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    油茶廢棄物脫脂茶粕中皂苷和黃酮納米囊的制備與應(yīng)用研究

    2017-03-12 01:21:36戴述誠葉勇琚春梅
    中國動物保健 2017年11期
    關(guān)鍵詞:油茶籽油茶皂苷

    戴述誠,葉勇,琚春梅

    (1.廣東省天寶生物制藥有限公司研發(fā)中心 廣州 510650;2.華南理工大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院制藥工程系 廣州 510641;

    3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 廣州 510642)

    自上世紀(jì)90年代以來,我國油茶種植產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展,油茶加工企業(yè)的數(shù)量不斷增加,規(guī)模也不斷擴大,油茶產(chǎn)業(yè)的技術(shù)創(chuàng)新能力和精深加工能力得到進(jìn)一步加強。但是,目前我國油茶綜合利用加工技術(shù)匱乏,特別是油茶制油后的副產(chǎn)物茶粕等深加工和綜合利用技術(shù)還停留在較低的技術(shù)層面上,沒有考慮到油茶獨特的物理和化學(xué)性質(zhì),導(dǎo)致副產(chǎn)物沒有得到充分利用,產(chǎn)品附加值低,嚴(yán)重影響了企業(yè)的經(jīng)濟效益,并造成環(huán)境污染。

    近幾年來,我國每年油茶加工茶油后的副產(chǎn)物茶粕產(chǎn)量在100萬噸以上,其中皂苷含量15%~20%,黃酮含量1%~2%,這些有用成分?jǐn)?shù)量不容小視。目前,茶籽餅少數(shù)被用作農(nóng)藥兼肥料等方面,大量的茶籽餅遭到廢棄,沒有得到有效分離和應(yīng)用,急待進(jìn)一步開發(fā)、綜合利用。將其變廢為寶,不僅增加農(nóng)民收入,也有益于環(huán)境保護(hù),產(chǎn)生可觀的經(jīng)濟效益和社會效益。

    1 皂苷、黃酮及其納米囊生產(chǎn)方法

    皂苷和黃酮的提取方法一般采用溶劑法[1-7],有機溶劑的大量使用易導(dǎo)致VOCs(揮發(fā)性有機物)的排放超標(biāo)而污染環(huán)境。本研究應(yīng)用新型工藝,采用無有機溶劑的復(fù)合酶法生產(chǎn)工藝,通過簡單分離即可獲得皂苷和黃酮兩種產(chǎn)品。

    復(fù)合酶法:采用纖維素酶和果膠酶的復(fù)合酶,破壞油茶細(xì)胞壁,使皂苷和黃酮完全溶出,再經(jīng)過酸解和轉(zhuǎn)溶分離,可獲得高純度的皂苷和黃酮。

    圖1 油茶皂苷納米囊粒徑分布圖

    圖2 油茶皂苷納米囊ζ電位圖

    具體操作描述:將一定量的脫脂茶粕,按1:5~10比例加水混勻,再分別加入占茶粕質(zhì)量0.3%~0.6%的纖維素酶和0.04%~0.08%的果膠酶,40~50℃保溫一段時間,過濾。濾液加入較稀的鹽酸溶液,50~60℃保溫數(shù)小時。5,000r/min離心,收集沉淀。加入沉淀量5倍質(zhì)量的5%氫氧化鈉水溶液,加熱至60~70℃保溫一段時間,過濾,得沉淀1。濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.00左右,靜置沉淀,過濾,得沉淀2。沉淀用等量水洗滌2次,真空干燥,分別得到沉淀1(皂苷含量在93.0%以上),沉淀2(黃酮含量在94.0%以上)。分別以皂苷和黃酮為囊心,以大豆卵磷脂和膽固醇混合物為囊殼,囊心與囊殼按一定重量比投料,制備新型納米粒。先將囊心溶于含乳化劑吐溫-80的弱堿性磷酸緩沖液中,再將囊殼溶于乙醇,50~60℃水浴下將囊殼溶液緩慢滴入囊心溶液,6,000~10,000r/min攪拌反應(yīng)30min,使之乳化分散,經(jīng)0.10~0.20μm微孔膜抽濾,使產(chǎn)品納米化,并除去不溶物,將納米液冷凍干燥(或噴霧干燥),即可分別得到皂苷納米囊和黃酮納米囊。

