廢棄農(nóng)藥廠污染場(chǎng)地土壤浸出液的急性毒性和遺傳毒性篩查

許霞，薛銀剛,,*，劉菲，金珊，姜逸，蔣少杰，施昕瀾，謝顯傳

1. 常州大學(xué)環(huán)境與安全工程學(xué)院，常州 213164 2. 常州市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心，江蘇省環(huán)境保護(hù)水環(huán)境生物監(jiān)測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，常州 213001 3. 南京大學(xué)環(huán)境學(xué)院，污染控制與資源化研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 南京210046

近年來(lái)，由于經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展、產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整升級(jí)，以及城市化和工業(yè)化進(jìn)程的加快，大量工業(yè)企業(yè)進(jìn)行了搬遷、停產(chǎn)或關(guān)閉，廢棄的工業(yè)污染場(chǎng)地?cái)?shù)量逐步增加[1]。各類(lèi)廢棄的工業(yè)企業(yè)污染場(chǎng)地會(huì)對(duì)人類(lèi)健康和生態(tài)環(huán)境造成威脅，對(duì)于存在嚴(yán)重污染隱患的場(chǎng)地，急需管理與修復(fù)[2-3]。而廢棄的污染場(chǎng)地大多需要進(jìn)行再一次開(kāi)發(fā)利用，為防范工業(yè)企業(yè)關(guān)停搬遷過(guò)程中的偷排、偷倒和不規(guī)范拆遷等行為，以防污染加重，我國(guó)環(huán)保部于2014年頒布“關(guān)于加強(qiáng)工業(yè)企業(yè)關(guān)停、搬遷及原址場(chǎng)地再開(kāi)發(fā)利用過(guò)程中污染防治工作的通知”，旨在保障工業(yè)企業(yè)場(chǎng)地再開(kāi)發(fā)利用環(huán)境的安全[4]。

加強(qiáng)廢棄污染場(chǎng)地土壤環(huán)境對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，可為其開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)管理和實(shí)施修復(fù)措施提供科學(xué)依據(jù)[2]。目前，許多研究依靠土壤樣品的化學(xué)分析來(lái)進(jìn)行環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)[5-6]，但由于廢棄污染場(chǎng)地生產(chǎn)歷史的復(fù)雜性，僅根據(jù)化學(xué)污染物指標(biāo)對(duì)其進(jìn)行生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是不全面的。生物毒性檢測(cè)作為化學(xué)污染物檢測(cè)的補(bǔ)充，是環(huán)境監(jiān)測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)管理的一種有效手段，可以用于反映污染物間的聯(lián)合毒性，并通過(guò)生物指標(biāo)直觀地反映污染物對(duì)人類(lèi)健康和生態(tài)環(huán)境的影響[7]。Antczak等[8]基于大型溞的毒性機(jī)制研究人造化學(xué)品對(duì)生態(tài)系統(tǒng)和人體健康的危害；Ding等[9]運(yùn)用發(fā)光細(xì)菌試驗(yàn)對(duì)厭氧氨氧化底物和制藥廢水中4種抗生素的急性毒性進(jìn)行探究，并依據(jù)50%抑制濃度(IC50)對(duì)其單獨(dú)和聯(lián)合急性毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

土壤污染因其隱蔽性、滯后性、累積性、難治理性等特點(diǎn)，導(dǎo)致國(guó)家及公眾對(duì)土壤污染的重視程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，污染土壤的綜合評(píng)價(jià)對(duì)于準(zhǔn)確反映污染場(chǎng)地對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生的危害尤為重要，而目前我國(guó)尚未建立污染土壤的綜合評(píng)價(jià)方法[10]。與單一生物毒性測(cè)試相比，成組生物毒性測(cè)試能更全面反映供試樣品的綜合生物毒性[11-12]。本研究結(jié)合成組生物測(cè)試和化學(xué)分析方法對(duì)廢棄的農(nóng)藥廠污染土壤進(jìn)行評(píng)價(jià)，以期為建立中國(guó)污染土壤綜合評(píng)價(jià)方法做基礎(chǔ)性?xún)?chǔ)備。所選取的毒性測(cè)試方法包括發(fā)光細(xì)菌(Luminescent bacteria)急性毒性試驗(yàn)、大型溞(Daphnia magna)急性毒性試驗(yàn)和蠶豆根尖(Vicia faba)微核試驗(yàn)。

