長鏈非編碼RNA肝癌高表達(dá)轉(zhuǎn)錄本與原發(fā)性肝癌關(guān)系的研究進(jìn)展

余斌 綜述　丁佑銘，廖曉鋒 審校

（1. 武漢大學(xué)人民醫(yī)院 肝膽腔鏡外科，湖北 武漢 430060；2. 消化系統(tǒng)疾病湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430060；3. 湖北省襄陽市中心醫(yī)院 普通外科，湖北 襄陽 441021）

原發(fā)性肝癌（以下簡(jiǎn)稱肝癌）是世界最常見的惡性腫瘤之一，其主要組織學(xué)亞型為肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC），約占70%～90%[1]。截止2012年，全球肝癌發(fā)病率已躍居男性常見惡性腫瘤發(fā)病率第5位，居女性第9位；其致死率躍居男性腫瘤致死率第2位，居女性第六位[2]?，F(xiàn)階段，肝移植、手術(shù)切除、局部消融是治療早期肝癌的主要手段，但存在著供體缺乏、術(shù)后復(fù)發(fā)率高等諸多問題；此外，由于肝癌早期癥狀并不明顯，患者確診時(shí)多已處于癌癥中-晚期，只能選擇姑息性治療，故其整體預(yù)后不佳[3]。因此，各國學(xué)者不斷圍繞肝癌潛在的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行深入研究，以期探尋更為有效的診斷及治療方法。目前，越來越多的研究證據(jù)表明長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）肝癌高表達(dá)轉(zhuǎn)錄本（highly upregulated in liver cancer，HULC）與肝癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)，并擁有作為早期肝癌診斷標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)的良好應(yīng)用前景。

1　lncRNA HULC生物學(xué)概述

全基因組分析結(jié)果提示人類基因組中僅有不到2%的基因編碼蛋白質(zhì)，約有66%的基因活躍轉(zhuǎn)錄為非編碼RNA。lncRNA被界定為序列長度＞200 nt，缺乏編碼蛋白質(zhì)功能的RNA[4]。隨著對(duì)于lncRNA各項(xiàng)研究的深入，目前學(xué)界普遍認(rèn)同lncRNA具有多種生物學(xué)功能，如轉(zhuǎn)錄與翻譯調(diào)控、表觀遺傳學(xué)調(diào)控、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、剪接調(diào)節(jié)、lncRNA-miRNA或lncRNA-蛋白相互作用等，涉及細(xì)胞增值、分化、凋亡、血管生成等眾多生物學(xué)過程[5-7]；此外，lncRNA的失調(diào)與人類諸多疾病的發(fā)生顯著相關(guān)，如自身免疫性疾病[8]、心血管系統(tǒng)疾病[9]、神經(jīng)系統(tǒng)疾病[10]，尤其表現(xiàn)在腫瘤學(xué)方面[11-12]。

2007年，Panzitt等[13]首次發(fā)現(xiàn)HULC基因在肝癌組織中特異性高表達(dá)，其轉(zhuǎn)錄、加工后可產(chǎn)生一近500nt、含poly-A的長鏈非編碼RNA（lncRNA HULC），主要定位于細(xì)胞質(zhì)核糖體上。HULC基因在靈長類中高度保守，定位于6p24.3，含有1個(gè)內(nèi)含子和2個(gè)外顯子，其中內(nèi)含子長度為1152 bp，2個(gè)外顯子大小分別為182 bp和303 bp，基因上游具有保守的 CpG二核苷酸，可作為甲基化位點(diǎn)參與基因表達(dá)調(diào)控。后續(xù)研究表明，除肝癌外，lncRNA HULC在多種腫瘤組織中同樣存在著高表達(dá)，且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)，如神經(jīng)膠質(zhì)瘤[14]、鼻咽部腫瘤[15]、骨肉瘤[16]等。

2　lncRNA HULC與肝癌癌前疾病

肝癌的主要危險(xiǎn)因素包括：HBV/HCV感染、飲酒、攝入含黃曲霉素食物等。病毒性肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌三者關(guān)系密切[17]。

2.1　lncRNA HULC與病毒性肝炎

慢性HBV感染已被廣泛證明與肝癌的發(fā)生直接相關(guān)[18]。Xie等[19]研究發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞癌患者癌組織中l(wèi)ncRNA HULC的表達(dá)水平與其血清HBV陽性水平呈正相關(guān)，且具有較高HBV陽性水平的肝癌患者其血清lncRNA HULC檢出率更高。

乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitis B virus X protein，HBX）作為一種多功能致癌蛋白，可激活各種病毒性或細(xì)胞性啟動(dòng)子，在肝癌的發(fā)生中起到了重要作用[18,20]。Du等[18]研究證實(shí)了HULC基因涉及HBX介導(dǎo)的肝癌發(fā)生過程，在HBV相關(guān)肝癌的癌組織的中，HBx mRNA水平與lncRNA HULC水平呈正相關(guān)，HBX可調(diào)節(jié)cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cAMP response element binding protein，CREB）依賴性啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性，間接活化HULC啟動(dòng)子以加強(qiáng)HULC基因轉(zhuǎn)錄；而過表達(dá)的lncRNA HULC能夠抑制鄰近抑癌基因p18轉(zhuǎn)錄子活性，在mRNA和蛋白質(zhì)兩個(gè)水平同時(shí)下調(diào)p18的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖。

此外，Liu等[17]重點(diǎn)研究了HULC基因遺傳變異與肝癌易感性的關(guān)系，運(yùn)用病例對(duì)照研究猜想并證實(shí)了HULC基因啟動(dòng)子區(qū)域的rs7763881變異基因型有助于降低乙型肝炎病毒持續(xù)攜帶者發(fā)生肝癌的易感性。從另一角度，這一研究發(fā)現(xiàn)提示了HULC基因中的單個(gè)核苷酸多樣性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）可能使得已患乙型肝炎病毒慢性感染者罹患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)更高。

2.2　lncRNA HULC與肝炎后肝硬化

肝硬化是各種原因所致慢性肝損傷的終末期表現(xiàn)，病理過程漫長，不易發(fā)現(xiàn)。慢性病毒性肝炎導(dǎo)致的肝纖維化和肝硬化是肝癌發(fā)生的最危險(xiǎn)因素。慢性乙型肝炎攜帶者中每年肝硬化發(fā)生率約在2.1%～6.0%[21]。Zhou等[22]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可能是促進(jìn)人肝纖維化形成與進(jìn)展的關(guān)鍵因素。有超過3600種lncRNA在人星狀細(xì)胞中表達(dá)，lncRNA主要受轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）的調(diào)節(jié)，調(diào)控星狀細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)等組分，參與纖維化過程。目前的研究重點(diǎn)聚焦于免疫調(diào)控細(xì)胞，越來越多的研究成果強(qiáng)調(diào)了CD+T細(xì)胞在肝臟炎癥反應(yīng)和纖維化中具有重要作用。Zhao等[21]研究了HULC基因?qū)φ{(diào)控T細(xì)胞分化的影響，其結(jié)果表明lncRNA HULC在HBV相關(guān)肝硬化組織中高水平表達(dá)，其能直接下調(diào)抑癌基因p18的表達(dá)，增加調(diào)節(jié)T細(xì)胞的數(shù)量，提高TGF-β的表達(dá)，促進(jìn)肝纖維化免疫應(yīng)答過程。

由此可見，lncRNA HULC與病毒性肝炎、肝炎后肝硬化的發(fā)展密切相關(guān)，其過表達(dá)可能增加肝炎、肝硬化患者罹患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)。如若加深對(duì)lncRNA HULC與肝癌癌前疾病關(guān)系的認(rèn)識(shí)，明確lncRNA HULC作為診斷標(biāo)記物或治療靶點(diǎn)的價(jià)值，將使得預(yù)防或延緩肝癌的發(fā)生成為可能。

3　lncRNA HULC與肝癌

3.1　lncRNA HULC在肝癌中的表達(dá)水平

Panzitt等[13]研究發(fā)現(xiàn)在76%的肝細(xì)胞癌癌組織標(biāo)本中，lncRNA HULC的表達(dá)水平較正常肝組織平均上調(diào)33倍；而在其他腫瘤組織中，例如前列腺癌、星形細(xì)胞瘤等，均未見lncRNA HULC明顯表達(dá)。這提示lncRNA HULC在肝癌組織中的表達(dá)具有一定的特異性。此外，原位雜交實(shí)驗(yàn)還揭示了lncRNA HULC在肝癌細(xì)胞質(zhì)中特異性高表達(dá)，而在腫瘤間質(zhì)及正常肝細(xì)胞中則未測(cè)及。H?mmerle等[23]選取60例肝細(xì)胞癌癌組織及7例正常肝組織利用微陣列分析發(fā)現(xiàn)HULC基因是肝癌組織中除ERBB2假基因外第二高表達(dá)的非編碼基因；同時(shí)運(yùn)用qRT-PCR 證實(shí)了lncRNA HULC在肝癌組織中過表達(dá)，其水平約為正常組織中的8倍。大量研究[24-25]均一致證實(shí)了lncRNA HULC在肝癌組織中高表達(dá)。

