兩種肉桂酸肟酯衍生物的合成及其與人血清白蛋白的結(jié)合

逯東偉， 吳嘯宇， 謝 憲， 喻凱荔， 林翠梧，2*

(1. 廣西大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院， 廣西 南寧 530004； 2. 廣西高校應(yīng)用化學(xué)技術(shù)與資源開發(fā)重點實驗室， 廣西 南寧 530004)

兩種肉桂酸肟酯衍生物的合成及其與人血清白蛋白的結(jié)合

逯東偉1， 吳嘯宇1， 謝 憲1， 喻凱荔1， 林翠梧1，2*

(1. 廣西大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院， 廣西 南寧 530004； 2. 廣西高校應(yīng)用化學(xué)技術(shù)與資源開發(fā)重點實驗室， 廣西 南寧 530004)

以間甲氧基肉桂酸、對位取代的苯甲醛為原料，設(shè)計合成了2種未見報道的肉桂酸肟酯類衍生物，并用MS、IR、1H NMR、13C NMR進行結(jié)構(gòu)表征。采用分子對接技術(shù)和熒光光譜法、紫外-可見光譜法、位點競爭法研究了2種衍生物分別和人血清白蛋白(HSA)相結(jié)合的機理。通過Stern-Volmer方程等處理熒光猝滅相關(guān)數(shù)據(jù)得到了衍生物與HSA相互作用的結(jié)合常數(shù)和熱力學(xué)參數(shù)。結(jié)合紫外-可見光譜對兩種衍生物與HSA的相互作用進行了進一步的分析，結(jié)果表明在體外生理條件下，衍生物都可以與HSA結(jié)合，對HSA內(nèi)源熒光產(chǎn)生靜態(tài)猝滅并對其構(gòu)象產(chǎn)生影響，其主要的結(jié)合力為氫鍵和范德華力。位點競爭實驗表明衍生物與HSA相互作用都發(fā)生在Sudlow site 1(亞域Ⅱ A)處。以上實驗結(jié)果均驗證了分子模擬對實驗的預(yù)測。

肉桂酸肟酯； 光譜法； 位點競爭； 人血清白蛋白； 分子對接

1 引 言

藥物在進入人體后，要達到一定的療效，就必須有一定濃度的藥物分子達到受體部位，并與受體產(chǎn)生特異性結(jié)合，而血液系統(tǒng)是人體主要的藥物運輸途徑。作為體液中最豐富的胞外蛋白，HSA在血漿中維持有很高濃度。它除了可以運輸人體內(nèi)源物質(zhì)如激素、脂肪酸、代謝廢物之外，還可以與大量不同系列的外源性藥物結(jié)合并運送到不同的靶點部位。因此，HSA對藥代動力學(xué)有著極其重要的作用[1-4]。人們很早就對HSA的結(jié)構(gòu)進行了研究，現(xiàn)在對其有了充分的掌握，故HSA經(jīng)常被當(dāng)做模型研究藥物配體與蛋白質(zhì)受體的相互作用。大部分內(nèi)用藥物在人體內(nèi)的吸收、分布、代謝都極大地受到藥物分子與HSA結(jié)合作用強弱的影響。因此，通過對藥物分子與HSA相互作用的研究，不僅可以在分子水平上了解藥物作用的機制，還可以對了解藥物在人體內(nèi)的藥代動力學(xué)提供重要支持，同時也對新藥研發(fā)、臨床用藥以及藥物合成提供一定的理論參考[2-3,5]。

肉桂酸及其衍生物廣泛存在于自然界植物中，因其各種獨特的性能而被應(yīng)用在醫(yī)藥、化工、香料香精、食品等領(lǐng)域。在生物方面，肉桂酸及其衍生物更是有著諸多的優(yōu)良活性，如抗氧化、抗腫瘤、增強免疫、抑菌、止血、抗血栓等[6-10]。肟酯類化合物是分子內(nèi)含有碳氮雙鍵schiff堿的酯類化合物，其獨特的結(jié)構(gòu)賦予了其諸多優(yōu)異的生物活性，如抗菌、抗病毒、抗癌等。另外，肟酯類化合物也較多地被應(yīng)用于農(nóng)藥制劑，有除草、殺蟲的作用[11-14]?；诖?，本文以鄰甲氧基肉桂酸為起始原料，分別與對甲氧基苯甲醛、對甲砜基苯甲醛成肟之后的產(chǎn)物反應(yīng)，合成了2種肉桂酸肟酯類化合物(2種化合物均未見文獻報道)，以期新化合物能有更好的生物活性。為了解兩種衍生物與HSA的相互作用，在體外生理條件下，分別采用MOE(Molecular operating environment)分子對接、熒光光譜法、UV-Vis光譜法、位點競爭法測定了衍生物與HSA結(jié)合的各項特性，確定了其對HSA熒光猝滅的機理、結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點數(shù)以及結(jié)合位點。分子模擬對實驗的預(yù)測與光譜法測得的結(jié)果完全一致。本文結(jié)果對進一步研究2種肉桂酸肟酯衍生物在體內(nèi)的藥代動力學(xué)提供了重要的實驗數(shù)據(jù)和理論參考。

