急性腦梗死患者蛋白C活性依賴凝固時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化比值降低

伍柏青，傅穎媛

(1.南昌大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室，南昌 330006；2.江西省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，南昌 330006)

·臨床實(shí)驗(yàn)研究·

急性腦梗死患者蛋白C活性依賴凝固時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化比值降低

伍柏青1,2，傅穎媛1

(1.南昌大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室，南昌 330006；2.江西省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，南昌 330006)

目的 觀察急性腦梗死患者蛋白C活性依賴凝固時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化比值(PCAT-NR)與相關(guān)凝血指標(biāo)纖維蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦ:C)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)、抗凝血酶(AT)、D二聚體(DD)的相關(guān)性。方法 經(jīng)臨床及影像學(xué)確診急性腦梗死患者100例為病例組，選取75例體檢健康者為健康人對(duì)照組，檢測(cè)Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、AT、PCAT-NR、DD并比較兩組間差異；分析急性腦梗死患者PCAT-NR下降組與PCAT-NR正常組Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、DD、AT結(jié)果差異；分析急性腦梗死患者PCAT-NR與其他凝血指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果 急性腦梗死組Fib(3.38±1.25)g/L、FⅦ:C(130.5±15.9)%、FⅧ:C(135.8±43.1)%、DD(2.12±3.01)mg/L均高于健康人對(duì)照組，而AT(83.94±14.95)%、PCAT-NR(0.87±0.23)結(jié)果均低于健康人對(duì)照組,P均<0.05；急性腦梗死組患者PCAT-NR下降組Fib(4.03±1.25)g/L、FⅦ:C(138.2±6.9)%和FⅧ:C(151.5±54.9)%結(jié)果均高于正常組(P均<0.05)，而DD、AT差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；急性腦梗死患者PCAT-NR與Fib、FⅧ:C、DD呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.484、-0.356、-0.473，P均<0.05)，與FⅦ:C、AT無(wú)相關(guān)性(P均>0.05)。結(jié)論 急性腦梗死患者PCAT-NR水平下降與高凝狀態(tài)有關(guān)，與Fib和凝血因子Ⅷ活性有一定關(guān)聯(lián)。

急性腦梗死；蛋白C活性依賴凝固時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化比值；凝血因子Ⅷ；抗凝血酶；D二聚體

急性腦梗死發(fā)病原因主要是血栓形成栓塞導(dǎo)致缺血，影像學(xué)檢查是血栓形成的可靠依據(jù)。急性腦梗死發(fā)病涉及多項(xiàng)凝血指標(biāo)異常，如凝血因子活性升高、抗凝指標(biāo)下降及纖溶指標(biāo)升高等?？鼓到y(tǒng)指標(biāo)主要包括抗凝血酶(AT)、蛋白C(PC)和蛋白S(PS)。ProC Global試驗(yàn)是通過測(cè)定血漿蛋白C系統(tǒng)的抗凝能力，診斷獲得性或遺傳性蛋白C系統(tǒng)缺陷的凝固實(shí)驗(yàn)，其參數(shù)為蛋白C活性依賴凝固時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化比值(protein C activity-dependent clotting time normalized ratio，PCAT-NR)。本研究觀察纖維蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦ:C)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)等促凝指標(biāo)，抗凝血酶(AT)、PCAT-NR等抗凝指標(biāo)，D二聚體(DD)等纖溶指標(biāo)在急性腦梗死患者中的變化，探討PCAT-NR與Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、AT、DD的相關(guān)性，及其在臨床應(yīng)用中的意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 2013年12月至2014年11月江西省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的診斷明確、資料完整的急性腦梗死患者100例，男69例，女31例，年齡40～89歲，平均65歲；其中，高血壓75例；2型糖尿病31例，糖耐量受損1例；高血脂13例；動(dòng)脈粥樣硬化者15例(15.0%)；心房顫動(dòng)10例(10.0%)。急性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)[1];排除腦外傷、中毒、癲癇、瘤卒中、出血性腦卒中、高血壓腦病、血糖異常、腦炎及軀體重要臟器功能檢查障礙等引起的腦部病變。健康人對(duì)照組75例，男50例，女25例，年齡范圍35～78歲，平均58歲，體檢均合格。研究對(duì)象年齡、性別差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 試劑與儀器 標(biāo)準(zhǔn)人類血漿、乏Ⅶ因子血漿、乏Ⅷ因子血漿、氯化鈣溶液及APTT、Fib、DD、AT、Proc Global等試劑購(gòu)自德國(guó)西門子公司，CS-5100全自動(dòng)血凝分析儀(日本Sysmex公司)。

1.3 標(biāo)本采集與處理 采集研究對(duì)象靜脈血，枸櫞酸鈉抗凝，2 000×g離心10 min，分離血漿，若凝固、溶血、脂血或標(biāo)本量不符均重新采血。

