自噬與腎癌發(fā)病相關(guān)性的研究進(jìn)展*

曹 琪， 白 鵬， 章小平△

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院 1泌尿外科 2心血管外科，武漢 430022

自噬與腎癌發(fā)病相關(guān)性的研究進(jìn)展*

曹 琪1， 白 鵬2， 章小平1△

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院1泌尿外科2心血管外科，武漢 430022

自噬； 腎癌； 腎癌治療

自噬是真核細(xì)胞中一種高度保守的分解代謝過(guò)程，在維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和應(yīng)激狀態(tài)下保留細(xì)胞生存能力方面發(fā)揮重要作用[1-2]。細(xì)胞通過(guò)雙層膜狀結(jié)構(gòu)的自噬體包裹待降解底物，并將其運(yùn)輸至溶酶體進(jìn)行降解和回收再利用[3]。自噬主要發(fā)生在缺氧、免疫損傷、應(yīng)激和營(yíng)養(yǎng)缺乏等情況下[4]，被認(rèn)為是細(xì)胞對(duì)不良環(huán)境刺激的一種防御機(jī)制[5]。研究表明，自噬參與多種疾病的病理過(guò)程，如腫瘤[6]、神經(jīng)退行性病變[7]、心血管疾病[8]、感染和免疫功能缺陷等[9]。近年來(lái)，許多學(xué)者就自噬與腎癌發(fā)病的相關(guān)性進(jìn)行了研究，但是，自噬在腎癌發(fā)病過(guò)程中所發(fā)揮的作用，以及其作用的確切機(jī)制尚不明確。本文就自噬與腎癌發(fā)病的相關(guān)研究進(jìn)展作一綜述，以期從自噬的角度探討腎癌的發(fā)病機(jī)制，同時(shí)為腎癌的治療提供一些線索和途徑。

1 自噬及其調(diào)控機(jī)制

自噬現(xiàn)象在40多年前就已經(jīng)被學(xué)者觀察到，被認(rèn)為是一個(gè)非特異性的胞內(nèi)大塊物質(zhì)降解過(guò)程[10]。接下來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)自噬與細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)有密切的關(guān)系。現(xiàn)在普遍認(rèn)為，自噬在多層面發(fā)揮多種關(guān)鍵作用，包括細(xì)胞質(zhì)量控制、維持組織穩(wěn)態(tài)、能量供應(yīng)等[11]。近年來(lái)，多種關(guān)鍵分子被發(fā)現(xiàn)參與自噬體的形成過(guò)程。該過(guò)程在酵母和人類中表現(xiàn)出高度的進(jìn)化保守性。一系列酵母中的自噬相關(guān)基因(ATGs)被發(fā)現(xiàn)，并找到了其哺乳類同源物[12]。

目前發(fā)現(xiàn)主要有以下4個(gè)功能單位參與自噬過(guò)程調(diào)控：①ATG1/unc-51樣激酶(ULK)復(fù)合物，包含ATG13和FIP200[13]；②由Vps34、Ⅲ型磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和ATG6/Beclin1組成的復(fù)合物[13]；③2個(gè)泛素樣蛋白，即微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)和ATG12[14]，LC3鑲嵌在自噬體內(nèi)、外膜上，ATG12與ATG5共軛并與ATG16L相互作用，參與LC3的脂化[15]；④跨膜蛋白ATG9和VMP1，ATG9在自噬過(guò)程中的具體作用尚不清楚，VMP1與Beclin1的相互作用是自噬所必需的，過(guò)表達(dá)VMP1可以誘導(dǎo)自噬發(fā)生[16]。

