成人骨髓移植中EB病毒、CMV及BK病毒感染情況分析

葉曉佩,徐 維，楊 巖,孫 健,黃 丹,王 嬌，邵 靜,閆金松

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 血液科，遼寧 大連 116027；2.大連機車醫(yī)院 眼科，遼寧 大連 116021；3.大連醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院，遼寧 大連 116044)

論 著

成人骨髓移植中EB病毒、CMV及BK病毒感染情況分析

葉曉佩1,徐 維2，楊 巖1,孫 健1,黃 丹1,王 嬌1，邵 靜3,閆金松1

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 血液科，遼寧 大連 116027；2.大連機車醫(yī)院 眼科，遼寧 大連 116021；3.大連醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院，遼寧 大連 116044)

目的 監(jiān)測造血干細(xì)胞移植前后患者血液或尿液中EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)、巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus，CMV)、BK病毒(BK virus，BKV)的病毒感染情況及臨床特征。方法 收集大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院血液科2014年7月至2016年5月期間收治的45例成人造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem cell transplantation，HSCT)患者的臨床數(shù)據(jù)資料；從移植前3周開始應(yīng)用實時熒光定量PCR法檢測患者外周血EBV-DNA、CMV-DNA及尿液BKV-DNA的拷貝數(shù)，每周1次, 分析病毒感染情況。結(jié)果 實時熒光定量PCR擴(kuò)增法檢測出45例患者移植后的EBV感染率為26.7%(12/45)，感染中位時間為移植后+45 d，病毒血癥持續(xù)中位時間為39 d，其中僅1例男性患者發(fā)生淋巴細(xì)胞增殖性疾病(posttransplant lymphoproliferative disorders，PTLD)(1/45，2.22%)。CMV感染率為15.6%(7/45)，病毒血癥出現(xiàn)的中位時間為移植后+51 d，持續(xù)的中位時間為43 d，感染CMV的成人患者中未出現(xiàn)疑似CMV相關(guān)并發(fā)癥。BKV的感染率為46.7%(21/45)，病毒尿癥出現(xiàn)的中位時間為移植后+5 d，其持續(xù)中位時間為115 d，其中有12例(12/21，57.1%)發(fā)生出血性膀胱炎(hemorrhagic cystitis，HC)。結(jié)論 疾病類型、移植類型、移植物種類及年齡等是影響移植患者病毒感染的重要因素。實時熒光定量PCR檢測病毒DNA較為敏感，能對移植患者血液及尿液常見病毒DNA進(jìn)行實時檢測，以便及時發(fā)現(xiàn)感染，并予以及時診斷及預(yù)防治療。

造血干細(xì)胞移植；EB病毒；CMV；BK病毒

白血病及淋巴瘤等惡性疾病嚴(yán)重威脅著人們的生存與健康。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展，骨髓及造血干細(xì)胞移植(HSCT)使血液惡性腫瘤性疾病的治愈成為可能。但造血干細(xì)胞移植后復(fù)發(fā)、移植物抗宿主病及各種類型感染是影響移植后患者長期生存的重要因素。其中EB病毒(EBV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、BK病毒(BKV)等病毒感染是移植后常見的病毒感染類型，其相關(guān)因素包括高齡、異基因移植、移植物抗宿主病(graft-versus-host disease，GVHD)、預(yù)處理方案類型、移植前抗胸腺免疫球蛋白(antithymocyte globulin，ATG)的應(yīng)用等[1-4]。我們對本院造血干細(xì)胞移植后患者的EBV、CMV、BKV等病毒感染情況進(jìn)行了觀察。

