xì)胞的相互作用，提高藥物攝取率[18-19]。另一種方法是借助含有質(zhì)子的基團(tuán)來(lái)合成載體，在不同pH環(huán)境下載體帶電的情況不同，使藥物可在微酸環(huán)境下釋放。

Zhu Q等[20]為了降低阿霉素（DOX）的心臟毒性，研究出DOX自組裝的腫瘤pH響應(yīng)型載體。研究者將DOX插入DNA雙鏈中，再將其進(jìn)一步與陽(yáng)離子明膠（C-gel）進(jìn)行偶聯(lián)，形成復(fù)雜的載體結(jié)構(gòu)（GDD）。帶正電的載體進(jìn)入血液后與帶負(fù)電的人血清蛋白（HSA）之間發(fā)生靜電相互作用，載體表面吸附的血清蛋白可以使載體避開(kāi)吞噬，被動(dòng)積累到腫瘤部位。到達(dá)腫瘤組織后，表面的白蛋白在環(huán)境pH小于7時(shí)被迅速分解，載體與腫瘤特異性MMP相互作用，釋放出內(nèi)部的DOX/ DNA，組織中的DNA酶可以消化DNA分子釋放DOX進(jìn)入微環(huán)境。結(jié)果表明，這種新合成的載體有更好的腫瘤靶向能力以及比游離DOX更低的心臟毒性。

Zuo TT等[21]成功制備精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽（RGD）介導(dǎo)的載多烯紫杉醇（DTX）pH敏感脂質(zhì)體（RGD/DTX-PSL），可以有選擇地在低pH水平環(huán)境釋放藥物，并通過(guò)表面的RGD定位到腫瘤組織。研究者通過(guò)薄膜水化法，以磷脂酰乙醇胺、膽固醇、亞油酸（LA）及精氨酸、甘氨酸、天冬氨酸-PEG2000-LA為材料制備敏感載體，藥物平均裝載率為81.9%，平均粒徑為146.4 nm。亞油酸在弱酸性環(huán)境中，其結(jié)構(gòu)中羧基發(fā)生質(zhì)子化，親水的頭部縮小，使整體結(jié)構(gòu)由圓錐形變?yōu)閳A柱形，最終載體破裂并釋放其中的藥物。體外藥物釋放結(jié)果顯示，DTX在pH值為5.0的條件下，較pH值為7.0條件下釋放更快，表明了其pH敏感特性。

2.3 還原響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)

腫瘤細(xì)胞內(nèi)除了有GSH，還存在硫蛋白、Fe2+、半胱氨酸等還原性物質(zhì)。利用腫瘤細(xì)胞內(nèi)外存在的GSH濃度差異（100～1 000倍），以及腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞之間的濃度差[8]，可有針對(duì)性地設(shè)計(jì)腫瘤細(xì)胞內(nèi)外還原響應(yīng)型藥物載體。

ShiCL等[22]用PEG和聚己內(nèi)酯，由二硫鍵連接，以季戊四醇為核，形成星形的兩親嵌段共聚物膠束。通過(guò)體外模擬人體內(nèi)生理環(huán)境，在pH值為7.4且未加入GSH的條件下，72 h時(shí)只有大約10%的DOX釋放；在pH值為5.0且未加入GSH條件下，DOX的累積釋放量有顯著增加，表明DOX在偏酸環(huán)境更容易釋放；當(dāng)pH值為5.0同時(shí)含有10mmol/LGSH條件下，因模擬腫瘤細(xì)胞內(nèi)部的弱酸性和還原性，DOX的累積釋放量急劇增加，24 h可達(dá)到85.9%，說(shuō)明了該膠束載體在酸性和高GSH環(huán)境下可快速釋放藥物。Yu SJ等[23]設(shè)計(jì)并制備了酸響應(yīng)和還原雙敏感的聚氨酯交聯(lián)的膠束載體，以PEG鏈為親水殼，鏈中插入的哌啶和二硫鍵分別具有酸響應(yīng)和還原性響應(yīng)。通過(guò)動(dòng)態(tài)光散射試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在較高濃度還原劑的條件下，膠束會(huì)發(fā)生解離。將DOX作為模型藥物，通過(guò)體外細(xì)胞試驗(yàn)表明載藥交聯(lián)膠束能夠在酸性和還原環(huán)境下實(shí)現(xiàn)藥物的釋放；交聯(lián)后的載藥膠束較游離DOX和未交聯(lián)的聚氨酯載藥膠束具有更低的細(xì)胞毒性，這說(shuō)明交聯(lián)膠束具有更高的載藥穩(wěn)定性。串星星等[24]在普朗尼克F127疏水段引入甲基丙烯酸叔丁酯和半胱胺，合成強(qiáng)疏水性的巰基化衍生物F127-SH，利用F127-SH制備了載紫杉醇（PTX）還原響應(yīng)型聚合物膠束（F127-SS/PTX）。結(jié)果顯示，在無(wú)二硫蘇糖醇（DTT）條件下，F(xiàn)127-SS/PTX膠束在前6 h釋藥較快，之后緩慢釋藥，24 h時(shí)釋放量為50.15%；而在有DTT條件下，釋藥速率則大大加快，24 h時(shí)釋放量達(dá)到74.21%，明顯高于無(wú)DTT作用下藥物的釋放。這說(shuō)明載體在二硫鍵交聯(lián)作用下能夠保持穩(wěn)定，而在還原劑存在時(shí)二硫鍵斷裂，藥物可快速釋放。