通常情況下，細(xì)胞中的自噬過(guò)程處于低水平狀態(tài)，但卻是維持細(xì)胞基本活動(dòng)所必需的，如蛋白質(zhì)和細(xì)胞器質(zhì)量控制。某些應(yīng)激狀態(tài)會(huì)誘導(dǎo)自噬發(fā)生。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)匱乏是一種典型的自噬激活因素，其主要是通過(guò)哺乳類雷帕霉素靶點(diǎn)(mTOR)，尤其是mTOR復(fù)合物1(mTORC1)信號(hào)通路發(fā)揮作用。在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充足時(shí)，mTOR結(jié)合并磷酸化ULK1復(fù)合物，限制其激酶活性，從而抑制自噬起始過(guò)程[17]。反之，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)匱乏時(shí)，ULK1被激活，促進(jìn)自噬起始過(guò)程。在低能量狀態(tài)(AMP/ATP升高)下ULK1也可被AMP活化蛋白激酶(AMPK)激活，同時(shí)抑制mTORC1促進(jìn)自噬發(fā)生[18]。自噬起始同樣被Ⅲ型PI3K和Vps34作用的產(chǎn)物磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P)激活。在Vps34和ULK1復(fù)合物的下游信號(hào)有ATG5-ATG12和LC3-PE(LC3Ⅱ)這2對(duì)共軛復(fù)合物參與自噬體膜的延伸過(guò)程。

其他的自噬激活因素還包括抗腫瘤治療、活性氧物質(zhì)(ROS)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、非折疊蛋白質(zhì)反應(yīng)(UPR)等[16]。各種激活因素所誘導(dǎo)的自噬過(guò)程是否有差異尚不明確，所以期待未來(lái)在待降解產(chǎn)物的選擇、自噬調(diào)控功能單位的參與以及尋找其它的特定自噬激活因素方面有新的發(fā)現(xiàn)。

2 自噬參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展

研究人員發(fā)現(xiàn)在乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌細(xì)胞中存在自噬調(diào)節(jié)因子Beclin1(BECN1)等位基因缺失，推測(cè)自噬對(duì)腫瘤形成有抑制效應(yīng)[19]。Liang等[20]發(fā)現(xiàn)在乳腺癌細(xì)胞系中重新表達(dá)BECN1蛋白后，自噬過(guò)程恢復(fù)的同時(shí)抑制了腫瘤發(fā)生。其他自噬相關(guān)調(diào)節(jié)因子的缺失同樣傾向于促進(jìn)腫瘤發(fā)生：ATG4C-/-小鼠在化學(xué)致癌物的誘導(dǎo)下表現(xiàn)出高的纖維肉瘤敏感性[21]；UVRAG結(jié)合蛋白BIF1是一種與BECN1相互作用的自噬正向調(diào)節(jié)因子，其完全缺失會(huì)引起小鼠腫瘤自發(fā)形成[22]；凋亡缺陷的ATG5-/-永生乳鼠腎細(xì)胞(iBMK)和BECN1+/-永生小鼠乳腺上皮細(xì)胞(iMMECs)相較于自噬功能完全的細(xì)胞更易使裸鼠發(fā)生腫瘤[23]；全身ATG5缺失和肝細(xì)胞特異性ATG7缺失均會(huì)導(dǎo)致自噬缺陷肝細(xì)胞發(fā)生肝良性腺瘤[24]。

小鼠自噬基因遺傳相關(guān)研究表明完整功能狀態(tài)的自噬對(duì)細(xì)胞存活和細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的維持是必不可少的。Degenhardt等[25]發(fā)現(xiàn)自噬缺陷會(huì)損害凋亡缺陷小鼠細(xì)胞在生長(zhǎng)因子缺乏和代謝應(yīng)激條件下的生存能力。而這一成果和腫瘤有極大的相關(guān)性，因?yàn)樵谥掳┗蚣せ钕履[瘤常常表現(xiàn)出高的代謝需求。腫瘤相對(duì)低氧區(qū)域細(xì)胞表現(xiàn)出更高的自噬激活[24]也支持上述論斷。有學(xué)者認(rèn)為，自噬在腫瘤放化療中發(fā)揮平復(fù)應(yīng)激作用對(duì)腫瘤細(xì)胞的生存是極為重要的，而抑制自噬則提高了腫瘤對(duì)治療的敏感性[26]。