3.2　lncRNA HULC在肝癌中的作用機(jī)制

lncRNA HULC在肝癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，涉及肝癌細(xì)胞的分化、增殖及轉(zhuǎn)移等方面。迄今為止，各國學(xué)者圍繞其作用機(jī)制進(jìn)行了廣泛的研究探討（圖1）。

圖1　lncRNA HULC在肝癌中的上下游調(diào)控機(jī)制Figure 1　Up- and down-stream regulatory mechanisms associated with lncRNA HULC in HCC

3.2.1lncRNA HULC表達(dá)上調(diào)機(jī)制Wang等[24]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA HULC具有miRNA“海綿”作用，可與miR-372相互作用下調(diào)其活性；miR-372的低表達(dá)則阻遏了自身對(duì)靶基因蛋白激酶A催化亞單位β（protein kinase A catalytic subunit β，PRKACB）的抑制，誘導(dǎo)了CREB的磷酸化；而磷酸化的CREB又可與HULC基因啟動(dòng)子內(nèi)CREB結(jié)合位點(diǎn)特異性結(jié)合，維持HULC基因啟動(dòng)子內(nèi)染色體結(jié)構(gòu)的開放狀態(tài)，使得肝癌細(xì)胞HULC基因轉(zhuǎn)錄增加，并形成“正反饋調(diào)節(jié)”。后來，Wan等[26]研究發(fā)現(xiàn)miR-203在肝癌組織中的表達(dá)水平較癌周組織下調(diào)，且與致癌基因HULC的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。上述研究提示了lncRNA HULC可作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA（competitive endogenous RNA，ceRNA）通過抑制miRNA的表達(dá)來促進(jìn)自身水平的上調(diào)。

H?mmerle等[23]研究了RNA結(jié)合蛋白對(duì)lncRNA HULC表達(dá)水平的影響，發(fā)現(xiàn)類胰島素生長因子2 mRNA結(jié)合蛋白家族（IGF2 mRNA-binding proteins，IGF2BPs）是lncRNA HULC的特異性結(jié)合蛋白；IGF2BP1可作為募集CCR4-NOT復(fù)合物的銜接蛋白促進(jìn)HULC貼近CCR4-NOT復(fù)合物，啟動(dòng)lncRNA HULC的降解；而肝癌組織中低表達(dá)的IGF2BP1則增加了lncRNA HULC的半衰期并使其穩(wěn)定地高水平表達(dá)，提示了HULC基因轉(zhuǎn)錄后水平潛在的調(diào)控機(jī)制。

引人關(guān)注的是，Matouk等[27]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA HULC僅在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者中高表達(dá)，而結(jié)直腸癌淋巴轉(zhuǎn)移患者則無，由此提出lncRNA HULC水平的上調(diào)或許與肝臟微環(huán)境有關(guān)。此外，Gandhy等[28]提出lncRNA HULC在肝癌細(xì)胞中的高表達(dá)受轉(zhuǎn)錄因子Sp（specificity protein 1、3、4）的調(diào)控，但其具體機(jī)制尚未闡明。

3.2.2lncRNA HULC與肝癌細(xì)胞的增殖Gui等[29]研究證實(shí)了CUDR-HULC信號(hào)通路在肝癌干細(xì)胞中發(fā)揮著積極的作用，長鏈非編碼RNA CUDR（cancer up-regulated drug resistant）可通過抑制HULC基因啟動(dòng)子甲基化來促進(jìn)胚胎干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化以及肝樣細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，提示了HULC基因涉及肝癌相關(guān)表觀遺傳學(xué)的調(diào)控。

