當(dāng)歸藤的化學(xué)成分研究

闕祖亮+劉鼎+陳勇+張昕+魏江存+龐丹清

【摘要】目的： 研究廣西壯族和瑤族民間常用藥材當(dāng)歸藤的化學(xué)成分，為開(kāi)發(fā)利用當(dāng)歸藤藥材資源提供實(shí)驗(yàn)支持。方法：乙醇回流提取當(dāng)歸藤藥材，濃縮成浸膏，用系統(tǒng)溶劑分離法萃取得到不同極性的當(dāng)歸藤提取部位，然后用硅膠柱層析法對(duì)石油醚部位進(jìn)行分離純化，得到的單體成分通過(guò)波譜方法進(jìn)行鑒定。結(jié)果：從石油醚部位分離得到4個(gè)化合物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定其中的兩個(gè)分別是豆甾醇（II）、維生素E（III）。結(jié)論：這兩個(gè)化合物均為首次從當(dāng)歸藤中分離得到。

【關(guān)鍵詞】當(dāng)歸藤；化學(xué)成分；壯藥；瑤藥

【中圖分類號(hào)】R284【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2017）05-0005-05

當(dāng)歸藤為紫金?？扑崽僮訉僦参锂?dāng)歸藤Embelia parviflora Wall ex A DC的根與老藤[1]，又名小花酸藤子、土當(dāng)歸、篩箕蔃等。藥性溫和，具有補(bǔ)血活血、益精壯陽(yáng)、強(qiáng)腰膝的功效。民間常用于治療血虛諸癥、月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后虛弱、腰腿酸痛、跌打骨折等癥[1-3]。壯醫(yī)認(rèn)為，其具有補(bǔ)血益精、通谷道水道、祛濕毒的功效，可用于治發(fā)旺（風(fēng)濕骨痛）、勒內(nèi)（血虛）、京瑟（閉經(jīng)）、心頭痛（胃痛）等癥狀[4]。當(dāng)歸藤是是廣西壯族和瑤族民間常用藥材，也是廣西特色中成藥（桂龍藥膏和桂龍藥酒）的主要藥材[1]?，幾遽t(yī)藥是我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，歷史悠久，明清時(shí)代就有“入山采藥、沿寨行醫(yī)”、“負(fù)藥入城、醫(yī)治頗效”的瑤醫(yī)隊(duì)伍；長(zhǎng)期以來(lái)，瑤族的民間醫(yī)藥資源十分豐富，根據(jù)八十年代初對(duì)廣西大瑤山自然資源的綜合考察報(bào)告，發(fā)現(xiàn)區(qū)域植物約有2335種，且還有不少稀有科類[5-6]。

隨著國(guó)內(nèi)對(duì)當(dāng)歸藤的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，為了更安全有效地利用該藥材，對(duì)當(dāng)歸藤藥材進(jìn)行化學(xué)成分研究顯得非常重要。但目前國(guó)內(nèi)在化學(xué)成分方面僅對(duì)該藥材乙醇提取物的石油醚部位進(jìn)行了少量研究，盧文杰等[7]從該藥材根的乙醇提取物中分離到了四個(gè)單體化合物，其中三個(gè)化合物鑒定成功，分別為正三十烷酸乙酯、α-菠甾醇及正三十烷酸。當(dāng)歸藤藥材資源豐富，民間使用廣泛，為了更好地開(kāi)發(fā)利用當(dāng)歸藤藥材資源做好前期準(zhǔn)備，本實(shí)驗(yàn)采用現(xiàn)代分離分析技術(shù)，對(duì)當(dāng)歸藤的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究。

1儀器與材料

11藥材當(dāng)歸藤藥材于2012年6月購(gòu)自廣西靖西縣，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)郭敏副教授鑒定為紫金牛科酸藤子屬當(dāng)歸藤Embelia parviflora Wallex A DC干燥全株。標(biāo)本存于廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥物分析教研室。