2 實 驗

2.1 儀器與試劑

儀器：BrukerAvance核磁共振儀(600 MHz，德國Bruker)，Agilent Cary Eclipse熒光分光光度計(美國Agilent Technologies)，Is50 FT-IR紅外光譜儀(美國Thermo Nicolet)，Shimadzu UV-1800紫外-可見分光光度計(日本Shimadzu)，ShimadzuLCMS-8040液質(zhì)聯(lián)用儀(日本Shimadzu)，Milli-Q Advantage A10超純水儀(美國Millipore)，Boetius顯微熔點測定儀(德國Boetius)。

試劑:間甲氧基肉桂酸、對甲砜基苯甲醛、茴香醛(珠海嘉信康醫(yī)藥科技有限公司，HPLC ≥ 95%)，pH=7.4的PBS緩沖液(粉劑，美國Sigma)，人血清白蛋白(HSA，99%，美國Sigma)，其余試劑均為國產(chǎn)分析純。實驗用水為Milli-Q超純水。

2.2 化合物Ⅰ、Ⅱ的合成及表征

化合物Ⅰ、Ⅱ的合成路線如圖1所示。

2.2.1 苯甲醛衍生物的肟化

將苯甲醛衍生物10.0 mmol、鹽酸羥胺10.5 mmol和50%乙醇溶液20.0 mL水浴30 ℃反應(yīng)0.5 h，減壓旋蒸除去乙醇，析出固體抽濾，用去離子水沖洗3次，即得苯甲醛衍生物的肟化產(chǎn)物。

2.2.2 中間體鄰甲氧基肉桂酸酰氯的制備

將間甲氧基肉桂酸10.0 mmol、二氯亞砜 10 mL在80 ℃下油浴回流5.0 h，減壓旋蒸出去多余溶劑，得間甲氧基肉桂酸酰氯化粗產(chǎn)物，待用。

2.2.3 衍生物Ⅰ、Ⅱ的制備

取10.0 mmol苯甲醛肟衍生物溶于10.0 mL二氯甲烷，滴加1.2 mL三乙胺，置于冰浴中0.5 h。將鄰甲氧基肉桂酸酰氯的粗產(chǎn)物溶于5.0 mL二氯甲烷，緩慢加入苯甲醛肟中，冰浴反應(yīng)0.5 h。然后，常溫反應(yīng)6.0 h，減壓旋蒸除去溶劑，用乙酸乙酯溶解，過濾，重結(jié)晶即得衍生物Ⅰ、Ⅱ。

2.2.4 衍生物Ⅰ、Ⅱ的結(jié)構(gòu)表征

圖1 衍生物Ⅰ、Ⅱ的合成方法。

2.3 分子模擬

用MOE(2008.09)構(gòu)建衍生物Ⅰ、Ⅱ的分子模型，并用MM94力場對其結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化，達到能量最低狀態(tài)。從Protein Data Bank數(shù)據(jù)庫(http://www.rcsb.org/pdb)下載HSA-華法林、HSA-布洛芬復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)，PDB ID：2bxd、2bxg(二者由同一實驗室同一條件測得)。用MOE分別對兩個衍生物在2bxd的華法林結(jié)合位點以及2bxg的布洛芬結(jié)合位點進行模擬對接，打分函數(shù)為MOE自帶函數(shù)ASE[15-16]。對最后的計算結(jié)果進行對比和分析。

2.4 光譜與位點競爭實驗

2.4.1 藥品配置

儲備液：用pH=7的PBS緩沖液分別配制1.0×10-4mol·L-1人血清白蛋白、布洛芬和華法林溶液以及1.0×10-3mol·L-1衍生物溶液，在4 ℃下保存待用。