總之，自噬在維持細(xì)胞生存和穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮了重要的作用。其在腫瘤發(fā)生中的作用可能是雙向的：一方面，自噬可以降低氧化應(yīng)激壓力、降解突變及受損的DNA和蛋白質(zhì)而發(fā)揮抑癌作用；另一方面，自噬可以平復(fù)氧化應(yīng)激、受損DNA及蛋白聚集等各種壓力，促進(jìn)細(xì)胞存活，發(fā)揮促癌的作用。這種雙向作用可能與以下因素有關(guān)：①腫瘤分期，如起始期、進(jìn)展期、轉(zhuǎn)移期或逐漸發(fā)生的藥物抵抗階段；②腫瘤的組織類型；③腫瘤的遺傳學(xué)改變。了解自噬在腫瘤發(fā)生中的作用毫無(wú)疑問(wèn)對(duì)建立合理的針對(duì)自噬的抗腫瘤治療方案大有裨益。

3 與腎癌發(fā)病相關(guān)的自噬信號(hào)

3.1 自噬相關(guān)PI3K/AKT/mTOR通路

持續(xù)性激活的PI3K/AKT/mTOR信號(hào)軸是人類腫瘤細(xì)胞一種典型的生存機(jī)制[27]。多種情況下，如腫瘤抑制因子人類第10號(hào)染色體張力蛋白同源基因(PTEN)和結(jié)節(jié)硬化復(fù)合物(TSC)1和TSC2的缺失、Ⅰ型PI3K的突變、AKT的過(guò)表達(dá)、酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子受體的持續(xù)激活等均導(dǎo)致此信號(hào)通路的異常激活，最終抑制自噬過(guò)程[28]。PI3K/AKT/mTOR軸的激活不僅抑制自噬，同時(shí)促進(jìn)蛋白質(zhì)翻譯和細(xì)胞生長(zhǎng)增殖。抑制PI3K信號(hào)軸將對(duì)快速增殖的腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生不良影響，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。Sourbier等[29]用Western blot法分析后發(fā)現(xiàn)，在7種腎癌細(xì)胞系(786-O、UOK-126、UOK-128、A498、ACHN、Caki-1和Caki-2)中，同正常腎組織相比AKT的S473和T308位點(diǎn)磷酸化增多使AKT表達(dá)出現(xiàn)上調(diào)，而AKT的表達(dá)與PI3K的表達(dá)呈正比，與PTEN的表達(dá)呈反比。為確認(rèn)PI3K/AKT通路是否參與了腎腫瘤細(xì)胞增殖，該團(tuán)隊(duì)用特異性PI3K抑制劑LY294002處理786-O和Caki-1兩種細(xì)胞系后發(fā)現(xiàn)，其細(xì)胞死亡數(shù)相比對(duì)照組明顯增多，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Zheng等[30]則用mTOR抑制劑AZD-2014處理786-O和A498兩種腎癌細(xì)胞系后檢測(cè)細(xì)胞生存能力，發(fā)現(xiàn)與傳統(tǒng)的雷帕霉素相比，該組細(xì)胞生存能力明顯下降，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。該學(xué)者認(rèn)為這一結(jié)果表明AZD-2014可以明顯抑制腎腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，進(jìn)一步推測(cè)抑制PI3K信號(hào)軸是抗腎細(xì)胞癌治療的新的有效途徑。

