1858例痰培養(yǎng)樣本的質(zhì)量評(píng)價(jià)

靳情　嚴(yán)威　朱國(guó)勇

摘要：目的 探討痰標(biāo)本的質(zhì)量對(duì)培養(yǎng)結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 收集我院2015年3月～9月的1858例痰標(biāo)本，進(jìn)行涂片、革蘭染色、鏡檢，根據(jù)涂片染色結(jié)果，并對(duì)上述痰標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定，分析鏡檢結(jié)果與細(xì)菌檢出率的關(guān)系。結(jié)果 1858例痰標(biāo)本中，涂片合格標(biāo)本1150例，占61.89%；不合格標(biāo)本708例，占38.11%。共檢出847株細(xì)菌。在1150涂片合格的標(biāo)本中，細(xì)菌檢出率為73.65%，合格痰標(biāo)本涂片結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果的符合率為67.13%。在708例涂片不合格的標(biāo)本中，檢出212株細(xì)菌，細(xì)菌檢出率為29.94%。結(jié)論 痰培養(yǎng)標(biāo)本的質(zhì)量非常重要，而涂片革蘭染色鏡檢能在早期為呼吸道感染的診斷和治療提供重要信息，可以篩除不合格的痰標(biāo)本，提高痰培養(yǎng)的細(xì)菌檢出率，有效指導(dǎo)臨床用藥。

關(guān)鍵詞：質(zhì)量分析；痰涂片；革蘭染色；細(xì)菌培養(yǎng)；病原菌

院內(nèi)感染的發(fā)生是臨床較難攻克的難題，最為常見(jiàn)的感染以下呼吸道感染所占比例為主。痰培養(yǎng)對(duì)下呼吸道感染性疾病的病原診斷、指導(dǎo)臨床用藥有著非常重要的參考價(jià)值。培養(yǎng)前痰標(biāo)本的質(zhì)量是關(guān)鍵。如何培養(yǎng)出真正的致病菌，取決于樣本采集。因此，對(duì)痰標(biāo)本的質(zhì)量做評(píng)價(jià)至關(guān)重要。涂片革蘭染色鏡檢，不僅可以為診斷提供快速有價(jià)值的信息，對(duì)微生物鑒定過(guò)程還能起到引導(dǎo)作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 標(biāo)本采集2015年3月～9月，1858例痰標(biāo)本來(lái)自襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院就診。在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下，清晨漱口，清洗咽喉、深咳痰液于一次性無(wú)菌痰杯中；對(duì)于重癥患者，可經(jīng)氣管插管或氣管切開(kāi)處，用一次性吸痰管抽取呼吸道標(biāo)本，立即送檢。

1.2涂片制備與染色鏡檢 用無(wú)菌棉簽挑取膿性、粘稠的痰，直接涂片，自然干燥后經(jīng)甲醇固定或火焰快速固定3次，革蘭染色鏡檢。

1.3鏡檢結(jié)果記錄 白細(xì)胞>25個(gè)/LP，上皮細(xì)胞<10個(gè)/LP的標(biāo)本為合格標(biāo)本；白細(xì)胞<10個(gè)/LP，上皮細(xì)胞>25個(gè)/LP的標(biāo)本為不合格標(biāo)本，聯(lián)系臨床重留。

1.4標(biāo)本的培養(yǎng)、分離及鑒定 經(jīng)鏡檢合格的痰標(biāo)本用液化劑（sputasol，code SR089A，OXOZD產(chǎn)品）使痰液化，分別接種于血平板、巧克力平板，在5%～10%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，35℃～37℃孵育18～24 h；真菌接種沙氏培養(yǎng)基。對(duì)分離的可疑菌落進(jìn)行染色鏡檢，通過(guò)生化反應(yīng)和藥敏試驗(yàn)，鑒定細(xì)菌[1]。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用統(tǒng)計(jì)軟件分析，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1痰標(biāo)本的細(xì)菌檢出率 1858例痰標(biāo)本中1150例標(biāo)本檢出有細(xì)菌（除口腔正常菌群），陽(yáng)性檢出率為61.89%，合格標(biāo)本的檢出率為73.65%（847/1150），不合格標(biāo)本的檢出率為29.94%（212/708），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

2.2合格痰標(biāo)本涂片與培養(yǎng)結(jié)果顯示 鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果均為陽(yáng)性者有592份，鏡檢陽(yáng)性而培養(yǎng)結(jié)果為陰性者有123份，鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果均為陰性者有180份，合格痰標(biāo)本涂片結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其符合率為67.13%（772/1150），真陽(yáng)性率為69.9%（592/847）。