掃描溶液：取10支10 mL比色管，分別加入1.0 mL HSA溶液，再加入不同量的衍生物溶液，定容。

競爭實驗溶液：對于華法林競爭實驗，取定容前各衍生物的掃描溶液，加入1.0 mL華法林溶液，定容。對于布洛芬競爭實驗，其溶液的配制方法同上。

2.4.2 實驗設(shè)置

將掃描溶液和競爭實驗溶液分別置于298，303，308 K下30 min以使體系穩(wěn)定。設(shè)置熒光激發(fā)波長為280 nm，激發(fā)狹縫5 nm，發(fā)射狹縫2.5 nm，掃描范圍300～500 nm，快速掃描不同濃度衍生物-HSA體系熒光發(fā)射光譜。對照PBS緩沖液，測定不同濃度衍生物-HSA體系在200～500 nm內(nèi)的紫外吸收光譜，溫度分別為298，303，308 K。

3 結(jié)果與討論

3.1 分子模擬研究衍生物與HSA的相互作用

X射線結(jié)構(gòu)表明[3,17]，人血清白蛋白的分子高度螺旋，其67%的氨基酸殘基都包含在了28個α-螺旋中。HSA的分子輪廓呈心形或一個近似的等邊三角形，分子內(nèi)由Ⅰ(1～195氨基酸殘基)、Ⅱ(196～383氨基酸殘基)、Ⅲ(384～585氨基酸殘基)3個相似的結(jié)構(gòu)區(qū)域組成，3個區(qū)域的高度不對稱性又使每個結(jié)構(gòu)域分為A、B兩個亞域。研究表明，大多數(shù)藥物與HSA的結(jié)合都分別發(fā)生在兩個位點上，定義它們?yōu)閟ite 1和site 2，分別在HSA的ⅡA、ⅢA區(qū)域，而抗凝血藥物華法林被用來作為site 1定位藥物，抗炎布洛芬被用來作為site 2定位藥物[18]。

圖2 兩種衍生物在HSA中的模擬圖

表1為用MOE分別在site 1和site 2位點的對接結(jié)果。由表1可以看出，衍生物Ⅰ、Ⅱ在site 1的結(jié)合能明顯低于site 2，因此可以推斷衍生物Ⅰ、Ⅱ更有可能與HSA在site 1處結(jié)合。衍生物與HSA site 1處的相互作用的結(jié)合位域及相互作用力見圖2。由圖中可以看出，衍生物Ⅰ與HSA周圍12個氨基酸殘基產(chǎn)生作用，分別是Glu153、Glu188、Glu292吸電子效應(yīng)，Lys199、His242、His288、Arg257給電子效應(yīng)，Tyr150、Ser192極性效應(yīng)，Phe157、Leu238、Ala291疏水作用。衍生物Ⅱ與HSA周圍14個氨基酸殘基產(chǎn)生作用，分別是Tyr150、Ser192、Gln196、Ser287極性效應(yīng)，Leu260、Ala261、Ile290、Ala291疏水作用，Lys195、Lys199、Arg218、Arg222、Arg257給電子效應(yīng)，Glu292吸電子效應(yīng)?？梢钥闯鲅苌铫?、Ⅱ與HSA主要的結(jié)合力是由電子的定向效應(yīng)、誘導(dǎo)效應(yīng)和分散效應(yīng)產(chǎn)生的，因此可以推斷它們之間的作用力主要為范德華力[19]，此外還有一定的疏水作用。

表1 衍生物與HSA不同位點的模擬結(jié)合能

Tab.1 Simulation binding energy of derivative in different sites

衍生物PDBID位點結(jié)合能/(kcal·mol-1)Ⅰ2bxdsite1-21.692bxgsite2-17.53Ⅱ2bxdsite1-23.152bxgsite2-20.60

3.2 衍生物與HSA相互作用的熒光發(fā)射光譜

激發(fā)波長為280 nm時，HSA的最大熒光發(fā)射峰在350 nm附近。在此條件下，衍生物Ⅰ、Ⅱ無熒光發(fā)射，但在λex、λem處有一定的吸收，可運用公式(1)對此產(chǎn)生的內(nèi)濾光效應(yīng)進行校正[20-21]：

(1)

F0為測得的熒光發(fā)射峰強度，F(xiàn)c為校正后峰強，Aex為λex處的吸收值，Aem為λem處的吸收值。

由衍生物Ⅰ(Ⅱ)對HSA的熒光猝滅圖(圖3)可知，HSA的熒光發(fā)射光譜隨著體系中衍生物濃度的增加，其猝滅的程度相應(yīng)增大。發(fā)射光譜的峰形不變，峰的位置出現(xiàn)紅移，其中衍生物Ⅰ-HSA紅移12 nm，衍生物Ⅱ-HSA紅移20 nm。這表明衍生物Ⅰ、Ⅱ與HSA的結(jié)合導(dǎo)致HSA的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使色氨酸(Trp)附近的疏水性減小，極性增大[22]。

a～j:c(HSA) =1.0×10-5mol·L-1,c(Ⅰ/Ⅱ) =(0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5)×10-5mol·L-1；k:c(HSA) =0 mol·L-1，c(Ⅰ/Ⅱ) =1.0×10-5mol·L-1.

