足三里、腎俞穴位埋線對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清TGF—β1、IL—17的影響

阮崇潔　馬志毅　李勇　李建武

【摘 要】目的：觀察穴位埋線治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎對(duì)血清轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、白細(xì)胞介素-17（IL-17）的影響，探討穴位埋線治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的可能機(jī)制。方法：將60例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，每組30例。對(duì)照組口服來氟米特片每次20 mg，每日1次；治療組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用足三里、腎俞穴位埋線，每15日埋線1次，共治療6次。2組療程均為3個(gè)月。觀察2組治療前后血清TGF-β1、IL-17的變化并進(jìn)行比較。結(jié)果：治療后，2組IL-17水平明顯降低，TGF-β1水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；治療組IL-17水平低于對(duì)照組，TGF-β1水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。結(jié)論：穴位埋線聯(lián)合來氟米特治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎較單純口服來氟米特能夠更明顯降低IL-17水平，升高TGF-β1水平。穴位埋線治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的機(jī)制可能是通過促進(jìn)TGF-β1生成，并抑制IL-17生成來實(shí)現(xiàn)的。

【關(guān)鍵詞】 關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕；穴位埋線；足三里；腎俞；TGF-β1；IL-17

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種慢性自身免疫性疾病，其主要病理改變?yōu)槁赃M(jìn)行性關(guān)節(jié)滑膜炎、骨和關(guān)節(jié)軟骨的破壞，病程日久可致關(guān)節(jié)畸形及功能障礙[1]。筆者在臨床中治療RA采用足三里、腎俞穴位埋線聯(lián)合來氟米特口服[2]，

與單純采用來氟米特治療的RA患者治療前后血清轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、白細(xì)胞介素-17（IL-17）水平變化情況比較，以對(duì)穴位埋線治療RA的可能作用機(jī)制進(jìn)行探討。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2013年1月至2014年9月在本院風(fēng)濕病科就診的RA患者60例，男12例，女48例；年齡45～65歲；病程6～10年。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對(duì)照組，每組30例。

2組患者在性別、年齡、病程、HAQ指數(shù)、X線分期等方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。見表1。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 按照2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)（ACR）/歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟（EULAR）發(fā)布的RA分類標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)，且處于活動(dòng)期（DAS28評(píng)分 > 2.6分）；②年齡18～65歲；

③初發(fā)未接受治療或確診半年未治療再次復(fù)發(fā)；

④至少1周未口服非甾體抗炎藥；⑤至少4周未服用糖皮質(zhì)激素類藥物；⑥試驗(yàn)前8周內(nèi)未使用過改善病情抗風(fēng)濕藥物；⑦WBC≥4×109·L-1；血小板≥100×109·L-1；轉(zhuǎn)氨酶≤正常上限的1.5倍；肌酐≤120 μmol·L-1；⑧患者自愿并簽署知情同

意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) ①患有感染性疾病及嚴(yán)重的、未控制的心、腦、內(nèi)分泌、血液等系統(tǒng)疾病者；②患有癥狀及體征預(yù)期會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果評(píng)估的疾病者；③生活不能自理者；④妊娠或哺乳期婦女。

2 方 法

2.1 治療方法 2組均以口服來氟米特片（蘇州長征-欣凱制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20000550）為基礎(chǔ)治療，每次20 mg，每日1次。

治療組：基礎(chǔ)治療+穴位埋線治療。穴位埋線取穴：參照GB12346—90頒布的《腧穴國際標(biāo)準(zhǔn)化方案》中的定位標(biāo)準(zhǔn)，選取雙側(cè)足三里、腎俞。具體操作方法：嚴(yán)格按照外科無菌操作進(jìn)行，將穴位常規(guī)消毒后，選用9號(hào)腰穿針，剪取1 cm的

00號(hào)羊腸線置入腰穿針前端，刺入腧穴。待患者出現(xiàn)針感后，術(shù)者一手將針芯固定，另一手將管針取出，使羊腸線呈直線埋入穴位，出針后用消毒棉球覆蓋針孔2～3 d。每15日治療1次， 治療3個(gè)月。

2.2 標(biāo)本采集 2組患者均于清晨空腹抽取2組患者靜脈血5 mL，常溫放置1 h，然后置于3000 r·min-1

離心機(jī)離心10 min，分離血清，并于-20 ℃保存。

2.3 TGF-β1、IL-17水平檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清中TGF-β1、IL-17水平，按照儀器及試劑盒（深圳市達(dá)科為生物技術(shù)有限公司）的操作規(guī)程嚴(yán)格進(jìn)行操作檢測。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以表示，采用t檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié) 果

治療過程中，對(duì)照組1例失訪，治療組2例因不能耐受穴位埋線而停止治療。最終納入57例，治療組28例，對(duì)照組29例。

治療后，2組IL-17水平明顯降低，TGF-β1水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；治療組IL-17水平低于對(duì)照組，TGF-β1水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

4 討 論

RA是一種典型的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其確切病因迄今尚未闡明，目前認(rèn)為與自身免疫因素、遺傳因素和感染因素有關(guān)。有研究報(bào)道，多種細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)通過相互作用調(diào)節(jié)直接或間接參與了RA免疫炎癥反應(yīng)[4]。

