茵陳提取物中化學(xué)成分的UHPLC—LTQ—Orbitrap快速鑒定

歐陽文竹+尚展鵬+王文建+王守旭+沈家序+錢浩+馬志國+張加余

[摘要]應(yīng)用UHPLC-HR-MSn技術(shù)分析檢測茵陳提取物中的化學(xué)成分。采用ACQUITY UPLC HSS T3 （2.1 mm×100 mm，1.7 μm）色譜柱和0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）流動相系統(tǒng)進行梯度洗脫；應(yīng)用LTQ-Orbitrap質(zhì)譜負離子模式檢測茵陳提取物中的化學(xué)成分。根據(jù)精確分子量數(shù)據(jù)和多級質(zhì)譜碎片離子，結(jié)合對照品比對和文獻報道，共從茵陳提取物中分析鑒定了50個化學(xué)成分，包括21個黃酮、22個有機酸、6個香豆素和1個其他類成分。應(yīng)用UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)較為全面地闡明了茵陳提取物中的化學(xué)成分，為進一步研究茵陳提取物的全面質(zhì)量控制方法、體內(nèi)代謝過程以及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供了科學(xué)依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]茵陳提取物； 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)； 化學(xué)成分鑒定

[Abstract]A rapid and sensitive UHPLC-HR-MSN method was developed for the identification of chemical constituents in capillary wormwood extract. ACQUITY UHPLC HSS T3 chromatography column （2.1 mm×100 mm， 1.7 μm） was used with 0.1% formic acid-acetonitrile solution as the mobile phase in gradient elution. The extract was detected by ESI-LTQ-Orbitrap equipped with an ESI ion source in a negative mode. Based on the accurate mass measurements， retention time， mass fragmentation patterns and literature reports， a total of 50 compounds including 21 flavonoids， 22 phenolic acids， 6 coumarins and 1 other compound were tentatively screened and characterized. These results are helpful for the comprehensive quality control， better comprehension of the metabolism and further study of pharmacodynamic substance from capillary wormwood extract.

[Key words]capillary wormwood extract； UHPLC-LTQ-Orbitrap MS； chemical constituent identification

茵陳為菊科植物濱蒿Artemisia scoparia Waldst.et Kit.或茵陳蒿A. capillaries Thunb.的干燥地上部分。我國大部分地區(qū)均有分布，主產(chǎn)于安徽、浙江、江蘇、陜西等省。春季和秋季采收茵陳的分別習(xí)稱“綿茵陳”和“花茵陳”^[1]。茵陳味苦、辛，性微寒，歸脾、胃、肝膽經(jīng)，具有清熱利濕、利膽退黃之功效，是一種具有保肝功效的特色中藥，常與其他中藥配伍用于治療甲、乙型和黃疸型肝炎。現(xiàn)代研究表明，茵陳中的主要化學(xué)成分包括黃酮、有機酸、香豆素、色原酮以及揮發(fā)油等。茵陳提取物則是綿茵陳經(jīng)提取制成的，其質(zhì)量標(biāo)準被收載于《中國藥典》2015年版一部^[2]。目前，現(xiàn)行標(biāo)準中僅對綠原酸等成分進行質(zhì)量控制，其他成分尚不明確。這無疑不利于茵陳提取物的全面質(zhì)量控制和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。因此，亟需建立一種快速、簡便的分析方法來全面闡明茵陳提取物中的化學(xué)成分。

LC-MS技術(shù)具有靈敏度高、選擇性強且碎片離子重現(xiàn)性好等諸多優(yōu)點，已廣泛用于中藥化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定^[3-5]。其中，線性離子阱與Orbitrap傅里葉掃描質(zhì)譜組成的串聯(lián)質(zhì)譜儀（LTQ-Orbitrap hybrid mass spectrometry）將線性離子阱的多級質(zhì)譜功能和Orbitrap高分辨能力質(zhì)譜結(jié)合起來，可同時實現(xiàn)多級質(zhì)譜碎裂和母離子的高分辨數(shù)據(jù)采集，為小分子藥物及大分子蛋白質(zhì)的鑒定提供更準確信息^[6-8]。本文基于UHPLC-LTQ-Orbitrap建立茵陳提取物中化學(xué)成分的分析方法，并結(jié)合精確分子質(zhì)量數(shù)據(jù)、碎片離子和對照品比對等手段進行結(jié)構(gòu)鑒定，以期為闡明其物質(zhì)基礎(chǔ)進而建立全面的質(zhì)量控制方法提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

