ABO疑難血型鑒定的分析與報(bào)告

楊永懷+++曾媛媛

[摘要]目的 研究ABO疑難血型的鑒定方法及效果，為臨床輸血的安全性和有效性提供重要保障。方法 于2012年1月～2015年12月，在37 264份無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本中選取83份ABO疑難血型的血液標(biāo)本作為研究對(duì)象，對(duì)這83份ABO疑難血型血液標(biāo)本進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，分別采用鹽水試管法、聚凝胺法以及吸收放散試驗(yàn)對(duì)血型正、反定型進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法、鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗(yàn)對(duì)血型正、反定型的符合率，并對(duì)鹽水試管法檢測(cè)ABO疑難血型正、反定型不符合的原因進(jìn)行分析。結(jié)果 83份ABO疑難血型血液標(biāo)本中，鹽水試管法檢測(cè)共37份標(biāo)本血型正、反型符合，符合率為44.58%，鹽水試管法+聚凝胺法的符合率為50.60%，鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗(yàn)的符合率為75.90%，三種檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)的符合率高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法（P<0.05）。鹽水試管法鑒定ABO疑難血型正反型不符合的原因主要為AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規(guī)則抗體陽(yáng)性等。結(jié)論 采用鹽水試管法、聚凝胺法、吸收放散試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)ABO疑難血型進(jìn)行鑒定，能夠準(zhǔn)確鑒定血型正、反型。

[關(guān)鍵詞]ABO疑難血型；鑒定；輸血

[中圖分類號(hào)] R446.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）02（c）-0112-03

Analysis and report of ABO difficult blood group identification

YANG Yong-huai1 ZENG Yuan-yuan2

1.Clinical Laboratory，People′s Hospital of Shanwei City in Guangdong Province，Shanwei 516600，China；2.Blood Center of Shanwei City in Guangdong Province，Shanwei 516600，China

[Abstract]Objective To study the method and effect of identification of suspicious ABO blood group，to provide an important guarantee for the safety and effectiveness of clinical blood transfusion.Methods From January 2012 to December 2015，83 cases of suspicious ABO blood samples in 37 264 blood specimens of blood donors were selected as the research object，the 83 suspicious ABO blood specimens were carried out serological detection，saline tube method，Polybrene method and absorption elution test of blood group positive and negative stereotypes were detected. The coincidence rate of saline tube method，saline tube method+Polybrene method，saline tube method+Polybrene method+absorption elution test of blood group positive and negative stereotypes were calculated，the inconformity reason of saline tube method in detecting suspicious ABO blood group positive and negative stereotypes was analyzed.Results In the 83 cases of suspicious ABO blood samples，a total of 37 specimens of blood samples were consistent of positive and negative， and the coincidence rate was 44.58%，the coincidence rate of saline tube method and Polybrene method was 50.60%，the coincidence rate of saline tube Polybrene method+absorption elution test was 75.90%.The coincidence rate of combined detection of the three methods was higher than that of the single saline test tube method，the saline tube test method and the Polybrene method （P<0.05）.The main inconformity cause of saline tube test identification of ABO blood group were the AB subtype，weak A antigen，weak B antigen，irregular antibody positive.Conclusion The saline tube method，Polybrene method，absorption elution test of combined detection of suspicious ABO blood group identification can accurately identify the positive and negative blood type.

[Key words]ABO difficult blood group；Identification；Blood transfusionABO血型的鑒定較為困難，被稱為ABO疑難血型。據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，ABO血型的鑒定失誤導(dǎo)致輸血無(wú)效的概率>4%，容易造成嚴(yán)重后果。由于ABO血型的準(zhǔn)確鑒定是確保臨床輸血安全及治療有效的重要前提，因此，臨床上應(yīng)對(duì)ABO疑難血型的鑒定方法進(jìn)行積極研究，以保障臨床輸血的安全和有效[1-2]。本研究選取我院ABO疑難血型的血液標(biāo)本進(jìn)行鑒定和分析，分別采取鹽水試管法、聚凝胺法以及吸收放散試驗(yàn)對(duì)血型正、反定型進(jìn)行檢測(cè)，旨在探討ABO疑難血型的鑒定方法及效果，以期能夠?yàn)榕R床輸血的安全性和有效性提供重要保障，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

