苦蕎茶乙醇提取物總抗氧化活性的研究

摘 要：采用乙醇浸提法提取不同類型苦蕎茶中抗氧化物質(zhì)，測定其中總酚和黃酮類物質(zhì)含量，并通過體外抗氧化評價方法研究其抗氧化能力。結(jié)果表明：苦蕎茶的乙醇提取物均有較強的抗氧化活性，并且與總酚和總黃酮含量有相關(guān)性，苦蕎茶乙醇提取物的抗氧化活性是總多酚共同作用的結(jié)果。其中，造?？嗍w茶總酚、總黃酮含量均高于全麥苦蕎茶，約是全麥苦蕎茶的2倍；同一類型苦蕎茶乙醇提取物，總黃酮含量約是總酚含量的5倍；ZL-4總酚含量最高，ZL-3總黃酮含量最高。對于苦蕎茶總抗氧化活性，造?？嗍w茶均高于全麥苦蕎茶，約是全麥苦蕎茶的2倍，ZL-3抗氧化活性最高，其次是ZL-4。

關(guān)鍵詞：苦蕎茶 ；乙醇提取物 ；總酚； 總黃酮； 抗氧化

中圖分類號：S517 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20161233031

苦蕎又名韃靼蕎麥（Fagopyrum tataricum （L.） Gaertn），在我國西南、中南、華北等省區(qū)均有分布。其中，位于四川省西南部川滇交界處的涼山彝族自治州，是苦蕎麥種植的最佳生態(tài)和集中產(chǎn)區(qū)。目前，在涼山州本地，以苦蕎為原料從事苦蕎系列食品加工生產(chǎn)的企業(yè)眾多，產(chǎn)品形式以苦蕎茶等最多也最為常見，而產(chǎn)品宣傳著力點均涉及其抗氧化性能，有著主導(dǎo)市場消費的重要作用。但是，就現(xiàn)行加工技術(shù)的不同，此類制品中是否承繼了苦蕎麥原有的抗氧化活性，卻一直沒有受到關(guān)注。因此，開展苦蕎茶抗氧化活性研究，對于產(chǎn)品的進(jìn)一步推廣和應(yīng)用有著重要的現(xiàn)實意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（A0103-20mg，純度≥98%UV，批號：MUST-14082710）；槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品（A0083-20mg純度≥98%UV，批號：MUST-14082610）；沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品，成都科龍化工試劑廠；Folin-Ciocalteu試劑；95%乙醇、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、碳酸鈉等均為分析純。各苦蕎茶樣品均為市售。

1.2 試驗設(shè)備

SHA-C 水浴恒溫振蕩器，津達(dá)公司；722型可見分光光度計，上海菁華科技儀器有限公司；抽濾裝置，津騰公司；KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司； JD400-3電子分析天平，ESJ210-4B電子天平，沈陽龍騰電子有限公司。

1.3 方法

1.3.1 總酚含量的測定

以沒食子酸為標(biāo)樣，采用 Folin-Ciocalteu 方法測定[1]，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1。

1.3.2 總黃酮含量的測定

以蘆丁為標(biāo)樣，采用NaNO2-Al（NO3）3方法測定[2，3]，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2。

1.3.3 待測溶液制備

準(zhǔn)確稱取苦蕎茶樣品試樣2.000g（設(shè)3次重復(fù)），直接置于150mL具塞三角瓶中，加入80%乙醇60mL，70℃恒溫水浴條件下，浸提時間4h，趁熱抽濾，濾液定容至50mL，稀釋50倍后待測。

1.3.4 待測溶液的測定

苦蕎茶樣品經(jīng)提取后，待測濾液經(jīng)可見分光光度法分析，結(jié)果按照1.3.1～1.3.2中回歸方程式，分別計算樣品中總酚、總黃酮的含量。

1.3.5 總抗氧化能力的測定

機體中有許多抗氧化物質(zhì)，能使Fe3+還原成Fe2+，后者可與菲啉類物質(zhì)形成穩(wěn)固的絡(luò)和物，利用比色的方法，通過光吸收值的變化來確定抗氧化物質(zhì)的總抗氧化能力，光吸收值變化越大總抗氧化能力越強[4，5]。依照總抗氧化能力測定的試劑盒說明書進(jìn)行操作。抗氧化能力單位定義為： 在 37℃下，每分鐘每毫升測定液使反應(yīng)體系吸光度增加 0.01 為一個總抗氧化能力單位。

