三種方法檢測(cè)潛伏妊娠梅毒的臨床評(píng)價(jià)

摘要：目的：探討三種方法檢測(cè)潛伏妊娠梅毒的臨床價(jià)值。方法：隨機(jī)選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產(chǎn)保健孕婦800例，梅毒反應(yīng)素選擇TRUST（甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)）檢驗(yàn)，梅毒螺體抗體選擇ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TPPA（梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)）與膠體金法（金免疫層析試驗(yàn)）檢驗(yàn)。即TPPA檢驗(yàn)均呈現(xiàn)陽(yáng)性指標(biāo)時(shí)，方可確診為潛伏妊娠梅毒。結(jié)果：本次實(shí)驗(yàn)800例孕婦中，潛伏妊娠梅毒患者共存在25例，陽(yáng)性檢出率為3.12%。3種檢驗(yàn)方法結(jié)果對(duì)比中，可知ELISA檢驗(yàn)符合率明顯高于其它兩種，假陽(yáng)性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗(yàn)方法；ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%，陰性預(yù)測(cè)值更是在98%以上，且ELISA實(shí)驗(yàn)具有最高陽(yáng)性似然和最低陰性似然的現(xiàn)象。結(jié)論：ELISA檢驗(yàn)作為潛伏妊娠梅毒檢測(cè)常見方法，輔助TRUST檢驗(yàn)和膠體金法工作的開展，可提升陽(yáng)性檢出率，為后續(xù)母嬰傳播預(yù)防及阻斷提供可靠性數(shù)據(jù)支持。

關(guān)鍵詞：血清檢查；潛伏妊娠梅毒；陽(yáng)性率

梅毒作為性傳播病癥，主要因梅毒螺旋體感染導(dǎo)致的全身性病變，性接觸、妊娠均屬于該病傳播的主要方式。特別在女性妊娠期間，梅毒感染將會(huì)引起早產(chǎn)和胎兒水腫、流產(chǎn)與死產(chǎn)、宮內(nèi)生長(zhǎng)局限等問(wèn)題，而在新生兒中后遺癥也尤為嚴(yán)重，即先天梅毒兒[1]。因此，加強(qiáng)孕婦產(chǎn)前檢查于治療，是預(yù)防胎傳梅毒的關(guān)鍵手段。鑒于此，隨機(jī)選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產(chǎn)保健孕婦800例為研究對(duì)象，探討三種方法檢測(cè)潛伏妊娠梅毒的臨床價(jià)值?，F(xiàn)總結(jié)如下：

1 資料與方法

1.1 研究資料

隨機(jī)選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產(chǎn)保健孕婦800例，年齡區(qū)間在20-39歲，年齡中位數(shù)為（29.5±9.5）歲。800例孕婦中，均無(wú)任何梅毒癥狀及體征；采用空腹肘靜脈采血的方式，以5ml血液樣本為基準(zhǔn)，對(duì)樣本血清予以分離處理。潛伏妊娠梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)：孕婦或配偶存在梅毒感染史、婚外性行為；本人存在流產(chǎn)和早產(chǎn)、死產(chǎn)與分娩梅毒兒等現(xiàn)象；血清學(xué)檢查呈現(xiàn)陽(yáng)性；無(wú)任何梅毒癥狀或體征。先天梅毒兒診斷標(biāo)準(zhǔn)：新生兒、母親血清梅毒檢查中，均呈現(xiàn)陽(yáng)性；新生兒存在以下2種及其以上表現(xiàn)，斑疹和股端掌趾蛻皮、斑丘疹和黏膜損害、肝脾腫大與病理性黃疸、水腫、貧血及呼吸困難、腹脹、低體重等。

1.2 儀器與試劑

儀器：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)（均由北京普朗公司生產(chǎn)）和核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)儀（羅氏lightcycler2.0）；試劑：TP-ELISA試劑盒（生產(chǎn)企業(yè)：英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司）、TRUST試劑盒（生產(chǎn)企業(yè)：上海榮盛有限公司）、GICA試劑盒（生產(chǎn)企業(yè)：艾康（杭州）生物有限公司）、TPPA試劑盒（生產(chǎn)企業(yè)：日本富士瑞必歐株式會(huì)社）、室內(nèi)質(zhì)控血清（生產(chǎn)企業(yè)：科華公司）。

