2013～2016年蘭州市三種奶?？谔阋邷缁钜呙鏏型抗體效價比較

張新蘭，于清磊

（1.蘭州市動物疫病預防控制中心，蘭州 730050；2.甘肅省動物疫病預防控制中心，蘭州 730046）

2013～2016年蘭州市三種奶?？谔阋邷缁钜呙鏏型抗體效價比較

張新蘭1，于清磊2

（1.蘭州市動物疫病預防控制中心，蘭州 730050；2.甘肅省動物疫病預防控制中心，蘭州 730046）

為掌握近年來蘭州市奶牛強制免疫使用的A型口蹄疫滅活疫苗、O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗、O型-A型二價口蹄疫滅活疫苗的免疫效果，科學評價免疫質量和合理制定口蹄疫免疫程序，本研究應用液相阻斷ELISA方法對2013～2016年蘭州市三種奶?？谔阋邷缁钜呙绲腁型抗體效價進行了血清學監(jiān)測與對比分析。結果表明，三種口蹄疫疫苗接種奶牛21d后，均能很好地誘導奶牛機體產生A型抗體，免疫效果差異不顯著。

奶牛；A型口蹄疫；血清學監(jiān)測；免疫效果；比較分析

口蹄疫（foot and mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，FMDV）引起偶蹄動物感染的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，以口腔黏膜、鼻鏡、蹄部和乳房皮膚發(fā)生水皰和潰爛為特征。該病傳播迅速，感染率和發(fā)病率都很高，對公共衛(wèi)生及國際貿易危害嚴重，是世界動物衛(wèi)生組織（0IE）規(guī)定的必須報告的動物傳染病之一，我國將其列為一類動物疫病。目前，預防和控制口蹄疫的主要方法是疫苗免疫接種，我國采取強制免疫措施進行口蹄疫防控。目前廣泛使用的奶?？谔阋咭呙缬袦缁钜呙?、基因工程疫苗、合成肽疫苗等，以滅活疫苗使用最為廣泛。國內有多家獸用生物制品企業(yè)生產口蹄疫滅活疫苗，但產品質量良莠不齊，免疫效果差異較大[1～3]。曹世幀等[4]曾于2012年對蘭州市使用的國內4個疫苗生產企業(yè)的4種O型-亞洲Ⅰ型口蹄疫滅活疫苗進行了免疫效果對比試驗，證實4種口蹄疫滅活疫苗對奶牛機體保護性抗體誘導能力參差不齊。本研究對2013～2016年蘭州市強制免疫使用的三種奶牛口蹄疫滅活疫苗的A型抗體效價進行比較分析，為今后有效防控奶?？谔阋咛峁┛茖W依據。

1 材料與方法

1.1 疫苗

政府招標采購的國內兩個主要口蹄疫疫苗生產企業(yè)生產的A型口蹄疫滅活疫苗（批號：C131210J）、O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗（批號：20140824）、O型-A型二價口蹄疫滅活疫苗（批號：E160310J）；按照規(guī)定保存，按照使用說明進行書免疫接種。

1.2 血清樣品

全市所屬6區(qū)3縣2013～2016年春秋兩季強制免疫21d后，隨機采集免疫奶牛的血清樣品，共計2 923份，其中商品代奶牛場2 691份，奶牛養(yǎng)殖戶232份。

1.3 診斷試劑

口蹄疫A型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒（批號：2013091103、20131028、2014052003、20150422103-4、20150821103-2、20160518103-1），均由中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所生產。

1.4 試驗設計

1.4.1 疫苗接種

按照國家口蹄疫免疫方案及口蹄疫免疫接種技術規(guī)范（NY/T 1955-2010）[5]進行疫苗免疫。

1.4.2 血清學檢測

按照口蹄疫診斷技術（GB/T 18935-2003）[6]進行操作與判定，免疫接種21d后采血，分離血清，進行免疫抗體水平抽樣檢測。液相阻斷ELISA檢測抗體效價≥1∶128為免疫合格。

2 結果與分析

2.1 A型口蹄疫抗體效價檢測

在全市157個奶牛養(yǎng)殖場點隨機抽取2 923份免疫過口蹄疫滅活疫苗的血清樣品，進行A型口蹄疫抗體效價檢測，免疫合格份數為2 533份，平均合格率86.66%。結果見表1。

表1 2013～2016年蘭州市奶牛A型口蹄疫抗體效價檢測結果

在117個商品代奶牛場隨機抽取2 691份免疫血清樣品進行A型口蹄疫抗體效價檢測，免疫合格份數為2 346份，平均合格率87.18%；在40個散養(yǎng)戶隨機抽取232份免疫樣品進行抗體效果檢測，免疫合格份數為187份，平均合格率80.60%。結果見表2。

表2 不同養(yǎng)殖場點奶牛A型口蹄疫免疫抗體檢測結果

A型口蹄疫滅活疫苗在73個場點隨機抽取1 197份免疫血清樣品進行抗體效價檢測，免疫合格份數為1 006份，平均合格率84.04%；O型-A型-亞洲I型口蹄疫三價滅活疫苗在49個場點隨機抽取956份免疫血清樣品進行A型抗體效價檢測，免疫合格份數為869份，平均合格率90.90%；O型-A型口蹄疫二價滅活疫苗在35個場點隨機抽取770份免疫血清樣品進行A型抗體效價檢測，免疫合格份數為658份，平均合格率85.45%。結果見表3。