1 材料與方法(Materials and methods)

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 供試土壤

采樣區(qū)位于常州市某廢棄農(nóng)藥廠，根據(jù)土壤環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范(HJT 166—2004)，用螺旋取土鉆采集該場(chǎng)區(qū)內(nèi)6處不同區(qū)域20 cm坡面深度的土壤樣品，每個(gè)采樣點(diǎn)采集3份土壤樣品，去除雜物并碾碎后混勻，采樣點(diǎn)具體分布見(jiàn)表1。供試土樣經(jīng)風(fēng)干、磨碎后過(guò)20目篩，用于后續(xù)土壤浸出液的制備。本次研究的土壤質(zhì)地為粉砂壤土，土壤有機(jī)質(zhì)、總氮、總磷和總鉀含量分別為13.87 g·kg-1、1.33 g·kg-1、1.61 g·kg-1和16.23 g·kg-1。

1.2 土壤浸出液提取

主要參照《固體廢物浸出毒性浸出方法-水平振蕩法》(HJ 557—2009)[13]制備土壤浸出液，制作過(guò)程進(jìn)行少許修改。浸出液采用純水，GB/T 6682，二級(jí)，每份浸出液做3個(gè)平行。制備過(guò)程：取20 g干試樣于500 mL的錐形瓶，按液固比10:1 (L·kg-1) 加入浸取劑，蓋緊瓶蓋，將其垂直固定于水平往復(fù)式恒溫振蕩器，振蕩頻率為每分鐘(110±10)次，振幅為40 mm，于室溫下振蕩8 h后取下錐形瓶靜置16 h。用0.45 μm微孔濾膜對(duì)浸出液進(jìn)行抽濾后，存放于用HNO3浸泡24 h的聚乙烯瓶中，測(cè)定浸出液pH值后將其置于4 ℃冰箱冷藏(各土壤樣品浸出液pH分別為S1：7.38，S2：7.31，S3：7.21，S4：7.35，S5：7.53，S6：7.41)，供毒性試驗(yàn)使用。

1.3 生物毒性測(cè)試方法

1.3.1 發(fā)光細(xì)菌急性毒性試驗(yàn)

(1)供試生物

選用ISO發(fā)光細(xì)菌急性毒性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)方法所采用的菌種——費(fèi)氏弧菌(Vibrio fischeri)，購(gòu)自美國(guó)SDI公司。

(2)實(shí)驗(yàn)方法和步驟

①水樣相對(duì)發(fā)光度測(cè)定

發(fā)光菌凍干粉的菌體復(fù)蘇：用4 ℃保存的1 mL MicroTox稀釋液復(fù)蘇發(fā)光菌凍干粉(置于-22 ℃保存的Microtox SOLO Reagent)15 min，用DeltaTox毒性檢測(cè)儀(SDI，USA)讀取復(fù)蘇菌液的發(fā)光強(qiáng)度(ATP模式下)，當(dāng)發(fā)光強(qiáng)度大于100萬(wàn)光子數(shù)時(shí)即可用于毒性實(shí)驗(yàn)。取水樣1 mL，加入0.1 mL滲透壓調(diào)節(jié)溶液，混勻后用DeltaTox毒性檢測(cè)儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(B-Tox模式下)，先讀取0.1 mL復(fù)蘇菌液的發(fā)光強(qiáng)度，再取調(diào)節(jié)滲透壓后的水樣0.9 mL加入到0.1 mL復(fù)蘇菌液中，混勻后恒溫5 min后測(cè)其相對(duì)發(fā)光度，每組試驗(yàn)做3個(gè)平行，對(duì)照組為MicroTox稀釋液。

②質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

按照①的測(cè)試步驟，2.2 mg·L-1Zn2+的相對(duì)發(fā)光度在20～80之間；步驟②中發(fā)光菌的CF值在0.6～1.8之間。

1.3.2 大型溞急性毒性實(shí)驗(yàn)

(1)供試生物

供試溞(Daphnia magna)取自中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所，經(jīng)分類(lèi)鑒定后，用孤雌生殖法獲取水溞單克隆純品系，以斜生柵藻為餌進(jìn)行培養(yǎng)，獲得純品系生物株。