3.2 自噬相關(guān)p53蛋白與腎癌

腫瘤抑制因子p53是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中一種重要的檢查點(diǎn)蛋白[31]，其在DNA損傷、低氧、致癌基因激活等遺傳應(yīng)激條件下激活產(chǎn)生。在這些情況下，p53可以反式激活自噬誘導(dǎo)基因，同時(shí)通過(guò)AMPK和TSC1/TSC2依賴途徑抑制mTOR來(lái)促進(jìn)自噬[32]。p53也可直接作用于損傷調(diào)控自噬調(diào)節(jié)因子(DRAM)靶點(diǎn)誘導(dǎo)自噬[33]。但是，有研究發(fā)現(xiàn)通過(guò)基因或藥物途徑清除胞質(zhì)中p53可以誘導(dǎo)自噬[34]，表明核外p53是一種有效的自噬抑制因子。然而，p53在何種環(huán)境下以何種分子途徑激活自噬來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)尚不明確。近年來(lái)2項(xiàng)大樣本臨床研究發(fā)現(xiàn)腎細(xì)胞癌標(biāo)本中有p53的過(guò)表達(dá)(36%，n=97；29.5%，n=297)[35-36]，推測(cè)p53參與腎細(xì)胞癌的發(fā)生。Sinik等[37]發(fā)現(xiàn)p53過(guò)表達(dá)與腎細(xì)胞癌1年死亡率有極大的相關(guān)性(P=0.011)。Zigeuner等[36]還發(fā)現(xiàn)大部分轉(zhuǎn)移期腎細(xì)胞癌存在p53過(guò)表達(dá)(51.8%，n=56，P<0.05)。該學(xué)者還通過(guò)對(duì)130例腎細(xì)胞癌患者的生存分析(Kaplan-Meier曲線)發(fā)現(xiàn)p53過(guò)表達(dá)患者生存率相比非過(guò)表達(dá)患者明顯下降(P=0.0005)。上述研究進(jìn)一步表明p53可能與腎細(xì)胞癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。Warburton等[38]用紫外線處理3種腎癌細(xì)胞系(ACHN，Caki-2，A498)介導(dǎo)DNA損傷后發(fā)現(xiàn)p53的轉(zhuǎn)錄活性分別是原來(lái)的1.4倍、2倍、8倍，而且其轉(zhuǎn)錄活性的提高與紫外線劑量呈正相關(guān)，以此推測(cè)p53在修復(fù)DNA損傷和維持細(xì)胞生長(zhǎng)方面發(fā)揮了一定作用。上述研究為我們通過(guò)抑制p53來(lái)提高某些藥物對(duì)腎腫瘤的療效提供了一些啟示，而這一作用的發(fā)揮可能與抑制了p53誘導(dǎo)的自噬過(guò)程有關(guān)。

3.3 LC3B依賴的自噬途徑

LC3B是一種酵母類自噬相關(guān)蛋白ATG8在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的同源物[39]，其C-段甘氨酸與磷脂酰乙醇胺(PE)結(jié)合，形成脂化的LC3(LC3-Ⅱ)。LC3-Ⅱ鑲嵌于自噬體膜上，參與自噬體膜的延長(zhǎng)[40]。Mikhaylova等[41]通過(guò)一系列研究發(fā)現(xiàn)LC3B依賴的自噬是腎細(xì)胞癌生長(zhǎng)所必需的。該團(tuán)隊(duì)將含有抑制LC3B的shRNA慢病毒顆粒注射至裸鼠皮下的腎癌細(xì)胞系786-O型腫瘤中，發(fā)現(xiàn)9 d后的腫瘤體積明顯比對(duì)照組小(P=0.000 7)。而將穩(wěn)定表達(dá)shRNA的786-O注射至裸鼠腎包膜下，4周后發(fā)現(xiàn)腫瘤質(zhì)量也明顯比對(duì)照組小(P<0.05)。相似的結(jié)果同樣出現(xiàn)在另一種腎癌細(xì)胞系A(chǔ)498中，表明LC3B介導(dǎo)的自噬是裸鼠腎細(xì)胞癌生長(zhǎng)所必需的。該團(tuán)隊(duì)用定量免疫印跡法測(cè)得在人腎透明細(xì)胞癌(ccRCC)組織和正常腎組織LC3B的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)量與腫瘤分期呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，進(jìn)一步推測(cè)LC3B介導(dǎo)的自噬是ccRCC進(jìn)展的重要調(diào)節(jié)方式。