1 資料與方法

1.1 研究對象

收集大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院血液科2014年7月至2016年5月期間進(jìn)行骨髓及外周造血干細(xì)胞移植的患者45例。所有患者年齡范圍18～61歲，平均年齡41.8歲；其中男性22例，年齡21～57歲，平均年齡40.2歲，中位年齡43歲；女性23例，年齡23～61歲，平均年齡43.3歲，中位年齡44歲。臨床診斷為急性髓細(xì)胞白血病(acute myelocytic leukemia, AML)19例(42.2%)；急性淋巴細(xì)胞白血病 (acute lymphocytic leukemia，ALL)7例(15.6%)，其中3例在移植時為慢性粒細(xì)胞白血病進(jìn)展為急性淋巴白血病變狀態(tài)，故根據(jù)其臨床特征及治療手段將其歸類為ALL組；其他共有19例(42.2%)，淋巴瘤(lymphoma)8例(17.8%)；多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma)4例(8.9%)，骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome，MDS)4例(8.9%)，慢性髓細(xì)胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)2例(4.4%)，再生障礙性貧血(alastic anemia，AA)1例(2.2%)。45例患者中自體造血干細(xì)胞移植12例，親緣全相合移植19例，單倍體半相合移植14例。所有患者診斷均符合《血液病診斷療效與標(biāo)準(zhǔn)》[5]，均經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等確診。

1.2 移植類型

所有患者中有自體造血干細(xì)胞移植患者12例；異基因移植前供受者進(jìn)行HLA-A、B、C、DR、DQ高分辨配型檢測，其中HLA配型全相合親緣移植患者19例，單倍體不全相合移植患者共14例。

1.3 預(yù)處理方案

異基因移植患者移植前預(yù)處理方案主要有改良Bu/Cy：Bu 0.8 mg/kg·6h-1，Cy 50 mg/kg；FLU/Cy方案：FLU 30 mg/ m2，Cy 1200 mg/m2；改良FLU/Bu方案：FLU 30 mg/m2，Bu 3.2 mg/kg。自體移植患者預(yù)處理方案主要為改良BEAM：BCNU 300 mg/m2，VP-16 100 mg/m2，Ara-C 200 mg/m2，Mel 140 mg/m2；高劑量馬法蘭： Mel 200 mg/m2。

1.4 免疫抑制劑應(yīng)用

移植后患者多采用免疫抑制劑以抑制免疫排異反應(yīng)-移植物抗宿主病(GVHD)，預(yù)防藥物主要有環(huán)孢素A、甲氨蝶呤、他克莫司、嗎替麥考酚酯等。環(huán)孢素的起始劑量一般為3 mg/kg，谷濃度維持在150～250 ng/mL之間；他克莫司起始劑量為0.03 mg/kg，濃度維持在10～20 ng/mL；甲氨蝶呤 15 mg/m2于移植后1 d，10 mg/m2于移植后3、6、11 d共4次。根據(jù)血藥濃度及副反應(yīng)癥狀調(diào)整藥物用量。

1.5 方 法

1.5.1 樣本采集

所有移植患者從移植前3周開始進(jìn)行病毒監(jiān)測，移植期間若病毒持續(xù)陰性則每周檢測1次至移植后100 d；若期間病毒轉(zhuǎn)陽則每周檢測2次直至轉(zhuǎn)陰；移植100 d以后病毒持續(xù)陰性者可以適當(dāng)延長監(jiān)測的周期至每月1次；移植2年后可延長至每2～6個月1次。

EBV及CMV檢測樣本為靜脈血，BKV檢測樣本為尿液；采集患者手臂靜脈血2 mL應(yīng)用EDTA抗凝，留取中段晨尿5 mL，血液及尿液標(biāo)本均4 ℃存放，24 h內(nèi)檢測。

1.5.2 DNA提取及PCR

血液中的DNA提?。簯?yīng)用紅細(xì)胞裂解液與血液樣本2∶1混勻，室溫靜置5 min，重復(fù)裂解2次；5000 r/min離心5 min棄上清，生理鹽水洗滌1次；沉淀加入50 μL核酸抽提液，混勻后2000 r/min離心10 s，100 ℃干浴10 min，12000 r/min離心10 min，取上清備用。尿液中的DNA提?。簩⒘羧∧蛞?2000 r/min離心10 min棄上清，沉淀加無菌生理鹽水1 mL吹勻，12000 r/min離心5 min棄上清。沉淀加入50 μL核酸抽提液充分混勻，100 ℃干浴10 min，12000 r/min離心10 min，取上清備用。紅細(xì)胞裂解液及核酸提取液及PCR反應(yīng)液均為試劑盒提供：EB病毒核酸定量檢測試劑盒(PCR熒光法)、人巨細(xì)胞病毒(HCMV)核酸定量檢測試劑盒(PCR熒光法)購自艾康生物技術(shù)有限公司；多瘤病毒核酸測定試劑盒(PCR熒光法)購自上海之江生物科技股份有限公司。