12儀器6890-5973N 氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國(guó)安捷倫公司）；HP-5MS UI彈性石英毛細(xì)管色譜柱（025um×025mm×30m），G1701DA MSD化學(xué)工作站，NIST8譜庫(kù)；Agilent8453紫外-可見(jiàn)分光光度儀（美國(guó)Agilent科技公司）；WDF型多功能提取濃縮機(jī)組（溫州中祥輕工機(jī)械廠）；OSB-2100型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東京理化儀器株式會(huì)社）；BP-211D型電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）；SQP電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）；各種不同規(guī)格口徑的普通玻璃層析柱。

13材料柱層析硅膠（200～300目、100～200目，西隴化工化學(xué)試劑有限公司）；薄層層析硅膠G、薄層層析硅膠H（青島海洋化工有限公司）； 提取用乙醇為食用酒精（95%乙醇），南寧軍正酒廠；石油醚（60～90℃）、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇和95%乙醇均為西隴化工化學(xué)試劑有限公司提供，均為分析純。

2當(dāng)歸藤化學(xué)成分的提取、分離與純化

21提取分離與純化取當(dāng)歸藤干藥材23kg，適當(dāng)粉碎，用8倍量乙醇加熱回流提取三次，每次2h，減壓回收溶劑，得乙醇提取物浸膏234kg（得膏率約10%）。取2kg浸膏，依次用石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯和正丁醇溶劑萃取，分別得到石油醚部位浸膏130g，乙酸乙酯部位浸膏330g以及正丁醇部位浸膏685g、水部位浸膏155g和不溶物680g。

在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）第15至20瓶的大柱餾分中得到一個(gè)粗結(jié)晶，該樣品能溶于甲醇，拌硅膠（硅膠H）上小柱，用石油醚-乙酸乙酯（15∶1～5∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）的餾分中有片狀結(jié)晶化合物I析出，約17mg。

在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的大柱餾分中有白色結(jié)晶析出，拌硅膠（硅膠H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（10∶1→1∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）的餾分低9～14瓶中得到白色粉末結(jié)晶化合物II，約30mg。

在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的大柱餾分第18～27瓶中淡黃色結(jié)晶析出，拌硅膠（硅膠H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（10∶1→1∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的餾分中得到淡黃色粉末化合物III，約22mg。

取石油醚部位浸膏60g，經(jīng)硅膠柱色譜（100～200目）進(jìn)行分離純化，石油醚-乙酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度洗脫。在石油醚-乙酸乙酯（10∶1）的大柱餾分中有油狀物析出，拌硅膠（硅膠H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（20∶1→5∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的餾分中得到微黃色油狀化合物IV，約20mg。

22提取、分離與純化流程圖

3單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定

31化合物II的結(jié)構(gòu)鑒定

311物理性質(zhì)無(wú)色結(jié)晶性粉末，溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醇、丙酮，不溶于水。

312GC-MS鑒定經(jīng)儀器NIST08譜庫(kù)檢索得到該化合物：英文名：Stigmasterol。中文名：豆甾醇，條目號(hào)：199250，CAS 編號(hào)：000083-48-7，分子式：C29H48O。匹配度：99%。

313綜合解析綜合理化鑒別、氣質(zhì)聯(lián)用圖譜和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，確定化合物II其為豆甾醇（Stigmasterol）。

化合物II ：為白色針晶 （甲醇 ）， m p 166～ 168℃， Liberman-Burchard 反應(yīng)呈陽(yáng)性。IR（cm-1）：3 410，2 950， 2 920， 2 860， 1 640， 1 455， 1 435， 1 374， 1 068， 800 1 H-NM R（CDCl3， TM S）： W 5 35（1H， d， J = 4 8Hz）、 5 14（1H， q， J = 24 0 Hz）、 5 00（1H， q， J = 23 6 Hz）、 350（1H， m ） 13 C-NMR： 37 2（C-1）， 31 5（C-2）， 71 8（C-3）， 42 1（C-4）， 140 6（C-5）， 121 7（C-6）， 31 8（C-7）， 31 8（C-8）， 50 1（C-9）， 37 2（C-10）， 21 0（C-11）， 40 5（C-12）， 42 2（C-13）， 56 8（C-14）， 24 3（C-15）， 29 7（C-16）， 55 9（C-17）， 12 0（C-18）， 19 3（C-19）， 42 1（C-20）， 21 2（C-21）， 138 3（C-22）， 129 2（C-23）， 51 2（C-24）， 31 8（C-25）， 21 1（C-26）， 18 9（C-27）， 25 4（C-28）， 12 2（C-29）。