1.3 檢測(cè)

對(duì)800例孕婦血清予以檢驗(yàn)，即TRUST檢驗(yàn)、ELISA檢驗(yàn)、TPPA檢驗(yàn)、膠體金法4種血清試驗(yàn)。下文主要針對(duì)TRUST檢驗(yàn)、ELISA檢驗(yàn)及膠體金法步驟予以分析。

1.3.1TPPA檢驗(yàn)

將血清置于U型培養(yǎng)板處予以稀釋，以1：80、1：40、1：20、1：10的比例，形成四種稀釋液；再經(jīng)致敏和未致敏明膠顆粒的添加，置于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)；且于120min后，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果予以判定[2]。

1.3.2ELISA檢驗(yàn)

通過(guò)碳酸鹽包被緩沖液的使用，對(duì)血清抗體予以稀釋，經(jīng)待測(cè)血清向包被反應(yīng)孔的添加，輔助酶標(biāo)抗體，將孵育時(shí)間控制在30-60min、孵育溫度控制在37℃；再經(jīng)四甲基聯(lián)苯胺底物液的顯色處理，在硫酸終止反應(yīng)的前提下，反應(yīng)孔顏色較深，則證明待測(cè)血清陽(yáng)性越強(qiáng)，反之則為陰性[3]。

1.3.3膠體金法

選擇去離子水對(duì)氯金酸實(shí)施溶解，以此將其濃度控制在0.2g/L，經(jīng)煮沸操作后，向溶液內(nèi)滴加1/25比例的檸檬酸三鈉，將溶液濃度控制在10g/L時(shí)，持續(xù)煮沸7分鐘后，完成15納米的膠體金制備工作；結(jié)合免疫層析測(cè)試條的運(yùn)用，因該測(cè)試條由吸水濾紙、吸水纖維及硝酸纖維素構(gòu)成，可在金標(biāo)記物、待測(cè)血清混合的基礎(chǔ)上，呈現(xiàn)2條紅色色帶，則為血清陽(yáng)性；1條則為血清陰性；0條則為試劑失效[4]。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

當(dāng)TPPA檢驗(yàn)均呈現(xiàn)陽(yáng)性指標(biāo)時(shí)，方可確診為潛伏妊娠梅毒。其中，陽(yáng)性檢出率=（陽(yáng)性檢出例數(shù)-假陽(yáng)性檢出例數(shù)）/確診未潛伏妊娠梅毒例數(shù)×100.00%；假陽(yáng)性率=假陽(yáng)性檢出例數(shù)/800×100.00%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過(guò)SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件的選擇，組間數(shù)據(jù)采用卡方、t值檢驗(yàn)。P<0.05時(shí)，證明數(shù)據(jù)對(duì)比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 潛伏妊娠梅毒陽(yáng)性檢出率

將TPPA檢驗(yàn)結(jié)果同時(shí)呈現(xiàn)陽(yáng)性指標(biāo)作為潛伏妊娠梅毒檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，于本次實(shí)驗(yàn)800例孕婦中，潛伏妊娠梅毒患者共存在25例，陽(yáng)性檢出率為3.12%。

2.2 ELISA、TRUST及膠體金法結(jié)果對(duì)比

3種檢驗(yàn)方法結(jié)果對(duì)比中，可知ELISA檢驗(yàn)符合率明顯高于其它兩種，假陽(yáng)性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗(yàn)方法。

2.3 ELISA、TRUST及膠體金法效能對(duì)比

ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%，陰性預(yù)測(cè)值更是在98%以上，且ELISA實(shí)驗(yàn)具有最高陽(yáng)性似然和最低陰性似然的現(xiàn)象。