(2)實(shí)驗(yàn)方法和步驟

①預(yù)試驗(yàn)

在正式實(shí)驗(yàn)之前，先進(jìn)行較大范圍濃度系列(如0.1～100 mg·L-1)的預(yù)實(shí)驗(yàn)，從而為正式試驗(yàn)設(shè)置受試物的濃度。預(yù)實(shí)驗(yàn)每個(gè)濃度放置5個(gè)幼溞，設(shè)置4組平行組，持續(xù)時(shí)間48 h后觀察結(jié)果，找出被測(cè)水樣使大型溞全部產(chǎn)生活動(dòng)抑制的最低濃度和最大耐受濃度的范圍。

②正式試驗(yàn)

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，按幾何級(jí)數(shù)的濃度系列設(shè)計(jì)6個(gè)濃度的試驗(yàn)液，每個(gè)濃度4組平行，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照(各4組)，各土壤浸出液正式試驗(yàn)稀釋濃度梯度分別設(shè)置為：S1和S4為0.39%、0.78%、1.56%、3.13%、6.25%、12.5%；S2和S6為3.125%、6.25%、12.5%、25%、50%、100%；S3和S5為0.05%、0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6%。將每個(gè)濃度和每個(gè)對(duì)照組各放5個(gè)幼溞，試驗(yàn)期間不再喂食，試驗(yàn)溫度控制在18～22 ℃，持續(xù)48 h后記錄每個(gè)濃度大型溞活動(dòng)受抑制數(shù)，計(jì)算48 h-EC50值。

③質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

用分析純重鉻酸鉀測(cè)定試驗(yàn)用大型溞24 h-EC50在0.5～1.2 mg·L-1之間；實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照未出現(xiàn)不活動(dòng)大型溞。

1.3.3 蠶豆根尖微核試驗(yàn)

(1)試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用的蠶豆(Vicia faba)品種為松滋青皮豆，是篩選出的較為敏感的品種，購(gòu)于江蘇省常州市竹林菜市場(chǎng)。

(2)實(shí)驗(yàn)方法和步驟

將松滋青皮豆放入盛有自來(lái)水的燒杯中，于25 ℃的恒溫箱中浸泡26～30 h，待種子吸脹后，取出種子，用紗布包裹放入恒溫箱內(nèi)催芽12～30 h。選取初生根生長(zhǎng)良好、根長(zhǎng)一致種子，放于盛有被測(cè)水樣的培養(yǎng)皿中，用蒸餾水處理做對(duì)照；處理6 h后將種子洗凈，放于恒溫箱中恢復(fù)培養(yǎng)24 h；將恢復(fù)后的種子用卡諾固定液固定24 h；固定好的幼根用蒸餾水浸洗2次后加入5 mol·L-1HCl淹沒(méi)幼根，于28 ℃水浴鍋中水解至幼根被軟化；蒸餾水浸洗2次，堿性品紅染色10 min，加蓋玻片壓片。在數(shù)碼顯微鏡BSmart zoom 5(Carl Zeiss Jena，Germany)下鏡檢觀察并拍照。

表1 廢棄農(nóng)藥廠土壤樣品分布情況Table 1 Distribution of soil samples in the waste pesticide factory

(3)質(zhì)量保證與質(zhì)量控制

對(duì)于嚴(yán)重污染的土壤，其浸出液可能造成根尖死亡，應(yīng)稀釋后再做檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel軟件(2010版本)計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。(1)發(fā)光細(xì)菌相對(duì)發(fā)光度由Deltatox系統(tǒng)計(jì)算得出；(2)大型溞48 h-EC50值和95%置信區(qū)間用SPSS軟件(22.0版本)計(jì)算得出；(3)蠶豆根尖微核試驗(yàn)中各測(cè)試樣品的微核千分率(MCN‰)計(jì)算方法見(jiàn)公式(1)，污染指數(shù)(PI)判別方法見(jiàn)公式(2)。

(1)

(2)

2 結(jié)果(Results)