    圖3 油茶黃酮納米囊粒徑分布圖

    圖4 油茶黃酮納米囊ζ電位圖

    2 納米囊皂苷、黃酮表征與用途

    2.1 納米囊皂苷、黃酮表征

    2.1.1 納米囊皂苷 將所得納米囊皂苷,在粒徑及ζ(音Zeta)電位兩方面對其進(jìn)行了表征,表征結(jié)果分別見圖1和圖2。

    從上兩圖可看出,用本研究方法制得的油茶皂苷納米囊粒徑為55.5nm,平均ζ電位為-51.9mV,經(jīng)計算其包封率為85.25%。

    2.1.2 納米囊黃酮 將所得納米囊黃酮,在粒徑及ζ電位兩方面對其進(jìn)行了表征,表征結(jié)果分別見圖3和圖4。

    從上兩圖可看出,用本研究方法制得的油茶黃酮納米囊粒徑為63.97nm,平均ζ電位為58.2mV,經(jīng)計算其包封率為84.06%。

    以上表明,用本研究制備的皂苷和黃酮納米囊粒徑較小,且包封率大于80%,均達(dá)到了納米粒徑,質(zhì)量符合要求。

    2.2 納米囊皂苷和黃酮用途

    油茶皂苷和黃酮有顯著的抗菌(包括真菌)消炎、抗癌、降血脂、消除自由基、抗氧化、提高免疫等作用,可用于替代抗生素,減少抗生素的濫用和拮抗。目前,油茶加工茶油后的脫脂茶粕及其加工品,在水產(chǎn)養(yǎng)殖[8-10]、農(nóng)藥[11,12]、醫(yī)藥保健品[3,4,7,13]、化妝品[14]及飼料[15-22]等行業(yè)上有了不少的應(yīng)用探索報道。但皂苷和黃酮兩者提純后穩(wěn)定性差,且味苦,動物入口性差。本研究通過新型設(shè)備和工藝制備黃酮和皂苷納米囊包被制劑,可克服傳統(tǒng)的溶劑提取法缺點,掩蓋苦味,提高動物入口性,提高皂苷和黃酮的穩(wěn)定性,還顯著提高其生物利用率。

    3 應(yīng)用前景展望

    當(dāng)前,我國畜禽養(yǎng)殖中抗生素的使用,雖經(jīng)政府部門管理、實行執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師開處方藥,得到了較好的管控,但養(yǎng)殖業(yè)中抗生素的大量使用、濫用現(xiàn)象還是較普遍。大量抗生素的使用既污染了環(huán)境,也誘導(dǎo)細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生,形成安全隱患。尋找畜禽抗生素替代物已成為當(dāng)今十分迫切的問題。天然產(chǎn)物皂苷和黃酮來源于油茶籽,具有抗菌消炎、提高免疫等作用,不易產(chǎn)生耐藥性,是抗生素替代品的優(yōu)秀備選品種。

    本研究領(lǐng)域?qū)儆谵r(nóng)林產(chǎn)品深加工范疇,將油茶產(chǎn)業(yè)的廢棄物脫脂茶粕進(jìn)行綜合開發(fā)利用,可減少對環(huán)境的污染、提升農(nóng)副產(chǎn)品附加值。制備的皂苷和黃酮在化工、醫(yī)藥、化妝品、食品、農(nóng)藥、畜禽與水產(chǎn)養(yǎng)殖等行業(yè)上有著廣泛的應(yīng)用。

    本研究將從油茶加工廢棄物中提取的皂苷和黃酮,進(jìn)一步制成穩(wěn)定性更好、更有利于吸收利用的黃酮和皂苷納米囊包被制劑,開發(fā)成新型綠色飼料添加劑使用,用以替代飼料抗生素。近些年來,我國每年生產(chǎn)抗生素達(dá)21t噸之多,其中近一半量用于養(yǎng)殖。大家知道,抗生素濫用的后果——導(dǎo)致超強耐藥菌的產(chǎn)生,引起人畜共感染,而無法治愈。減少和控制抗生素的應(yīng)用應(yīng)是全社會的責(zé)任。令人欣慰的是,從有關(guān)方面了解到,我國也將步歐盟后路,在飼料中逐步停止添加人獸共用、促生長或可能存在安全隱患的其他獸用抗菌藥物,無疑為抗生素替代物的開發(fā)利用提供了極好的發(fā)展機遇與空間;而且,隨著油茶種植業(yè)的迅猛發(fā)展,每年油茶加工茶油后的茶粕正以大增幅上升,根據(jù)國家發(fā)改委等部委聯(lián)合出臺的《全國油茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃(2009—2020年)》,到2020年我國油茶種植總規(guī)模將達(dá)到7,000萬畝,榨油后的茶籽餅將超700萬t[4]。這些為開發(fā)天然皂苷和黃酮提供了豐富廉價的資源。

    因此,將油茶產(chǎn)業(yè)的廢棄物脫脂茶粕進(jìn)一步加工為黃酮和皂苷納米囊包被制劑,開發(fā)成新型綠色飼料添加劑使用,市場潛力巨大,發(fā)展前景廣闊?!?/p>

    [1] 馮自立.茶籽粕化學(xué)組成和茶皂苷純化、衍生物合成及活性[D].西北大學(xué),2016.

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