杜仲化學(xué)成分的LC-Triple TOF MS/MS分析

嚴(yán) 穎，趙 慧，鄒立思，劉訓(xùn)紅，柴 川，王勝男，華愉教

(南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 210023)

杜仲化學(xué)成分的LC-Triple TOF MS/MS分析

嚴(yán) 穎，趙 慧，鄒立思，劉訓(xùn)紅，柴 川，王勝男，華愉教

(南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 210023)

采用液相色譜-三重四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(LC-Triple TOF MS/MS)法分析杜仲中的化學(xué)成分。實(shí)驗(yàn)使用反相C18色譜柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)，以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；采用ESI離子源的正、負(fù)離子掃描方式對(duì)樣品進(jìn)行分析。根據(jù)高分辨質(zhì)譜提供的準(zhǔn)分子離子和碎片離子的精確分子質(zhì)量信息，并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照與相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，共鑒定出35種化學(xué)成分，包括13種木脂素類、11種環(huán)烯醚萜類、9種苯丙素類和2種黃酮類成分。該實(shí)驗(yàn)可為杜仲的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和品質(zhì)評(píng)價(jià)等進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)資料。

杜仲；液相色譜-三重四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(LC-Triple TOF MS/MS)；化學(xué)成分

杜仲來(lái)源于杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOilv.的干燥樹皮，是我國(guó)特有的名貴藥材，藥用歷史悠久，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、安胎之功效，用于肝腎不足、腰膝酸痛、筋骨無(wú)力、頭暈?zāi)垦?、妊娠漏血、胎?dòng)不安等癥狀[1]?，F(xiàn)代研究表明，杜仲含有木脂素類、環(huán)烯醚萜類、苯丙素類、多糖等多類藥效活性成分，具有降血壓、降血脂、降血糖、抗腫瘤、抗菌抗病毒、保肝護(hù)腎、抗骨質(zhì)疏松等多方面的藥理作用[2-3]。近年來(lái)，杜仲因其顯著的生理活性受到廣泛關(guān)注，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了大量研究，主要集中于化學(xué)成分分離鑒定、藥理作用和品質(zhì)評(píng)價(jià)等方面[4-6]，亦有用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析杜仲化學(xué)成分的報(bào)道，共定性或鑒定出其中27個(gè)化學(xué)成分[7-9]。目前杜仲的分析方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)、核磁共振(NMR)和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)等[10-12]。HPLC法操作簡(jiǎn)便、靈敏度較高；HPCE法載樣量小、柱效高、分辨率高，但重現(xiàn)性差、靈敏度較低，以上二者主要用于含量測(cè)定。在杜仲化學(xué)成分研究方面，主要通過(guò)提取、萃取、柱層析或制備型液相色譜等手段分離得到單體化合物后，通過(guò)質(zhì)譜及核磁共振等技術(shù)進(jìn)行分析鑒定，但傳統(tǒng)方法的鑒定效率較低，且對(duì)于中草藥中微量化學(xué)成分的檢出靈敏度低。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)具有高效、快速、實(shí)驗(yàn)前處理簡(jiǎn)單、靈敏度高、分辨率高等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于中藥復(fù)雜化學(xué)成分的定性定量分析。該技術(shù)發(fā)展迅速，通過(guò)將不同類型的質(zhì)譜串聯(lián)組成復(fù)合型質(zhì)譜以提高分辨率、檢測(cè)靈敏度及質(zhì)量測(cè)定準(zhǔn)確度等，或增強(qiáng)其定量能力，實(shí)現(xiàn)定性和定量同時(shí)分析，以滿足不同的分析需求。飛行時(shí)間質(zhì)譜作為目前主流的高分辨質(zhì)譜儀，其優(yōu)點(diǎn)是掃描速度快，儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，其質(zhì)量準(zhǔn)確度經(jīng)嚴(yán)格校正后可達(dá)10-6級(jí)，三重四極桿質(zhì)譜和飛行時(shí)間質(zhì)譜組成串聯(lián)質(zhì)譜，可提供母離子和碎片離子的精確質(zhì)量，與三重四極桿質(zhì)譜相比，具有更高的分辨率、更高的質(zhì)量鑒定效率和更好的選擇性[13]。根據(jù)化合物的精確分子質(zhì)量以及多級(jí)質(zhì)譜給出的化合物裂解碎片，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)資料，能夠快速鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。