于2012年1月～2015年12月在我院37 264份無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本中選取83份ABO疑難血型的血液標(biāo)本作為研究對(duì)象，血液標(biāo)本來(lái)源包括男性41例，女性42例；年齡為25～49歲，平均（37.15±10.62）歲；其中血站送檢標(biāo)本65份，醫(yī)院送檢標(biāo)本18份。

1.2方法

試劑分別為抗-A試劑、抗-B試劑、抗-IgG試劑、聚凝胺試劑、C3d試劑，均購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。對(duì)這83份ABO疑難血型血液標(biāo)本進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，分別采用鹽水試管法、聚凝胺法以及吸收放散試驗(yàn)對(duì)血型正、反定型進(jìn)行檢測(cè)，先對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行鹽水試管法檢測(cè)，進(jìn)一步采用聚凝胺法、吸收放散試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，均按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》《中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程》中的規(guī)范流程進(jìn)行操作。

1.3觀察指標(biāo)

計(jì)算鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法、鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗(yàn)對(duì)血型正、反定型的符合率，并對(duì)鹽水試管法檢測(cè)ABO疑難血型正、反定型不符合的原因進(jìn)行分析。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1不同檢測(cè)方法對(duì)ABO血型正、反型檢測(cè)結(jié)果符合情況的比較

83份ABO疑難血型血液標(biāo)本中，鹽水試管法檢測(cè)共37份標(biāo)本血型正、反型符合，符合率為44.58%；鹽水試管法+聚凝胺法共有42例符合，符合率為50.60%；鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗(yàn)共有63例符合，符合率為75.90%。三種檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)的符合率高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2鹽水試管法檢測(cè)ABO血型正、反型不符合的原因分析

對(duì)46例鹽水試管法鑒定血型正、反型不符合的標(biāo)本進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，鹽水試管法鑒定ABO疑難血型正反型不符合的原因主要為AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規(guī)則抗體陽(yáng)性等，分別有9例（19.57%）、7例（15.22%）、6例（13.04%）、7例（15.22%），其余原因還有無(wú)抗-B抗體A型、無(wú)抗體O型、低抗-B效價(jià)、低抗-A效價(jià)、低抗-B效價(jià)O型、B亞型，分別有5例（10.87%）、4例（8.70%）、3例（6.52%）、2例（4.35%）、2例（4.35%）、1例（2.17%）。

3討論

ABO血型是一種血型系統(tǒng)，在輸血過程中，這種血型容易引發(fā)溶血性輸血反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致貧血、腎功能衰竭、休克等嚴(yán)重后果的發(fā)生，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致死亡[3]。在臨床輸血過程中，常能遇到ABO血型正、反型出現(xiàn)不一致的情況，這給ABO血型的鑒定和臨床血液輸注均帶來(lái)嚴(yán)重影響，ABO血型鑒定失誤，容易造成輸血無(wú)效，對(duì)臨床治療較為不利，尤其是部分危急重癥患者，可能會(huì)導(dǎo)致患者發(fā)生失血性休克，進(jìn)而導(dǎo)致患者死亡[4-5]。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，ABO血型的鑒定失誤導(dǎo)致的輸血無(wú)效率約為4%。對(duì)ABO血型進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定是保障臨床輸血安全有效的重要前提，因此，臨床上應(yīng)對(duì)ABO血型的鑒定進(jìn)行深入研究，以尋求有效的鑒定方法，提高ABO血型鑒定的準(zhǔn)確性，進(jìn)而提高臨床輸血的安全性[6-7]。