32化合物III的結(jié)構(gòu)鑒定

321物理性質(zhì)蠟油狀偏黃，易溶于甲醇等有機(jī)溶劑，不溶于水，溶于乙醇，可與丙酮、氯仿、乙醚和植物油混溶。322GC-MS鑒定經(jīng)儀器NJST08譜庫(kù)檢索得到該化合物英文名：Vitamin E。中文名：維生素E。條目號(hào)：203745。CAS 編號(hào)：000059-02-9。分子式：C29H50O2。匹配度：97%。

323綜合解析綜合物理性質(zhì)和氣質(zhì)聯(lián)用圖譜與文獻(xiàn)資料，確定化合物III為維生素E（Vitamin E），化學(xué)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖7。

從氣相色譜圖中可以看出，化合物III并不是單個(gè)成分，而是混合物，采用氣質(zhì)聯(lián)用鑒別，得到表1，成分1，2，6，匹配度超過(guò)90%，除去維生素E外，其他兩個(gè)成分可以確定其為

成分1

英文名：1，2-Benzenedicarboxylic acid

中文名：鄰苯二甲酸

成分2

英文名：9-Octadecenamide， （Z）-

中文名：油酸酰胺；油酰胺； （Z）-9-十八烯酸酰胺

化合物III：黃色油狀，分子式為 C29H50O2；EI-MS m/z： 430 [M]+， 431 [M+H]+， 205。 1H-NMR （400MHz， CDCl3） δ： 427 （1H， s， -OH）， 262 （2H， t， J = 67Hz， H-4）， 218 （3H， s， H-7a）， 213 （6H， s， H-5a， 8a），180 （2H， m， H-3）， 125 （3H， s， H-2a）； 13C-NMR （100MHz， CDCl3） δ： 1457 （C-8a）， 1447 （C-6）， 1227（C-8）， 1212 （C-7）， 1187 （C-5）， 1175 （C-4a）， 746（C-2）， 399 （C-1′）， 395 （C-11′）， 376 （C-3′， 5′， 7′）， 374（C-9′）， 329 （C-4′）， 328 （C-8′）， 317 （C-3）， 281 （C-12′），250 （C-10′）， 246 （C-6′）， 239 （C-2a）， 229 （C-12′a），228 （C-13′）， 212 （C-2′）， 209 （C-4）， 199 （C-4′a）， 198（C-8′a）， 124 （C-7a）， 119 （C-8a）， 114 （C-5a）。

4討論

當(dāng)歸藤是廣西少數(shù)民族民間常用藥，也是生產(chǎn)中成藥的原料藥，具有活血補(bǔ)血、強(qiáng)腰膝、益精壯陽(yáng)的功效，用于治療血虛諸癥、閉經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、腰腿酸痛、產(chǎn)后虛弱、跌打骨折等癥[1，3]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)廣西民族藥當(dāng)歸藤進(jìn)行了化學(xué)成分的分析研究。從石油醚部位分離純化得到四個(gè)單體，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜解析等方法確定其中2個(gè)化合物結(jié)構(gòu)，分別是豆甾醇和維生素E。維生素E是脂溶性維生素，又稱生育酚，是最主要的抗氧化劑之一。其可促進(jìn)性激素分泌，使男子精子活力和數(shù)量增加；使女子雌性激素濃度增高，提高生育能力，預(yù)防流產(chǎn)，燒傷、凍傷、毛細(xì)血管出血、更年期綜合癥、美容等[8]。從當(dāng)歸藤中分離出維生素E印證了當(dāng)歸藤的藥效。

本研究從當(dāng)歸藤中分離得到兩個(gè)化合物，為闡明當(dāng)歸藤藥理作用提供資料支撐，但其化學(xué)成分及藥理活性作用還有待進(jìn)一步研究。

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