長毛明對蝦幼蝦對鹽度和溫度的適應性

楊世平++王成桂++李揚海++張美妹++陳兆明++孫成波

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.085

摘要：通過溫度、鹽度的漸變以及突變試驗研究長毛明對蝦（Fenneropenaeus penicillatus）幼蝦對鹽度和溫度的適應性。當鹽度由2.5%突變至2.0%、1.5%時，長毛明對蝦幼蝦的96 h死亡率與對照組相比差異不顯著（P>0.05），其死亡率分別為8.33%、18.33%；當鹽度由2.5%漸變至0.5%、3.7%時，長毛明對蝦幼蝦仍可正常攝食。當溫度由 29 ℃ 突變至19 ℃時，長毛明對蝦幼蝦的96 h死亡率為18.33%；當溫度由29 ℃漸變至13 ℃時，長毛明對蝦幼蝦攝食開始減少，但其存活率仍為90.00%。試驗結果表明，長毛明對蝦幼蝦對鹽度變化的適應性較強，對低溫也有一定的耐受力。

關鍵詞：長毛明對蝦；鹽度；溫度；適應性

中圖分類號： S968.22文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2016）10-0298-03

收稿日期：2015-10-16

基金項目：廣東省揚帆計劃高層次人才項目（編號：201334018）；廣東海洋大學創(chuàng)新強校工程科研項目（編號：GDOU2013050306）。

作者簡介：楊世平（1977—），男，重慶人，博士，副教授，主要從事蝦蟹類健康養(yǎng)殖及水產(chǎn)微生物學研究。E-mail：ysp20010@sina.com。

通信作者：孫成波，博士，教授，主要從事對蝦健康養(yǎng)殖與病害防治研究。E-mail：scb248@126.com。長毛明對蝦（Fenneropenaeus penicillatus）屬節(jié)肢動物門十足目（Decapoda）對蝦科（Penaeidae）明對蝦屬（Fenneropenaeus）[1]，主要分布于印度洋、巴基斯坦至印度尼西亞沿海一帶，在我國福建省、臺灣地區(qū)、粵東沿海最為常見。早在20世紀80年代初，長毛明對蝦的人工育苗技術已經(jīng)成功，使其成為我國南方地區(qū)的主要養(yǎng)殖品種之一。1986年，僅臺灣地區(qū)長毛明對蝦的養(yǎng)殖產(chǎn)量就達到8 000 t[2-3]。學者們先后對長毛明對蝦的親蝦培育、餌料、幼體發(fā)育等進行了研究[4-7]。然而，隨著生長速度較快的凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）的引進，長毛明對蝦的養(yǎng)殖未能實現(xiàn)持續(xù)發(fā)展。近年來，對蝦養(yǎng)殖過程中疾病頻發(fā)，養(yǎng)殖成本不斷攀升，養(yǎng)殖效益大幅下降，學者們開始研究和推廣南方本土品種長毛明對蝦和墨吉明對蝦（F.merguiensis）來優(yōu)化對蝦養(yǎng)殖結構。

鹽度及溫度對水產(chǎn)動物的生長和存活極為重要，能影響對蝦的生長代謝、免疫力、能量轉化、存活等[8-13]。很多對蝦類物種對鹽度變化均具有一定耐受力，表明鹽度耐受范圍較廣[14]，但對蝦對鹽度的適應范圍會因種類的不同而表現(xiàn)出很大差異。關于溫度、鹽度對長毛明對蝦受精卵孵化及無節(jié)幼體發(fā)育的影響已有研究[15]，但未見長毛明對蝦幼蝦對鹽度和溫度適應性的報道。開展長毛明對蝦幼蝦對鹽度和溫度的適應性研究，可為其增殖放流提供依據(jù)，并對生產(chǎn)實踐具有重要的指導意義。