圖3 兩種衍生物對HSA的熒光猝滅光譜

Fig.3 Fluorescence quenching spectra of two derivatives to HSA

3.3 衍生物與HSA相互作用的猝滅機理

靜態(tài)猝滅和動態(tài)猝滅是熒光猝滅的兩種模式，一般熒光的猝滅是其中的一種。靜態(tài)猝滅是指猝滅劑與熒光分子結(jié)合產(chǎn)生不發(fā)光的復(fù)合物而達到猝滅；動態(tài)猝滅是指猝滅劑與熒光分子發(fā)生碰撞而產(chǎn)生猝滅。兩者的過程均符合Stern-Volmer方程[23]：

(2)

公式表示：不存在猝滅劑時的熒光強度(F0)與存在猝滅劑時的強度(F)比，與藥物的濃度[Q]成正比，系數(shù)即為雙分子猝滅速率常數(shù)(Kq)、Stern-Volmer猝滅常數(shù)(KSV)，公式中熒光分子的平均壽命(τ0)為1×10-8s。

圖4 衍生物與HSA結(jié)合在不同溫度下的熒光猝滅 Stern-Volmer 線

Fig.4 Stern-Volmer strings of fluorescence quenching of derivatives binding with HSA at different temperature

表2 不同溫度下兩種衍生物對HSA的猝滅參數(shù)

分別繪制298，303，308 K溫度下衍生物Ⅰ(Ⅱ)-HSA體系的Stern-Volmer曲線圖(見圖4)，根據(jù)圖中線性關(guān)系，計算其斜率即可得體系在不同溫度下的兩種猝滅常數(shù)(見表2)。由表2可知，溫度的增高導(dǎo)致KSV降低，說明HSA的猝滅是由靜態(tài)猝滅導(dǎo)致[24]。同時說明衍生物Ⅰ(Ⅱ)與HSA結(jié)合產(chǎn)生不發(fā)光復(fù)合物。小分子與蛋白質(zhì)最大碰撞猝滅速率為2.0×1010L·mol-1·s-1[25]，而衍生物Ⅰ、Ⅱ與HSA的Kq遠大于該值，進一步說明衍生物Ⅰ(Ⅱ)能與HSA形成復(fù)合物，即衍生物對HSA產(chǎn)生靜態(tài)猝滅。

3.4 衍生物與HSA相互作用的紫外-可見吸收光譜

通過測定不同衍生物-HSA體系的吸收光譜來進一步探明衍生物對HSA的猝滅機理(圖5)。圖中顯示，衍生物的濃度增加使體系的最大吸收峰值相應(yīng)增加，表明衍生物與HSA 的結(jié)合導(dǎo)致HSA分子構(gòu)象發(fā)生了變化，原本包含Trp和絡(luò)氨酸殘基(Tyr)等含有芳雜環(huán)疏水基團殘基的肽鏈伸展開，致使這些基團出現(xiàn)裸露，疏水作用減弱，吸收強度增大[26]。同時圖5中小圖顯示，HSA的紫外吸收光譜與衍生物Ⅰ(Ⅱ)-HSA和Ⅰ(Ⅱ)的紫外吸收差譜不重合。以上都充分證明衍生物Ⅰ、Ⅱ都與HSA形成了基態(tài)配合物，進一步證明其猝滅機制為靜態(tài)猝滅[27]。

a～j:c(HSA) =1.0×10-5mol·L-1,c(Ⅰ/Ⅱ)=(4.5, 4.0, 3.5, 3.0, 2.5, 2.0, 1.5, 1.0, 0.5, 0)×10-5mol·L-1； k:c(HSA)=0 mol·L-1,c(Ⅰ/Ⅱ)=1.0×10-5mol·L-1.

圖5 兩種衍生物-HSA復(fù)合物的紫外吸收光譜

Fig.5 UV absorption spectra of two derivative-HSA mixtures

3.5 衍生物與HSA相互作用的結(jié)合位點數(shù)(n)及結(jié)合常數(shù)(KA)

設(shè)衍生物在HSA上有n個相同且獨立的結(jié)合位點，則衍生物Ⅰ(Ⅱ)-HSA復(fù)合物的熒光強度與衍生物濃度對應(yīng)關(guān)系可由公式(3)描述[24]：

(3)

