基于InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針的DNA檢測

胡先運(yùn)， 孟鐵宏， 張汝國， 江家志， 黃星宏

(1. 東南大學(xué)生物科學(xué)與醫(yī)學(xué)工程學(xué)院 生物電子學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 江蘇 南京 210096;2. 黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校, 貴州 都勻 558000)

基于InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針的DNA檢測

胡先運(yùn)1,2， 孟鐵宏2， 張汝國2， 江家志2， 黃星宏2

(1. 東南大學(xué)生物科學(xué)與醫(yī)學(xué)工程學(xué)院 生物電子學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 江蘇 南京 210096;2. 黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校, 貴州 都勻 558000)

利用巰基丙酸包覆的InP@ZnS 量子點(diǎn)(QDs)與Dured構(gòu)建了一種檢測DNA的熒光探針。在該探針中，以環(huán)境友好型帶負(fù)電的InP@ZnS量子點(diǎn)為熒光團(tuán)，與帶正電的Dured通過靜電結(jié)合，構(gòu)建了InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針。通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)機(jī)理，量子點(diǎn)熒光被猝滅；當(dāng)DNA存在時，Dured與DNA的特異性結(jié)合使Dured從InP@ZnS QDs表面脫附，F(xiàn)RET過程被打斷，InP@ZnS QDs熒光恢復(fù)，以熒光“關(guān)-開”方式檢測DNA。該探針檢測DNA的線性范圍為2.0～275.0 ng·L-1，檢測限為1.0 ng·L-1，并可用于模擬生物生理?xiàng)l件下的DNA檢測。

InP@ZnS量子點(diǎn)； 熒光探針； DNA； 熒光共振能量轉(zhuǎn)移

1 引 言

量子點(diǎn)(Quantum dots,QDs)又稱為半導(dǎo)體納米晶體，相較于傳統(tǒng)的有機(jī)染料，具有優(yōu)良的光學(xué)性能和電學(xué)性質(zhì)而被廣泛應(yīng)用于生物、食品、醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域[1-4]。量子點(diǎn)的優(yōu)勢主要表現(xiàn)在寬的激發(fā)光譜、窄而對稱的發(fā)射光譜、光穩(wěn)定性好、發(fā)光效率高等方面，有望替代傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料，用于各種生物分子的熒光檢測[5-8]。目前，隨著Ⅱ-Ⅵ族 量子點(diǎn)(如 CdTe、CdSe等)制備技術(shù)的成熟，其在生物傳感領(lǐng)域已得到很大的發(fā)展[9-11]。與之相比，Ⅲ-Ⅴ族量子點(diǎn)(如InP)的制備要求苛刻，其應(yīng)用受到了很大限制。然而，InP 量子點(diǎn)具有較低的毒性，不含有Cd、Hg等有毒元素，其光譜范圍覆蓋可見及近紅外區(qū)(500～850 nm)，并且具有相對較小的粒子尺寸。優(yōu)異的生物相容性以及光學(xué)性能，使得 InP 量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)成像等領(lǐng)域表現(xiàn)出誘人的前景[12-15]。

DNA作為遺傳信息的載體，其與有機(jī)小分子相互作用的研究對于闡明DNA靶標(biāo)藥物與 DNA相互作用機(jī)制以及疾病的起源具有重要意義,是分子生物學(xué)和生命化學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)[16-17]，同時核酸的定量分析是核酸研究的基礎(chǔ)。熒光分析法因其簡便快速、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn), 已成為核酸分析的最重要手段之一[18-20]。目前與DNA相互作用的小分子熒光染料主要有二苯并咪唑、溴化乙啶及其二聚體以及Dured(5,5′-(6,22-二氧11,14,17-三氧雜-7,21-二氮雜二十七烷-1,27-二基)雙(3,8-二氨基-6-苯基菲啶-5-碘化銨))等[16]，其作為核酸探針的檢測靈敏度主要取決于熒光染料的高量子產(chǎn)率以及與DNA相互作用的特異性。但是，有機(jī)熒光染料容易發(fā)生光漂白現(xiàn)象而使其信號減弱, 從而限制了其在痕量核酸檢測中的應(yīng)用。實(shí)現(xiàn)DNA靈敏檢測依然是眾多研究者致力的方向，篩選和構(gòu)建DNA有效識別體是實(shí)現(xiàn)DNA簡單靈敏檢測的有效手段。