目前，臨床上鑒定ABO血型主要采取血清學(xué)檢測(cè)方法，主要是通過對(duì)紅細(xì)胞以及血清的正、反定型不一致進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)方法主要有鹽水試管法、聚凝胺法、吸收放散試驗(yàn)。本研究采取這三種檢測(cè)方法進(jìn)行血型鑒定后發(fā)現(xiàn)，83份ABO疑難血型血液標(biāo)本中，鹽水試管法檢測(cè)共37份標(biāo)本血型正、反型符合，符合率為44.58%；鹽水試管法+聚凝胺法的符合率為50.60%，鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗(yàn)的符合率為75.90%，三種檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)的符合率高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法（P<0.05）。三種檢測(cè)方法聯(lián)合鑒定的符合率最高，且高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法聯(lián)合聚凝胺法檢測(cè)，提示在對(duì)ABO血型鑒定時(shí)，應(yīng)采取多種檢測(cè)方法進(jìn)行綜合鑒定，以減少誤差，進(jìn)一步提高ABO血型鑒定的準(zhǔn)確性，以確保臨床輸血的安全性和搶救的有效性[8-9]。

在ABO血型鑒定過程中，由于紅細(xì)胞抗原出現(xiàn)異常，如紅細(xì)胞表面抗原減弱，往往會(huì)導(dǎo)致血型正、反型鑒定出現(xiàn)差錯(cuò)，而血型正、反型鑒定準(zhǔn)確是ABO血型鑒定準(zhǔn)確的重要前提，故有必要對(duì)血型正、反型鑒定出現(xiàn)差錯(cuò)的原因進(jìn)行分析，以采取有效的控制措施，確保血型正、反型鑒定的準(zhǔn)確性。臨床諸多研究顯示，血型正、反型鑒定差錯(cuò)的原因較為復(fù)雜，通過洗滌紅細(xì)胞、延長(zhǎng)反定型反應(yīng)時(shí)間、反定型加做O型混合紅細(xì)胞和不規(guī)則抗體檢測(cè)以及吸收放散試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，血型正、反型差錯(cuò)主要和冷凝集素、紅細(xì)胞表面抗原減弱、血清抗體缺失、紅細(xì)胞致敏等有關(guān)[10-13]。本研究對(duì)46份經(jīng)鹽水試管法檢測(cè)后血型正、反型不符合的標(biāo)本進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，鹽水試管法鑒定ABO疑難血型正反型不符合的原因主要為AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規(guī)則抗體陽(yáng)性等，其占比分別為19.57%、15.22%、13.04%、15.22%，這主要是因?yàn)锳BO正、反定型檢測(cè)時(shí)采用的反定型細(xì)胞以混合細(xì)胞為主，ABO以外抗原成分相對(duì)復(fù)雜，一旦血液標(biāo)本血清中存在不規(guī)則抗體或自身抗體，容易導(dǎo)致反定型細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)，對(duì)血型鑒定結(jié)果造成影響，這提示在ABO血型鑒定過程中，應(yīng)注意對(duì)AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規(guī)則抗體陽(yáng)性等問題予以重視，嚴(yán)格按照規(guī)范流程進(jìn)行操作，對(duì)于存在不規(guī)則抗體的血液標(biāo)本，應(yīng)在對(duì)其不規(guī)則抗體進(jìn)行鑒定的基礎(chǔ)上，選用與不規(guī)則抗體相應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞作為鑒定對(duì)照物；在紅細(xì)胞洗滌時(shí)，應(yīng)采用溫度為37℃的生理鹽水對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行5～6次反復(fù)洗滌，直至洗滌到顯微鏡下未出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集后才可進(jìn)行ABO血型正、反定型檢測(cè)；對(duì)于含自身抗體或AB亞型的血清標(biāo)本，其紅細(xì)胞容易發(fā)生致敏效應(yīng)，該類血液標(biāo)本的鑒定較為困難，因此，在這類血清標(biāo)本的血型正、反型進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，往往會(huì)出現(xiàn)血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果誤差或疑問，此時(shí)，應(yīng)適當(dāng)結(jié)合分子生物學(xué)基因分型技術(shù)進(jìn)行輔助鑒定，以進(jìn)一步減少其檢測(cè)誤差，提高血型正、反型鑒定的準(zhǔn)確性[14-18]。