Ultimate 3000超高效液相色譜儀與LTQ-Orbitrap XL 質(zhì)譜，配有電噴霧離子源（ESI），Xcalibur 2.1 工作站（美國Thermo Scientific公司）；Millipore Synergy UV 型超純水機（美國Millipore 公司）；KQ-250DE 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；R200D 型電子分析天平（1/10萬，德國Sartorius 公司）。

菌除法藥材產(chǎn)地為廣東梅州，經(jīng)暨南大學(xué)藥學(xué)院張英副教授鑒定為菊科植物茵陳蒿A.capillaris的干燥地上部分。

5-咖啡?？鼘幩幔ㄅ?10753-200413）購自中國食品藥品檢定研究院；3-咖啡?？鼘幩?、4-咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩?、4，5-二咖啡酰奎寧酸等對照品購自成都曼思特生物科技有限公司。所有對照品純度均大于98%。乙腈和甲醇（質(zhì)譜級，德國Merck公司），甲酸（色譜級，德國Merck公司），其他均為分析純。

2 方法

2.1 茵陳提取物的制備

取綿茵陳，用90%乙醇作為溶劑，浸漬24 h后進行滲漉，收集滲漉液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.10～1.15 （60～65 ℃）的清膏，加6倍量水，冷藏，靜置，濾過，濾液120 ℃加熱1 h，冷藏，靜置，加入0.2%活性炭，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.15～1.20 （60～65 ℃）的清膏，80 ℃真空干燥，即得。

2.2 混合對照品溶液的制備

分別取上述6種對照品適量，精密稱定，加甲醇制成濃度約為100 mg·L^-1的儲備液；分別精密吸取各儲備液適量，加甲醇定容于5 mL量瓶中，即得。

2.3 供試品溶液的制備

稱取茵陳提取物0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇溶液25 mL，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，混勻，靜置，取上清液，以0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 色譜條件

色譜柱ACQUITY UHPLC HSS T3 （2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流動相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）；梯度洗脫0～4 min，3%～19% B，4～10 min，19%～20% B，10～13 min，20%～21% B，13～17 min，21%～40% B，17～20 min，40%～90% B；柱溫35 ℃，流速為0.40 mL·min^-1；檢測波長327 nm；進樣量5 μL。

2.5 質(zhì)譜條件

負離子檢測模式，毛細管溫度350 ℃，鞘氣流速30 arp，輔助氣流速10 arp，噴霧電壓3 kV，毛細管電壓-35 V，管透鏡電壓-110 V。樣品采用FT進行FS掃描和PIL掃描，分辨率為3萬，掃描范圍m/z 100～800，隔離寬度2；二級和三級質(zhì)譜采用數(shù)據(jù)依賴性掃描，選取上一級豐度最高的2個峰進行碰撞誘導(dǎo)解離碎片離子掃描，激活單位0.25 q，激活時間30 ms，歸一化碰撞能量為35%。

3 結(jié)果

應(yīng)用 HPLC-DAD-LTQ-Orbitrap MSN法，結(jié)合多級質(zhì)譜碎片離子信息、對照品比對以及相關(guān)文獻報道，對茵陳提取物中的4大類50個化合物進行了分析鑒定，其中包括黃酮21個、有機酸22個、香豆素6個以及其他類1個?；旌蠈φ掌泛鸵痍愄崛∥锏?HPLC-DAD 色圖譜與總離子流圖（TIC）見圖1，各類成分的歸屬信息見表1。

3.1 黃酮類化合物的鑒定

本實驗從茵陳提取物中篩選鑒定了21個黃酮類化合物，其中包括黃酮醇11個，黃酮4個，二氫黃酮3個，二氫黃酮醇、查爾酮以及黃烷酮各1個。

3.1.1 黃酮醇類化合物 主要包括9個黃酮醇糖苷和2個黃酮苷元?；衔?8和45的準分子離子峰分別為m/z 301.033 7 [M-H]-和m/z 299.054 9 [M-H]-，由此推斷它們的分子式為C₁₅H₁₀O7 （誤差-1.99）和C₁₆H12O6 （誤差-0.33）。在化合物48的ESI-MSN譜中，m/z 301首先丟失1分子H₂O產(chǎn)生m/z 283，再失去1分子CO產(chǎn)生m/z 255，同時還產(chǎn)生RDA碎片離子1，3A-m/z 151。經(jīng)相關(guān)文獻對比后將其鑒定為槲皮素^[9-10]。而化合物45的m/z 299[M-H]-在多級質(zhì)譜裂解中產(chǎn)生RDA碎片離子m/z 193 （C9H₅O₅-）。結(jié)合文獻中的茵陳化學(xué)成分相關(guān)報道，將其鑒定為鼠李檸檬素^[11-12]。