本實(shí)驗(yàn)采用液相色譜-三重四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(LC-Triple TOF MS/MS)技術(shù)對(duì)杜仲中的化學(xué)成分進(jìn)行分析，根據(jù)高分辨質(zhì)譜獲得的化合物精確分子質(zhì)量、碎片離子峰、色譜保留時(shí)間及對(duì)照品信息，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，鑒定杜仲的化學(xué)成分，并推測(cè)其可能的裂解途徑及規(guī)律，希望為研究杜仲藥材的功效物質(zhì)基礎(chǔ)、質(zhì)量變化規(guī)律及質(zhì)量調(diào)控機(jī)制提供基礎(chǔ)資料。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與裝置

Triple TOFTM5600 System-MS/MS電噴霧飛行時(shí)間高分辨質(zhì)譜儀：美國(guó)AB Sciex公司產(chǎn)品，配備Peakview 1.2數(shù)據(jù)處理工作站；SIL-20A XR超快速液相色譜儀：日本Shimadzu公司產(chǎn)品；AnkeTGL-16B離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；BSA224S電子天平：德國(guó)賽多利斯公司產(chǎn)品；KQ-500B型超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；Milli-Q超純水制備儀：美國(guó)Millipore公司產(chǎn)品。

1.2 主要材料與試劑

松脂醇二葡萄糖苷(批號(hào)：111537-200501)、桃葉珊瑚苷(批號(hào)：111761-200601)、京尼平苷(批號(hào)：110749-200714)、京尼平苷酸(批號(hào)：111828-201102)、哈巴苷(批號(hào)：111729-201405)、梓醇(批號(hào)：110808-200508)、綠原酸(批號(hào)：110753-200413)、咖啡酸(批號(hào)：110885-200102)、蘆丁(批號(hào)：100080-200707)等對(duì)照品：純度均大于99%，由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；新綠原酸(批號(hào)：12112712)、隱綠原酸(批號(hào)：12112605)：純度均大于98%，成都普瑞法科技開發(fā)有限公司產(chǎn)品；異槲皮苷(批號(hào)：BCBB2943)：純度≥98%，美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品；甲醇(批號(hào)：143135)：色譜純，江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品；乙腈、甲酸：色譜純，德國(guó)Merck公司產(chǎn)品；實(shí)驗(yàn)用水：Milli-Q超純水。

杜仲樣品：于2015年6月中旬采自貴州省湄潭縣冼馬鎮(zhèn)團(tuán)結(jié)村(北緯107°27′27.04″，東經(jīng)27°57′15.67″)，剝?nèi)《胖?樹齡15年)干皮，堆積“發(fā)汗”5～7天至內(nèi)皮變紫褐色后，曬干。經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院劉訓(xùn)紅教授鑒定為杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOilv.的樹皮，留樣憑證保存于南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定實(shí)驗(yàn)室。

1.3 溶液制備

1.3.1 對(duì)照品溶液 分別取適量各對(duì)照品，精密稱定，置于10 mL量瓶中，加入甲醇溶解，配制成對(duì)照品溶液。分別取0.2 mL各對(duì)照品溶液，置于10 mL量瓶中，用50%甲醇配制成混合對(duì)照品溶液。

1.3.2 供試品溶液 精密稱取0.6 g杜仲粉末，加入30 mL 50%甲醇，密閉，稱其質(zhì)量后，超聲處理(功率250 W，頻率30 kHz)20 min，放置冷卻，再次稱其質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足質(zhì)量損失，過(guò)濾，濾液以12 000 r/min離心10 min，取上清液，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，即得供試品溶液。

1.4 實(shí)驗(yàn)條件

1.4.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；流動(dòng)相：A為0.1%甲酸-水溶液，B為乙腈；梯度洗脫程序：0～10 min(5%～10%B)，10～12 min(10%～15%B)，12～22 min(15%～20%B)，22～35 min(20%～30%B)，35～42 min(30%～60%B)，42～55 min(60%～85%B)，55～57 min(85%～5%B)，57～60 min(5%B)；柱溫30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL。