2.4 酶響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)

腫瘤組織酶濃度和活性都顯著高于正常組織，其對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)、增殖及轉(zhuǎn)移都有重要影響。由于酶具有高度選擇性，用特異性酶作為靶向腫瘤的底物，是納米載體研究的一個(gè)新的方向。蛋白酶和一些脂肪酶已被證實(shí)在腫瘤組織過(guò)度表達(dá)[24]。MMP是一類基質(zhì)中分解細(xì)胞組分的蛋白酶，其在腫瘤微環(huán)境過(guò)度表達(dá)，對(duì)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移有重要影響[25]。特別是MMP-2和MMP-9，在胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌和卵巢癌等腫瘤組織中都過(guò)度表達(dá)[26-27]。除此之外，糖苷酶、組織蛋白酶、酯酶等也被設(shè)計(jì)應(yīng)用于酶敏感的納米靶向載體。

Liu J等[28]構(gòu)建了酶響應(yīng)的多級(jí)釋放納米粒子載體（ESMSV），將MMP-2與聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）-PEG交聯(lián)成納米粒子，模型藥物香豆素6被封裝在聚合物納米粒子內(nèi)，之后將納米粒子綴合到介孔二氧化硅表面。在MMP-2的存在下，聚合物納米顆粒被釋放到腫瘤細(xì)胞間質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了藥物釋放，同時(shí)促進(jìn)了藥物的細(xì)胞內(nèi)化。此外，黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的小鼠模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，相比于非刺激響應(yīng)納米粒子，ESMSV的全身遞送在癌細(xì)胞中藥物聚集的量顯著增加。

因?yàn)榘┘?xì)胞通常過(guò)度表達(dá)Cat-B[29]，Lee SJ等[30]將Gly-Phe-Leu-Gly通過(guò)羧基基團(tuán)共軛締和為樹枝狀大分子，然后甲氧基聚乙二醇（MPEG）與DOX通過(guò)二亞胺反應(yīng)相連接，合成結(jié)構(gòu)為MPEG-DOX的大分子，隨后分子表面經(jīng)Cat-B的修飾，利用酶特異性將抗癌藥物靶向腫瘤組織。通過(guò)對(duì)荷瘤小鼠的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示所合成的樹枝狀大分子組小鼠腫瘤體積明顯減小。

2.5 溫度響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)

機(jī)體正常組織在體溫升高時(shí)（40～43℃），通過(guò)增大血流量、加快流速以提高散熱，減少對(duì)機(jī)體的損傷。然而，由于腫瘤組織內(nèi)細(xì)胞快速增殖，密度過(guò)高，新生血管畸形，導(dǎo)致散熱困難，從而比正常組織溫度要高4～8℃[31]。根據(jù)這一特點(diǎn)，可以對(duì)腫瘤局部進(jìn)行加熱來(lái)誘導(dǎo)溫敏載體向腫瘤靶向。目前，常用的溫敏材料是聚（N-異丙基丙烯酰胺）（PNIPAM）。因?yàn)镻NIPAM的低臨界溶解溫度（LSCT）更接近于人體生理溫度[32]，通過(guò)引入親水單體，會(huì)提高聚合物的LCST，可使聚合物有更好的溫度敏感性。聚甲基丙烯酸N，N-二甲基氨基乙酯（PDMAEMA）是另一種重要的溫敏材料，可同時(shí)對(duì)酸和溫度產(chǎn)生響應(yīng)。其結(jié)構(gòu)含烷基、羰基和叔氨基團(tuán)，溫度或pH值變化時(shí)，其中的氫鍵形成或破壞，從而產(chǎn)生了高分子相態(tài)的變化。Ta T等[33]制備了表面經(jīng)PNIPAM-丙基丙烯酸修飾的溫敏脂質(zhì)體，通過(guò)局部加熱使溫度高于LCST，這時(shí)脂質(zhì)體膜的完整性被破壞，藥物進(jìn)而釋放。

2.6 能量響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)