應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測血液及中尿液病毒DNA拷貝數(shù)，PCR反應(yīng)體系按照產(chǎn)品說明進(jìn)行；PCR設(shè)置反應(yīng)條件為37 ℃，2 min；94 ℃，2 min；93 ℃，15 s，60 ℃，60 s，循環(huán)40次，在60 ℃收集熒光，反應(yīng)體系為40 μL，熒光通道檢測選擇FAM和HEX(或VIC/JOE)通道，每次PCR均設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品4個。三種病毒典型的PCR擴(kuò)增曲線(以BKV為例)如圖1所示，其中1、2、3、4線為標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別代表拷貝數(shù)數(shù)量級為107、106、105、104(標(biāo)準(zhǔn)品樣品由各個試劑盒所提供，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖2)；5、6、7線為樣本擴(kuò)增曲線，其拷貝數(shù)(copies/mL)分別為31037661.184、115.3、0，根據(jù)試劑盒說明DNA拷貝數(shù)>500 copies/mL定義為陽性)。

1、2、3、4線為標(biāo)準(zhǔn)曲線；5、6、7線為樣本擴(kuò)增曲線圖1 感染病毒的患者病毒DNA的PCR擴(kuò)增曲線(以BKV為例)Fig 1 PCR amplification curve of the viral DNA in infected patients(take BKV as an example)

圖2 病毒DNA的PCR擴(kuò)增標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig 2 The PCR amplification standard curve of the virus-DNA

1.5.3 病毒預(yù)防及治療原則

抗病毒的常規(guī)用藥一般為阿昔洛韋、更昔洛韋、膦甲酸鈉等[1,6-8]。本研究中所有患者在移植前-7～-10 d預(yù)處理階段均予以更昔洛韋(5 mg/kg,q12 h)靜滴，至移植前-2 d改為阿昔洛韋(10 mg/kg,q8 h)預(yù)防病毒感染。根據(jù)歐洲第二次血液學(xué)年會關(guān)于HSCT后病毒感染的相關(guān)指南[9]與美國及加拿大血液與骨髓移植中心的感染性疾病控制指南[7，10]，移植后患者的病毒拷貝數(shù)升高>500 copies/mL，但未出現(xiàn)病毒相關(guān)疾病時予以抗病毒藥物搶先治療：若起始預(yù)防性抗病毒藥物為更昔洛韋，則更換抗病毒藥物為膦甲酸鈉(60 mg/kg,q12 h)，或更昔洛韋與膦甲酸鈉聯(lián)用；若起始抗病毒藥物為阿昔洛韋則更換為更昔洛韋(5 mg/kg,q12 h)或/和膦甲酸鈉。若病毒感染進(jìn)展為病毒性腦炎、肺炎、腸炎、膀胱炎等疾病時，需進(jìn)行聯(lián)合抗病毒治療，同時加用丙種免疫球蛋白提高機體免疫力，在疾病允許的情況下降低免疫抑制劑用量?？共《局委熤敝僚R床癥狀緩解或病毒拷貝數(shù)轉(zhuǎn)陰后2周，隨后繼續(xù)阿昔洛韋或泛昔洛韋維持治療。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用spss 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 移植受者的臨床特征及病毒感染情況