以不同衍生物的lg[Q]為橫坐標(biāo)對應(yīng)體系的lg[(F0-F)/F]作圖(圖6)，由對應(yīng)直線的斜率和截距可得相應(yīng)體系的KA和n值(表3)。由表3可得不同溫度下2種衍生物的n值都約為1，表明衍生物Ⅰ、Ⅱ與HSA的結(jié)合位點均只有1個。此外，2種衍生物與HSA結(jié)合的KA值隨溫度的升高而降低，說明復(fù)合物的穩(wěn)定性隨溫度的升高而降低，進一步說明猝滅過程為靜態(tài)猝滅[28]。

圖6 衍生物-HSA復(fù)合物在不同溫度下的熒光猝滅雙對數(shù)曲線

Fig.6 Double lg strings of fluorescence quenching of derivative-HSA mixtures in different temperatures

表3 衍生物與HSA在不同溫度下的結(jié)合參數(shù)

Tab.3 Binding parameters of derivatives and HSA in different temperatures

復(fù)合物T/KKA/(mol·L-1)nR衍生物Ⅰ-HSA2983.883×1041.0220.99533031.625×1040.9460.99373081.123×1040.9270.9985衍生物Ⅱ-HSA2983.629×1041.2040.99923031.300×1041.1020.99943087.508×1031.0430.9975

3.6 不同衍生物-HSA體系結(jié)合距離(r)及能量轉(zhuǎn)移效率(E)

受體與配體之間的相互作用的E與r的關(guān)系符合非輻射能量轉(zhuǎn)移理論[29-30]：

(4)

(5)

(6)

式中，F(xiàn)0為受體分子的熒光強度，F(xiàn)為受體和配體濃度為1∶1時的熒光強度，偶極空間取向因子K2為2/3，供體的熒光量子產(chǎn)率φ為0.118，R0為臨界能量轉(zhuǎn)移距離，介質(zhì)折射指數(shù)N為1.336[31]，J表示受體的熒光光譜與配體的吸收光譜的重疊積分，F(xiàn)(λ)是受體在波長λ處的熒光強度，ε(λ)是配體在波長λ處的摩爾吸光系數(shù)。

圖7為HSA熒光光譜與衍生物紫外吸收光譜的重疊圖。根據(jù)公式(4)～(6)可得到J、E、r，見表4。R0值均在7 nm內(nèi)，且r在0.5R0～1.5R0之間，說明Trp殘基可以以非輻射方式將能量轉(zhuǎn)移至衍生物，導(dǎo)致HSA的熒光猝滅。r>R0，表明靜態(tài)猝滅過程引起的猝滅可能性大于非輻射能量，衍生物與HSA作用猝滅的方式主要是靜態(tài)猝滅[29,32]。

T=298 K, c(HSA)=c(Ⅰ/Ⅱ)=1.0×10-5 mol·L-1．

圖7 HSA的熒光發(fā)射(a)與兩種衍生物(b)的紫外吸收重疊圖譜

Fig.7 Overlap spectrum of fluorescence emission of HSA (a) and absorption spectra of two derivatives (b)

表4 兩種衍生物與HSA的結(jié)合距離參數(shù)

表5 不同溫度下衍生物與HSA作用的熱力學(xué)參數(shù)

3.7 不同衍生物-HSA體系作用力類型

配體與受體之間的作用力類型主要有氫鍵作用、疏水作用、范德華力以及靜電作用。配體與受體之間的作用力類型可由其作用前后熱力學(xué)參數(shù)ΔH、ΔS的變化來判斷[32]。在本實驗條件下，HSA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定不會降解，根據(jù)van’t Hoff定律，兩物質(zhì)相互作用的熱力學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系可描述如下：

(7)

(8)

以1/T位橫坐標(biāo)對lnKA作圖得到直線，由直線產(chǎn)生的斜率和截距可得相互作用的ΔH和ΔS，由公式(8)可得不同溫度下的ΔG(表5)。由表5可知，ΔS<0、ΔH<0并且在不同溫度下ΔG<0，表明衍生物Ⅰ、Ⅱ與HSA相互作用是由焓驅(qū)動自發(fā)進行的過程，其主要作用力類型為氫鍵和范德華力[33]。該結(jié)果與分子模擬的結(jié)果一致。

3.8 位點競爭實驗結(jié)果

根據(jù)Sudlow的命名法，配體與HSA主要在兩個位點產(chǎn)生結(jié)合。華法林、布洛芬分別被視為Sudlow的site 1和2定型配體。華法林作為大雜環(huán)陰離子，結(jié)合到Sudlow的site 1，位于子域ⅡA；而布洛芬作為帶擴展構(gòu)象的芳族羧酸鹽，結(jié)合到Sudlow的site 2，位于子域ⅢA[34]。用已知位點的化合物(華法林與布洛芬)與衍生物共同作用，由引起的熒光數(shù)據(jù)的變化可確認衍生物的結(jié)合位點，見圖8。

a～j:c(HSA)=1.0×10-5mol·L-1，c(Ⅰ/Ⅱ) =(4.5, 4.0, 3.5, 3.0, 2.5, 2.0, 1.5, 1.0, 0.5, 0)×10-5mol·L-1； k:c(HSA)=0 mol·L-1，c(warfarin)=c(ibuprofen)=1.0×10-5mol·L-1.