化合物22，30和31的準分子離子峰均為m/z 463.08 [M-H]-，且在ESI-MS²譜均出現(xiàn)m/z 301，說明它們可能是以槲皮素或異槲皮素為苷元的黃酮醇糖苷。而中性丟失的糖基團相對分子質(zhì)量為162表明三者可能是葡糖糖苷或半乳糖苷。同時，三者均產(chǎn)生m/z 179 和m/z 151 的特征RDA碎片離子。結(jié)合在茵陳中已報道的化學(xué)成分，將它們依次推斷為槲皮素-7-O-葡萄糖苷、金絲桃苷和槲皮苷^[13]。

化合物32和39的準分子離子峰均為m/z 447.09 [M-H]-，說明二者為同分異構(gòu)體。然而，二者的多級質(zhì)譜圖存在較大差異，說明它們的母核并不相同?；衔?2產(chǎn)生苷元碎片離子m/z 301，

4.3-咖啡?？鼘幩幔?.5-咖啡?？鼘幩?；9.4-咖啡酰奎寧酸；16.1，3-二咖啡?？鼘幩?；34.1，5-二咖啡酰奎寧酸；43.4，5-二咖啡?？鼘幩?；A. 6個對照品溶液UHPLC圖譜；B. 茵陳提取物UHPLC圖譜； C. 6個對照品溶液TIC圖； D.茵陳提取物TIC圖。

可將其鑒定為槲皮素-3-O-鼠李糖苷^[13]?；衔?9的[M-H]-離子m/z 447.09則中性丟失相對分子質(zhì)量為162后生成m/z 285，并進一步中性丟失1分子CO產(chǎn)生m/z 257，由此將其鑒定為山柰酚-3-O-葡萄糖苷^[14]。

化合物36的準分子離子峰為m/z 623.160 0，由此推斷其分子式為C28H32O₁₆，誤差為1.1。其二級離子碎片離子m/z 315表明其苷元可能為異鼠李素，而中性丟失的碎片離子質(zhì)量數(shù)m/z 308則表明為其可能是刺槐糖苷。在進一步的質(zhì)譜裂解過程中，m/z 315丟失1分子CH₃·后產(chǎn)生m/z 300，然后繼續(xù)失1分子HCO·和CO分別產(chǎn)生m/z 271和m/z 243，進一步驗證了上述推斷。由此，將化合物36鑒定為異鼠李亭-3-O-刺槐苷。經(jīng)分析，化合物33和42與化合物36具有相同的母核，只是糖取代種類不同。結(jié)合文獻報道，將化合物33和42分別鑒定為異鼠李素-3-O-半乳糖苷和異鼠李素-3-O-葡萄糖苷^{[9，15]}。

化合物17的準分子離子峰為m/z 609.142 9 [M-H]-，由此推斷其分子式為C₂₇H29O16 （誤差-3.45）。在多級質(zhì)譜裂解過程中，m/z 609 中性丟失其糖基團后得到碎片離子m/z 301（典型的黃酮醇苷元）。而m/z 301在ESI-MS3譜中則產(chǎn)生m/z 179 和m/z 151，這與槲皮素的裂解方式基本一致。因此將其鑒定為蘆丁。

3.1.2 黃酮類化合物 主要包括9個黃酮醇糖苷和2個黃酮苷元?；衔?3的準分子離子峰為461.071 4 [M-H]-，可推斷其分子式為C₂₇H29O₁₆ （誤差-0.22）。在其ESI-MS²譜中，苷元離子m/z 285表明其可能為木犀草素的葡萄糖苷；而其他碎片離子m/z 443 [M-H-H₂O]-和m/z 415 [M-H-H₂O-CO]-，進一步表明該化合物為木犀草素-7-O-葡糖糖苷^[16]。