2.2 結果分析

2.2.1 三種口蹄疫疫苗的A型免疫抗體效價

國內兩個主要口蹄疫疫苗生產企業(yè)生產的三種口蹄疫滅活疫苗的A型口蹄疫免疫抗體效價合格率均達到農業(yè)部≥70%的規(guī)定要求（圖1），說明三種疫苗均能很好地誘導機體產生A型抗體，免疫效果符合國家規(guī)定。

圖1 2013～2016年三種口蹄疫滅活疫苗A型免疫抗體效價合格率

表3 三種口蹄疫滅活疫苗A型抗體效價檢測結果

2.2.2 不同養(yǎng)殖場A型口蹄疫免疫抗體效價檢測結果

從2013～2016年蘭州市奶牛A型口蹄疫免疫抗體效價檢測結果看，規(guī)模奶牛場和散養(yǎng)戶免疫抗體合格率差異不顯著（圖2）。此結果與馬長賓等[7]監(jiān)測結果相符，說明規(guī)模養(yǎng)殖場或散養(yǎng)戶只要按照正確的操作方法和科學的免疫程序操作，使用合格的疫苗產品，并做好疫苗的貯存工作，就能保障良好的免疫效果。

圖2 不同養(yǎng)殖場點A型口蹄疫免疫抗體效價合格率

2.2.3 三種口蹄疫疫苗的免疫合格率比較

理想的口蹄疫疫苗應該是在一次免疫接種后就能刺激機體產生有效、持久的免疫應答。圖1和圖3顯示，三種口蹄疫疫苗免疫合格率均很高，而O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗一免多效，操作省工省時，可縮短防疫周期，大大減輕防疫員的勞動強度。

圖3 A型口蹄疫免疫抗體效價檢測合格率

3 建議

3.1 進一步加快奶?？谔阋叩姆揽嘏c凈化工作

口蹄疫的強制免疫事關我國口蹄疫的防控與凈化工作，也事關公共衛(wèi)生安全，各級政府和獸醫(yī)行政管理部門應高度重視，不斷加大免疫效果監(jiān)測力度，不斷擴大監(jiān)測覆蓋面，通過科學檢測，達到凈化目標。

3.2 進一步加強奶?？谔阋呙庖咝ЧO(jiān)測工作

疫苗免疫效果受多種因素的影響，不僅要針對奶牛場的實際情況制定科學的免疫程序，更要注意牛群中口蹄疫免疫抗體的變化情況，應認真做好免疫抗體監(jiān)測工作，及時補免，確保牛群保持較高的免疫抗體水平。

3.3 進一步加大口蹄疫疫苗質量跟蹤監(jiān)測力度

根據大量的國內文獻資料報道，國內生產的口蹄疫疫苗存在質量參差不齊的現象，國家有關部門應加大疫苗生產企業(yè)產品質量監(jiān)管和實時跟蹤監(jiān)測工作，從源頭上杜絕不合格疫苗流入市場。

3.4 嚴格按照口蹄疫免疫程序進行口蹄疫免疫

賈澤穎等[8]對奶牛A型口蹄疫免疫抗體消長規(guī)律監(jiān)測結果表明，A型口蹄疫在免疫后4個月抗體水平下降到臨界值；郭日東等[9]對奶?？谔阋呙庖叱绦虮O(jiān)測結果表明，口蹄疫最佳的免疫程序是1年免疫3次。犢牛應在首免后1個月進行二免，以后每4個月加強免疫一次，成年母牛首免后，每4個月加強一次。

3.5 在秋末入冬前對奶牛進行一次全面的強制免疫

從三種口蹄疫滅活疫苗A型免疫抗體效價檢測結果看， O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗抗體水平較好，該疫苗抗原含量為6個PD50，是入冬前免疫首選疫苗。冬春季節(jié)特別是1～2月份為口蹄疫高發(fā)季節(jié)，應在入冬前開展一次免疫接種工作。

[1] 裴潔,田峰,金鑫,等.四種豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫效果的比較[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2013,9:14-15.

[2] 黃志堅.兩種豬口蹄疫O型疫苗應用效果對比試驗[J].福建畜牧獸醫(yī),2013,5(5):17-18.

[3] 文崇利,蘭家暖,陳田嬌,等.三種豬O型口蹄疫商品滅活疫苗免疫效果比較[J].廣西畜牧獸醫(yī),2014,30(5):251-254.

[4] 曹世幀,汪占弟,魏素紅,等.奶牛口蹄疫O型-亞洲Ⅰ型二價滅活疫苗免疫效果對比試驗[J]. 中國奶牛,2012,13:44-46.

[5] 農業(yè)部.NY/T 1955-2010口蹄疫免疫接種技術規(guī)范[S].北京:中國標準出版社,2010-09-21.

[6] 農業(yè)部.GB/T 18935-2003口蹄疫診斷技術[S].北京:中國標準出版社,2003-01-10.

[7] 馬長賓,劉向鵬,陳文武,等.不同養(yǎng)殖模式下牛群口蹄疫免疫抗體監(jiān)測情況分析[J].中國草食動物科學,2015,35(4):57-58.

[8] 賈澤穎,劉鄧,郭又春,等.奶牛O型、亞洲Ⅰ型、A型口蹄疫免疫抗體變化規(guī)律觀察[J]. 中國奶牛,2013,4:36-38.

[9] 郭日東,宋麗華,韓吉雨,等.奶?？谔阋呙庖叱绦虻难芯縖J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘,2014,30(5):100-102.

S858.23

A

1004-4264（2017）03-0030-03

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.03.009

2016-09-12

張新蘭（1962-），女，高級獸醫(yī)師，主要從事動物疫病防控技術的研究和動物疫病實驗室檢測工作推廣應用。

于清磊。