圖8 位點競爭對不同衍生物-HSA系統(tǒng)的影響

Fig.8 Effect of site marker to the different derivative-HSA systems

表6 競爭試驗中不同衍生物的結(jié)合常數(shù)

Tab.6 Binding constants of different derivatives in site marker competitive

體系T/KKA/(mol·L-1)R衍生物Ⅰ-HSA2983.883×1040.9953衍生物Ⅰ-HSA+warfa-rin2983.993×1030.9937衍生物Ⅰ-HSA+ibupro-fen2982.392×1040.9985衍生物Ⅱ-HSA2983.629×1040.9992衍生物Ⅱ-HSA+warfa-rin2981.461×1040.9994衍生物Ⅱ-HSA+ibupro-fen2983.343×1040.9975

由圖可以發(fā)現(xiàn)，在添加華法林之后，衍生物Ⅰ、Ⅱ的熒光發(fā)射光譜發(fā)生了明顯的紅移，而加入布洛芬的組別則沒有明顯變化。這說明華法林的加入使衍生物-HSA復(fù)合物的色氨酸(Trp214)周圍的極性增加[35]。為進一步了解華法林和布洛芬的加入對衍生物-HSA復(fù)合物產(chǎn)生的影響，我們用Stern-Volmer方程對其數(shù)據(jù)進行分析(表6)。從表中可以看出，添加華法林的KA明顯小于未添加時，而添加布洛芬的KA則沒有太大變化。以上結(jié)果可以證明衍生物Ⅰ、Ⅱ均與HSA在site 1處結(jié)合，該結(jié)果與分子模擬對接結(jié)果一致。

4 結(jié) 論

本文合成了2種未見報道的肉桂酸肟酯類衍生物，并通過分子對接、光譜法、位點競爭法研究了其與HSA相互作用的情況。分子對接結(jié)果表明，衍生物Ⅰ、Ⅱ更易結(jié)合到Sudlow的site 1(結(jié)構(gòu)亞域ⅡA)處，主要的相互作用力為范德華力。光譜實驗顯示，在體外生理條件下，衍生物Ⅰ、Ⅱ均可以使HSA的內(nèi)源性熒光發(fā)生靜態(tài)猝滅，衍生物Ⅰ、Ⅱ與HSA之間的作用力主要為氫鍵作用和范德華力。位點競爭實驗結(jié)果表明，衍生物Ⅰ、Ⅱ均與HSA在華法林的位點處結(jié)合即Sudlow的site 1(結(jié)構(gòu)亞域ⅡA)處。分子模擬對實驗的預(yù)測在光譜法和位點競爭實驗的實際操作下得以驗證，理論與實踐的結(jié)合使實驗的準(zhǔn)確度大大提高。這些結(jié)果為進一步研究肉桂酸肟酯類化合物的體內(nèi)藥代動力學(xué)提供了重要參數(shù)，同時也對新藥的設(shè)計、改良以及分子對接提供了一定的理論參考。

致謝：感謝中山大學(xué)提供MOE2008.09軟件。

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逯東偉(1989-)，男，河南濮陽人，碩士研究生，2010年于廣東海洋大學(xué)獲得學(xué)士學(xué)位，主要從事天然藥物化學(xué)方面的研究。

E-mail: ldw309@163.com

林翠梧(1958-)，女，廣西北流人，教授，博士生導(dǎo)師，2000年于中山大學(xué)獲得博士學(xué)位，主要從事天然藥物化學(xué)方面的研究。

E-mail: cuiwulin114@163.com

第十屆全國有機發(fā)光和光電性質(zhì)學(xué)術(shù)會議

第一輪會議通知

“全國有機發(fā)光和光電性質(zhì)學(xué)術(shù)會議”是每兩年舉行一次的全國性專業(yè)學(xué)術(shù)活動，旨在為國內(nèi)外從事有機光電材料與器件研究的專家、學(xué)者和企業(yè)家提供一個良好的學(xué)術(shù)交流、展示最新成果的平臺，探討有機光電材料及器件的發(fā)展現(xiàn)狀和趨勢，同時也是對近兩年來在有機光電領(lǐng)域所取得的研究成果和技術(shù)進步進行一次全面、集中的檢閱。本屆學(xué)術(shù)會議將于2017年7月7日至7月9日在具有2500年悠久歷史的文化古城山西省太原市召開，由太原理工大學(xué)承辦，會議將邀請國內(nèi)外多位院士和著名專家學(xué)者參會并作大會報告。謹此，我們熱忱歡迎廣大專家學(xué)者、相關(guān)企業(yè)的工程技術(shù)人員和研究生蒞臨大會！