1.4.2 質(zhì)譜條件 電噴霧離子源(ESI)，正、負(fù)離子模式采集數(shù)據(jù)；質(zhì)量掃描范圍m/z50～1 500；氣簾氣壓力275.8 kPa；霧化氣壓力379.2 kPa；輔助氣壓力379.2 kPa；離子源溫度550 ℃；噴霧電壓：正離子模式下5 500 V，負(fù)離子模式下-4 500 V；解簇電壓：正離子模式下100 V，負(fù)離子模式下-100 V。

2 結(jié)果與討論

2.1 杜仲化學(xué)成分色譜峰的鑒定

按照1.4節(jié)條件對(duì)杜仲化學(xué)成分進(jìn)行分離和分析，正、負(fù)離子兩種模式下的總離子流色譜圖示于圖1，可見，本實(shí)驗(yàn)從杜仲中共鑒定出35個(gè)化合物。將供試品的色譜保留時(shí)間、質(zhì)譜準(zhǔn)分子離子峰和碎片離子峰信息等與對(duì)照品比對(duì)，確定了12個(gè)化學(xué)成分峰。匯總與杜仲化學(xué)成分相關(guān)的文獻(xiàn)，根據(jù)質(zhì)譜提供的準(zhǔn)確分子質(zhì)量計(jì)算化合物的分子式，再依據(jù)碎片離子信息，與相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比對(duì)，并結(jié)合HMDB數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，共推斷出23個(gè)化學(xué)成分峰。杜仲化學(xué)成分的保留時(shí)間、分子式、化合物名稱、高分辨質(zhì)譜母離子及偏差數(shù)據(jù)、碎片離子信息等詳細(xì)信息列于表1。

注：a.負(fù)離子模式掃描；b.正離子模式掃描圖1 杜仲50%甲醇提取物的總離子流色譜圖Fig.1 Total ion chromatogram (TIC) of 50% methanol extract of Eucommiae Cortex

2.2 各類化合物的質(zhì)譜解析

2.2.1 木脂素類 本實(shí)驗(yàn)共鑒定了13個(gè)木脂素類化合物，包括10個(gè)雙環(huán)氧木脂素和3個(gè)單環(huán)氧木脂素，分別對(duì)應(yīng)圖1中的峰10、15、17、18、19、20、22、23、26、27、29、31和32。杜仲中的木脂素類化合物大多為苯丙素二聚體與1～2個(gè)葡萄糖結(jié)合，以單糖苷或二糖苷的形式存在，二級(jí)質(zhì)譜通常失去葡萄糖中性碎片，二糖苷變?yōu)閱翁擒账槠碾x子峰，單糖苷變?yōu)檐赵槠碾x子峰。得到的苷元碎片在負(fù)離子模式下易失去甲基中性碎片，形成[M-H-CH3]-碎片離子，苷元碎片在正負(fù)離子模式下均可斷開呋喃環(huán)或四氫呋喃環(huán)得到相應(yīng)碎片離子，如松脂醇碎片離子m/z205和m/z151，丁香素碎片離子m/z181。

以松脂醇及其糖苷類化合物為例說(shuō)明其裂解途徑。化合物18的保留時(shí)間為17.95 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z681.239 5 [M-H]-直接失去1～2個(gè)葡萄糖中性碎片得到碎片m/z519和m/z357，苷元碎片可裂解得到碎片m/z151，松脂醇二葡萄糖苷的裂解途徑示于圖2。通過(guò)與對(duì)照品比對(duì)，并結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，推測(cè)化合物18為松脂醇二葡萄糖苷?；衔?9的保留時(shí)間為24.52 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z359.147 6 [M+H]+的呋喃環(huán)斷開得到碎片m/z205 [M-ArCHO-H]+和m/z151 [ArCO]+，或m/z137 [ArCH2]+，結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)推測(cè)化合物29可能為松脂醇?；衔?1的保留時(shí)間為26.44 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z519.186 0 [M-H]-失去葡萄糖中性碎片得到苷元碎片m/z357，苷元碎片可裂解得到碎片m/z151，結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)推測(cè)該化合物可能為松脂醇單葡萄糖苷。