3.4 MAP1S激活的自噬途徑

MAP1S是細(xì)胞微管相關(guān)蛋白家族1成員之一，其與LC3相互作用，是自噬的一個(gè)正向調(diào)節(jié)因子[42]。MAP1S缺失會(huì)導(dǎo)致自噬缺陷，從而引起線粒體功能障礙，影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。同時(shí)MAP1S被發(fā)現(xiàn)是腫瘤患者一個(gè)重要的生存相關(guān)基因[43]。MAP1S缺陷小鼠有更大的肝細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移傾向[44]。人類前列腺腺癌中MAP1S的低表達(dá)會(huì)減少患者的平均生存時(shí)間[45]。據(jù)此我們認(rèn)為MAP1S介導(dǎo)的自噬可能與腫瘤轉(zhuǎn)移和患者預(yù)后相關(guān)。ccRCC是人類腎細(xì)胞癌中最常見(jiàn)的類型。Xu等[46]發(fā)現(xiàn)4種ccRCC細(xì)胞系(786-O、RCC4、A498、Caki-1)中MAP1S表達(dá)水平明顯低于人正常腎細(xì)胞系(HK-2)，而在76位ccRCC患者腫瘤標(biāo)本中癌灶區(qū)MAP1S表達(dá)水平也明顯低于癌旁正常組織。該團(tuán)隊(duì)通過(guò)統(tǒng)計(jì)繪制的ccRCC患者Kaplan-Meier生存曲線也發(fā)現(xiàn)高表達(dá)MAP1S患者累計(jì)生存時(shí)間明顯高于低表達(dá)者(P<0.01)。上述研究表明MAP1S介導(dǎo)的自噬與ccRCC的發(fā)展與預(yù)后有關(guān)，高水平的MAP1S水平激活自噬，降低細(xì)胞基因組的不穩(wěn)定性，減弱ccRCC的侵襲力，提高患者的生存時(shí)間。

3.5 自噬相關(guān)KEAP1/NRF2通路

轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2(NRF2)可激活多種抗氧化目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄，Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1(KEAP1)是其抑制劑。在通常情況下，KEAP1可以將NRF2“鎖”在胞質(zhì)中，并促進(jìn)其降解[47]；該通路在包括急性和慢性腎損傷以及腎臟腫瘤中都發(fā)揮著重要作用[48-49]。研究表明，在缺乏富馬酸水合酶(FH)的Ⅱ型乳頭狀腎細(xì)胞癌中，KEAP1的琥珀化增多、NRF2降解減少，從而激活HMOX1等應(yīng)激反應(yīng)基因，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活[50]。Fabrizio等[51]發(fā)現(xiàn)啟動(dòng)子甲基化后引起的KEAP1基因表達(dá)下降，從而使NRF2表達(dá)增加，在腎透明細(xì)胞癌中起到了重要作用。而p62作為一種自噬的底物蛋白，是NRF2的關(guān)鍵激動(dòng)劑[52]。自噬缺陷的細(xì)胞中，p62降解減少，當(dāng)p62與KEAP1競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合時(shí)，NRF2得到釋放，并進(jìn)入細(xì)胞核，激活下游目標(biāo)基因轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活[53]。這表明自噬相關(guān)的KEAP1/NRF2通路在腎癌的發(fā)展過(guò)程中起著重要的調(diào)控作用。

4 總結(jié)與展望

盡管目前學(xué)術(shù)界就自噬與腎癌的相關(guān)性及相互作用機(jī)制進(jìn)行了較為廣泛的探討，然而自噬與腎癌發(fā)病的確切關(guān)系、自噬通過(guò)何種途徑參與腎癌的發(fā)病尚不明確，仍需要大量的相關(guān)研究。目前，臨床上對(duì)腎癌的治療多采用腎部分切除及腎癌根治術(shù)，術(shù)后多采用白細(xì)胞介素及干擾素治療，療效不確切。深入認(rèn)識(shí)自噬的功能并最終將其應(yīng)用于臨床實(shí)踐將會(huì)為腎癌的防治開(kāi)啟一個(gè)新的方向，雖任重道遠(yuǎn)，卻意義重大。

[1] Mizushima N.Autophagy：process and function[J].Genes Dev，2007，21(22)：2861-2873.