利用量子點(diǎn)的優(yōu)良的熒光性能，目前開始設(shè)計(jì)三元體系，以DNA特異識別劑作為中間體，用量子點(diǎn)的熒光開關(guān)變化間接測定DNA[21-26]。Dured作為DNA的特異插入劑，因其安全、穩(wěn)定、性價比高的特點(diǎn)，已被逐漸應(yīng)用于DNA的熒光標(biāo)記[27-28]。本文基于Dured與DNA的特異性結(jié)合，以環(huán)境友好型InP@ZnS量子點(diǎn)為熒光團(tuán)，利用水溶性InP@ZnS QDs的較好的熒光性能以及顏色可調(diào)的特性與Dured結(jié)合，構(gòu)建了InP@ZnS QDs的三元體系熒光探針，研究了量子點(diǎn)與Dured的作用機(jī)理，通過InP@ZnS QDs熒光“關(guān)-開”方式，建立一種簡便快速測定DNA的熒光分析法，為核酸的定量分析以及小分子藥物篩選開辟新的途徑。

2 實(shí) 驗(yàn)

2.1 試劑與儀器

小牛胸腺DNA(DNA)購買于Sigma-Aldrich公司，貯液用pH為7.4的Tris-HCl 緩沖溶液溶解，4 ℃保存?zhèn)溆谩ured購買于Biotium公司；醋酸銦(In(AC)3)、十四烷脂肪酸、硫、硬脂酸鋅、辛胺、巰基丙酸(MPA)購買于Alfa Aesar公司；十八烯(ODE)購于Aldrich；三(三甲硅烷基)膦(P(TMS)3)購買于Strem Chemicals公司。

量子點(diǎn)的熒光和紫外吸收光譜分別在Hitachi F-7000和Hitachi U-4100光譜儀上測量。量子點(diǎn)形貌用JEM-2100透射電子顯微鏡測量。Zeta電位在Malvern Zetasizer Nano-ZS粒徑分析儀(Malvern, U.K.)上測量。超純水(ρ>18 MΩ·cm-1)通過Pall Cascade AN超純水系統(tǒng)制備。

2.2 InP@ZnS QDs制備

按照文獻(xiàn)[29]的方法并加以改進(jìn)，合成水溶性InP@ZnS QDs，具體合成方法如下：以十四酸銦、三(三甲硅烷基)膦、辛胺為前驅(qū)體，采用熱注入法合成InP核。以硬脂酸鋅、硫?yàn)榍疤嵛镔|(zhì)，通過連續(xù)離子層吸附反應(yīng)，在InP核上包覆ZnS殼層。通過調(diào)節(jié)前驅(qū)體比例以及ZnS殼層層數(shù)，合成核殼型油溶性InP@ZnS量子點(diǎn)。通過配體交換方法，制備出高質(zhì)量水溶性MPA-InP@ZnS量子點(diǎn)。取8 mL 10 μmol·L-1油溶性InP@ZnS量子點(diǎn)，加入2 mL MPA，在60 ℃下反應(yīng)48 h，離心，用氯仿洗去沒有反應(yīng)的MPA。加入2 mL超純水溶解，調(diào)至pH=8，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3 熒光測定

在熒光猝滅實(shí)驗(yàn)中，將不同濃度的Dured水溶液加入到InP@ZnS QDs溶液中，兩者充分混合，InP@ZnS QDs濃度為0.1 μmol·L-1。在熒光恢復(fù)實(shí)驗(yàn)中，將一定濃度的DNA水溶液和0.1 μmol·L-1InP@ZnS QDs/Dured水溶液在室溫下混合。所有熒光測量實(shí)驗(yàn)均是在室溫條件下進(jìn)行的，光電倍增管(PMT)電壓為700 V，狹縫寬度為5 nm。