表1 LC-Triple TOF MS/MS分析杜仲中化學(xué)成分的鑒定結(jié)果Table 1 Identification of the compounds in Eucommiae Cortex by LC-Triple TOF-MS/MS

續(xù)表1

注：標(biāo)“*”的化合物已與對(duì)照品比對(duì)確定

圖2 松脂醇二葡萄糖苷的裂解途徑Fig.2 Fragmentation pathways of pinoresinol-di-O-β-D-glucopyranoside

2.2.2 環(huán)烯醚萜類 本實(shí)驗(yàn)共鑒定了11個(gè)環(huán)烯醚萜類化合物，分別對(duì)應(yīng)圖1中的化合物1、2、3、6、7、9、11、14、24、30和34。環(huán)烯醚萜類化合物中，大多為環(huán)烯醚萜苷類成分，此類成分均易失去葡萄糖中性碎片162，得到苷元碎片離子[M-H-Glc]-。對(duì)苷元碎片進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析，大多易失去H2O分子或/和CO2分子得到[M-H-Glc-H2O]-、[M-H-Glc-CO2]-、[M-H-Glc-CO2-H2O]-等碎片離子。例如，杜仲醇苷碎片離子m/z169、桃葉珊瑚苷碎片離子m/z165、京尼平苷酸碎片離子m/z193、m/z167、m/z149等。京尼平則易在失去一分子H2O后繼續(xù)失去中性CH3COOH碎片得到m/z147。同時(shí)，杜仲中普通環(huán)烯醚萜類成分易由母離子在1,4位斷開得到失去中性碎片1,4I(C7H7O2或C7H7O3)的碎片離子，也有1,4I失去H的碎片離子。如Eucomoside B的碎片離子m/z234為苷元碎片m/z358作為母離子失去1,4I得到；京尼平碎片離子m/z123[1,4I-H]-是由1,4I失去H得到。

以去乙酰車葉草苷酸為例說(shuō)明其裂解途徑?；衔?的保留時(shí)間為5.53 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z389.109 4 [M-H]-失去葡萄糖中性碎片得到苷元碎片m/z227，對(duì)苷元碎片進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析，m/z227丟失一分子H2O得到碎片m/z209或丟失一分子CO2得到碎片m/z183，碎片m/z183離子相繼失去兩分子H2O得到碎片m/z165和m/z147，結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，推測(cè)化合物3可能為去乙酰車葉草苷酸，其裂解途徑示于圖3。

2.2.3 苯丙素類 本實(shí)驗(yàn)共鑒定了9個(gè)苯丙素類化合物，分別對(duì)應(yīng)圖1中的化合物4、5、8、12、13、16、21、33和35。其中，綠原酸、綠原酸甲酯、異綠原酸等咖啡?；鼘幩犷惢衔镆紫仁タХ弱埢玫剿槠x子[M-H-caffeoyl]-或[M+H-caffeoyl]+，而后綠原酸和異綠原酸在負(fù)離子模式下易失去一分子H2O，綠原酸甲酯在正離子模式下易失去一分子甲氧基，同時(shí)咖啡?；槠资ヒ环肿覥O2得到[caffeoyl-H-CO2]-碎片離子。簡(jiǎn)單酚類或酚酸類化合物的裂解方式有所不同。例如在負(fù)離子模式下，咖啡酸易失去一分子CO2得到碎片離子m/z135；香草酸易失去一分子CH3和一分子CO2得到碎片離子m/z152和m/z108；原兒茶酸-4-葡萄糖苷易在失去糖基碎片后失去一分子CO2得到[M-H-Glc]-和[M-H-Glc-CO2-H]-。