1材料與方法

1.1材料

購買廣東省湛江市海區(qū)采捕的自然成熟的長毛明對蝦親蝦，挑選個體大、性腺飽滿的雌蝦進行產(chǎn)卵、孵化、培育，以得到的健康幼蝦作為試驗材料。幼蝦的體長為（2.26±0.02） cm，體質量為（0.138±0.085） g。養(yǎng)殖用水為鹽度25%的自然海水，經(jīng)沉淀、沙濾后使用。采用精度為0.001 g的電子天平測量其體質量，采用精度為0.1 mm的游標卡尺測量其體長。

1.2方法

由于幼蝦前期均在自然水溫29 ℃、自然鹽度2.5%的環(huán)境下進行培育，為盡可能降低環(huán)境因素的影響，試驗的起始溫度和鹽度分別設定為29 ℃、2.5%。試驗中，采用空調將實驗室內(nèi)的溫度控制在29 ℃。采用充氣泵在恒溫空調房內(nèi)對試驗用海水不間斷地充氣，確保充足的溶氧以及恒定的溫度。

1.2.1鹽度突變試驗根據(jù)試驗需要共設計10個鹽度梯度，分別為0.0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%、4.5%，每個鹽度梯度設3個平行，試驗在裝有2 L海水的試驗桶中進行。將鹽度為2.5%（原海水鹽度）的試驗組作為對照組。高鹽度組（3.0%、3.5%、4.0%、4.5%）的海水鹽度采用海水精進行調節(jié)，低鹽度組（0.0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%）的海水鹽度采用經(jīng)曝氣處理的自來水進行調節(jié)。試驗時，將幼蝦從暫養(yǎng)桶撈出后直接放入不同鹽度的海水中進行試驗，每個試驗桶放入幼蝦30尾。定期觀察各試驗桶中幼蝦的攝食情況和活動情況，并及時撈出死亡個體，記錄存活尾數(shù)。日投餌量為體質量的30%左右，分3次投喂。試驗期間（96 h）每天換水1次，并保持微充氣。

1.2.2鹽度漸變試驗在低鹽度漸變試驗中，試驗期間每天調整鹽度1次。鹽度的初始降低幅度為0.5百分點，直至鹽度為1.5%后，每次鹽度降低幅度調整為0.2百分點，直至鹽度為0.1%，24 h后再將鹽度直接調整為0.0%。試驗設6個平行。

在高鹽度漸變試驗中，試驗期間每天調整鹽度1次。鹽度的初始增加幅度為0.5百分點，直至鹽度為1.5%后，每次鹽度增加幅度調整為0.2百分點，直至累計死亡率超過80%。試驗設6個平行。試驗用水及其配制方法、試驗容器、試驗條件、觀察記錄等均與鹽度突變試驗相同。

1.2.3溫度突變試驗試驗于裝有2 L海水的試驗桶中進行。根據(jù)試驗需要，分別設計14、19、24、29、34、39 ℃共6個溫度梯度，每個溫度梯度設3個平行，將29 ℃試驗組作為對照組。采用白色泡沫箱內(nèi)裝淡水水浴的方式控制溫度，高溫組（34、39 ℃）采用缸內(nèi)電子恒溫器進行加熱，低溫組（9、14、19、24 ℃）采用冰袋降溫，所有試驗桶均放置溫度計，以監(jiān)測控溫的準確性。試驗過程中的試驗容器、試驗條件、日常管理、觀察記錄等均與鹽度突變試驗一致。

1.2.4溫度漸變試驗在低溫漸變試驗中，試驗期間每天調整溫度1次。溫度的初始降低幅度為5 ℃，直至溫度為19 ℃后，每次溫度降低幅度調整為2 ℃，直至累計死亡率超過80%。試驗設6個平行。

在高溫漸變試驗中，試驗期間每天調整溫度1次。試驗開始時，直接將幼蝦從29 ℃的自然海水轉入34 ℃的海水中，此后每天調整溫度1次，每次溫度增加幅度為2 ℃，直至累計死亡率超過80%。試驗設6個平行。試驗過程中的試驗容器、試驗條件、日常管理、觀察記錄等均與鹽度突變試驗一致。