2.1 發(fā)光菌急性毒性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)中國(guó)科學(xué)院南京土壤所發(fā)光菌毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(表2)進(jìn)行判定[11]，結(jié)果如圖1所示。該廢棄農(nóng)藥廠6個(gè)點(diǎn)位土壤樣品浸出液的發(fā)光細(xì)菌急性毒性測(cè)試結(jié)果表明，6個(gè)點(diǎn)位的土壤樣品毒性檢出率為100%。其中S3和S5的土壤浸出液對(duì)發(fā)光細(xì)菌的抑制作用最強(qiáng)，其發(fā)光細(xì)菌急性毒性檢測(cè)結(jié)果為重毒；S1、S2和S4的土壤浸出液毒性比S3和S5弱，屬于中毒；S6的土壤浸出液毒性最小，為低毒。

表2 發(fā)光細(xì)菌急性毒性級(jí)別Table 2 Acute toxicity level of luminescent bacteria

圖1 土壤浸出液發(fā)光細(xì)菌急性毒性結(jié)果Fig. 1 Results of luminescent bacteria acute toxicity of soil leachates

圖2 土壤浸出液大型溞運(yùn)動(dòng)抑制劑量-效應(yīng)關(guān)系Fig. 2 Dosage-response relationship of soil leachates on Daphnia magna immobilization

2.2 大型溞急性毒性結(jié)果

土壤浸出液大型溞運(yùn)動(dòng)抑制劑量-效應(yīng)關(guān)系(圖2)表明，空白對(duì)照組大型溞均未出現(xiàn)死亡和運(yùn)動(dòng)受抑制等異常癥狀。S1和S3的土壤浸出液原液對(duì)大型溞均具有很高的毒性效應(yīng)，48 h后對(duì)大型溞運(yùn)動(dòng)抑制率為100%。S1和S4在土壤浸出液稀釋體積分?jǐn)?shù)為12.5%時(shí)，所有實(shí)驗(yàn)組大型溞均出現(xiàn)死亡或運(yùn)動(dòng)受抑制現(xiàn)象；而S3和S5在土壤浸出液稀釋體積分?jǐn)?shù)為1.6%時(shí)，大型溞運(yùn)動(dòng)抑制率分別為90%和96.67%。

農(nóng)藥廠土壤浸出液大型溞急性毒性結(jié)果如表3所示，急性毒性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參照《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》(第四版)-溞類(lèi)急性活動(dòng)抑制毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(48 h-EC50≤1：極高毒，1<48 h-EC50≤10：高毒，10<48 h-EC50<100：中毒，48 h-EC50>100：低毒)[14]。6個(gè)點(diǎn)位的土壤浸出液樣品大型溞急性毒性檢測(cè)結(jié)果表明：S3和S5的土壤浸出液對(duì)大型溞的抑制作用最為明顯，其浸出液檢測(cè)結(jié)果為極高毒，S1、S2和S4為高毒，S6為中毒，檢測(cè)結(jié)果與發(fā)光細(xì)菌急性毒性結(jié)果基本相同。

2.3 蠶豆根尖微核實(shí)驗(yàn)

農(nóng)藥廠土壤浸出液蠶豆根尖微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4，根據(jù)《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》(第四版)中污染指數(shù)(PI)判別法(污染指數(shù)在0～1.5區(qū)間為基本無(wú)污染；1.5～2區(qū)間為輕污染；2～3.5區(qū)間為中污染；3.5以上為重污染)進(jìn)行污染情況的鑒定[14]。S3和S5的遺傳毒性檢測(cè)結(jié)果為重污染，S1、S4和S6為中污染，S2為輕污染。與急性毒性檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，除S2和S6點(diǎn)位的土壤浸出液遺傳毒性與急性毒性的檢測(cè)結(jié)果略有不同，其余點(diǎn)位樣品的急性毒性和遺傳毒性效應(yīng)基本一致。

3 討論(Discussion)