化合物40的準分子離子峰為269.043 8 [M-H]-，最有可能的分子式為C₁₅H9O5 （誤差-2.23）。結(jié)合文獻報道以及分子式推測其可能是芹菜素^[17]。而m/z 269通過中性丟失H₂O+CO后產(chǎn)生m/z 223以及RDA 碎片離子m/z 121（C7H₃O4-）則進一步驗證了上述推斷。

化合物5的準分子離子峰為m/z 313.070 5 [M-H]-，可知其分子式為C₁₇H14O₁₆ （誤差-0.22）。在進一步的質(zhì)譜裂解過程中，m/z 313分別產(chǎn)生m/z 298 [M-H-CH₃·]-，283 [M-H-2CH₃·]-，255 [M-H-2CH₃·-CO]-。結(jié)合文獻報道，將其鑒定為薊黃素^[18]。同理，可將化合物49鑒定為芫花素^[1]。

3.1.3 其他黃酮類化合物 主要包括二氫黃酮3個（化合物25，35，41）、二氫黃酮醇（化合物38）、查爾酮（化合物14）以及黃烷酮（化合物50）各1個。化合物35和41的準分子離子峰均為m/z 271.06[M-H]-（C₁₅H11O₅，誤差<2）。在ESI-MS²譜中，二者均產(chǎn)生二氫黃酮類化合物典型的RDA碎片離子m/z 151（C7H₃O4-），由此可將兩者分別鑒定為柚皮素或其同分異構(gòu)體?；衔?5的準分子離子峰為m/z 285.074 9 [M-H]-，可知其分子式為C₁₆H13O5 （誤差-3.16）。在進一步的質(zhì)譜裂解過程中，其主要通過發(fā)生RDA裂解產(chǎn)生m/z 165和m/z 121等碎片離子。根據(jù)相關(guān)文獻[9]，將其鑒定為8-去甲基杜鵑素。

化合物38的準分子離子峰為m/z 301.070 9 [M-H]-，可知其分子式為C₁₆H13O6 （誤差0.66）。其主要ESI-MSN碎片離子m/z 165 （C8H₅O4-）是m/z 301丟失B環(huán)部分后產(chǎn)生的，同時還繼續(xù)脫去1分子CO₂產(chǎn)生m/z 135。結(jié)合相關(guān)文獻報道^[9]，將其鑒定為7-甲基香橙素。

化合物14的準分子離子峰為m/z 593.149 4 [M-H]-，可知其分子式為C₂₇H₂9O15 （誤差-1.18）。在隨后的多級質(zhì)譜裂解過程中，其進一步產(chǎn)生m/z 575 [M-H-H₂O]-，473 [M-H-H₂O-C8H8O]-，353 [M-H-H₂O-2C8H8O]-，由此將化合物14鑒定為紅花黃色素A。

化合物50具有典型的黃酮類化合物的碎片離子峰如m/z 255，179，151等。結(jié)合相關(guān)文獻報道^[19]，可將其鑒定為 （-）-表阿夫兒茶精。

3.2 有機酸類化合物的鑒定

本實驗從茵陳提取物中鑒定了22個有機酸，其中21個為綠原酸類化合物，1個為原兒茶酸。按照奎寧酸上的咖啡酰、對香豆酰以及阿魏酰等取代基的數(shù)目，可將綠原酸類化合物分為單取代（11個）、雙取代（8個）以及三取代（2個）等 [20-21]。

3.2.1 單取代奎寧酸類化合物 主要包括咖啡酰奎寧酸4個、對香豆?？鼘幩峒捌滠疹惢衔?個，阿魏?？鼘幩?個?；衔?，4，7，9均產(chǎn)生準分子離子峰m/z 353.09，可知其分子式為C₁₆H₁₇O9 （誤差< 5）。通過與對照品比對，將化合物4，7，9分別準確鑒定為新綠原酸、綠原酸和隱綠原酸。同時，化合物3同樣產(chǎn)生m/z 191 [quinic acid-H]-和m/z 179 [caffeic acid-H]-等主要碎片離子，結(jié)合文獻報道中綠原酸同分異構(gòu)體在反相色譜柱上的保留行為差異，將其鑒定為1-咖啡酰奎寧酸^[22]。