實(shí)驗(yàn)原理如圖1所示。帶正電的Dured和帶負(fù)電的巰基丙酸(MPA)包覆的InP@ZnS量子點(diǎn)靜電吸附,形成InP@ZnS QDs/Dured 納米復(fù)合物。由于QDs向Dured存在有效的熒光共振能量轉(zhuǎn)移(Fluorescence resonance energy transfer，F(xiàn)RET)過程，InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物提供了熒光(PL)信號“關(guān)”的狀態(tài)。有DNA存在時，Dured特異與DNA結(jié)合而從InP@ZnS QDs表面脫附，InP@ZnS QDs的熒光恢復(fù)，呈現(xiàn)出熒光信號“開”的狀態(tài)。因此，通過InP@ZnS QDs/Dured熒光探針的信號“關(guān)-開”的形式，能夠靈敏和特異性地識別DNA。

圖1 基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移機(jī)制的InP@ZnS QDs/Dured納米復(fù)合物檢測DNA示意圖

3 結(jié)果與討論

3.1 水溶性InP@ZnS QDs制備

核殼型InP@ZnS QDs合成過程如圖2(a)所示。通過熱注入合成了InP量子點(diǎn)核，由于InP量子點(diǎn)單核的熒光很弱，所以通過連續(xù)離子層吸附反應(yīng)，在其外層包覆ZnS殼層，形成核殼型的InP@ZnS QDs。ZnS殼層可以有效增加QDs的熒光強(qiáng)度，并且可以提高InP QDs的穩(wěn)定性，如圖2(b)、(c)所示。InP量子點(diǎn)熒光很弱，其熒光量子產(chǎn)率小于1%。包覆第一層ZnS殼層后，量子點(diǎn)熒光顯著增強(qiáng)；包覆第二層ZnS殼層后，量子點(diǎn)的熒光進(jìn)一步增強(qiáng)，InP@ZnS QDs的熒光量子產(chǎn)率達(dá)到34%，結(jié)果與文獻(xiàn)[29]結(jié)果吻合。InP@ZnS QDs在放置4～6個月后，其熒光沒有明顯變化，說明具有較好的熒光穩(wěn)定性。通過配體交換方法，我們制備出水溶性MPA包覆的InP@ZnS量子點(diǎn)。由圖2(d)可知，InP@ZnS QDs發(fā)射波長的最大發(fā)射峰為511 nm(半峰寬為53 nm)，第一吸收峰為454 nm。在紫外燈下，量子點(diǎn)熒光顏色為綠色。將羅丹明B作為標(biāo)準(zhǔn)樣，測得其量子產(chǎn)率為20%。圖2(e)中的透射電子顯微鏡(TEM)以及高分辨透射電子顯微鏡(HRTEM)圖像顯示，水溶性InP@ZnS量子點(diǎn)分散均勻，粒徑為2.8 nm。

3.2 InP@ZnS QDs/Dured納米復(fù)合物構(gòu)建

我們制備了水溶性MPA包覆的綠色I(xiàn)nP@ZnS QDs，發(fā)射波長為511 nm。將0.1 μmol·L-1的InP@ZnS QDs與不同濃度的Dured混合，帶正電荷的Dured靜電吸附在MPA包覆的InP@ZnS QDs表面，共組裝成InP@ZnS QDs/Dured納米復(fù)合物。如圖3(a)所示，隨著加入的Dured濃度的逐漸增加，InP@ZnS QDs的zeta電位呈線性增大。當(dāng)Dured/InP@ZnS QDs的濃度比大于10∶1時，InP@ZnS QDs表面的zeta電位不再增加，趨于飽和，說明帶正電的Dured靜電吸附到帶負(fù)電的InP@ZnS QDs的表面，并且每個InP@ZnS QDs表面平均可以吸附10個分子的Dured。另外，如圖3(b)的紅外光譜所示，所制備的MPA-InP@ZnS QDs/Dured納米復(fù)合物與MPA-InP@ZnS QDs出現(xiàn)了Dured的特征振動峰(1 627 cm-1, 1 110 cm-1)。說明Dured已結(jié)合在MPA-InP@ZnS QDs表面。