圖3 去乙酰車葉草苷酸的裂解途徑Fig.3 Fragmentation pathways of deacetyl asperulosidic acid

圖4 綠原酸的裂解途徑Fig.4 Fragmentation pathways of chlorogenic acid

以綠原酸及其同分異構(gòu)體、異綠原酸A和異綠原酸C為例說(shuō)明其裂解途徑?；衔?、12和13的保留時(shí)間分別為11.08、14.97、15.42 min。準(zhǔn)分子離子峰為m/z353.088 [M-H]-，碎片離子為m/z191、179、135。綠原酸裂解規(guī)律示于圖4，新綠原酸、隱綠原酸的裂解規(guī)律與綠原酸相似。由于三者的質(zhì)譜數(shù)據(jù)相同，無(wú)法通過(guò)質(zhì)譜分辨，只能通過(guò)與對(duì)照品比對(duì)，并結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，推測(cè)化合物8為新綠原酸，化合物12為綠原酸，化合物13為隱綠原酸。

化合物33、35的保留時(shí)間分別為28.05 min和29.90 min，準(zhǔn)分子離子峰為m/z515.12 [M-H]-，碎片離子為m/z353、191、179、173、135。結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)推測(cè)化合物33和35可能為異綠原酸，但是用質(zhì)譜技術(shù)無(wú)法確定它們是異綠原酸的哪個(gè)同分異構(gòu)體。參考文獻(xiàn)[2-4]報(bào)道可知，杜仲皮中含有異綠原酸A和異綠原酸C，結(jié)合文獻(xiàn)[31-32]中的洗脫順序、極性差別等特性，推測(cè)化合物33可能為異綠原酸A，化合物35可能為異綠原酸C。異綠原酸A可能的裂解方式示于圖5。

2.2.4 黃酮類 實(shí)驗(yàn)中共鑒定了2個(gè)黃酮類化合物，分別對(duì)應(yīng)圖1中的化合物25和28，二者均是苷元為槲皮素的黃酮苷類成分，在裂解過(guò)程中均易丟失糖基碎片得到苷元碎片離子，槲皮素苷元碎片還可進(jìn)一步裂解丟失H2O、CO碎片。

以蘆丁為例說(shuō)明其裂解途徑。化合物25的保留時(shí)間為21.14 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z609.143 9 [M-H]-失去鼠李糖和葡萄糖中性碎片得到苷元碎片m/z301，文獻(xiàn)表明苷元碎片裂解方式較多，依據(jù)實(shí)驗(yàn)得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)中碎片離子m/z255，推測(cè)蘆丁可能的裂解方式示于圖6。通過(guò)與對(duì)照品比對(duì)，并結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，推測(cè)該化合物為蘆丁。

圖5 異綠原酸A的裂解途徑Fig.5 Fragmentation pathways of isochlorogenic acid A

圖6 蘆丁的裂解途徑Fig.6 Fragmentation pathways of rutin

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用LC-Triple TOF MS/MS技術(shù)對(duì)杜仲的化學(xué)成分進(jìn)行分析，通過(guò)高分辨質(zhì)譜獲得的化合物精確分子質(zhì)量、碎片離子峰、色譜保留時(shí)間及對(duì)照品信息，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，初步鑒定出木脂素類、環(huán)烯醚萜類、苯丙素類和黃酮類共35種成分,可為進(jìn)一步探究杜仲的功效物質(zhì)基礎(chǔ)、質(zhì)量變化規(guī)律及質(zhì)量調(diào)控機(jī)制提供基礎(chǔ)資料。

LC-Triple TOF MS/MS技術(shù)能夠提供高分辨、高精度的多級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)，適用于化合物的元素組成和裂解途徑分析，在中藥復(fù)雜組分的鑒定中具有廣闊的應(yīng)用前景。但該技術(shù)仍有其局限性，比如難以通過(guò)質(zhì)譜數(shù)據(jù)區(qū)分化合物的多種同分異構(gòu)體，也無(wú)法確認(rèn)苷類成分中糖基的連接方式，在裂解規(guī)律相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)較少的情況下難以確認(rèn)化合物的裂解途徑等。因此采用質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行化合物結(jié)構(gòu)鑒定的工作還需要進(jìn)一步深入研究，通過(guò)總結(jié)不同類型化合物的裂解特點(diǎn)，為中藥化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)解析提供更可靠的依據(jù)。