3.1 廢棄農(nóng)藥廠污染場(chǎng)地土壤浸出液的急性毒性和遺傳毒性篩查結(jié)果

生物毒性檢測(cè)是基于生態(tài)毒理學(xué)而發(fā)展的檢測(cè)方法，主要用于研究有毒有害物質(zhì)對(duì)生態(tài)系統(tǒng)中的生物所造成的分子、細(xì)胞、器官、個(gè)體和群落等不同生命層次的損傷，是能直觀反映環(huán)境介質(zhì)中所有共存污染物整體效應(yīng)的生物學(xué)方法[15]。發(fā)光細(xì)菌和大型溞是目前國(guó)際廣泛認(rèn)可的測(cè)試生物，由于其快速、有效和費(fèi)用低等特點(diǎn)，被廣泛用于化學(xué)品、農(nóng)藥以及工業(yè)廢水的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和監(jiān)測(cè)[16-17]。蠶豆根尖微核遺傳毒性試驗(yàn)是適用于分析化學(xué)物質(zhì)對(duì)生物產(chǎn)生毒害的遺傳毒理學(xué)方法，在環(huán)境監(jiān)測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用[18]。宋曉威等[3]利用發(fā)光細(xì)菌、大型溞和斜生柵藻3種受試生物檢測(cè)廢棄農(nóng)藥廠淺層地下水的急性毒性，結(jié)果表明：3種受試生物的敏感性雖有所不同，但毒性效應(yīng)均隨著時(shí)間的增加有所增大。本次研究運(yùn)用成組生物毒性試驗(yàn)對(duì)農(nóng)藥廠污染場(chǎng)地土壤進(jìn)行研究，首先通過(guò)發(fā)光細(xì)菌急性毒性試驗(yàn)進(jìn)行土壤浸出液毒性級(jí)別篩選，同時(shí)結(jié)合大型溞急性毒性實(shí)驗(yàn)做進(jìn)一步毒性監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)，并補(bǔ)充蠶豆根尖微核試驗(yàn)對(duì)污染土壤浸出液進(jìn)行遺傳毒性檢測(cè)，從而建立適用于污染土壤生物毒性綜合評(píng)價(jià)的方法。

表3 土壤浸出液大型溞急性毒性結(jié)果Table 3 Results of Daphnia magna acute toxicity of soil leachates

表4 土壤浸出液蠶豆根尖微核結(jié)果Table 4 Results of micronucleus genetic toxicity test on Vicia faba root tips of soil leachates

由表5可以看出，2種急性毒性試驗(yàn)結(jié)果基本一致，3種毒性測(cè)試方法的結(jié)果具有較好的一致性，適用于農(nóng)藥廠污染場(chǎng)地的毒性分析。比較3種毒性試驗(yàn)對(duì)土壤樣品的測(cè)試結(jié)果，發(fā)光細(xì)菌和大型溞相對(duì)來(lái)說(shuō)較為敏感，其中發(fā)光細(xì)菌毒性試驗(yàn)周期最短，可用于土壤浸出液毒性級(jí)別的初步篩選，但發(fā)光菌抑制實(shí)驗(yàn)容易受到各種因素干擾，準(zhǔn)確性較差；大型溞培養(yǎng)方便且對(duì)許多毒物敏感，被廣泛用于水生生態(tài)毒理學(xué)研究；從本次研究結(jié)果來(lái)看，綜合2種毒性試驗(yàn)更能全面地反映土壤樣品的急性毒性；蠶豆根尖是微核技術(shù)檢測(cè)常用的材料，可以用于反映污染土壤中存在的潛在遺傳危害[18]，通過(guò)蠶豆根尖微核試驗(yàn)可以看出農(nóng)藥廠的土壤污染對(duì)遺傳毒性也造成了一定影響(表5)；可見(jiàn)，運(yùn)用成組生物毒性更利于準(zhǔn)確地生物毒性評(píng)價(jià)[19]。