所有患者中共有12例發(fā)生EBV血癥(12/45，26.7%)，出現(xiàn)此病毒血癥的中位時間為移植后+45 d，其病毒血癥持續(xù)中位時間為39 d。其中女性患者EBV感染率稍高于男性患者(38.4% vs. 18.2%，P>0.05)，AML患者感染率顯著高于其他疾病患者(47.4% vs. 11.5%，P=0.015)，單倍型移植患者EBV感染率顯著高于全相合移植患者(64.3% vs. 15.8%，P=0.009)，同時進(jìn)行骨髓和外周干細(xì)胞移植的患者EBV感染率明顯高于僅進(jìn)行外周干細(xì)胞移植者(P=0.001)，自體移植患者無EBV感染。其中1例進(jìn)行5/10單倍型移植，移植物來源為骨髓及外周造血干細(xì)胞的男性急性髓細(xì)胞白血病患者在移植后+48 d開始出現(xiàn)EBV拷貝數(shù)升高，+57 d病毒拷貝數(shù)最高4.29×106copies/mL，同時出現(xiàn)淋巴細(xì)胞增殖性疾病(Posttransplant Lymphoproliferative disorders，PTLD)，發(fā)生率為2.2%(1/45)。

所有患者移植后CMV血癥的發(fā)生率為15.6%(7/45)，出現(xiàn)的中位時間為移植后+51 d，持續(xù)中位時間為43 d，病毒拷貝數(shù)最高達(dá)3.44×107copies/mL。其中女性患者CMV感染率稍高于男性患者(26.1% vs. 4.5%，P>0.05)，AML患者感染率顯著高于其他患者(31.6% vs. 3.8%，P=0.031)，單倍型移植高于全相合移植(28.6% vs. 15.8%，P>0.05)，同時進(jìn)行骨髓與外周干細(xì)胞移植者稍高于進(jìn)行外周干細(xì)胞移植(33.3% vs. 11.1%，P>0.05)。

移植后患者BKV尿癥的發(fā)生率為46.7%(21/45)，中位時間為移植后+5 d，持續(xù)中位時間為115 d，病毒拷貝數(shù)最高達(dá)5.25×1012copies/mL。其中有8例患者在移植前即存在BKV拷貝數(shù)升高，共有12例發(fā)生出血性膀胱炎，占BKV感染患者的57.1%(12/21)，占所有患者的26.7%(12/45)。其中女性患者BKV感染率高于男性患者(52.2% vs. 40.9%，P>0.05)，BKV感染患者中以ALL患者感染率較高，ALL、AML及其他患者患者相比(85.7% vs. 42.1% vs. 36.8%，P>0.05)，單倍型移植及全相合移植均高于自體移植分別為(64.3% vs. 8.3%，P=0.005)，(57.9% vs. 8.3%，P=0.008)，而全相合與半相合相比沒有顯著差異(64.3% vs. 57.9%，P>0.05)。所有移植受者的臨床特征及病毒感染情況統(tǒng)計見表1。

表1 45例成人造血干細(xì)胞移植患者的臨床特征及EBV、CMV、BKV感染情況Tab 1 Clinical features of the 45 adult patients with hematopoietic stem cell transplantation and their infections with EBV,CMV,BKV

AML:急性髓細(xì)胞白血病；ALL：急性淋巴細(xì)胞白血病；BM：骨髓；PBSC：外周造血干細(xì)胞；Bu：白消安；Cy：環(huán)磷酰胺；FLU：氟達(dá)拉濱；BEAM：卡莫司汀+依托泊苷+阿糖胞苷+馬法蘭

2.2 疾病轉(zhuǎn)歸

該45例成人患者中共7例發(fā)生死亡，其中4例患者出現(xiàn)移植后復(fù)發(fā)，其死亡原因為移植后原發(fā)疾病復(fù)發(fā)，腫瘤細(xì)胞高度增殖、多臟器累及等所導(dǎo)致。2例患者因多重感染導(dǎo)致的重度消耗及呼吸衰竭所致，1例患者因急性中毒腸道移植物抗宿主病所致。其中死亡前EBV感染2例，CMV感染1例，BKV感染2例，其死亡原因為原發(fā)疾病所致，與病毒感染無關(guān)。3例患者沒有出現(xiàn)EBV、CMV或BKV感染情況。