脂質(zhì)代謝紊亂能影響多種細(xì)胞生命活動(dòng)，如增殖、運(yùn)動(dòng)及腫瘤發(fā)生。肝臟作為脂質(zhì)代謝的中心，肝癌的發(fā)生伴隨著脂質(zhì)代謝的紊亂。Cui等[30]重點(diǎn)研究了lncRNA HULC與肝癌細(xì)胞脂質(zhì)代謝異常的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)60例肝細(xì)胞癌癌組織樣本中l(wèi)ncRNA HULC水平與長鏈脂酰CoA合成酶1（Acyl-CoA synthetase long-chain family members 1，ACSL1）及其產(chǎn)物水平呈正相關(guān)；lncRNA HULC能誘導(dǎo)miR-9啟動(dòng)子CpG島甲基化，抑制miR-9的表達(dá)，阻遏miR-9對(duì)過氧化物酶體增殖物激活受體α（peroxisome proliferator-activated receptor alpha，PPARA）的抑制作用；而高表達(dá)的PPARA則促進(jìn)了ACSL1的反式激活，使得肝癌細(xì)胞內(nèi)脂肪生成加強(qiáng)；此外，ACSL1的膽固醇產(chǎn)物（Cholesterol）又可通過激活轉(zhuǎn)錄因子RXRA 上調(diào)lncRNA HULC，由此在肝癌細(xì)胞中形成HULC/miR-9/PPARA/ACSL1/cholesterol/RXRA/HULC正反饋環(huán)路，介導(dǎo)脂質(zhì)代謝的紊亂，促進(jìn)肝癌了發(fā)生與發(fā)展。

在肝細(xì)胞中，近10%的基因受生物鐘的控制而節(jié)律性表達(dá)。生物鐘基因的表達(dá)紊亂涉及肝癌的發(fā)生與發(fā)展。Cui等[31]重點(diǎn)研究了lncRNA HULC與肝癌細(xì)胞生物鐘基因的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞癌癌組織中生物鐘基因CLOCK高表達(dá)，且lncRNA HULC與CLOCK的表達(dá)水平呈正相關(guān)；lncRNA HULC能夠上調(diào)肝癌細(xì)胞中CLOCK基因及其下游晝夜節(jié)律振蕩器per和cry的表達(dá)水平，顯著改變CLOCK基因的表達(dá)模式并延長CLOCK基因的周期表達(dá)；流式細(xì)胞學(xué)分析顯示lncRNA HULC、CLOCK mRNA共同作用時(shí)可使得肝癌細(xì)胞S相比例增加。由此證實(shí)了lncRNA HULC可通過上調(diào)CLOCK的表達(dá)水平擾亂肝細(xì)胞生理節(jié)律（disturbance of circadian rhythm），促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖。

Wu等[32]研究證實(shí)lncRNA HULC與長鏈非編碼RNA肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1（metastasisassociated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）在肝癌細(xì)胞中聯(lián)合過表達(dá)可顯著促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖。深入研究發(fā)現(xiàn)，兩者的過表達(dá)可增強(qiáng)RNA聚合酶-II（RNA pol II）、乙酰基轉(zhuǎn)移酶P 300、癌蛋白CREPT與端粒重復(fù)結(jié)合因子（telomere repeat-binding factor 2，TRF2）的啟動(dòng)子區(qū)域相結(jié)合并觸發(fā)TRF2的過表達(dá)、磷酸化和SUMO化修飾（small ubiquitin-related modifier），而TRF2與lncRNA HULC或lncRNA MALAT1所形成的復(fù)合物又可替代CST/AAF復(fù)合物結(jié)合于端粒區(qū)，募集端粒保護(hù)蛋白（protection of telomeres，POT1）、磷酸化端粒保護(hù)蛋白（pPOT1）、核酸外切酶1（exonuclease 1，Exo 1）、異染色質(zhì)蛋白1-α（heterochromatin protein 1 alpha，HP1α）、核酸外切酶SNM1B，極大地保護(hù)和延長端粒。此外，過量的lncRNA HULC可減少端粒酶RNA（telomerase RNA component，TERC）啟動(dòng)子的甲基化，增加TERC表達(dá)，使得端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)和TERC之間的相互作用加強(qiáng)；最終導(dǎo)致肝癌干細(xì)胞中周期相關(guān)蛋白（cell cycle related proteins）的激活，以及端粒酶活性（telomerase activity）和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）的增加，促進(jìn)了肝癌細(xì)胞的惡性增殖。

此外，Li等[33]還研究發(fā)現(xiàn)lncRNA HULC能通過ERK激酶途徑促進(jìn)YB-1蛋白（Y-box binding protein 1，YB-1）的磷酸化，減弱了YB-1與特定致癌基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA（oncogenic mRNA）的結(jié)合，加速其翻譯過程，由此促進(jìn)了腫瘤的形成。值得注意的是，Xiong等[34]致力于肝癌、lncRNA HULC、去泛素化三者關(guān)系的研究，其最新研究發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞中高表達(dá)的lncRNA HULC能增加去泛素化酶USP22（ubiquitin-specific peptidase 22）的水平，以此減少泛素所介導(dǎo)的環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）蛋白降解，從而促進(jìn)了肝癌細(xì)胞的增殖，提示了“HULC/USP22/COX-2”軸在肝癌中的潛在作用。

