虎耳草的研究概況

何紅梅，戴 岳，夏玉鳳*

(中國藥科大學(xué)1.中藥分析學(xué)教研室；2.中藥藥理教研室，江蘇 南京 210009)

虎耳草的研究概況

何紅梅1，戴 岳2，夏玉鳳1*

(中國藥科大學(xué)1.中藥分析學(xué)教研室；2.中藥藥理教研室，江蘇 南京 210009)

本文對虎耳草的化學(xué)成分、分析方法和藥理活性等方面的國內(nèi)外研究概況進(jìn)行了綜述，為虎耳草的進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

虎耳草；化學(xué)成分；分析方法；藥理活性

虎耳草為虎耳草科虎耳草屬植物虎耳草[Saxifragastolonifera(L.)Meerb.]的全草，別名石荷葉、金線吊芙蓉、老虎耳等[1]，是一種常用中藥，始見于《履巉巖本草》。性微苦，辛，寒，有小毒。具有祛風(fēng)、清熱、涼血解毒等功效，用于治療風(fēng)疹、濕疹、中耳炎、丹毒、咳嗽吐血、肺癰、崩漏、痔疾等癥[2]?，F(xiàn)代藥理研究表明虎耳草具有抗炎、保肝、抑菌、鎮(zhèn)咳等多種藥理活性，虎耳草在我國分布廣泛，為更好地開發(fā)利用該資源，本文就虎耳草的化學(xué)成分、分析方法、藥理活性的研究概況進(jìn)行總結(jié)。

1 化學(xué)成分

1.1 香豆素類

劉玉梅等[3]從虎耳草全草中分離得到虎耳草素(C14H16O9)，別名巖白菜素、巖白菜內(nèi)酯、矮茶素、佛手配質(zhì)，為白色疏松針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有顯著的生理活性。李振等[4]從虎耳草中分離得到8-甲氧基異虎耳草素，并且是首次從該植物分離得到。

1.2 黃酮類

目前從虎耳草中分離得到的黃酮類化合物主要有：槲皮素、槲皮苷、槲皮素-3-O-ɑ-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-L-鼠李糖苷、槲皮素-5-O-β-D葡萄糖苷、山奈酚-3-O-ɑ-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D半乳糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷[3-7]。

1.3 萜類和甾體類

虎耳草中另含有萜類及甾體類物質(zhì)，其中主要含有二十九烷[3]、三十一烷[3]和β-谷甾醇[3]，并且上述三種物質(zhì)均是首次從該植物中分離得到。

1.4 其他類

此外，李振等[4]從虎耳草全草中分離得到 3，4-二羥基烯丙基苯-4-O-β-D葡萄糖苷；馮衛(wèi)生等[8]從虎耳草中分離得到芐基-O-ɑ-L-鼠李糖-(1→6)-β-D葡糖苷、(3S，5R，6R，7E，9R)-3，5，6，9-四羥基-7-megastigmane、(7R，8S)-4，9，9-三羥基-3-甲氧基-7，8-二氫苯駢呋喃-1-丙基新木脂素-3-O-β-D-葡糖苷等苷類物質(zhì)。

2 分析方法

2.1 高效液相色譜法

覃容貴等[9]采用HPLC法測定不同炮制品中巖白菜素的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)炮制后巖白菜素的含量由高到低為：醋制>蜜制>鹽制>生品>酒制>姜制，同時不同的炮制方法導(dǎo)致虎耳草的抗炎、鎮(zhèn)咳作用差異顯著，鎮(zhèn)咳宜用醋制品，抗炎宜用姜制品。鄭巖等[10]采用HPLC法檢測虎耳草顆粒中巖白菜素的含量，旨在為虎耳草制劑建立一種可靠的質(zhì)量控制方法。結(jié)果顯示該方法靈敏、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于虎耳草顆粒的質(zhì)量控制。冉啟軍等[11]采用HPLC法檢測虎耳草中巖白菜素的含量，該方法最終檢測出虎耳草中巖白菜素的含量為0.424%，方法的準(zhǔn)確度、靈敏度、重現(xiàn)性良好，可作為虎耳草藥材質(zhì)量控制的含量檢測方法。鄭一敏等[12]采用HPLC法檢測虎耳草中槲皮苷的含量，采用該方法檢測結(jié)果穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，無雜質(zhì)干擾，可用于虎耳草中槲皮苷的質(zhì)量控制。張秋海等[13]采用HPLC法檢測不同產(chǎn)地不同采收季節(jié)虎耳草中原兒茶酸的含量，該方法最終結(jié)果顯示安徽產(chǎn)虎耳草中原兒茶酸的含量最高，且以安徽5月份產(chǎn)虎耳草的含量最高，測定方法快速、簡便、干擾少、結(jié)果準(zhǔn)確，適用于虎耳草中原兒茶酸的分析測定。