化合物的6和15的準分子離子峰為m/z 337.09，可推斷其分子式為C₁₆H₁₇O8，誤差均小于3。在ESI-MS²譜中，m/z 337分別產(chǎn)生各自的基峰離子m/z 163和m/z 173，由此可將二者分別鑒定為3-對香豆?？崴岷?-對香豆?？崴?sup>[23]。化合物10，13，20則產(chǎn)生準分子離子峰m/z 449.14，可推斷分子式為C22H₂₇O13，誤差均小于5。在ESI-MS²譜中，m/z 449均可通過中性丟失1分子葡萄糖殘基（162）產(chǎn)生m/z 337，說明它們可能是對香豆?？鼘幩崞咸烟擒铡Ｍ瑫r，在ESI-MS²譜中，其他主要碎片離子m/z 191，173，163的產(chǎn)生表明它們的苷元可能是5-對香豆?？鼘幩?、4-對香豆?？鼘幩岷?-對香豆?？鼘幩?。由于苷元上的羥基取代位點較多，單純應(yīng)用LC-MS方法難以確定葡萄糖在苷元上的取代位置。因此，僅將它們鑒定為5-對香豆?？鼘幩崞咸烟擒?、4-對香豆?？鼘幩崞咸烟擒蘸?-對香豆?？鼘幩崞咸烟擒铡?

化合物18和19均產(chǎn)生準分子離子峰m/z 367.10。根據(jù)所獲得的高分辨質(zhì)譜精確分子質(zhì)量以及多級質(zhì)譜碎片離子信息，推斷最可能的分子式為C₁₇H19O9，誤差均小于2，表明它們可能是阿魏?？鼘幩犷惢衔?。在負離子檢測模式下，化合物18和19的ESI-MS²譜圖存在差異：m/z 367分別產(chǎn)生m/z 191和m/z 173的基峰離子。參考文獻[23]，將化合物18和19分別鑒定為5-阿魏?？鼘幩岷?-阿魏酰奎寧酸。

3.2.2 雙取代奎寧酸類化合物 化合物16，34，37，43均產(chǎn)生準分子離子峰m/z 515.11 [M-H]-。根據(jù)所獲得的高分辨質(zhì)譜精確分子質(zhì)量可推斷其分子式為C25H23O12，誤差小于5。在多級質(zhì)譜裂解過程中，m/z 515均產(chǎn)生特征碎片離子m/z 353 [M-H-C6H₁₀O6]-，由此推斷這4個化合物為雙咖啡酰奎寧酸。通過與對照品的色譜保留時間、質(zhì)譜準分子離子峰以及多級質(zhì)譜裂解碎片離子信息相比對，可將化合物34，37，43準確鑒定為1，5-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩岷?，5-二咖啡酰奎寧酸^[24]?；衔?6的m/z 515依次中性丟失咖啡酰基團，產(chǎn)生m/z 353和m/z 191。同時，m/z 353進一步裂解產(chǎn)生ESI-MS3譜基峰離子m/z 191，且m/z 179的相對豐度也接近50%，由此確定其分子中有1個3-咖啡?；〈＝Y(jié)合其他碎片離子，如m/z 173 [M-H-2Caffeoyl-H₂O]-等，可將其鑒定為1，3-二咖啡?？鼘幩?sup>[25]。

化合物21，27，29均產(chǎn)生準分子離子峰m/z 529.13 [M-H]-。根據(jù)所獲得的高分辨質(zhì)譜精確分子質(zhì)量可推斷其分子式為C26H25O12，誤差小于5。在進一步的質(zhì)譜裂解過程中，m/z 529可以通過丟失1分子咖啡?；虬⑽乎；謩e產(chǎn)生m/z 367 或m/z 353，說明它們是阿魏?？Х弱？鼘幩犷惢衔铮ɑ旌闲停?。由于在質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集過程中未獲得足夠的碎片離子信息，尚難以確定咖啡酰基或阿魏?；诳鼘幩崮负松系娜〈恢谩Ｒ虼耍瑑H將這3個化合物分別鑒定為咖啡酰阿魏?？鼘幩?1、咖啡酰阿魏?？鼘幩?2和咖啡酰阿魏酰奎寧酸-3。