1.3數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行多重比較和單因素方差分析（ANOVA），并對結果進行差異顯著性檢驗（P<0.05）。所有數(shù)據(jù)均以平均值±標準差（x±s）表示。

2結果與分析

2.1鹽度突變試驗結果

將長毛明對蝦幼蝦從鹽度為2.5%的海水中直接轉入其他鹽度的海水。當長毛明對蝦幼蝦養(yǎng)殖水體的鹽度突變至0.0%、4.5%時，幼蝦出現(xiàn)急游、偶爾跳出水面、身體發(fā)白等現(xiàn)象，并于 1 h 后全部死亡。當鹽度突變至4.0%時，幼蝦停止攝食、身體發(fā)白，并出現(xiàn)大量死亡。當鹽度突變至0.5%時，幼蝦攝食量減少、空胃。當鹽度突變至1.5%～2.5%時，幼蝦能夠正常攝食，96 h存活率達到80%以上。方差分析顯示，不同鹽度組幼蝦的 96 h 死亡率存在顯著差異（P<005），但鹽度為1.5%、2.0%、2.5%各組之間的差異不顯著（P>0.05），表明長毛明對蝦幼蝦對鹽度突變的適應能力較強（表1）。

2.2鹽度漸變試驗結果

對養(yǎng)殖水體的鹽度進行調整，從自然鹽度2.5%開始，每 24 h 下降0.2～0.5百分點，直至鹽度為0.0%。當鹽度漸變至0.5%時，長毛明對蝦幼蝦的累計死亡率為55%，攝食正常。當鹽度突變至0.5%時，96 h累計死亡率為41.67%，低于漸變鹽度，但攝食明顯減少。當鹽度漸變至0.1%時，仍有41.25%的長毛明對蝦幼蝦存活，但攝食停止。當鹽度漸變至0.0%時，24 h后長毛明對蝦幼蝦全部死亡。方差分析顯示，鹽度對幼蝦的累計死亡率存在顯著影響（P<0.05）（表2）。

對養(yǎng)殖水體的鹽度進行調整，從自然鹽度2.5%開始，每 24 h 增加0.2～0.5百分點，直至累計死亡率超過80%。當鹽度漸變至3.7%時，長毛明對蝦幼蝦的累計死亡率為3417%，但攝食仍然正常。當鹽度漸變至3.9%時，幼蝦攝食開始明顯減少，累計死亡率為45.83%。幼蝦的累計死亡率隨著鹽度的增加逐漸升高。當鹽度漸變至4.7%時，幼蝦停止攝食。方差分析顯示，鹽度對幼蝦的累計死亡率存在顯著影響（P<0.05）（表3）。

2.3溫度突變試驗結果

將長毛明對蝦幼蝦從溫度為29 ℃的海水中直接轉入其他溫度的海水。當溫度突變至14 ℃時，幼蝦活動能力驟減，停止攝食和游泳，沉底并大量死亡，于10 min后全部死亡。當溫度突變至19 ℃時，幼蝦的攝食量明顯減少，但其96 h累計死亡率僅為18.33%。當溫度突變至39 ℃時，幼蝦停止攝食，1 d后死亡率為100%。方差分析顯示，溫度對幼蝦的 96 h 死亡率存在顯著影響（P<0.05），但24 ℃與29 ℃之間差異不顯著（P>0.05）（表4）。

2.4溫度漸變試驗結果

對養(yǎng)殖水體的溫度進行調整，從自然溫度29 ℃開始，每24 h降低2～5 ℃，直至試驗組累計死亡率超過80%。當溫度漸變至15 ℃時，幼蝦攝食正常，累計死亡率為6.67%。當溫度漸變至13 ℃時，幼蝦攝食減少、活動減弱，但累計死亡率僅為10.00%。當溫度漸變至11 ℃時，幼蝦攝食停止。當溫度漸變至9 ℃時，幼蝦身體發(fā)白，停止游動并沉底，于24 h內(nèi)全部死亡。方差分析顯示，24、19、17 ℃各溫度組間累計死亡率差異不顯著（P>0.05）（表5）。