3 討 論

目前血液惡性腫瘤日漸增多，但醫(yī)學(xué)診療水平的不斷提高，特別是骨髓/造血干細(xì)胞移植(HSCT)使血液惡性疾病的治愈成為可能。由于造血干細(xì)胞移植的復(fù)雜性，移植后疾病的復(fù)發(fā)、移植物抗宿主病(GVHD)、病原體感染等成為影響移植后患者長期生存的重要因素。HSCT患者移植后由于免疫抑制劑的應(yīng)用、免疫重建緩慢等原因，使患者容易發(fā)生病毒感染或體內(nèi)潛伏病毒活化。EBV、CMV、BKV是造血干細(xì)胞移植后常見的病毒感染[1-2,4，11-12]，應(yīng)常規(guī)進(jìn)行各種感染的預(yù)防[13]。

據(jù)報道EBV的感染率為8.8%～58.8%[1,14-15]，大部分患者僅表現(xiàn)為EBV血癥，少數(shù)進(jìn)展為可致死性的移植后淋巴細(xì)胞增殖性疾病(Posttransplant Lymphoproliferative disorders，PTLD)。由EBV感染導(dǎo)致的PTLD使用利妥昔單抗治療(500 mg/次，q4w)[9]，同時結(jié)合患者病情降低免疫抑制藥物的劑量。EBV感染所致的淋巴細(xì)胞增殖性疾病(PTLD)是造血干細(xì)胞移植后少見但致命的的并發(fā)癥，其發(fā)生率為3～25%[1,14，16]，發(fā)生的中位時間為61天，其中單倍體移植患者移植后發(fā)生PTLD的危險性較高，應(yīng)用利妥昔單抗(rituximab，美羅華)治療患者的預(yù)后明顯優(yōu)于其他患者(2年OS：48.2% vs. 13.2%)[16]。本研究分析得到的EBV的感染率為26.7%，女性患者EBV感染率稍高于男性患者，AML患者感染率顯著高于其他疾病患者，單倍型移植患者EBV感染率顯著高于全相合移植患者，移植物來源為骨髓和外周干細(xì)胞移植的患者EBV感染率明顯高于僅進(jìn)行外周干細(xì)胞移植者，自體移植患者無EBV感染。其中PTLD的發(fā)生率為2.2%(1/45)。本研究中EBV激活率與文獻(xiàn)報道基本一致，PTLD的發(fā)生率則較文獻(xiàn)報道低，且由于臨床早期識別、及時干預(yù)，該名發(fā)生PTLD的患者預(yù)后良好。

在我國成人血清CMV-IgG陽性率幾乎為100%，即大部分人存在既往感染，CMV 感染可累及許多器官，如視網(wǎng)膜、肺、肝、消化道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等，其中最常見為累及肺臟，導(dǎo)致CMV相關(guān)間質(zhì)性肺炎，須早期診斷和治療否則病死率很高。據(jù)報道，在骨髓及外周造血干細(xì)胞移植患者中，CMV的感染率為32%～45.4%[4，17]，CMV感染患者與非感染患者相比死亡率增加[18]。CMV所致CMV間質(zhì)性肺炎的發(fā)生率最高可達(dá)20%～30%，病死率可達(dá)75%～90%[4,18]，而早期診斷和治療可顯著降低其死亡率。CMV病，如CMV肺炎或腸炎的一線治療應(yīng)用更昔洛韋及靜脈應(yīng)用免疫球蛋白(IVIG)，無效則加用膦甲酸鈉為二線治療方案[13]。本研究中所有患者移植前CMV-IgG的陽性率為91.1%(41/45)，提示大部分移植患者移植前存在既往感染；移植后患者CMV血癥的發(fā)生率為15.6%，AML患者感染率顯著高于其他患者，女性患者CMV感染率稍高于男性患者，單倍型移植稍高于全相合移植，同時進(jìn)行骨髓與外周干細(xì)胞移植者稍高于進(jìn)行外周干細(xì)胞移植。在感染CMV的成人患者中未出現(xiàn)CMV相關(guān)腸炎及CMV間質(zhì)性肺炎等。