3 討論

梅毒主要經(jīng)梅毒螺旋體慢性或系統(tǒng)性病變引起的性傳播疾病，分為Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、Ⅲ期梅毒和潛伏梅毒、先天梅毒等，按照《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，梅毒屬于乙類防治病種。同時(shí)，梅毒典型癥狀主要為：Ⅰ期梅毒：硬下疳且呈現(xiàn)無(wú)痛性、紅色硬結(jié)，多發(fā)外生殖器；Ⅱ期梅毒：以梅毒疹為主要體征，且存在全身癥狀，硬下疳可自行消退；Ⅲ期梅毒：皮膚黏膜損傷和近關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)、腦血管梅毒、梅毒性腦膜炎及主動(dòng)脈瓣閉鎖障礙等[5]。

妊娠梅毒多以潛伏狀態(tài)為主，且在孕婦內(nèi)毒螺旋體、費(fèi)梅毒螺旋體檢查中，血清樣本呈現(xiàn)假陽(yáng)性，雖患者無(wú)任何梅毒癥狀，但卻呈現(xiàn)陽(yáng)性指標(biāo)，加大妊娠潛伏梅毒診斷難度。故醫(yī)學(xué)領(lǐng)域急需超靈敏陽(yáng)性血清檢驗(yàn)技術(shù)，以便更快、更準(zhǔn)做好妊娠潛伏梅毒診斷工作。而在此過(guò)程中，常見血清試驗(yàn)包含TRUST檢驗(yàn)、ELISA檢驗(yàn)、TPPA檢驗(yàn)、膠體金法等方法，以TPPA檢驗(yàn)的方式，其結(jié)果更具準(zhǔn)確性和權(quán)威性價(jià)值；其余3種方法則是以高靈敏度、經(jīng)濟(jì)、便捷的特點(diǎn)，在妊娠潛伏梅毒診斷中得以常見[6]。

同時(shí)，若要從根本上避免先天梅毒兒，則應(yīng)在孕期加強(qiáng)梅毒篩查工作。據(jù)國(guó)外研究結(jié)果表明，孕28周、分娩晚期梅毒復(fù)查工作，能夠在精準(zhǔn)診斷潛伏妊娠梅毒的同時(shí)，將先天梅毒兒控制在最低標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)合本文研究結(jié)果顯示，800例孕婦中，潛伏妊娠梅毒患者共存在25例，陽(yáng)性檢出率為3.12%。3種檢驗(yàn)方法結(jié)果對(duì)比中，可知ELISA檢驗(yàn)符合率明顯高于其它兩種，假陽(yáng)性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗(yàn)方法；ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%，陰性預(yù)測(cè)值更是在98%以上，且ELISA實(shí)驗(yàn)具有最高陽(yáng)性似然和最低陰性似然的現(xiàn)象。

總之，ELISA檢驗(yàn)作為潛伏妊娠梅毒檢測(cè)常見方法，輔助TRUST檢驗(yàn)和膠體金法工作的開展，可提升陽(yáng)性檢出率，為后續(xù)母嬰傳播預(yù)防及阻斷提供可靠性數(shù)據(jù)支持。

參考文獻(xiàn)：

[1]符琴，王咸菊，王桂，等.妊娠合并梅毒的高危因素分析[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2016，16（7）：933-936.

[2]黃必然，周姝，楊遠(yuǎn)超，等.潛伏梅毒孕婦及其新生兒特異性IgM抗體檢測(cè)分析[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2014，14（8）：962-964.

[3]吳奇，王麗，季靈婷，等.上海閘北地區(qū)妊娠梅毒分子流行病學(xué)特征分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2016，31（06）：486-490.

[4]笪蘇蓉，陳官芝，董娜，等.梅毒患者外周血特異性轉(zhuǎn)錄因子FOXP3 mRNA的表達(dá)[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2015，14（02）：84-88.

[5]賴其偉.潛伏梅毒患者的血清降鈣素原檢測(cè)分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床，2016，27（1）：22-24.

[6]謝春雷.潛伏梅毒發(fā)病率上升趨勢(shì)原因分析[J].中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2016，13（26）：59-61.