對養(yǎng)殖水體的溫度進行調整，從自然溫度29 ℃開始，每24 h增加2～5 ℃，直至試驗組累計死亡率超過80%。當溫度漸變至38 ℃時，幼蝦攝食減少，累計死亡率為60.83%。當溫度漸變至40 ℃時，幼蝦停止游動并沉底，于24 h內(nèi)全部死亡。方差分析顯示，34～40 ℃各溫度組間累計死亡率差異顯著（P<0.05）（表6）。

3結論與討論

溫度和鹽度是水產(chǎn)動物養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中極為重要的2個因素。目前，我國水產(chǎn)動物人工養(yǎng)殖以露天池塘為主，溫度和鹽度易受天氣變化等因素的影響，大大增加了水產(chǎn)養(yǎng)殖的管理難度。一般認為，蝦蟹類可通過改變自身代謝狀況來克服鹽度滲透壓的影響，從而適應不同的鹽度環(huán)境。Chen等研究發(fā)現(xiàn)，在適宜的鹽度范圍內(nèi)，鹽度升高時中國明對蝦（F. chinensis）的血淋巴滲透壓增加，組織水分也會發(fā)生相應的變化；當鹽度超出其適應范圍時，對蝦需要通過消耗更多能量來調節(jié)體內(nèi)的滲透壓，以適應鹽度的變化[15]。鹽度突變還會引起對蝦呼吸的變化，使呼吸與排泄的氧氮原子比（O/N）升高[16]。鹽度突變對羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）、中國明對蝦、墨吉明對蝦、凡納濱對蝦的存活率均有不同程度的影響，鹽度突變幅度越大，對對蝦存活率的影響就越大[17-21]。本研究發(fā)現(xiàn)，將長毛明對蝦幼蝦從鹽度為2.5%的水體直接移至鹽度為0.5%的海水中時，幼蝦攝食量明顯減少，而進行鹽度漸變處理時其攝食基本保持正常?？梢?，通過鹽度的漸變方式，長毛明對蝦幼蝦可逐漸調整其滲透壓的調節(jié)強度和方式，更能適應鹽度的變化。無論是鹽度突變還是鹽度漸變，當鹽度為1.0%或3.5%時，長毛明對蝦幼蝦的存活率均低于80%，而墨吉明對蝦幼蝦的存活率均高于80%[19]，表明墨吉明對蝦對鹽度的適應范圍比長毛明對蝦更廣。

對蝦屬于變溫動物，其機體的生理調節(jié)機制和代謝水平直接受到環(huán)境溫度的影響。對蝦的攝食、生長、發(fā)育、抗氧化酶活力、免疫指標等也會受到溫度的影響[16，22-24]。將長毛明對蝦幼蝦從溫度為29 ℃的海水中直接移至溫度為14 ℃的海水中時，幼蝦活動能力下降，停止攝食，無法游動并沉底，大量死亡，10 min后存活率為0%。當溫度漸變至13 ℃時，其累計死亡率僅為10%?？梢?，降低溫度的變化幅度可提高幼蝦對低溫的適應性。本研究結果與賈旭穎等對凡納濱對蝦對溫度的適應性研究結論類似[25]。對蝦養(yǎng)殖過程中，在條件允許的情況下必須嚴格控制水溫變化，避免由水溫變化造成應激后帶來的一系列疾病甚至死亡。當養(yǎng)殖水溫漸變至15 ℃時，長毛明對蝦幼蝦能正常攝食，累計死亡率僅為6.67%；而墨吉明對蝦幼蝦卻表現(xiàn)出攝食減少，且累計死亡率為2583%[19]，表明長毛明對蝦比墨吉明對蝦更耐低溫。長毛明對蝦、墨吉明對蝦的自然分布調查發(fā)現(xiàn)，長毛明對蝦分布于我國福建省、臺灣地區(qū)、廣東東部沿海，而墨吉明對蝦僅分布于我國南海地區(qū)[1]。

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