出血性膀胱炎(HC)是移植后常見的泌尿系統(tǒng)疾病，分為急性型和遲發(fā)型；其中急性型主要由預(yù)處理及化療藥物引起，特別是環(huán)磷酰胺(Cy)，一般發(fā)生在移植后4周內(nèi)，由于目前化療方案的改良及預(yù)防措施的加強，其發(fā)生明顯減少；遲發(fā)型多在移植4周后發(fā)生，一般由病毒感染引起，其中主要為BKV。BKV感染后主要引起泌尿系統(tǒng)疾病，也可表現(xiàn)為無癥狀病毒血癥、病毒尿癥，造血干細(xì)胞移植后患者BKV的感染率可達(dá)35%～100%[2-3,11-12]，出血性膀胱炎(HC)是造血干細(xì)胞移植后常見的并發(fā)癥，其發(fā)生率為5%～68%[3,19]。非相關(guān)供者、單倍體及清髓性移植等均會增加BKV相關(guān)出血性膀胱炎的發(fā)生率，BKV與移植后嚴(yán)重并發(fā)癥及移植結(jié)果有很大的影響[8]。BKV尿癥對HC的發(fā)生有顯著意義，HC的發(fā)生和尿液BKV載量明顯相關(guān)，尿液BKV-DNA拷貝數(shù)>106copies/mL時，HC的發(fā)生率明顯升高(80% vs. 12%)[2]，其對HC的發(fā)生預(yù)測準(zhǔn)確性為90%以上，而HC的發(fā)生使移植后患者的2年存活率明顯降低(40% vs. 65%)[3]，可以為HC的診斷及預(yù)先治療、預(yù)后估計等提供重要依據(jù)，而BKV血癥對HC發(fā)生的預(yù)測意義不大[15，19]，因此臨床常規(guī)多進(jìn)行尿液BKV-DNA的檢測。本研究中采取檢測患者尿液中BKVDNA拷貝數(shù)，BKV尿癥的發(fā)生率為46.7%，在出現(xiàn)BKV尿癥的患者中有57.1%患者出現(xiàn)出血性膀胱炎，病毒拷貝數(shù)最高達(dá)5.25×1012copies/mL，其中女性患者感染率高于男性患者，疾病類型則以ALL患者感染率最高，單倍型移植及全相合移植患者BKV感染率均顯著高于自體移植，而全相合與半相合相比沒有顯著差異，同時接受骨髓與外周造血干細(xì)胞移植的患者與外周造血干細(xì)胞來源的患者的感染率之間無明顯差異，但兩者均顯著高于自體移植。本研究中BKV感染患者出現(xiàn)出血性膀胱炎的臨床癥狀時，其尿中BKV-DNA拷貝數(shù)基本都>105copies/mL，但同時另外9例出現(xiàn)病毒尿癥的患者BKV-DNA拷貝數(shù)均有超過105copies/mL，而并未出現(xiàn)出血性膀胱炎癥狀，說明密切監(jiān)測病毒拷貝數(shù)，及時發(fā)現(xiàn)病毒感染并予以相關(guān)治療對患者的臨床預(yù)后是很有意義的。

本院目前針對HC的治療因其嚴(yán)重度及等級不同而予以的相應(yīng)支持治療，大多數(shù)可采取保守治療，包括止痛、利尿、水化堿化尿液、持續(xù)膀胱灌洗、輸血、抗病毒治療后患者的臨床癥狀及病毒拷貝數(shù)均較前有所好轉(zhuǎn)，無效者可應(yīng)用膀胱灌洗或介入治療[6，8,11-12]。據(jù)Ordemann R及Leung AY等[20-21]研究顯示應(yīng)用雌激素及環(huán)丙沙星可以有效治療出血性膀胱炎，降低尿液BKV拷貝數(shù)。Miller等[22]前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，與歷史隊列中未予以環(huán)丙沙星治療的患者相比，在移植后0～60 d給予環(huán)丙沙星治療的患者可以顯著降低3～4級出血性膀胱炎的累積發(fā)生率，然而Phipps等[8]卻發(fā)現(xiàn)環(huán)丙沙星的應(yīng)用對移植后患者的BKV相關(guān)出血性膀胱炎的降低并沒有顯著的臨床意義，環(huán)丙沙星應(yīng)用于出血性膀胱炎需進(jìn)一步深入研究。而小劑量西多福韋應(yīng)用相對于大劑量應(yīng)用更為安全，能有效降低腎毒性及血液毒性，同時對于出血性膀胱炎的治療也是安全有效的[15，23]。