1.4 標(biāo)本檢測(cè) 質(zhì)控合格后檢測(cè)樣本。Fib、DD、AT等在血漿分離后立即檢測(cè)；而ProC Global、FⅦ:C、FⅧ:C等在標(biāo)本(-80 ℃保存)收集完成后同時(shí)檢測(cè)。

1.5 PCAT-NR檢測(cè) 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)人血漿PCAT和緩沖液PCAT-0，PCAT與PCAT-0的商乘以試劑標(biāo)注的敏感系數(shù)(sensitivifv value，SV)，得到校準(zhǔn)因數(shù)(calibration factor，CF)，即CF=SV×(PCAT/PCAT-0)。測(cè)定患者血漿PCAT和緩沖液PCAT-0，PCAT與PCAT-0的商再乘以CF，得到標(biāo)準(zhǔn)化比值(normalized ratio，NR)，公式為PCAT-NR=(PCAT/PCAT-0)×CF。

2 結(jié)果

2.1 急性腦梗死組與健康人對(duì)照組患者凝血指標(biāo)結(jié)果 見表1。急性腦梗死組患者血漿Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、DD均高于健康人對(duì)照組(P均<0.05)，血漿AT和PCAT-NR均低于正常組(P均<0.05)。

表1 急性腦梗死患者與健康人對(duì)照組凝血指標(biāo)結(jié)果

注：*，P<0.05。

2.2 PCAT-NR下降與PCAT-NR正?；颊吣笜?biāo)結(jié)果 根據(jù)PCAT-NR參考值0.69～1.56為標(biāo)準(zhǔn)，將急性腦梗死患者分為PCAT-NR正常組和PCAT-NR下降組，PCAT-NR下降組患者Fib、FⅦ:C和FⅧ:C血漿水平均高于正常組(P<0.05)；而DD、AT結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 急性腦梗死患者PCAT-NR下降和正常組凝血指標(biāo)結(jié)果

注：*，P<0.05。

2.3 PCAT-NR與Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、DD、AT相關(guān)性 急性腦梗死組患者Fib、FⅧ:C和DD與PCAT-NR呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.484、-0.356、-0.473，P均<0.05)；而FⅦ:C、AT與PCAT-NR無(wú)相關(guān)性(r分別為-0.108、0.133，P均>0.05)。

3 討論

腦血管疾病中與血栓形成栓塞相關(guān)的主要有短暫性缺血發(fā)作、腦梗死與顱內(nèi)靜脈及靜脈竇血栓形成3類，其中以腦梗死所占比例最高；其危險(xiǎn)因素包括遺傳性的凝血因子、抗凝因子、纖溶因子及血小板的問題，也有獲得性因素，如高血壓、電解質(zhì)紊亂、血脂、吸煙與酗酒及糖尿病等[2]。

急性腦梗死患者Fib、FⅦ:C、FⅧ:C均高于健康人對(duì)照組，說明凝血因子的高活性與其發(fā)病緊密關(guān)聯(lián)。DD是血栓形成標(biāo)志物，其升高提示繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，血栓形成；急性腦梗死患者腦血管內(nèi)形成血栓，DD高于健康人對(duì)照組。AT是血漿中主要生理性抗凝物質(zhì)，腦梗死患者發(fā)病時(shí)機(jī)體處于高凝狀態(tài)，凝血功能亢進(jìn)，消耗大量AT。急性腦梗死組患者AT結(jié)果低于健康人對(duì)照組，說明其致病因素和AT下降有關(guān)。