3.2 生物毒性試驗(yàn)結(jié)果與理化分析結(jié)果的相關(guān)性

該廢棄農(nóng)藥廠由于長(zhǎng)期的農(nóng)藥生產(chǎn)、加工和運(yùn)輸過(guò)程中摻雜多種污染物質(zhì)，已對(duì)土壤環(huán)境造成了較大程度的影響，通過(guò)對(duì)農(nóng)藥廠不同點(diǎn)位的土壤進(jìn)行毒性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)該污染場(chǎng)地多處場(chǎng)所的土壤具有生物毒性，且部分點(diǎn)位的土壤毒性非常大，對(duì)生態(tài)環(huán)境和人體健康具有一定的危害。章霖之等[20-21]和何歡等[22]對(duì)該農(nóng)藥廠土壤所含有的揮發(fā)性有機(jī)污染物(volatile organic compounds，VOCs)和多環(huán)芳烴(polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs)進(jìn)行調(diào)查(表6)，發(fā)現(xiàn)該農(nóng)藥污染場(chǎng)地土壤中揮發(fā)性有機(jī)污染物以苯系物為主，同時(shí)還檢出14種多環(huán)芳烴，其中苯是人類(lèi)致癌物，甲苯、乙苯、二甲苯以及其他多環(huán)芳烴也都具有不同程度的“致突變、致癌和致畸”作用[23-25]，此類(lèi)持久性有機(jī)污染物不僅對(duì)人體有潛在危害[26]，同時(shí)會(huì)對(duì)土壤中的生物具有毒性效應(yīng)。目前，有16種多環(huán)芳烴已被美國(guó)環(huán)境保護(hù)署列為優(yōu)先污染物[27]，由于其不易溶于水，具有高度的親脂性[28]，致使在生物體內(nèi)逐級(jí)富集[29]。此次研究區(qū)域土壤中多環(huán)芳烴類(lèi)污染物以萘、菲、苯并[k]熒蒽和芘為主，這些物質(zhì)可能對(duì)土壤中存在的生物產(chǎn)生不利影響[30]。由表7可以看出，該農(nóng)藥廠污染土壤中含有甲萘酚、乙草胺、丁草胺和撲虱靈等農(nóng)藥成分，以撲虱靈的濃度最高，其中危險(xiǎn)品庫(kù)和輔助設(shè)施區(qū)土壤中所含農(nóng)藥成分最高。農(nóng)藥在土壤中的長(zhǎng)期存留不僅對(duì)生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生負(fù)面影響，同時(shí)危害土壤中的生物[31]。

由表6可以看出，生產(chǎn)車(chē)間內(nèi)(S5)的土壤所含多環(huán)芳烴和揮發(fā)性有機(jī)物濃度最高，其次是輔助設(shè)施區(qū)域(S3)，同時(shí)S3和S5點(diǎn)位土壤中農(nóng)藥的檢出濃度較高。綜合該研究區(qū)域土壤理化指標(biāo)分析結(jié)果與生物毒性試驗(yàn)結(jié)果可知，含污染物濃度較高的研究場(chǎng)所(S3和S5)，發(fā)光菌和大型溞急性毒性試驗(yàn)結(jié)果分別為重毒和極高毒，蠶豆根尖微核試驗(yàn)結(jié)果為重污染；含污染物濃度最低的研究場(chǎng)所(廠區(qū)外：S6)，發(fā)光菌和大型溞急性毒性試驗(yàn)結(jié)果分別為低毒和中毒，蠶豆根尖微核試驗(yàn)結(jié)果為中污染；不難看出，土壤中所含污染物濃度已經(jīng)對(duì)土壤毒性效應(yīng)產(chǎn)生影響，污染物濃度較高的場(chǎng)所，其毒性作用也較高，生物毒性檢測(cè)結(jié)果與理化分析結(jié)果呈現(xiàn)出較好的相關(guān)性。

表5 農(nóng)藥廠污染土壤生態(tài)毒性診斷結(jié)果Table 5 Ecotoxicity diagnosis of contaminated site in the waste pesticide factory

表7 農(nóng)藥廠污染土壤中農(nóng)藥檢出濃度Table 7 Detection concentration of pesticides in pesticide contaminated soil

注： ND表示污染物未檢出，/表示未研究該區(qū)域樣品。

Note: ND indicates the contaminant was not detected, / indicates the sample was not studied.

綜上所述，綜合發(fā)光細(xì)菌急性毒性試驗(yàn)、大型溞急性毒性實(shí)驗(yàn)和蠶豆根尖微核試驗(yàn)進(jìn)行土壤浸出液毒性級(jí)別篩選、監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)，建立污染土壤生物毒性綜合評(píng)價(jià)方法對(duì)于準(zhǔn)確和全面地反映農(nóng)藥廠污染場(chǎng)地對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生的危害具有重要意義。同時(shí)研究結(jié)果表明土壤的生物毒性跟其中所含的污染物質(zhì)密切相關(guān)，毒性試驗(yàn)結(jié)果與土壤理化指標(biāo)具有較好的相關(guān)性，可見(jiàn)，結(jié)合化學(xué)分析與生物毒性檢測(cè)是進(jìn)行污染土壤綜合評(píng)價(jià)和危害識(shí)別的重要手段。

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