會議將在全國范圍內(nèi)廣泛開展征文活動，真誠希望有機光電研究領(lǐng)域的專家、學(xué)者與研究生，以及相關(guān)產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域的技術(shù)人員踴躍投稿并到會交流，展示最新研究成果及應(yīng)用、開發(fā)實踐中的成績和寶貴經(jīng)驗。

(一)征文專題

會議征文內(nèi)容包括但不限于如下幾個領(lǐng)域：

有機發(fā)光理論與有機發(fā)光材料

有機發(fā)光器件及其制備技術(shù)

有機光伏及鈣鈦礦電池理論、材料與器件

有機薄膜晶體管理論、材料與器件

新型有機光電材料與器件：傳感、存儲、激光與非線性光學(xué)等

新型有機光電產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)

(二) 時間節(jié)點

會議時間： 2017年7月7日-7月9日

論文摘要提交截止日期： 2017年5月20日

論文摘要錄用通知日期： 2017年6月1日

網(wǎng)上注冊、繳費截止日期： 2017年6月10日

論文全文提交截止日期： 2017年7月1日

(三) 會議論文提交事項

論文力求反映有機光電領(lǐng)域的最新成果且尚未在國內(nèi)外刊物上發(fā)表過，主題明確、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠、論述嚴(yán)謹、結(jié)論明確。

請將投寄的論文摘要和全文通過會議網(wǎng)址提交(http://oel2017.tyut.edu.cn)。論文摘要模板可在會議網(wǎng)站中下載；論文全文格式請登陸《發(fā)光學(xué)報》網(wǎng)站(http://www.fgxb.org)，按照稿件模板撰寫。

本次會議征集的論文全文，組委會將擇優(yōu)推薦給EI 收錄的中文核心期刊《發(fā)光學(xué)報》刊登發(fā)表。

本次會議將評選墻報展示的優(yōu)秀論文進行獎勵。

會議詳細信息和進展情況請訪問會議網(wǎng)址：http://oel2017.tyut.edu.cn

聯(lián)系方式

地 址：山西省太原市迎澤西大街79號太原理工大學(xué)材料館

名 稱：太原理工大學(xué)新材料界面與工程教育部重點實驗室

聯(lián)系人：秦 蕾 13623665546；王 華 13834637553

電 話：0351-6018010 傳 真：0351-6018010

電子郵箱：OEL2017@tyut.edu.cn

第十屆全國有機發(fā)光和光電性質(zhì)學(xué)術(shù)會議組委會

2016年12月16日

第八屆全國氧化鋅學(xué)術(shù)會議征文通知

ZnO具有激子束縛能高、可見光透過率高、紫外吸收強等特點，同時擁有壓電、熱電等特性，是一種獨特的第三代半導(dǎo)體材料。經(jīng)過十多年持續(xù)的攻關(guān)研究，人們對ZnO半導(dǎo)體的光、電、磁及壓電等特性的理解和研究不斷深入。ZnO半導(dǎo)體在太陽能電池、發(fā)電機、傳感器、探測器、發(fā)光二極管和激光器等領(lǐng)域的應(yīng)用成果不斷涌現(xiàn)，特別是ZnO透明導(dǎo)電膜、薄膜晶體管等方面的大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用已迅速展開。目前，ZnO的研究已進入功能擴展與綜合利用的新階段，有著巨大的潛在應(yīng)用前景。

全國氧化鋅學(xué)術(shù)會議是由中國物理學(xué)會發(fā)光分會主辦的專注ZnO科學(xué)研究進展交流的全國性重要會議，每兩年舉辦一次。第八屆全國氧化鋅學(xué)術(shù)會議擬定于2017年10月29-31日在南寧市召開，本屆會議由北京科技大學(xué)和廣西大學(xué)聯(lián)合承辦。本屆會議旨在集中展示我國ZnO研究領(lǐng)域取得的最新科研成果，為相關(guān)科技工作者提供一個學(xué)術(shù)和技術(shù)交流的平臺，共同研討ZnO研究中存在的基本科學(xué)和技術(shù)問題，探尋解決途徑，大力推動我國在ZnO相關(guān)物理問題和器件應(yīng)用方面的研究。