[2] Yang Z，Klionsky D J.Eaten alive：a history of macroautophagy[J].Nat Cell Biol，2010，12(9)：814-822.

[3] Klionsky D J，Emr S D.Autophagy as a regulated pathway of cellular degradation[J].Science，2000，290(5497)：1717-1721.

[4] Mizushima N，Ohsumi Y，Yoshimori T.Autophagosome formation in mammalian cells[J].Cell Struct Funct，2002，27(6)：421-429.

[5] Lum J J，DeBerardinis R J，Thompson C B.Autophagy in metazoans：cell survival in the land of plenty[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2005，6(6)：439-448.

[6] Dikic I，Johansen T，Kirkin V.Selective autophagy in cancer development and therapy[J].Cancer Res，2010，70(9)：3431-3434.

[7] Schaeffer V，Lavenir I，Ozcelik S，et al.Stimulation of autophagy reduces neurodegeneration in a mouse model of human tauopathy[J].Brain，2012，135(Pt 7)：2169-2177.

[8] Liao X，Sluimer J C，Wang Y，et al.Macrophage autophagy plays a protective role in advanced atherosclerosis[J].Cell Metab，2012，15(4)：545-553.

[9] Kim J J，Lee H M，Shin D M，et al.Host cell autophagy activated by antibiotics is required for their effective antimycobacterial drug action[J].Cell Host Microbe，2012，11(5)：457-468.

[10] De Duve C，Wattiaux R.Functions of lysosomes[J].Annu Rev Physiol，1966，28：435-492.

[11] Mizushima N，Levine B，Cuervo A M，et al.Autophagy fights disease through cellular self-digestion[J].Nature，2008，451(7182)：1069-1075.

[12] Chen N，Karantza-Wadsworth V.Role and regulation of autophagy in cancer[J].Biochim Biophys Acta，2009，1793(9)：1516-1523.

[13] Simonsen A，Tooze S A.Coordination of membrane events during autophagy by multiple class III PI3-kinase complexes[J].J Cell Biol，2009，186(6)：773-782.

[14] Geng J，Klionsky D J.The Atg8 and Atg12 ubiquitin-like conjugation systems in macroautophagy.‘Protein modifications：beyond the usual suspects’ review series[J].EMBO Rep，2008，9(9)：859-864.

[15] Hanada T，Noda N N，Satomi Y，et al.The Atg12-Atg5 conjugate has a novel E3-like activity for protein lipidation in autophagy[J].J Biol Chem，2007，282(52)：37298-37302.

[16] Kimmelman A C.The dynamic nature of autophagy in cancer[J].Genes Dev，2011，25(19)：1999-2010.

[17] Jung C H，Ro S H，Cao J，et al.mTOR regulation of autophagy[J].FEBS Lett，2010，584(7)：1287-1295.

[18] Gwinn D M，Shackelford D B，Egan D F，et al.AMPK phosphorylation of raptor mediates a metabolic checkpoint[J].Mol Cell，2008，30(2)：214-226.

[19] Aita V M，Liang X H，Murty V V，et al.Cloning and genomic organization of beclin 1，a candidate tumor suppressor gene on chromosome 17q21[J].Genomics，1999，59(1)：59-65.

[20] Liang X H，Jackson S，Seaman M，et al.Induction of autophagy and inhibition of tumorigenesis by beclin 1[J].Nature，1999，402(6762)：672-676.