3 討論

痰培養(yǎng)結(jié)果是判斷呼吸道感染的重要依據(jù)之一，而其培養(yǎng)結(jié)果主要依靠痰標(biāo)本的質(zhì)量。由于痰液中細(xì)菌種類復(fù)雜多樣，常出現(xiàn)多種細(xì)菌混合感染，以及樣本留取質(zhì)量等多種分析前因素的影響，導(dǎo)致臨床微生物室痰液培養(yǎng)陽(yáng)性率不高。然而臨床醫(yī)生使用抗生素須依靠其培養(yǎng)結(jié)果，所以其準(zhǔn)確性非常重要。正確留取標(biāo)本對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要[1-2]根據(jù)ABC分類法對(duì)痰標(biāo)本是否合格進(jìn)行分類，各地均有報(bào)道且各不相同，本文對(duì)1858例痰標(biāo)本進(jìn)行研究，1150份樣本合格，合格樣本檢出率73.65%，與2013年陳險(xiǎn)峰報(bào)道492例痰標(biāo)本，合格368 例，占74.80%[3-6]，基本相符。合格痰標(biāo)本涂片結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果符合率為67.13%（772/1150），國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道[7]，二者符合率達(dá)80.20%；本文比上述報(bào)道結(jié)果偏低，說(shuō)明分析前的質(zhì)量控制做的不是很好，樣本合格率有待提高。然而合格標(biāo)本檢出率高，并不等于在實(shí)際工作中將不合格標(biāo)本一概拒收。有文章報(bào)道不合格的標(biāo)本，存在潛在的致病菌[8]。因此，在實(shí)際工作中，需要大量積累經(jīng)驗(yàn)，判斷這類標(biāo)本的陽(yáng)性是由何種原因引起，唾液污染還是真正致病菌？另文獻(xiàn)報(bào)道也證實(shí)提高痰標(biāo)本送檢質(zhì)量確實(shí)有助于提高培養(yǎng)陽(yáng)性率[8]。

綜上所述，判斷痰標(biāo)本質(zhì)量最直接的方法就是涂片革蘭染色，其結(jié)果比培養(yǎng)快，并且能在早期為患者的治療和診斷提供重要信息。痰涂片革蘭染色可以篩選出合格的痰標(biāo)本，提高痰培養(yǎng)的細(xì)菌檢出率[7]若對(duì)痰標(biāo)本不進(jìn)行鏡檢剔除，所有痰標(biāo)本均進(jìn)行培養(yǎng)，會(huì)使細(xì)菌檢出率下降，有可能導(dǎo)致病原學(xué)診斷的錯(cuò)誤。檢驗(yàn)人員在鑒定細(xì)菌時(shí)應(yīng)結(jié)合涂片與培養(yǎng)結(jié)果，判斷兩者是否一致，這種做法有助于提高痰標(biāo)本細(xì)菌檢出的準(zhǔn)確性，且具有重要鑒定價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜，等.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版，南京：東南大學(xué)出版社，2006：736-753.

[2]郭基平，袁暉蓉，陳幼紅，等.標(biāo)本涂片革蘭染色在臨床微生物檢驗(yàn)中的作用[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2006，32（3）.

[3]韓志偉，廖雪梅. 痰標(biāo)本涂片檢查與培養(yǎng)結(jié)果分析[J]. 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2003，15（5）：279-280.

[4]楊嬌英，鐘毓瓊，蔡志軍. 85 份合格咳痰標(biāo)本涂片檢查與培養(yǎng)結(jié)果分析[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6（7）：556-557.

[5]肖卓. 痰涂片革蘭氏染色臨床價(jià)值探討[J]. 黑龍江醫(yī)學(xué)，2004，47（ 9）：682.

[6]陳險(xiǎn)峰，周庭銀.痰涂片革蘭氏染色鏡檢的臨床意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，28（6）：499.

[7]Pagano L，Girmenia C，Melel L，et a1.Infections caused by filamentous fungi inpatients with hematologic malignancies.Areport of391cases byGMEMA Infection ProgramD[J].Haemtologica，2001，86.

[8]楊朵，辛續(xù)麗，馬東媛，等.痰培養(yǎng)標(biāo)本合格性評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)的比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27（9）：773-775.

編輯/金昊天