3.2.3lncRNA HULC與肝癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移血管再生（angiogenesis）在腫瘤的發(fā)展及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。據(jù)報(bào)道Sphingosine kinase/S1P/S1P receptor 信號(hào)軸涉及腫瘤形成，促進(jìn)細(xì)胞的存活、增殖、分化并刺激血管再生[35]。Lu等[35]重點(diǎn)研究了lncRNA HULC與SPHK1（sphingosine kinase 1）在肝癌血管生成中的作用，發(fā)現(xiàn)SPHK1在肝癌組織中較癌周組織高表達(dá)；肝癌組織及肝癌細(xì)胞系HepG2中l(wèi)ncRNA HULC水平與SPHK1及其產(chǎn)物S1P水平呈正相關(guān)；lncRNA HULC能夠基于堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)揮“海綿樣”作用降低miR-107表達(dá)，阻遏其對(duì)E2F1的抑制；上調(diào)的E2F1與SPHK1啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)E2F1元件相結(jié)合，促進(jìn)SPHK1的轉(zhuǎn)錄；SPHK1/S1P/S1P receptor信號(hào)軸的激活促進(jìn)了肝癌的血管生成，增強(qiáng)了肝癌的侵襲能力。

上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）涉及腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移及耐藥性等，在腫瘤的進(jìn)展中具有重要作用。Zhang等[36]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA HULC的過表達(dá)能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞系MHCC97L和HepG2的增殖，并增強(qiáng)肝癌細(xì)胞的侵襲能力；此外，肝癌細(xì)胞中高表達(dá)的lncRNA HULC能夠上調(diào)EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Snail的表達(dá)水平。Li等[25]深入研究發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞癌癌組織中l(wèi)ncRNA HULC的表達(dá)水平與miR-200a-3p呈負(fù)相關(guān)，而與EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子ZEB1、Snail等呈正相關(guān)；細(xì)胞及動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步提示了lncRNA HULC可作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA阻隔miR-200a-3p對(duì)其靶基因ZEB-1的抑制，通過上調(diào)ZEB-1來介導(dǎo)EMT過程，促進(jìn)肝癌的侵襲與轉(zhuǎn)移。

3.3　lncRNA HULC在肝癌中的診療價(jià)值

現(xiàn)階段，肝細(xì)胞癌的總體療效不佳，基礎(chǔ)研究與臨床實(shí)踐之間的巨大鴻溝是導(dǎo)致療效難以進(jìn)一步提高的瓶頸。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)從肝癌的早期診斷、藥物篩選、干預(yù)新策略的制定、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的早期預(yù)測(cè)等方面為肝癌實(shí)現(xiàn)從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的跨越搭建了重要橋梁[37]。

甲胎蛋白（AFP）是目前臨床上診斷早期肝癌所廣泛使用的血清標(biāo)記物，但因其敏感性（39%～65%）與特異性（76%～94%）欠佳[38]，時(shí)有誤診漏診，各國學(xué)者仍在不斷探尋一種敏感性更高、特異性更強(qiáng)的肝癌血清標(biāo)記物，以期達(dá)到早診斷、早治療，改善預(yù)后的目的。Panzitt 等[13]首次在肝細(xì)胞癌患者血清中測(cè)及l(fā)ncRNA HULC的存在，提示了lncRNA HULC成為原發(fā)性肝癌新型腫瘤標(biāo)記物的可能。Xie等[19]運(yùn)用qRT-PCR分別檢測(cè)20例健康人和30例肝細(xì)胞癌患者血漿中l(wèi)ncRNA HULC的表達(dá)水平，結(jié)果顯示肝癌患者組血漿中l(wèi)ncRNA HULC的檢出率為63%（19/30），明顯高于健康人對(duì)照組的10%（2/20）。此外，lncRNA HULC的檢出率與Edmondson分級(jí)呈正相關(guān)，Edmondson分級(jí)I～I(xiàn)I、II～I(xiàn)II、III～I(xiàn)V的血漿檢出率分別為14%、62%、100%。隨后，Li等[39]也研究證實(shí)肝細(xì)胞癌患者血漿樣本中l(wèi)ncRNA HULC表達(dá)水平顯著上調(diào)，且血漿中l(wèi)ncRNA HULC表達(dá)水平能有效預(yù)測(cè)肝癌的生長和轉(zhuǎn)移，并指出lncRNA HULC聯(lián)合AFP能夠有效提高肝癌診斷正確率。綜上所述，lncRNA HULC有希望成為一種新型的血清腫瘤標(biāo)記物用于原發(fā)性肝癌的診斷或預(yù)后評(píng)估，但現(xiàn)階段缺乏針對(duì)其敏感性、特異性所進(jìn)行的比較性研究（如lncRNA HULC與AFP、lncRNA HULC與GP73等），故lncRNA HULC的血清學(xué)診斷價(jià)值有待進(jìn)一步明確。