2 結(jié)果與分析

2.1 苦蕎茶乙醇提取物總酚含量

酚酸類化合物是天然的抗氧化物質(zhì)，常與黃酮類物質(zhì)一起組成一個抗氧化體系，協(xié)同發(fā)揮抗氧化作用[6-8]。因此，有必要對苦蕎茶中酚酸類含量進(jìn)行分析，并探討其與抗氧化活性的相關(guān)性。

根據(jù)表3多重比較結(jié)果可知，QM-2、QM-8分別與QM-3、QM-10、QM-4、QM-7 有極顯著差異，QM-3與QM-10、QM-4、QM-7 有極顯著差異；QM-2、QM-8分別與QM-6有顯著性差異，QM-3與QM-6有顯著性差異，其余之間均無顯著性差異。其中，QM-2含量最高，平均為2.717mg/g；QM-7含量最低，平均為1.352mg/g。

ZL-4與ZL-5、ZL-9、ZL-7、ZL-1、ZL-6均有極顯著差異，ZL-3與ZL-9、ZL-7、ZL-1、ZL-6有極顯著差異，ZL-5與ZL-9、ZL-7、ZL-1、ZL-6有極顯著差異，ZL-9、ZL-10分別與ZL-7、ZL-1、ZL-6有極顯著差異；ZL-4、ZL-3、ZL-5、ZL-10、ZL-9分別與ZL-8有顯著性差異，ZL-3與ZL-5有顯著性差異，ZL-2與ZL-6有顯著性差異，其余之間均無顯著性差異。其中，ZL-4含量最高，平均為4.764mg/g；ZL-6含量最低，平均為3.201mg/g。

2.2 苦蕎茶乙醇提取物總黃酮含量

黃酮類化合物是苦蕎多酚最主要的成分，是苦蕎中最重要的生物活性物質(zhì)，具有很強的抗氧化作用。因此，研究苦蕎茶中黃酮類物質(zhì)的含量，是進(jìn)一步探明產(chǎn)品功能的物質(zhì)基礎(chǔ)[9-11]。

根據(jù)表4多重比較結(jié)果可知，QM-2、QM-5、QM-8分別與QM-3、QM-10、QM-7 有極顯著差異，QM-3與QM-10、QM-7 有極顯著差異，QM-10與QM-7 有極顯著差異，QM-1、QM-9分別與QM-7 有極顯著差異；QM-2與QM-8、QM-6有顯著性差異，QM-5與QM-6有顯著性差異，QM-8與QM-3、QM-10、QM-6、QM-7有顯著性差異，QM-3與QM-6有顯著性差異，QM-1、QM-9分別與QM-10、QM-6有顯著性差異，QM-10與QM-6有顯著性差異，其余之間均無顯著性差異。其中，QM-2含量最高，平均為12.941mg/g；QM-7含量最低，平均為3.390mg/g。

ZL-3與ZL-10、ZL-4、ZL-2、ZL-9、ZL-7、ZL-6有極顯著差異，ZL-10與ZL-4、ZL-2、ZL-9、ZL-7、ZL-6有極顯著差異，ZL-4與ZL-2、ZL-9、ZL-7、ZL-6有極顯著差異，ZL-2與ZL-9、ZL-7、ZL-6有極顯著差異，ZL-5與ZL-7、ZL-6有極顯著差異，ZL-9與ZL-7、ZL-6有極顯著差異；ZL-3、ZL-10、ZL-4、ZL-2、ZL-5、ZL-9與ZL-8分別有顯著性差異，ZL-1、ZL-8分別與ZL-7、ZL-6有顯著性差異，其余之間均無顯著性差異。其中，ZL-3含量最高，平均為31.738mg/g；ZL-6含量最低，平均為12.463mg/g。