圖2 (a)核殼型的InP@ZnS QDs合成過程示意圖；(b)ZnS殼層對InP量子點(diǎn)熒光強(qiáng)度的影響；(c)InP@ZnS QDs的時間穩(wěn)定性；(d)綠色I(xiàn)nP@ZnS QDs的吸收和發(fā)射光譜，插入圖為紫外燈下的熒光圖片；(e)綠色I(xiàn)nP@ZnS QDs的透射電鏡(TEM)以及高分辨透射電鏡(HRTEM)圖像。

Fig.2 (a) Schematic illustration of InP@ZnS QDs synthesis. (b) PL intensity changes of InP QDs with different ZnS layers. (c) PL intensity of InP@ZnS QDs under different time. (d) Absorption and emission spectra of InP@ZnS QDs. (e) (HR)TEM images of InP@ZnS QDs.

圖3 (a)不同濃度比的Dured/ InP@ZnS QDs的zeta電位；(b) InP@ZnS QDs、Dured、InP@ZnS QDs/Dured以及InP@ZnS QDs/Dured加入DNA后的離心沉淀物的紅外光譜圖。

Fig.3 (a) Zeta potentials of Dured/ InP@ZnS QDs with different molar ratios. (b) FTIR spectra of MPA-capped InP@ZnS QDs, Dured, the precipitates of InP@ZnS QDs/Dured in the absence/presence of DNA.

3.3 Dured猝滅InP@ZnS QDs的熒光

當(dāng)不同濃度的Dured加入到0.1 μmol·L-1InP@ZnS QDs中時，如圖4(a)所示，Dured能夠逐漸猝滅InP@ZnS QDs的熒光。當(dāng)Dured濃度為1.0 μmol·L-1時，InP@ZnS QDs熒光猝滅到原來的29.0%；當(dāng)Dured濃度為5.0 μmol·L-1時，InP@ZnS QDs熒光猝滅到原來的2.0%。Dured濃度在0～1.0 μmol·L-1范圍內(nèi)時，InP@ZnS QDs的相對熒光強(qiáng)度(I/I0,I和I0分別是InP@ZnS QDs/Dured和原始0.1 μmol·L-1InP@ZnS QDs的熒光強(qiáng)度)與Dured的濃度呈現(xiàn)出線性關(guān)系，R2=0.992，如圖4(b)所示。這表明當(dāng)Dured濃度較低(0～1.0 μmol·L-1)時，Dured能夠完全吸附到InP@ZnS QDs表面；當(dāng)Dured濃度大于1.0 μmol·L-1后，Dured不能完全吸附到InP@ZnS QDs表面。為了構(gòu)建對DNA靈敏的InP@ZnS QDs/Dured熒光探針，我們將0.1 μmol·L-1InP@ZnS QDs和1.0 μmol·L-1的Dured(Dured和InP@ZnS QDs濃度比為10∶1)自組裝構(gòu)建InP@ZnS QDs/Dured熒光探針。

圖4 (a) InP@ZnS QDs溶液中加入不同濃度Dured后的熒光光譜；(b)相對熒光強(qiáng)度的變化。

Fig.4 (a) PL spectra of 0.1 μmol·L-1InP@ZnS QDs with different Dured concentration. (b) Relationship between relative PL intensity (I/I0) of InP@ZnS QDs and Dured concentration.