此外，研究者還針對(duì)lncRNA HULC在肝癌組織中的表達(dá)水平與患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行了探討。Li等[25]分析38例肝細(xì)胞癌樣本后發(fā)現(xiàn)lncRNA HULC的表達(dá)水平與肝癌患者的臨床分期、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與諸如年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤分化、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；此外，lncRNA HULC相對(duì)高表達(dá)者（中位生存期17個(gè)月）較相對(duì)低表達(dá)者（中位生存期41個(gè)月）有著更差的5年存活率，這些結(jié)論提示了lncRNA HULC的表達(dá)上調(diào)涉及肝癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后。Fan等[40]Meta分析結(jié)果揭示肝癌患者lncRNA HULC的高表達(dá)與較差的無病生存期、腫瘤分級(jí)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等有關(guān)，其可作為肝癌的預(yù)后評(píng)價(jià)指標(biāo)。然而，H?mmerle等[23]卻研究發(fā)現(xiàn)lncRNA HULC在低分期及低分級(jí)的肝癌組織中有著更高的表達(dá)水平，但lncRNA HULC的表達(dá)水平與年齡、性別、腫瘤大小等無關(guān)，指出lncRNA HULC在腫瘤早期進(jìn)展中具有重要作用。值得注意的是，Yang等[41]還研究發(fā)現(xiàn)lncRNA HULC能夠減少肝癌的血管侵襲，是肝癌預(yù)后的積極因素。而且，單變量及多變量Cox回歸分析表明腫瘤組織中l(wèi)ncRNA HULC水平的上調(diào)有助于更好的臨床結(jié)局，包括生存期及無病生存期。不難發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)階段對(duì)于HULC的表達(dá)水平與肝癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系尚不完全明確，目前主要存在著研究樣本量偏小，隨訪時(shí)間不足，患者納入標(biāo)準(zhǔn)不一致（如治療干預(yù)的影響）等問題，期待后續(xù)深入研究予以闡明。

值得關(guān)注的是，Xiong等[42]重點(diǎn)研究了lncRNA HULC與肝癌化療藥物耐藥性（chemoresistance）兩者的關(guān)系，其結(jié)果揭示lncRNA能通過減弱miR-6825-5p、miR-6845-5p和miR-6886-3p 3種mRNA的表達(dá)，增加USP22的表達(dá)水平，加強(qiáng)沉默調(diào)節(jié)蛋白1（silent information regulator 1 protein，Sirt1）去泛素化，引發(fā)肝癌細(xì)胞的自噬現(xiàn)象，由此增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥性（圖1）。此外，該課題組在發(fā)現(xiàn)“HULC/USP22/COX-2”通路促進(jìn)肝細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)上，還進(jìn)一步提出猜想：lncRNA HULC所介導(dǎo)的COX-2增加是否與肝癌化療敏感性相關(guān)[34]？這有待研究者的后續(xù)研究予以證實(shí)。總而言之，該團(tuán)隊(duì)的一系列研究成果及猜想有望為增強(qiáng)肝癌化療敏感性提供新靶點(diǎn)和新思路。

4 結(jié) 語

lncRNA HULC與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，并擁有作為早期肝癌診斷標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)的良好應(yīng)用前景。但目前對(duì)于lncRNA HULC與肝癌關(guān)系的研究尚處于初步階段，HULC在肝癌及其癌前疾?。ㄈ绺窝?、肝硬化等）中的生物學(xué)功能和作用機(jī)制亟待豐富，其作為早期診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)的應(yīng)用價(jià)值也有待更為深入的研究探討?？梢韵嘈?，隨著研究思路的不斷創(chuàng)新以及研究技術(shù)的不斷進(jìn)步，lncRNA HULC與肝癌關(guān)系的研究有望得到突破，并為肝癌的診治提供新策略、開辟新路徑。

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