2.3 苦蕎茶乙醇提取物總抗氧化活性變化

2.3.1 苦蕎茶乙醇提取物總抗氧化能力比較

根據(jù)表5多重比較結(jié)果可知，QM-2與QM-5、QM-9、QM-10有極顯著差異，QM-8與QM-9、QM-10有極顯著差異，QM-9與QM-10有極顯著差異；QM-2與QM-8、QM-3有顯著性差異，QM-8與QM-5、QM-3有顯著性差異，QM-5與QM-3、QM-9、QM-10有顯著性差異，QM-3與QM-9、QM-10有顯著性差異，其余之間均無顯著性差異。其中，QM-2抗氧化活性最高，平均為9.735U/mg；QM-7含量最低，平均為7.025U/mg。

ZL-3與ZL-10、ZL-4、ZL-2、ZL-9、ZL-7、ZL-1、ZL-5有極顯著差異，ZL-10與ZL-9、ZL-5、ZL-7、ZL-1、ZL-2有極顯著差異，ZL-4與ZL-10、ZL-9、ZL-5、ZL-7、ZL-1、ZL-2有極顯著差異，ZL-9與ZL-5、ZL-7、ZL-1、ZL-2有極顯著差異，ZL-5與ZL-7、ZL-1、ZL-2有極顯著差異，ZL-7與ZL-1、ZL-2有極顯著差異，ZL-1與ZL-2有極顯著性差異。其中，ZL-3抗氧化活性最高，平均為18.863U/mg；ZL-6含量最低，平均為10.917U/mg。

對于苦蕎茶總抗氧化活性，造?？嗍w茶均高于全麥苦蕎茶，約是全麥苦蕎茶的2倍。其中，ZL-3最高。

2.3.2 苦蕎茶乙醇提取物中酚類化合物與抗氧化能力

由表3、表4可知，不同類型苦蕎茶乙醇提取物，造?？嗍w茶總酚、總黃酮含量均高于全麥苦蕎茶，約是全麥苦蕎茶的2倍。其中，ZL-4總酚含量最高，ZL-3總黃酮含量最高。同一類型苦蕎茶乙醇提取物，總黃酮含量是總酚含量的5倍左右。

以總酚含量為橫坐標(biāo)，抗氧化活性為縱坐標(biāo)作圖，結(jié)果見圖3?？偡雍颗c抗氧化活性之間呈線性關(guān)系相關(guān)性。其中，造?？嗍w茶總酚含量與抗氧化活性的相關(guān)系數(shù)達(dá)0.7742（P<0.01），全麥苦蕎茶總酚含量與抗氧化活性的相關(guān)系數(shù)達(dá) 0.6616（P<0.05），表明苦蕎茶中總酚類物質(zhì)是其抗氧化活性物質(zhì)。

以總黃酮含量為橫坐標(biāo)，抗氧化活性為縱坐標(biāo)作圖，結(jié)果見圖4?？偡雍颗c抗氧化活性之間呈線性關(guān)系相關(guān)性。其中，造?？嗍w茶總酚含量與抗氧化活性的相關(guān)系數(shù)達(dá)0.7442（P<0.01），全麥苦蕎茶總酚含量與抗氧化活性的相關(guān)系數(shù)達(dá) 0.7696（P<0.01），表明苦蕎茶中總黃酮類物質(zhì)也是其抗氧化活性物質(zhì)。

3 討論

苦蕎茶的乙醇提取物均有較強的抗氧化活性，并且與茶提取物中的總酚和總黃酮含量有相關(guān)性，苦蕎茶乙醇提取液的抗氧化活性是總多酚共同作用的結(jié)果。研究結(jié)果表明，不同類型苦蕎茶乙醇提取物，造?？嗍w茶總酚、總黃酮含量均高于全麥苦蕎茶，約是全麥苦蕎茶的2倍。其中，ZL-4總酚含量最高，ZL-3總黃酮含量最高。同一類型苦蕎茶乙醇提取物，總黃酮含量是總酚含量的5倍左右。對于苦蕎茶總抗氧化活性，造粒苦蕎茶均高于全麥苦蕎茶，約是全麥苦蕎茶的2倍。其中，ZL-3平均值為18.863U/mg最高，其次是ZL-4為17.894U/mg。

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作者簡介：清源（1983-），女，河北張家口人，博士研究生，講師，主要從事食品相關(guān)研究。