麥貞花顆粒提取工藝研究

顧先志+曲長欣

摘 要：本實驗采用正交實驗設(shè)計法，以高效液相色譜法測定從麥貞花顆粒中提出女貞苷的量為考察指標(biāo)，考察提取次數(shù)、加水倍數(shù)、提取時間3個因素。含量測定方法：色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5μm）；流動相以甲醇-水（40：60）；檢測波長為224nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：35℃。女貞苷對照品在50～350μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。女貞苷平均回收率分別為99.3%。女貞苷最佳提取工藝為加入8倍量水，煎煮提取90分鐘，連續(xù)提取3次。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高；測定方法簡便、準(zhǔn)確，

關(guān)鍵詞：麥貞花顆粒；提??；工藝

女貞子為麥貞花顆粒主要成分之一。女貞子，別名女貞實、冬青子、鼠梓子，為木犀科植物女貞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果實。女貞子是一味補腎滋陰、養(yǎng)肝明目的中藥，可治肝腎不足、頭暈耳嗚、頭發(fā)早白及兩目昏糊等病癥。女貞子具有補益肝腎，明目，清虛熱的功效，主要用于頭暈?zāi)垦！㈨毎l(fā)早白、視物昏花、陰虛發(fā)熱等。女貞子含墩果酸、甘露醇、葡萄糖、棕櫚酸、銅、鋅、鐵、錳等。《本草正》記載：“養(yǎng)陰氣，平陰火，解煩熱骨蒸，止虛汗，消渴，及淋濁，崩漏，便血，尿血，陰瘡，痔漏疼痛。亦清肝火，可以明目止淚?！迸懽由杏袕娦?、擴張冠狀血管、保肝、免疫調(diào)節(jié)、抗動脈粥樣硬化、抗炎、抗衰老、擴張外周血管、止咳、抗菌等作用[1-2]。本實驗以女貞苷為指標(biāo)對麥貞花顆粒提取工藝進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

WP-UP-Ⅲ-20精密型實驗室專用超純水機（四川沃特爾水處理設(shè)備有限公司）；FA1204CFAC型全自動內(nèi)校電子分析天平（北京同德創(chuàng)業(yè)科技有限公司）；KQ250DE煎煮波清洗器煎煮波檢測儀器（煙臺鑫康商貿(mào)有限公司）；HH-601超級恒溫水浴（北京富瑞恒創(chuàng)科技有限公司）；PHS-550智能型臺式酸度計（杭州陸恒生物科技有限公司）；EX1600四元低壓梯度液相色譜儀（南京皓而普分析設(shè)備有限公司）；可見分光光度計（掃描型）（石家莊偉天科學(xué)儀器設(shè)備有限公司）。女貞苷對照品（自制）。乙腈（北京亞太龍興化工有限公司）；甲醇（北京亞太龍興化工有限公司）；乙醇（北京亞太龍興化工有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 單因素考察

2.1.1 提取次數(shù)

取麥貞花顆粒藥材，至于圓底燒瓶內(nèi)，分別提取四次，第一次加10倍水，煎煮提取60分鐘，過濾，合并濾液，減壓濃縮；第二次加10倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)提取兩次，過濾，合并濾液，減壓濃縮；第三次加10倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)提取三次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。第四次加10倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)提取四次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中女貞苷含量并計算女貞苷收率。

2.1.2 加水倍數(shù)

取麥貞花顆粒藥材，至于圓底燒瓶內(nèi)，分別提取四次，第一次加14倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)四次，第二次加12倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)四次，第三次加10倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)四次，第四次加8倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)四次，分別過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中女貞苷含量并計算女貞苷收率。

2.1.3 提取時間

取麥貞花顆粒藥材，至于圓底燒瓶內(nèi)，分別提取三次，第一次加10倍水，煎煮提取60分鐘，連續(xù)四次，第二次加10倍水，煎煮提取90分鐘，連續(xù)四次，第三次加10倍水，煎煮提取120分鐘，連續(xù)四次，分別過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中女貞苷含量并計算女貞苷收率。

2.2 正交試驗設(shè)計

實驗結(jié)果表明，提取次數(shù)、加水倍數(shù)和提取時間對女貞苷收率影響較大。選擇提取次數(shù)、加水倍數(shù)和提取時間作為考察因素，采用正交試驗法對影響提取效率的其它工藝條件進(jìn)行優(yōu)選。采用3個考察水平，用L9（34）正交表進(jìn)行試驗，因素水平表見表1。

3 含量測定

3.1 色譜條件：依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[3-5]。色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5μm）；流動相以甲醇-水（40：60）；檢測波長為224nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：35℃。理論板數(shù)按女貞苷峰計算應(yīng)不得低于2000。

3.2 供試品溶液的制備

取提取膏適量，精密量取，至于25毫升容量瓶內(nèi)，用70%乙醇超聲10分鐘，放置室溫，用70%乙醇定容，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

3.3 對照品溶液的制備

分別精密稱取女貞苷對照品5mg，置50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

將濃度為50μg/ml，100μg/ml，150μg/ml，200μg/ml，250μg/ml，300μg/ml，350μg/ml的對照品溶液分別吸取20μL注入HPLC，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗表明，女貞苷對照品在50～350μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的膏子6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.82%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

3.6 回收率試驗

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的女貞苷對照品，測定含量，計算回收率。平均回收率為99.3%，RSD為0.73%。

4 實驗結(jié)果

按照L9（34）正交設(shè)計表條件進(jìn)行試驗，得到最佳提取工藝為加入8倍量水，煎煮提取90分鐘，連續(xù)提取3次。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高。

參考文獻(xiàn)

[1]張明發(fā)，沈雅琴.女貞子抗炎、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2012（05）.

[2]范秦鶴，侯雅玲，朱愛華，呂蘭熏，馮敬群.女貞子不同炮制品升高白細(xì)胞耐缺氧作用及毒性比較[J].西北藥學(xué)雜志，2004（01）.

[3]李澤運，陳曉輝，馬鳳，蘇丹，畢開順.RP-HPLC法同時測定二至丸中紅景天苷、女貞子苷和蟛蜞菊內(nèi)酯的含量[J].藥物分析雜志，2011（01）.

[4]李澤運，陳曉輝，馬鳳，蘇丹，畢開順.RP-HPLC法同時測定二至丸中紅景天苷、女貞子苷和蟛蜞菊內(nèi)酯的含量[J].藥物分析雜志，2011（01）.

[5]黃雯，蘇子仁，畢文川，李軍，施麗瓊，文英強，詹華強.HPLC法測定女貞子藥材中女貞苷的含量[J].藥物分析雜志，2009（05）.