[21] Marino G，Salvador-Montoliu N，F(xiàn)ueyo A，et al.Tissue-specific autophagy alterations and increased tumorigenesis in mice deficient in Atg4C/autophagin-3[J].J Biol Chem，2007，282(25)：18573-18583.

[22] Takahashi Y，Coppola D，Matsushita N，et al.Bif-1 interacts with Beclin 1 through UVRAG and regulates autophagy and tumorigenesis[J].Nat Cell Biol，2007，9(10)：1142-1151.

[23] Karantza-Wadsworth V，Patel S，Kravchuk O，et al.Autophagy mitigates metabolic stress and genome damage in mammary tumorigenesis[J].Genes Dev，2007，21(13)：1621-1635.

[24] Takamura A，Komatsu M，Hara T，et al.Autophagy-deficient mice develop multiple liver tumors[J].Genes Dev，2011，25(8)：795-800.

[25] Degenhardt K，Mathew R，Beaudoin B，et al.Autophagy promotes tumor cell survival and restricts necrosis，inflammation，and tumorigenesis[J].Cancer Cell，2006，10(1)：51-64.

[26] Wang K，Liu R，Li J，et al.Quercetin induces protective autophagy in gastric cancer cells：involvement of Akt-mTOR-and hypoxia-induced factor 1 alpha-mediated signaling[J].Autophagy，2011，7(9)：966-978.

[27] LoPiccolo J，Blumenthal G M，Bernstein W B，et al.Targeting the PI3K/Akt/mTOR pathway：effective combinations and clinical considerations[J].Drug Resist Updat，2008，11(1/2)：32-50.

[28] Arico S，Petiot A，Bauvy C，et al.The tumor suppressor PTEN positively regulates macroautophagy by inhibiting the phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B pathway[J].J Biol Chem，2001，276(38)：35243-35246.

[29] Sourbier C，Lindner V，Lang H，et al.The phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway：a new target in human renal cell carcinoma therapy[J].Cancer Res，2006，66(10)：5130-5142.

[30] Zheng B，Mao J H，Qian L，et al.Pre-clinical evaluation of AZD-2014，a novel mTORC1/2 dual inhibitor，against renal cell carcinoma[J].Cancer Lett，2015，357(2)：468-475.

[31] Levine A J.p53，the cellular gatekeeper for growth and division[J].Cell，1997，88(3)：323-331.

[32] Feng Z，Hu W，de Stanchina E，et al.The regulation of AMPK beta1，TSC2，and PTEN expression by p53：stress，cell and tissue specificity，and the role of these gene products in modulating the IGF-1-AKT-mTOR pathways[J].Cancer Res，2007，67(7)：3043-3053.

[33] Crighton D，Wilkinson S，O’Prey J，et al.DRAM，a p53-induced modulator of autophagy，is critical for apoptosis[J].Cell，2006，126(1)：121-134.

[34] Tasdemir E，Maiuri M C，Galluzzi L，et al.Regulation of autophagy by cytoplasmic p53[J].Nat Cell Biol，2008，10(6)：676-687.

[35] Haitel A，Wiener H G，Baethge U，et al.mdm2 expression as a prognostic indicator in clear cell renal cell carcinoma：comparison with p53 overexpression and clinicopathological parameters[J].Clin Cancer Res，2000，6(5)：1840-1844.

[36] Zigeuner R，Ratschek M，Rehak P，et al.Value of p53 as a prognostic marker in histologic subtypes of renal cell carcinoma：a systematic analysis of primary and metastatic tumor tissue[J].Urology，2004，63(4)：651-655.

[37] Sinik Z，Alkibay T，Ataoglu O，et al.Nuclear p53 overexpression in bladder，prostate，and renal carcinomas[J].Int J Urol，1997，4(6)：546-551.

[38] Warburton H E，Brady M，Vlatkovic N，et al.p53 regulation and function in renal cell carcinoma[J].Cancer Res，2005，65(15)：6498-6503.

