木姜子儲存過程中揮發(fā)性成分的變化

范會，馬紅紅，左定財，王萍萍，劉婉頤，鐘永科

（遵義醫(yī)學院藥學院，貴州遵義 563099）

木姜子儲存過程中揮發(fā)性成分的變化

范會，馬紅紅，左定財，王萍萍，劉婉頤，鐘永科＊

（遵義醫(yī)學院藥學院，貴州遵義 563099）

采用固相微萃?。瓪赓|聯(lián)用方法考察了木姜子室溫儲存12個月的揮發(fā)性成分變化。結果表明：在考察的12個月內(nèi)，木姜子揮發(fā)性成分的變化主要反映在存儲前4個月，萜類的增加和醛類的減少，萜類含量由原樣的41.98%迅速增加到83.28%而成為主要成分，其中，dl－檸檬烯的含量由原樣的24.63%增加到39.15%，α－蒎烯由5.05%增加到8.97%，β－月桂烯由4.75%增加到9.30%，反式石竹烯由2.58%增加到3.42%，β－蒎烯由2.16%增加到5.42%；與此相反，醛類成分的含量由原樣的52.03%銳減到8.02%，其中，α－檸檬醛和β－檸檬醛的含量由29.36%和21.64%分別銳減到4.28%和3.58%，香茅醛的含量由1.03%減少到0.16%。此外，醇類（芳樟醇由原樣的1.97%增加到4.50%）和酮類（主要是6－甲基－5－庚烯－2－酮的出現(xiàn)）的含量也有所增加。在儲存的中后期，主要成分萜類的相對含量雖然持續(xù)增加，但幅度不大；次要成分醛類的含量雖然持續(xù)減少，但減少幅度也不大。在整個儲存中烴類和醚類的變化不大；酮類、酯類和酸類成分的變化雖較大，但含量有限。

木姜子；揮發(fā)性成分；儲存；固相微萃取

木姜子，又名山蒼子、蓽茄澄、山雞椒和山胡椒等，是樟科植物山雞椒Litsea cubeba（Lour.）Pers.的干燥成熟果實［1］，廣泛分布于我國南方各?。?］，其味稍辣而微苦，揮發(fā)性成分芳香，是重要的中草藥，具有溫中散寒、行氣止痛的功效，用于胃寒嘔逆、脘腹冷痛、寒濕郁滯、小便渾濁等；同時，也是常用的調(diào)味品［3］和食品防腐劑［4］。

作為調(diào)味品，揮發(fā)性成分是木姜子的主要呈香物質，對木姜子揮發(fā)性成分研究和分析是木姜子的重要研究內(nèi)容。目前，對木姜子揮發(fā)性成分的分析提取方法主要有水蒸氣蒸餾［5－7］、超臨界CO2流體萃?。?］、有機溶劑萃?。?］、同時蒸餾萃?。?0］和固相微萃取等。其中，固相微萃取法集采樣、吸附、萃取、濃縮、進樣等操作于一體，具有分析過程短、無萃取溶劑、對被測樣品的選擇性高且重現(xiàn)性好等優(yōu)點［11－13］。由于木姜子是季節(jié)性產(chǎn)品，使用時往往經(jīng)過或多或少的儲存，無論是作為藥材還是調(diào)味品，了解木姜子儲存過程中揮發(fā)性成分的變化對于其實際應用具有重要意義。目前，有關木姜子在儲存過程中揮發(fā)性成分的變化研究鮮見報道。本文報道固相微萃?。瓪赓|聯(lián)用分析木姜子在儲存1年過程中揮發(fā)性成分的變化。

1 實驗部分

1.1 儀器與原料

GC6890／MS5973型氣相色譜－質譜聯(lián)用儀 美國Agilent公司；HP－1510型固相微萃取儀 上海濟成分析儀器有限公司；100μm PDMS萃取頭，頂空進樣器

美國Supelco公司；EL－303型電子天平 梅特勒－托利多儀器有限公司。木姜子于2015年8月8日采自貴州省銅仁市江口縣太平土家族苗族鄉(xiāng)。

1.2 方法

1.2.1 原料處理

木姜子陰干后用雙層聚乙烯自封袋密封，并室溫儲存。

1.2.2 揮發(fā)性成分的提取

木姜子磨碎，稱取研碎成末的木姜子0.45g，裝入5mL萃取瓶中；將裝有樣品的萃取瓶置于頂空進樣器，在50℃下平衡15min，插入經(jīng)活化的萃取頭（在230℃下活化3min），50℃下萃取25min，然后將萃取頭插入氣相色譜儀進樣口（250℃）脫附3min。

1.2.3 氣相色譜－質譜條件

色譜柱使用Agilent HP－5MS（30.0m×250μm× 0.25μm）彈性石英毛細管色譜柱，柱箱起始溫度為60℃，以3℃／min升溫至230℃；載氣為高純He，流速為0.5mL／min；采用不分流進樣，進樣口溫度250℃。MS條件：EI電離源70eV，離子源溫度230℃，MS四級桿溫度150℃，接口溫度150℃，質量掃描范圍30～500m／z。MS信號積分參數(shù)：初始峰寬0.102，初始閾值14.5。