TGF-β是一種由多種細(xì)胞分泌的，具有多效能的生長因子。TGF-β作為一種負(fù)性免疫調(diào)節(jié)因子，在某些特定條件下，又可表現(xiàn)出正向的免疫調(diào)節(jié)作用。對(duì)于RA患者中血清TGF-β1的水平，各類文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果不一，可能與納入病例病程長短和病情活動(dòng)度差異性有關(guān)[5-6]。一方面，有研究結(jié)果顯示TGF-β1可抑制成纖維細(xì)胞增長及血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生，并對(duì)炎性細(xì)胞因子起到拮抗作用，從而保護(hù)關(guān)節(jié)及軟組織的完整性，達(dá)到免疫抑制的效

果[7]。另一方面，有研究報(bào)道TGF-β1在炎癥初期大量聚集炎癥部位，因其為強(qiáng)效的單核細(xì)胞趨化因子，故可使大量T細(xì)胞快速聚集，加重滑膜炎癥，局部組織出現(xiàn)免疫亢進(jìn)狀態(tài)，從而加快RA的發(fā)生和發(fā)展[8]。本研究結(jié)果顯示，治療后RA患者血清TGF-β1水平均高于治療前，這與Mu?oz-Valle等[9]的研究結(jié)論一致，說明TGF-β1在RA中主要起到免疫抑制作用；但在RA發(fā)病機(jī)制中TGF-β1的作用錯(cuò)綜復(fù)雜，所涉及到的信號(hào)通路及細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，仍然需要進(jìn)一步的研究。

IL-17是一種主要由活化的記憶性的CD4+T淋巴細(xì)胞分泌的促炎癥性細(xì)胞因子。有研究表明，在體外產(chǎn)生IL-17的Th17細(xì)胞可強(qiáng)烈地抑制滑膜細(xì)胞生成膠原蛋白，而在關(guān)節(jié)內(nèi)注射IL-17可誘導(dǎo)關(guān)節(jié)出現(xiàn)炎癥，并可促使軟骨蛋白的耗竭[10]；IL-17通過上調(diào)RANKL及其他破骨因素，可增強(qiáng)破骨細(xì)胞活性[11]；另外由Th17細(xì)胞分泌的IL-17不斷參與著整個(gè)炎癥的過程，從而使得整個(gè)炎癥的級(jí)聯(lián)效應(yīng)不斷得到放大，最終形成一種慢性炎癥狀

態(tài)[12]。本研究顯示，RA患者治療后血清IL-17水平明顯降低，提示IL-17水平與疾病活動(dòng)呈正相關(guān)，并與關(guān)節(jié)滑膜的增生破壞有關(guān)。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，RA屬“尪痹”范疇，較一般的風(fēng)寒濕痹病情更重，更為復(fù)雜。痹證的初起病位主要在脾，久病不愈后遷延至肝、脾、腎。若脾胃虧虛，脾運(yùn)化水濕功能減弱，無力輸水散精，內(nèi)濕易生，濕濁內(nèi)盛，與外濕相合，濕阻氣機(jī)，不通則痛，故發(fā)而為痹。閻小萍[13]認(rèn)為，RA的發(fā)生首先是腎虛，只有腎精充足，臟腑得以養(yǎng)，脾胃健康，營衛(wèi)和，才可祛痹。焦樹德[14]認(rèn)為，RA可能因先天稟賦不足遺傳導(dǎo)致或后天素體失養(yǎng)，氣血生化不足，或消耗過多，導(dǎo)致腎陰虧虛，不能濡養(yǎng)筋骨，關(guān)節(jié)痙攣，骨質(zhì)疏松，不得屈伸。劉健等[15]認(rèn)為，RA中醫(yī)病機(jī)為脾胃虛弱，濕濁內(nèi)生，氣血不足，營衛(wèi)失調(diào)，痰瘀互結(jié)，脈絡(luò)阻滯。因此，應(yīng)以補(bǔ)腎健脾為治療原則，又因羊腸線在穴位上能達(dá)到較持久的刺激，增強(qiáng)腧穴的治療作用，故本課題選用了雙側(cè)足三里及腎俞進(jìn)行穴位埋線治療，與普通針刺相比較，穴位埋線療法具有施術(shù)簡單、價(jià)格低廉、省時(shí)方便等優(yōu)點(diǎn)。

研究發(fā)現(xiàn)，足三里、腎俞穴位埋線聯(lián)合口服來氟米特片較單純口服來氟米特能更好地降低IL-17水平及提高TGF-β1水平。而多項(xiàng)研究表明，血清TGF-β1、IL-17在RA疾病發(fā)生過程中起到了重要的作用，筆者的前期研究也證實(shí)足三里、腎俞穴穴位埋線能明顯改善RA患者病情[2]，故穴位埋線足三里、腎俞穴治療RA的機(jī)制可能是通過促進(jìn)TGF-β1生成，并抑制IL-17生成來實(shí)現(xiàn)的。

5 參考文獻(xiàn)

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收稿日期：2016-08-29；修回日期：2016-12-22