3.4 InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針檢測DNA

圖5(a)為InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針中加入不同濃度DNA的熒光光譜圖。隨著加入的DNA濃度增加，InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物的熒光強(qiáng)度逐漸增大。當(dāng)DNA濃度增加到400.0 ng·L-1時，探針熒光恢復(fù)到原來的約76%。我們進(jìn)一步建立了DNA濃度與InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物熒光恢復(fù)強(qiáng)度之間的線性響應(yīng)關(guān)系，如圖5(b)所示。當(dāng)DNA的濃度在2.0～275.0 ng·L-1范圍內(nèi)變化時，DNA的濃度與InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物的相對熒光強(qiáng)度(I/I0)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系(I是InP@ZnS QDs/Dured中加入DNA后的熒光強(qiáng)度，I0是原始InP@ZnS QDs的熒光強(qiáng)度)，線性方程為I/I0=0.274+0.0017×CDNA(R2=0.998)。根據(jù)3σ IUPAC標(biāo)準(zhǔn)，得到的檢測限為1.0 ng·L-1。繼續(xù)增加DNA濃度，InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物的相對熒光強(qiáng)度變化逐漸平緩。當(dāng)DNA濃度達(dá)到350.0 ng·L-1時，InP@ZnS QDs/Dured的熒光恢復(fù)達(dá)到飽和。另外，我們通過測量InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物中加入DNA后的離心沉淀物的紅外光譜，如圖3(b)所示，進(jìn)一步驗(yàn)證了加入DNA 后，打斷了InP@ZnS QDs和Dured的相互作用。當(dāng)50.0 ng·L-1DNA加入到InP@ZnS QDs/Dured復(fù)合物中時，其離心沉淀物的紅外光譜中Dured的特征振動峰減弱(1 627 cm-1,1 110 cm-1)。當(dāng)加入400.0 ng·L-1DNA后，其離心沉淀物的FTIR光譜中的Dured的特征振動峰消失，并且與InP@ZnS QDs的相同，證明在InP@ZnS QDs/Dured探針中加入DNA，其熒光恢復(fù)是由于加入的DNA使Dured從InP@ZnS QDs表面脫附。

圖5 (a) InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針中加入DNA的熒光恢復(fù)光譜；(b)相對熒光強(qiáng)度曲線。

Fig.5 (a) PL spectra representing the recovery of InP@ZnS QDs/Dured fluorescent nanoprobe by DNA. (b) Relationship betweenI/I0and DNA concentration.

3.5 InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針的選擇性

生物體液中含有一些常見生物分子和離子，如氨基酸、無機(jī)離子等，我們對其對InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針檢測體系的干擾進(jìn)行了考察，如圖6所示。在檢測300 ng·L-1的DNA時，其他常見離子和生物分子允許倍率分別為:100倍的葡萄糖、甘氨酸、色氨酸、丙氨酸、胱氨酸、半胱氨酸，以及10倍的常見金屬離子Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe2+及Cl-。它們均不產(chǎn)生明顯干擾。

圖6 常見生物分子和離子對InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針的影響

Fig.6 Effect of common biomolecules and ions on InP@ZnS QDs/Dured fluorescent nanoprobe

3.6 InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針檢測原理

我們選用綠色帶負(fù)電荷的InP@ZnS QDs，其發(fā)射波長為511 nm，與帶正電荷的Dured共組裝，兩者相互靠近，形成InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針。Dured在496 nm有很強(qiáng)的吸收峰，如圖7所示。當(dāng)用365 nm激發(fā)量子點(diǎn)時，InP@ZnS QDs在511 nm處的發(fā)射光譜與Dured的吸收光譜有很強(qiáng)的重疊，量子點(diǎn)向Dured發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移，量子點(diǎn)的熒光猝滅。當(dāng)DNA存在時，Dured與DNA結(jié)合形成Dured/DNA，其511 nm處的吸收降低，InP@ZnS QDs在511 nm處的發(fā)射光譜與Dured/DNA的吸收光譜重疊減少，InP@ZnS QDs與Dured之間的FRET效率降低，量子點(diǎn)熒光恢復(fù)。另外，InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針中加入DNA，Dured與DNA結(jié)合，從InP@ZnS QDs表面脫附，InP@ZnS QDs與Dured兩者之間距離拉大，F(xiàn)RET效率進(jìn)一步降低，因此InP@ZnS QDs熒光恢復(fù)。

圖7 Dured、Dured/DNA的吸收光譜和InP@ZnS QDs的發(fā)射光譜。

Fig.7 Absorption spectra of Dured and Dured/DNA and emission spectra of InP@ZnS QDs, respectively.