圖1 不同儲存階段木姜子揮發(fā)性成分的總離子流圖Fig.1 The total ion chromatogram of volatile components in Litsea cubeba（Lour.）Pers.at different storage stages

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

樣品中各揮發(fā)性成分用計算機與Wiley7Nist05、NIST05標準質譜數(shù)據(jù)庫檢索匹配，統(tǒng)計匹配度大于80%的揮發(fā)性成分。采用峰面積歸一化法定量分析揮發(fā)性成分的相對含量。

2 結果與分析

按1.2所述方法，分別得到木姜子原樣和儲存4，8，12個月的木姜子揮發(fā)性成分的總離子流色譜圖（見圖1）。由圖1可知，在所選實驗條件下，木姜子揮發(fā)性成分基本達到分離，成分分析的具體結果見表1。

表1 不同儲存階段木姜子揮發(fā)性成分的結果Table 1 The results of volatile components and relative content of Litsea cubeba（Lour.）Pers.at different storage stages

續(xù) 表

續(xù) 表

由表1可知，木姜子原樣經(jīng)固相微萃?。瓪赓|聯(lián)用分析，共鑒定出36個揮發(fā)性成分。其中，含量在1%以上的成分共10個，分別是α－檸檬醛（29.36%）、dl－檸檬烯（24.63%）、β－檸檬醛（21.64%）、α－蒎烯（5.05%）、β－月桂烯（4.75%）、反式石竹烯（2.58%）、β－蒎烯（2.16%）、芳樟醇（1.97%）、檸檬烯氧化物（1.38%）和香茅醛（1.03%），10個揮發(fā)性成分的總含量達到95.55%（其中α－檸檬醛和β－檸檬醛之和達51%），其主要成分與文獻報道結果基本相同。為進一步分析，我們對揮發(fā)性成分的種類進行了歸納，結果見表2，表2中的種類是原樣主要成分的歸類結果。

表2 儲存過程中木姜子揮發(fā)性成分相對含量和個數(shù)的變化Table 2 Changes of relative content and number of volatile components in Litsea cubeba（Lour.）Pers.during storage

由表2可知，原樣揮發(fā)性成分主要為醛類（52.03%），其次為萜類（41.98%）和醇類（2.56%），再次是少量的醚類（1.70%）、酮類（0.43%）、烴類（0.12%）、酯類（0.11%）和酸類（0.12%）。

將木姜子原樣室溫密封儲存，儲存中其揮發(fā)性成分的主要變化如下：

儲存前期（0～4個月）：醛類成分的含量迅速減少，其含量分別由原樣的52.03%銳減到8.02%，其中，α－檸檬醛的含量由原樣的29.36%銳減到4.28%，β－檸檬醛的含量由原樣的21.64%銳減到3.58%，香茅醛的含量由原樣的1.03%減少到0.16%；與醛類變化相反，萜類的含量由原樣的41.98%迅速增加到83.28%而成為主要成分，其中，萜類主要成分dl－檸檬烯的含量由原樣的24.63%增加到39.15%，α－蒎烯由5.05%增加到8.97%，β－月桂烯由4.75%增加到9.30%，反式石竹烯由2.58%增加到3.42%，β－蒎烯由2.16%增加到5.42%；醇類的含量明顯增加，主要是芳樟醇的增加，由原樣的1.97%增加到4.50%；酮類的含量由原樣的0.43%增加到2.78%（主要是6－甲基－5－庚烯－2－酮的出現(xiàn)）。

儲存中后期（4～12個月）：醛類成分的含量繼續(xù)減少，其含量由8.02%減少到5.08%，其中，α－檸檬醛的含量由4.28%減少到2.93%，β－檸檬醛的含量由3.58%減少到2.15%，香茅醛的含量到后期消失；主要成分萜類的變化與醛類依然相反，其含量由83.28%繼續(xù)增加到86.04%，其中，主要成分dl－檸檬烯的含量由39.15%增加到39.93%，α－蒎烯的含量由8.97%增加到11.01%，β－蒎烯的含量由5.42%增加到6.00%，茨烯的含量由3.39%增加到3.66%，香柑油烯的含量由1.26%增加到2.30%，β－紅沒藥烯的含量由2.60%增加到3.35%，β－月桂烯的含量雖然在儲存中期稍有減少，但后期又增加到了10.94%；反式石竹烯和α－紅沒藥烯的含量變化不大，α－蓽澄茄油烯和β－金合歡烯的含量在儲存中期之后持續(xù)減少。醇類的含量在儲存中期雖然有所減少，但其主要成分芳樟醇的含量卻在持續(xù)增加；烴類和醚類的含量變化不大，酯類、酸類和部分酮類（6－甲基－5－庚烯－2－酮）在儲存后期基本消失。