該研究局限性在于總體樣本量相對較小，但本院BKV累積感染率符合既往文獻(xiàn)報道，出現(xiàn)HC的患者比例則低于報道水平，而EBV、CMV累積感染率較文獻(xiàn)報道低；表明造血干細(xì)胞移植病房的清潔無菌程度、移植后患者的護(hù)理情況及移植前后病毒預(yù)防、感染后抗病毒治療等對于患者病毒感染的預(yù)防及治療是十分必要且有效的。應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)對病毒DNA的檢測敏感度好，穩(wěn)定性高，對移植后患者病毒感染的預(yù)防、診斷與治療都是十分必要的。

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Infection analysis of EB virus, CMV and BK virus in adults after bone marrow transplant

YE Xiaopei1, XU Wei2, YANG Yan1, SUN Jian1, HUANG Dan1, WANG Jiao1, SHAO Jing3, YAN Jinsong1

(1.DepartmentofHematology,theSecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116027,China; 2.DepartmentofOphtalmology,DalianLocomotiveHospital,Dalian116021,China; 3.DepartmentofOccupationalandEnvironmentalHealth,SchoolofPublicHealth,DalianMedicalUniversity,Dalian116044,China)

Objective To monitor viral infection and its clinical features in the patients after hematopoietic stem cell transplantation by detecting the gene copy numbers of Epstein-Barr virus (EBV) and Cytomegalovirus (CMV) in blood and BK virus (BKV) in urine via quantitative real-time PCR (QT-PCR). Methods The clinical data of 45 patients with hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) were collected and analyzed. The copy numbers of EBV-DNA, CMV-DNA, BKV-DNA were examined via QT-PCR at least once a week from three weeks before transplantation. Results The EBV infection rate was 26.7% (12/45) by QT-PCR; the median time was +45 day after the transplantation, and the median time of continued viremia was 39 days. Only 1 male patient developed post-transplant lymphoproliferative disorders (PTLD) (1/45, 2.22%). The CMV infection rate was 15.6% (7/45); the median time was +51 day, and the median time of continued viremia was 43 days. No adults had the relative syndrome. The BKV infection rate was 46.7% (21/45), the median time of viruria appeared was +5 day, and the median time of viruria continued was 115 days. Twelve cases developed hemorrhagic cystitis (HC), the BKV infection and HC incidence were higher in children than in adults. Conclusion The disease type, transplantation type, graft type and age are factors that impact the infection rate in patients after HSCT. The QT-PCR is more sensitive to detect the DNA copies. We should regularly detect the viral DNA in blood or urine of the post-transplanted patients in order to monitor the viral infections in patients so that we can discover the infection in time and make a diagnosis and preventive treatment.

hematopoietic stem cell transplantation (HSCT); EBV; CMV; BKV

遼寧省省直醫(yī)院改革重點臨床科室診療能力建設(shè)項目(LNCCC-A02-2015)

葉曉佩(1990-)，女，碩士研究生。E-mail：yexiaopei1104@126.com

閆金松，教授。E-mail：yanjsdmu@126.com

10.11724/jdmu.2017.01.08

R551

A

1671-7295(2017)01-0034-07

葉曉佩，徐維，楊巖,等.成人骨髓移植中EB病毒、CMV及BK病毒感染情況分析[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2017,39(1)：34-40.

2016-09-02;

2016-12-30)