化合物44產(chǎn)生準分子離子峰m/z 475.088 0 [M-H]-，由此推斷其分子式為C22H19O11（誤差 1.89）。m/z 475在進一步的裂解過程中，通過中性丟失1分子咖啡酰基產(chǎn)生m/z 313（對應(yīng)香豆?？崴幔纱丝梢詫⑵滂b定為香豆?？Х弱？鼘幩?。其另一重要碎片離子m/z 191的產(chǎn)生也進一步印證了上述推斷。但是，由于缺乏相應(yīng)的對照品，香豆酰和咖啡酰在奎寧酸母核上的具體取代基位置尚難以確定，由此將僅化合物44鑒定為香豆?？Х弱？鼘幩?。

三取代奎寧酸類化合物：化合物46和47在負離子模式下均產(chǎn)生準分子離子峰m/z 677.15 [M-H]-，由此推斷其分子式為C34H29O₁₅ （誤差<3）。在它們的ESI-MS/MS裂解過程中，m/z 677依次丟失1分子咖啡酰基后產(chǎn)生m/z 515和m/z 353，同時產(chǎn)生了m/z 191和m/z 173等特征碎片離子，由此推斷它們?yōu)槿Х弱？鼘幩犷惢衔?。由于缺乏相?yīng)的對照品，咖啡?；诳鼘幩崮负松系娜〈恢蒙须y以確定，因此僅將化合物46和47鑒定為三咖啡酰基奎寧酸-1和三咖啡?；鼘幩?2。

其他有機酸類化合物：化合物2產(chǎn)生準分子離子峰m/z 315.070 6 [M-H]-，由此推斷其分子式為C13H₁₅O9（誤差-1.59）。在進一步的質(zhì)譜裂解過程中，m/z 315可通過中性丟失1分子葡萄糖產(chǎn)生m/z 153，并可繼續(xù)丟失1分子CO₂產(chǎn)生m/z 109。結(jié)合文獻報道^[23]，可將其鑒定為原兒茶酸-3-O-葡萄糖苷。

3.3 香豆素類化合物的鑒定

本實驗從茵陳提取物中鑒定了6個香豆素類化合物。通過查閱文獻得知，茵陳中香豆素類化合物母核上的取代基主要有-OH和-OCH₃。結(jié)合高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)中準分子離子峰[M-H]-的精確質(zhì)量數(shù)和文獻報道^[26]，初步確定化合物8，11，12，24，26，28為香豆素類化學(xué)成分。在ESI-MS/MS裂解過程中，[M-H]-離子的特征裂解方式為中性丟失CO，CH₃·和H₂O等，并產(chǎn)生相應(yīng)的碎片離子。由此，對上述6個香豆素類化合物的結(jié)構(gòu)進行了推斷，結(jié)果見表1。

3.4 其他化合物的鑒定

本實驗從茵陳提取物中鑒定了1個其他類化合物?；衔?在負離子模式下產(chǎn)生準分子離子峰m/z 341.107 1 [M-H]-，由此推斷其分子式為C12H21O11（誤差-2.05）。在進一步的質(zhì)譜裂解過程中，m/z 341通過丟失1分子葡萄糖殘基產(chǎn)生m/z 179 [M-H-Glu]-，同時產(chǎn)生m/z 161 [179-H₂O]-和m/z 143[179-2H₂O]-等。因此，可將化合物1鑒定為龍膽二糖。

4 討論

本文采用的UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復(fù)雜體系物質(zhì)基礎(chǔ)研究中具有顯著優(yōu)勢：UHPLC采用亞2 μm顆粒度的色譜柱填料，不僅能獲得更高的柱效，還可在更寬的線速度范圍內(nèi)保持恒定的柱效，以獲取更好的分離效率、峰容量和靈敏度；LTQ-Orbitrap高分辨液質(zhì)聯(lián)用儀可同時進行多個數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)的MS/MS的掃描，能為小分子藥物的鑒定與分析提供了更準確的信息。

本文采用UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對茵陳提取物中的化學(xué)成分進行分析檢測，結(jié)果共篩選鑒定了50個化合物，包括21個黃酮、22個有機酸、6個香豆素以及1個其他類成分。本研究可為下一步的茵陳提取物質(zhì)量控制、藥理、藥效研究等提供前提與基礎(chǔ)，并為進一步的體內(nèi)代謝過程以及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù)。

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[責(zé)任編輯 丁廣治]