3 討論

前述結果表明：木姜子儲存過程中揮發(fā)性成分明顯變化，主要表現(xiàn)在存儲的前4個月：萜類（dl－檸檬烯、α－蒎烯、β－月桂烯、β－蒎烯、茨烯、香柑油烯、β－紅沒藥烯、反式石竹烯、β－金合歡烯和α－紅沒藥烯）和醇類成分相對含量的迅速增加，醛類成分相對含量的迅速減少；主要反映在檸檬烯的迅速增加而檸檬醛的急劇減少。在存儲的4～12個月，主要成分萜類的相對含量雖然在持續(xù)增加，但增加的幅度遠不如前4個月；次要成分醛類的相對含量雖然在持續(xù)減少，但減少的幅度也遠不如前4個月。醇類、烴類和醚類等的變化不大；酮類、酯類和酸類成分的變化雖然較大，但含量有限。所以，萜類和醛類揮發(fā)性成分在存儲前4個月的變化是木姜子揮發(fā)性成分在存儲12個月變化的主要變化。

除相對含量變化外，揮發(fā)性成分個數(shù)間也有變化，如萜類先增加（0～4個月，由17個增加至29個），隨后則連續(xù)降低（由29個降至15個），醇類由6個降至2個，這些都說明揮發(fā)性成分在存儲中不斷變化。同時，也說明干果木姜子在存儲時仍存在新陳代謝。

檸檬烯具有良好的祛痰、止咳、平喘、抑菌等作用，蒎烯具有鎮(zhèn)咳、祛痰及抗真菌作用，復方檸檬烯在臨床上可用于利膽、溶石、促進消化液分泌和排除腸內(nèi)積氣［14］。儲存中高萜類的發(fā)現(xiàn)，無疑對木姜子功能與藥用作用的了解具有重要意義。

4 結論

在木姜子室溫儲存考察的12個月內(nèi)，木姜子揮發(fā)性成分的變化主要反映在存儲前4個月：萜類的增加（由次要成分變?yōu)橹饕煞郑┖腿╊惖臏p少（由主要成分變?yōu)榇我煞郑?，隨后，主要成分萜類及次要成分醛類、醇類、烴類和醚類等的變化不大；酮類和酯類成分的變化較大，但含量有限。

在存儲前4個月的具體變化是：萜類含量由原樣的41.98%迅速增加到83.28%而成為主要成分，其中，dl－檸檬烯的含量由原樣的24.63%增加到39.15%，α－蒎烯由5.05%增加到8.97%，β－月桂烯由4.75%增加到9.30%，反式石竹烯由2.58%增加到3.42%，β－蒎烯由2.16%增加到5.42%；與此相反，醛類成分的含量由原樣的52.03%銳減到8.02%，其中，α－檸檬醛的含量由原樣的29.36%銳減到4.28%，β－檸檬醛的含量由原樣的21.64%銳減到3.58%，香茅醛的含量由原樣的1.03%減少到0.16%。

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The Change of Volatile Components in Litsea cubeba（Lour.）Pers.during Storage

FAN Hui，MA Hong－h(huán)ong，ZUO Ding－cai，WANG Ping－ping，LIU Wan－yi，ZHONG Yong－ke＊
（School of Pharmacy，Zunyi Medical University，Zunyi 563099，China）

The change of volatile components in Litsea cubeba（Lour.）Pers.during 12months＇storage at room temperature is investigated using gas chromatography－mass spectrometry coupled with solidphase microextraction.The results show that the total relative content of terpenoids increases rapidly to 83.28%from 41.98%and the total content of aldehydes reduces fast to 8.02%from 52.03%in the original Litsea cubeba（Lour.）Pers.after 4months＇storage.The relative content of main terpenoids，such as dl－limonene，alpha－pinene，beta－myrcene，trans－caryophyllene and beta－pinene increases to 39.15%，8.97%，9.30%，3.42%，5.42%from the respective 24.63%，5.05%，4.75%，2.58%，2.16%in the original Litsea cubeba（Lour.）Pers..At the same time，the relative content of main aldehydes including alpha－citral，beta－citral and citronellal reduces to 4.28%，3.58%and 0.16%from 29.36%，21.64%and 1.03%in the original sample and the content of alcohols（linalool increases to 4.50%from 1.97%）increases.At the medium and end of storage（4～8months＇storage），the content of terpenoids shows a little increase and the content of aldehydes shows a little decrease.In contrast to the rapid change，hydrocarbons，ethers，ketones，esters and acids present limited change during the total 12months＇storage.

Litsea cubeba（Lour.）Pers.；volatile components；storage；solid－phase microextraction

TS264.3

A

10.3969／j.issn.1000－9973.2017.04.014

1000－9973（2017）04－0064－05

2016－10－14 ＊通訊作者

貴州省科技廳自然科學基金（［2008］2233）

范會（1990－），女，貴州銅仁人，碩士，研究方向：天然產(chǎn)物化學。