[39] Tanida I，Ueno T，Kominami E.LC3 conjugation system in mammalian autophagy[J].Int J Biochem Cell Biol，2004，36(12)：2503-2518.

[40] Weidberg H，Shvets E，Shpilka T，et al.LC3 and GATE-16/GABARAP subfamilies are both essential yet act differently in autophagosome biogenesis[J].EMBO J，2010，29(11)：1792-1802.

[41] Mikhaylova O，Stratton Y，Hall D，et al.VHL-regulated MiR-204 suppresses tumor growth through inhibition of LC3B-mediated autophagy in renal clear cell carcinoma[J].Cancer Cell，2012，21(4)：532-546.

[42] Xie R，Nguyen S，McKeehan K，et al.Microtubule-associated protein 1S(MAP1S)bridges autophagic components with microtubules and mitochondria to affect autophagosomal biogenesis and degradation[J].J Biol Chem，2011，286(12)：10367-10377.

[43] Vandin F，Clay P，Upfal E，et al.Discovery of mutated subnetworks associated with clinical data in cancer[J].Pac Symp Biocomput，2012：55-66.

[44] Xie R，Wang F，McKeehan W L，et al.Autophagy enhanced by microtubule-and mitochondrion-associated MAP1S suppresses genome instability and hepatocarcinogenesis[J].Cancer Res，2011，71(24)：7537-7546.

[45] Jiang X，Zhong W，Huang H，et al.Autophagy defects suggested by low levels of autophagy activator MAP1S and high levels of autophagy inhibitor LRPPRC predict poor prognosis of prostate cancer patients[J].Mol Carcinog，2015，54(10)：1194-1204.

[46] Xu G，Jiang Y，Xiao Y，et al.Fast clearance of lipid droplets through MAP1S-activated autophagy suppresses clear cell renal cell carcinomas and promotes patient survival[J].Oncotarget，2016，7(5)：6255-6265.

[47] Tong K I，Padmanabhan B，Kobayashi A，et al.Different electrostatic potentials define ETGE and DLG motifs as hinge and latch in oxidative stress response[J].Mol Cell Biol，2007，27(21)：7511-7521.

[48] Lee D F，Kuo H P，Liu M，et al.KEAP1E3 ligase-mediated downregulation of NF-kappaB signaling by targeting IKKbeta[J].Mol Cell，2009，36(1)：131-140.

[49] Sporn M B，Liby K T.NRF2 and cancer：the good，the bad and the importance of context[J].Nat Rev Cancer，2012，12(8)：564-571.

[50] Kinch L，Grishin N V，Brugarolas J.Succination of Keap1 and activation of Nrf2-dependent antioxidant pathways in FH-deficient papillary renal cell carcinoma type 2[J].Cancer Cell，2011，20(4)：418-420.

[51] Fabrizio F P，Costantini M，Copetti M，et al.Keap1/Nrf2 pathway in kidney cancer：frequent methylation of KEAP1 gene promoter in clear renal cell carcinoma[J].Oncotarget，2017，8(7)：11187-11198..

[52] Lau A，Wang X J，Zhao F，et al.A noncanonical mechanism of Nrf2 activation by autophagy deficiency：direct interaction between Keap1 and p62[J].Mol Cell Biol，2010，30(13)：3275-3285.

[53] Villeneuve N F，Lau A，Zhang D D.Regulation of the Nrf2-Keap1 antioxidant response by the ubiquitin proteasome system：an insight into cullin-ring ubiquitin ligases[J].Antioxid Redox Signal，2010，13(11)：1699-1712.

*國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81672528)

曹 琪，男，1992年生，博士研究生，E-mail：curkey@126.com

△通訊作者，Corresponding author，E-mail：xzhang@hust.edu.cn

R737.11

10.3870/j.issn.1672-0741.2017.06.021

(2017-03-29 收稿)