綜上所述，采用鹽水試管法、聚凝胺法、吸收放散試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)ABO疑難血型進(jìn)行鑒定，能夠準(zhǔn)確鑒定血型正、反型，對(duì)于部分ABO正、反型檢測(cè)較為困難的血液標(biāo)本，可適當(dāng)結(jié)合分子生物學(xué)基因分型技術(shù)進(jìn)行輔助鑒定，以對(duì)ABO疑難血型進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒定，避免ABO疑難血型鑒定結(jié)果受到自身抗體、不規(guī)則抗體等干擾。

[參考文獻(xiàn)]

[1]馬紅麗，贠中橋，楊波，等.ABO疑難血型3步分析法實(shí)踐應(yīng)用[J].臨床血液學(xué)雜志，2011，24（2）：75-77.

[2]Yoneyama T，Hatakeyama S，TobisawaY，et al.Blood group antigen-targeting peptide suppresses anti-blood group antibody binding to antigen in renal glomerular capillaries after ABO-incompatible blood reperfusion[J].Transplantation，2013， 95（3）：418-425.

[3]伍鋼，杜海林.ABO疑難血型鑒定方法的建立與應(yīng)用[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2015，17（1）：68-70.

[4]胡曉玉，吳學(xué)忠，呂蓉，等.83例疑難ABO血型鑒定及分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（18）：2396-2397.

[5]華洪葳，宿軍，楊春晴，等.54例無(wú)償獻(xiàn)血者ABO疑難血型檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)輸血雜志，2015，28（12）：1509-1511.

[6]黃璐，歐小懂，古力，等.ABO疑難血型鑒定情況分析[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2014，18（7）：1190-1191.

[7]臨床輸血規(guī)范流程協(xié)作組.紅細(xì)胞ABO疑難血型檢測(cè)分析與記錄流程[J].中國(guó)輸血雜志，2014，27（2）：127-129.

[8]王峰，趙蒲宇，蘭炯采，等.ABO疑難血型三步分析法的臨床應(yīng)用[J].中國(guó)輸血雜志，2012，25（5）：459-460.

[9]王欣，劉澤林，盧博，等.血液病性貧血患者紅細(xì)胞參數(shù)的分布規(guī)律及其相互關(guān)系[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué)，2015，5（14）：171-173.

[10]Berséus O，Boman K，Nessen SC，et al.Nessen et al.Risks of hemolysis due to anti-A and anti-B caused by the transfusion of blood or blood components containing ABO-incompatible plasma[J].Transfusion，2013，53（Suppl 1）：S114-S123.

[11]蘭炯采，陳靜嫻，馬紅麗，等.推薦ABO疑難血型三步分析法[J].中國(guó)輸血雜志，2010，23（3）：165-168.

[12]陳志忠，廖揚(yáng)勛，陳尚良，等.PCR-SSP基因分型技術(shù)在ABO疑難血型定型中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011， 26（4）：53-55.

[13]鐘青，許業(yè)棟.骨髓形態(tài)檢驗(yàn)在難治性貧血與巨幼細(xì)胞性貧血鑒別診斷中的臨床價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué)，2016， 6（7）：172-174.

[14]蘇明珍，黃勁柏，陸雯靜，等.輕型α地中海貧血與缺鐵性貧血的臨床鑒別[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué)，2015，5（12）：10-12.

[15]夏富益.紅細(xì)胞ABO疑難血型檢測(cè)分析與處理方案[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2015，21（35）：77-78.

[16]范瑾，張玨.ABO血型鑒定中正反定型不一致時(shí)的分析與探討[J].上海醫(yī)藥，2013，34（17）：37-39.

[17]楊松.南充市無(wú)償獻(xiàn)血者ABO定型困難原因分析[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，31（4）：579-581.

[18]汪芳.疑難血型的臨床分析和處理方法[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（23）：3254-3255.

（收稿日期：2016-12-22 本文編輯：祁海文）