3.7 InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針在模擬生理樣品中的應(yīng)用

為進(jìn)一步驗(yàn)證InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針用于實(shí)際樣品中DNA測定的可行性，我們進(jìn)行了模擬生理離子條件為10 mmol·L-1的實(shí)驗(yàn)，pH=7.4的磷酸緩沖溶液中包含140.0 mmol·L-1Na+、5.0 mmol·L-1K+、2.5 mmol·L-1Ca2+、1.0 mmol·L-1Mg2+和20.0 μmol·L-1Fe2+，與人體血清的離子環(huán)境類似，結(jié)果如表1所示。分析結(jié)果表明測定值與理論值相吻合，回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果較好。因此,可以確定該方法測定DNA具有可行性。

表1 InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針在模擬生理樣品中測定

Tab.1 Analytical results of InP@ZnS QDs/Dured fluorescent nanoprobe under simulated physiological sample

SampleNo.Added/(ng·L-1)Determined/(ng·L-1)Recovery/%RSD/%150.050.5101.02.52200.0198.499.22.1

4 結(jié) 論

基于FRET機(jī)理，通過MPA包覆的InP@ZnS QDs與Dured構(gòu)建了一種檢測DNA的熒光探針。在該探針中，以環(huán)境友好型帶負(fù)電InP@ZnS量子點(diǎn)為熒光團(tuán)，與正電Dured通過靜電結(jié)合，構(gòu)建了InP@ZnS QDs/Dured納米熒光探針，量子點(diǎn)熒光猝滅。當(dāng)DNA存在時，Dured與DNA的特異性結(jié)合，Dured從InP@ZnS QDs表面脫附，F(xiàn)RET過程被打斷，InP@ZnS QDs熒光恢復(fù)，以熒光“關(guān)-開”方式檢測DNA。該方法檢測DNA的線性范圍為2.0～275.0 ng·L-1，檢測限為1.0 ng·L-1，并可用于模擬生理?xiàng)l件下的DNA檢測。

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胡先運(yùn)(1981-)，男，安徽金寨人，博士研究生，副教授，2007年于貴州師范大學(xué)獲得碩士學(xué)位，主要從事納米熒光傳感方面的研究。

E-mail: huxianyun2004@163.com

InP@ZnS QDs/Dured Fluorescent Nanoprobe for The Detection of DNA

HU Xian-yun1,2*, MENG Tie-hong2, ZHANG Ru-guo2, JIANG Jia-zhi2, HUANG Xing-hong2

(1.StateKeyLaboratoryofBioelectronics,SchoolofBiologicalScienceandMedicalEngineering,SoutheastUniversity,Nanjing210096,China;2.QiannanMedicalCollegeforNationalities,Duyun558000,China)

The fluorescent nanoprobe for the detection of DNA was established by utilizing mercaptopropionic acid coated InP@ZnS QDs and Dured. In this nanoprobe. The InP@ZnS QDs/Dured fluorescent nanoprobes were structured by electrostatic interactions between environment friendly, negatively charged InP@ZnS quantum dots and positively charged Dured, and then the fluorescence of InP@ZnS QDs/Dured was quenched through fluorescence resonance energy transfer (FRET). At presence of DNA, DNA and Dured were specific binding, which enable Dured removing from the surface of InP@ZnS QDs and achieving fluorescence recovery of InP@ZnS QDs. Thus, the detection of DNA was realized. The linear range of the InP@ZnS QDs/Dured fluorescent nanoprobes for DNA detection and the detection limit were 2.0-275.0 ng·L-1and 1.0 ng·L-1, respectively. The InP@ZnS QDs/Dured fluorescent nanoprobes can be also used in rapid detection of DNA under simulated physiological conditions.

InP@ZnS quantum dots; fluorescent probe; DNA; FRET

1000-7032(2017)03-0288-08

2016-09-19；

2016-10-15

國家自然科學(xué)基金(21545006)； 貴州省自然科學(xué)基金(2015GZ48861,2016GZ13752)； 中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(KYLX0187)； 黔南民族醫(yī)?？蒲谢?QNYZ201601)資助項(xiàng)目 Supported by National Natural Science Foundation of China(21545006); Natural Science Foundation of Guizhou Province(2015GZ48861,2016GZ13752); Special Fund for Basic Scientific Research of Central University(KYLX0187); National Medical Research Foundation of Qiannan(QNYZ201601)

O482.31

A

10.3788/fgxb20173803.0288

*CorrespondingAuthor,E-mail:huxianyun2004@163.com