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Chemical Constituents ofEucommiaeCortexby LC-Triple TOF MS/MS

YAN Ying, ZHAO Hui, ZOU Li-si, LIU Xun-hong, CHAI Chuan, WANG Sheng-nan, HUA Yu-jiao

(SchoolofPharmacy,NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210023,China)

EucommiaulmoidesOliv. is the sole species of the genusEucommia, which is an important traditional Chinese herbal medicine with vast clinical consumption because of its positive effects. The leaf, stem, and bark as well as staminate flower ofEucommiaulmoideshave been traditionally used to cure many diseases. Many studies indicated that monomer compounds and extracts fromEucommiaeCortexpossess wide-ranging pharmacological actions, especially in treating hypertension, hyperlipemia, diabetes and obesity. In this study, LC-Triple TOF MS/MS was used to analyze the chemical constituents inEucommiaeCortex. The separation and analysis were carried out on a reversed-phase C18 column with gradient elution of 0.1% formic acid (A)-acetonitrile (B). The gradient elution program was set as follow: 5%-10%B at 0-10 min, 10%-15%B at 10-12 min, 15%-20%B at 12-22 min, 20%-30%B at 22-35 min, 30%-60%B at 35-42 min, 60%-85%B at 42-55 min, 85%-5%B at 55-57 min, 5%-5%B at 57-60 min. The Triple TOF MS/MS system was equipped with an ESI source operating under both positive and negative ionization modes and the spectra were acquired in the range ofm/z50-1 500. According to the accurate mass of molecular and product ions provided by Triple TOF MS/MS, a total of thirty-five compounds inEucommiaeCortexwere identified or tentative presumed by comparised with reference standards and literature reports, which included thirteen lignans (Olivil-4′,4″-di-O-β-D-glucopyranoside, 1-Hydroxypinoresinol-4′,4″-di-O-β-D-glucopyranoside, Olivil-O-β-D-glucopyranoside, Pinoresinol-di-O-β-D-glucopyranoside, Eucommin A, Medioresinol-di-O-β-D-glucopyranoside, Syringaresionl-di-O-β-D- glucopyranoside, Syringaresionl, 1-Hydroxypinoresinol-O-β-D-glucopyranoside, Olivil, Pinoresinol, Pinoresinol-4′-O-β-D-glucopyranoside, and Syringaresionl-O-β-D-glucopyranoside), eleven iridoids (Eucommioside, Aucubin, Deacetyl asperulosidic acid, Geniposidic acid, Harpagide, Asperulosidic acid, Catalpol, Geniposide, Genipin, Eucomoside B, and Eucommiol), nine penylpropanoids (Protocatechuic acid 4-glucoside, Vanillic acid, Neochlorogenic acid, Chlorogenic acid, Cryptochlorogenic acid, Caffeic acid, Methyl chlorogenate, Isochlorogenic acid A, and Isochlorogenic acid C), and two flavonoids (Rutin and Isoquercitrin). Twelve of the compounds were identified by comparing their retention times and ESI-MS/MS data with those of reference standards, while other twenty-three compounds were tentatively identified or deduced according to their Triple TOF MS/MS data which afforded sufficient structural information. This study may provide the foundation and support for study on material foundation of efficacy and the overall assessment on quality ofEucommiaeCortex.

EucommiaeCortex; LC-Triple TOF MS/MS; chemical constituents

2016-08-11;

2016-11-08

江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(YSXK-2014)；江蘇高校品牌專業(yè)建設(shè)工程項(xiàng)目 (PPZY2015A070)資助

嚴(yán) 穎 (1993—)，女(漢族)，江蘇溧陽(yáng)人，碩士研究生，中藥學(xué)專業(yè)。E-mail: yanying93ly@163.com

劉訓(xùn)紅(1959—)，男(漢族)，江蘇濱海人，教授，從事中藥鑒定與品質(zhì)評(píng)價(jià)研究。E-mail: liuxunh1959@sohu.com

O657.63

A

1004-2997(2017)01-0146-11

10.7538/zpxb.2017.38.01.0146