會議將邀請海內(nèi)外從事ZnO研究的著名專家學(xué)者做大會邀請報告，并將安排分會邀請報告、口頭報告、墻報展示和專題討論等活動。熱忱歡迎國內(nèi)外廣大科技工作者，特別是青年科技工作者和研究生踴躍投稿，同時歡迎相關(guān)設(shè)備和儀器制造領(lǐng)域的科技人員和廠商參加交流展覽。

一、擬設(shè)置的分會及主題

1. ZnO材料與器件的基礎(chǔ)研究

2. ZnO在新能源、催化與環(huán)境領(lǐng)域的應(yīng)用研究

3. ZnO在電子與信息器件領(lǐng)域的應(yīng)用研究

4. 納米發(fā)電機與壓電電子學(xué)

5. ZnO與其他材料的前沿交叉研究

二、會議相關(guān)日程及重要日期

2017年7月15日 論文摘要截止提交日期

2017年8月15日 發(fā)送會議論文錄用通知

2017年10月29日 會議代表注冊

2017年10月30-31日 大會邀請報告、分會邀請報告、口頭報告、墻報展示等

三、摘要投稿要求

1．來稿應(yīng)為論文詳細摘要，每篇1頁(包括圖表)，中文、英文均可。頁面及格式要求：A4幅面，上、下、左、右邊距均為3厘米，單倍行距。題目(3號黑體字，居中)，作者(4號黑體字，居中)，單位和郵政編碼(5號宋體字，居中)，正文和參考文獻(5號宋體字)。會議論文將擇優(yōu)向《發(fā)光學(xué)報》(EI)推薦發(fā)表。

2．請將摘要電子版于2017年7月15日前發(fā)到電子信箱： nano@ustb.edu.cn。

四、會議注冊費及繳納方式

9月15日前: 1500元/人，學(xué)生1000元/人，家屬600元/人，企業(yè)注冊費2000元；

收款單位： 廣西大學(xué)； 銀行帳號： 6184 5748 4938；

開戶銀行： 中國銀行廣西南寧市城北支行； 聯(lián)系電話: 0771-3299726。

現(xiàn)場繳費: 1800元/人，學(xué)生1300元/人，家屬600元/人，企業(yè)注冊費2500元。

五、聯(lián)系方式

廖慶亮(電話： 13810174066) 張錚(電話： 15120005576)

管永精(電話： 15078878251) 林濤(電話： 13978651324)

會議郵箱： nano@ustb.edu.cn

會議網(wǎng)站： http://8th-zno.gxu.edu.cn

Synthesis of Two Cinnamic Oxime Ester Derivatives and Their Interaction Mechanism with Human Serum Albumin

LU Dong-wei1, WU Xiao-yu1, XIE Xian1, YU Kai-li1, LIN Cui-wu1,2*

(1.CollegeofChemistryandChemicalEngineering,GuangxiUniversity,Nanning530004,China;2.GuangxiCollegesandUniversitiesKeyLaboratoryofAppliedChemistryTechnologyandResourceDevelopment,Nanning530004,China)

Two novel cinnamic acid oxime ester derivatives were designed and synthesized witho-methoxy cinnamic acid andp-substituted benzaldehyde. Their structures were characterized by mass spectrometry, infrared spectroscopy, and nuclear magnetic resonance. The interaction mechanism of derivatives and human serum albumin (HSA) were explored by molecular docking, fluorescence spectroscopy, UV-visible absorption spectroscopy and site marker competitive experiments．The binding constants and corresponding thermodynamic parameters of the derivative-HSA systems were calculated by Stern-Volmer equation. Combined with UV-Vis absorption spectra, the results indicate that the derivatives can get complexes with HSA respectively and strongly quench the intrinsic fluorescence of HSA, and hydrogen bonds and van der Waals forces are main acting forces. Site marker competitive experiments indicate that the binding of the derivatives to HSA primarily take place in sub-domain ⅡA. The above results verify the prediction of molecular simulation experiment.

cinnamic acid ester oxime; spectrometry methodology; site marker competitive; human serum albumin (HSA); molecular docking

1000-7032(2017)03-0402-11

2016-08-31；

2016-09-21

國家自然科學(xué)基金(21362001)； 廣西高等學(xué)校高水平創(chuàng)新團隊和卓越學(xué)者項目([2014]49號)資助 Supported by National Natural Science Foundation of China(21362001); Guangxi Colleges and Universities High level of Innovation and Excellence in Academic Project Team([2014]49)

O625.5

A

10.3788/fgxb20173803.0402

*CorrespondingAuthor,E-mail:cuiwulin114@163.com