血液高凝狀態(tài)是導(dǎo)致腦梗死的主要風(fēng)險(xiǎn)因素之一?；罨鞍證滅活凝血因子Ⅴa和Ⅷa，阻礙凝血因子Ⅹa與血小板結(jié)合，促進(jìn)纖維蛋白的溶解。當(dāng)?shù)鞍證系統(tǒng)存在缺陷時(shí)，其對(duì)凝血系統(tǒng)的抑制將減弱，導(dǎo)致血液呈高凝狀態(tài)。ProC Global試驗(yàn)反映促凝和抗凝因子之間的相互作用，可作為一項(xiàng)獨(dú)立的血栓形成傾向的危險(xiǎn)因素，對(duì)凝血因子ⅤLeiden抵抗及蛋白C和蛋白S缺陷、促凝血因子水平升高敏感[3-4]，可篩選這類抗凝系統(tǒng)缺陷的血栓疾病。對(duì)于PC活性低于正常值70%的檢出率為90%，PS活性低于正常值60%的檢出率為89%，凝血因子Ⅴ Leiden突變的檢出率為100%，對(duì)檢查凝血因子Ⅱ20210 G→A突變的敏感性為84%[5-7]。急性腦梗死患者PCAT-NR為0.87±0.23，低于健康人對(duì)照組的1.09±0.15，說明急性腦梗死患者存在PC系統(tǒng)的抗凝缺陷，反映血栓易形成傾向。急性腦梗死患者PCAT-NR下降組Fib、FⅦ:C和FⅧ:C結(jié)果均高于PCAT-NR正常組，說明PCAT-NR下降與凝血因子水平升高相關(guān)。急性腦梗死患者 PCAT-NR與Fib、FⅧ:C、DD呈負(fù)相關(guān)，而與FⅦ:C、AT無(wú)相關(guān)性，說明ProC Global試驗(yàn)和AT雖然均是抗凝系統(tǒng)試驗(yàn)，但前者反映血漿蛋白C系統(tǒng)的整體抗凝能力，與AT是否正常無(wú)相關(guān)性。綜上所述，PCAT-NR是重要的抗凝系統(tǒng)缺陷診斷指標(biāo)，ProC Global試驗(yàn)是易栓癥的重要篩選試驗(yàn)，PCAT-NR水平下降與急性腦梗死患者高凝狀態(tài)有關(guān)，與Fib、凝血因子Ⅷ高水平有一定關(guān)聯(lián)。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管病學(xué)組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組．中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2010[J]．中華神經(jīng)科雜志，2010，43(2)：146-153．

[2]王振義，李家增，阮長(zhǎng)耿，等.血栓與止血基礎(chǔ)理論與臨床[M].上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2004：82-94.

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[5]Chatterjee T，Gupta N，Choudhry VP，etal. Prediction of ischemic stroke in young Indians: is thrombophilia profiling a way out? [J]Blood Coagul Fibrinolysis, 2013, 24(4): 449-453.

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(本文編輯：王海燕)

Decreased protein C activity-dependent clotting time normalized ratio in patients with acute cerebral infarction

WUBai-qing1,2,FUYing-yuan1

(1.TeachingandResearchSectionofImmunology,CollegeofBasicMedicine,NanchangUniversity,Nanchang330006,Jiangxi; 2.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofJiangxiProvince,Nanchang330006,Jiangxi,China)

Objective To observe the correlation between protein C activity-dependent clotting time-normalized ratio (PCAT-NR) and the related blood coagulation parameters, e.g., fibrinogen (Fib), factor Ⅶ coagulant activity (Ⅶ: C), factor Ⅷcoagulant activity (FⅧ: C), antithrombin (AT), D-dimer (DD) in patients with acute cerebral infarction. Methods One hundred cases of patients who were diagnosed as acute cerebral infarction according to clinical manifestations and imaging examinations were taken as the test group and 75 healthy subjects were taken as control group. The values of Fib, FⅦ: C, FⅧ: C, AT, PCAT-NR, DD were tested and the difference between the two groups were compared. The differences of Fib, FⅦ:C, FⅧ:C, DD and AT between declined PCAT-NR group and normal PCAT-NR group in the patients with acute cerebral infarction were analyzed. The correlations of PCAT-NR with other coagulation parameters in acute cerebral infarction cases were compared. Results The values of Fib (3.38±1.25) g/L, FⅦ: C (130.5±15.9)%, FⅧ: C (135.8±43.1)% and DD (2.12±3.01) mg/L in the acute cerebral infarction group were significantly higher than those of control group, while the values of AT (83.94±14.95)% and PCAT-NR (0.87±0.23) in test group were significantly lower than those the control group (P<0.05). The values of Fib (4.03±1.25)g/L, FⅦ: C (138.2±6.9)% and FⅧ: C (151.5±54.9)% of PCAT-NR declined group in the patients with acute cerebral infarction were significantly higher than those of PCAT-NR normal group (P<0.05), while the values of DD, AT were not statistically different between two groups (P>0.05). The values of PCAT-NR were significantly negatively correlated with Fib, FⅧ: C and DD in the patients with acute cerebral infarction (r=-0.484, -0.356 and -0.473, respectively (allP<0.05). There was no correlation of PCAT-NR with FⅦ: C and AT (P>0.05). Conclusion The PCAT-NR decline was associated with high coagulation state in patients with acute cerebral infarction. This decline has some correlation with high level of blood clotting factor Ⅷ and Fib.

acute cerebral infarction; protein C activity-dependent clotting time normalized ratio; clotting factor Ⅷ; antithrombin; D-dimer

10.13602/j.cnki.jcls.2017.02.11

伍柏青，1975年生，男，副主任技師，碩士，主要從事血液學(xué)檢驗(yàn)工作，E-mail:13507916536@163.com。

R446.11;R651.1

A

2016-12-21)