腫瘤細(xì)胞內(nèi)的ATP濃度（1～10mmol/L）遠(yuǎn)高于細(xì)胞外的濃度（＜5mmol/L），此現(xiàn)象在代謝旺盛的腫瘤細(xì)胞中尤為明顯[34]。ATP作為一個(gè)新的響應(yīng)觸發(fā)器，其優(yōu)點(diǎn)是：（1）細(xì)胞內(nèi)外存在的ATP濃度差異，可以使提前釋放的藥物不過(guò)早被細(xì)胞攝取，從而提高藥物在細(xì)胞內(nèi)的積累量；（2）ATP參與體內(nèi)很多生化反應(yīng)，使得基于ATP響應(yīng)策略的載體，不需要任何特殊的設(shè)備（如超聲或光），就能觸發(fā)藥物釋放；（3）ATP的水平可以通過(guò)其他代謝元素（如葡萄糖）來(lái)調(diào)節(jié)響應(yīng)的寬度范圍。藥物與ATP響應(yīng)納米載體之間相互作用的范圍不同，可用于不同藥物的負(fù)載，所以基于ATP響應(yīng)設(shè)計(jì)的納米載體具有更大的研究?jī)r(jià)值。到目前為止，生物大分子特異性識(shí)別ATP有2種類型：（1）單鏈DNA（ssDNA）核酸配體能夠特異性與ATP位點(diǎn)結(jié)合[34]；（2）通過(guò)代謝ATP提供能量[35]。

Qian CG等[36]合成了5′-ATP響應(yīng)型-近紅外光控制釋放抗癌藥的納米聚合物載體，并可以實(shí)時(shí)成像。研究者將甲?；脚鹚崤cPEG結(jié)合成共聚物（PFFP），將DOX封裝于內(nèi)，以疏水內(nèi)核噻吩吡啶部分作為成像劑。納米載體表面上接枝3-氟-4-羧基苯基硼酸，被設(shè)計(jì)成ATP特異結(jié)合位點(diǎn)。由于癌細(xì)胞內(nèi)高濃度的ATP，使載體表面水解進(jìn)而釋放藥物。靜脈注射結(jié)果顯示，DOX/ PFFP在腫瘤細(xì)胞有更好的滲透性和滯留性，同時(shí)硼酸部分的水解能使藥物更好運(yùn)送到腫瘤細(xì)胞。

Mo R等[37]研究發(fā)現(xiàn)，在納米聚合物載體內(nèi)，用ssDNA與互補(bǔ)核苷酸形成DNA雙分子鏈，其中一個(gè)“GC”對(duì)中裝載了DOX。在沒(méi)有ATP存在的環(huán)境下，DNA雙鏈能夠穩(wěn)定地保持DOX的裝載；而在高濃度ATP的條件下，ATP將與互補(bǔ)DNA競(jìng)爭(zhēng)ATP受體，結(jié)果使雙分子鏈解離，藥物也會(huì)隨之釋放。

2.7 復(fù)合型多重響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)

Loh XJ等[38]制備了雙親水性嵌段共聚物，其能在體內(nèi)自組裝為膠束，PNIPAM為溫敏材料，PDMAEMA為pH響應(yīng)材料。結(jié)果顯示，裝載DOX的共聚物膠束具有pH/溫度雙響應(yīng)性釋放的特點(diǎn)，可顯著殺傷HeLa細(xì)胞。Yang P等[39]合成了超聲/pH/還原三重響應(yīng)的納米載體，用全氟己烷作為載體內(nèi)殼，使其具有超聲敏感性。以超聲誘發(fā)液滴氣化，進(jìn)而提高超聲的成像性，同時(shí)可以增加血管的滲透性，可使納米載體更多地蓄積在腫瘤部位。聚甲基丙烯酸與二硫鍵締和成為載體外殼，載體包封DOX，可同時(shí)具有溫敏和還原敏感的雙重特點(diǎn)，具有診斷和治療意義。

3 結(jié)語(yǔ)

近年來(lái)，通過(guò)研究腫瘤微環(huán)境，利用其獨(dú)特的響應(yīng)因素有效地解決了載體轉(zhuǎn)運(yùn)穩(wěn)定性、靶向性、藥物定位釋放等難題，有效地增加了抗腫瘤藥的作用效果，并減輕了藥物的毒副作用。目前，腫瘤微環(huán)境多重響應(yīng)型納米載體正受到越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注，如pH/溫度、pH/還原、還原/酶、溫度/酶、溫度/磁場(chǎng)、pH/溫度/磁場(chǎng)等將成為主要研究熱點(diǎn)。多重刺激響應(yīng)體系能充分發(fā)揮不同環(huán)境響應(yīng)性物質(zhì)之間的特點(diǎn)，對(duì)實(shí)現(xiàn)藥物的特異性遞送具有重要意義。多重刺激響應(yīng)型藥物載體較單響應(yīng)載體存在載體結(jié)構(gòu)修飾、合成更加復(fù)雜，質(zhì)量控制更難等問(wèn)題，但隨著高分子材料學(xué)、腫瘤分子學(xué)等學(xué)科的不斷發(fā)展和相互滲透，此類問(wèn)題將會(huì)得到有效解決，未來(lái)微環(huán)境響應(yīng)型納米載藥系統(tǒng)將會(huì)為抗腫瘤研究提供新的策略。

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（編輯：余慶華）

R944.9

A

1001-0408（2017）13-1864-06

2016-10-17

2017-03-01）

＊碩士研究生。研究方向：緩控釋靶向制劑、中藥新藥研發(fā)。電話：0451-87266907。E-mail：qiaofu351@163.com

#通信作者：教授，博士。研究方向：緩控釋靶向制劑、中藥新藥研發(fā)。電話：0451-87266988。E-mail：15159267@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.13.38