此外，周美等[14]采用HPLC法對虎耳草乙酸乙酯部位進(jìn)行指紋圖譜研究，最終建立了虎耳草藥材的乙酸乙酯部位指紋圖譜，確定了15個共有峰，并指認(rèn)了7個共有峰，該方法的方法學(xué)考察顯示其精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性良好，為有效地控制虎耳草藥材的質(zhì)量提供了可靠的方法。

2.2 紫外分光光度法

徐應(yīng)淑等[15]采用紫外分光光度法測定虎耳草乙酸乙酯萃取物中總黃酮的含量，該方法準(zhǔn)確、簡便、重復(fù)性好，能有效地測定虎耳草乙酸乙酯部位萃取物中總黃酮的含量，能為虎耳草全草的質(zhì)量控制提供了新的評價指標(biāo)。

2.3 薄層色譜法

先春等[16]采用薄層色譜法對虎耳草中的沒食子酸做定性鑒別，結(jié)果顯示該方法斑點清晰、分離效果好，是一種快速、有效的虎耳草藥材薄層色譜鑒別方法。鄭巖等[17]采用薄層色譜法鑒別虎耳草中的巖白菜素，薄層鑒別能檢出巖白菜素的斑點，斑點清晰，并且不受其他物質(zhì)的干擾，該方法簡單，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可為建立虎耳草藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)實驗依據(jù)。

2.4 氣質(zhì)聯(lián)用法

陳晨等[18]采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對虎耳草微波輔助-石油醚提取物中的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析，結(jié)果顯示采用該法共鑒定出102種化學(xué)成分，該種數(shù)據(jù)聯(lián)用系統(tǒng)能夠?qū)Φ蜆O性部位的化學(xué)成分進(jìn)行快捷、簡便、準(zhǔn)確的分析。張知俠等[19]以石油醚為提取溶劑，采用索氏提取法對虎耳草成分進(jìn)行提取，通過GC-MS聯(lián)用技術(shù)對其成分進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該法最終確定了35種化學(xué)成分，其中含量最高的二丙酮醇占11.82%，其次為琥珀酸，含量達(dá)10.62%，虎耳草素含量為10.59%，沒食子酸含量為6.29%，3，3-二甲基葵苯含量為5.51%，辛醛含量為4.76%。

3 藥理作用

3.1 抑菌作用

劉世旺等[20]用不同濃度的虎耳草乙醇提取物對4種細(xì)菌、1種酵母菌和1種霉菌進(jìn)行抑菌試驗，結(jié)果表明虎耳草乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、蘇云金芽孢桿菌、大腸桿菌和枯草桿菌等均有抑制作用，并且對金黃色葡萄球菌的抑制作用最強，對產(chǎn)黃青霉和啤酒酵母的生長無明顯的抑制作用。陳嬌等[21]研究58種植物提取液對葡萄霜霉病菌的游動孢子囊萌發(fā)抑制率及接種葉圓盤的發(fā)病控制效果的研究，結(jié)果表明虎耳草提取液對葡萄霜霉病菌有抑制作用，對游動孢子囊萌發(fā)抑制率為84.70%，葉圓盤生測定結(jié)果，其發(fā)病率為0，揭示虎耳草具有一定的抗菌活性。

3.2 對細(xì)胞凋亡的影響

梁宇翔等[22]采用MTT比色法測定虎耳草硅膠柱層析所得各段餾分對DU145細(xì)胞的增殖抑制作用，結(jié)果顯示除F1與F8段抑制作用不明顯外，其他段均有不同程度的抑制作用，其中F3、F6、F7效果最顯著，并以F7為研究對象，檢測其在不同濃度、不同作用時間下對DU145細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果表明對DU145具有促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡的作用，并且呈現(xiàn)正相關(guān)的量效關(guān)系和時效關(guān)系。張立石等[23]研究從虎耳草中提取不同的有效部位，運用流式細(xì)胞儀、觀察不同提取物對體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞的抑制作用和對細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果顯示3種不同的提取物對前列腺成纖維細(xì)胞增殖均有明顯的抑制作用，且與藥物濃度有一定的量效關(guān)系，其中提取物2的作用最為顯著，同時各提取物均能促進(jìn)成纖維細(xì)胞的凋亡，而以提取物3的作用最為明顯，這提示虎耳草中某些成分經(jīng)過篩選可作為細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑使用。

3.3 保肝作用

左國營等[24]從黑蕊虎耳草中分離得到一個新的巖白菜素沒食子酸酯類，經(jīng)鑒定為11-氧-(4-甲氧基-沒食子酰)，后期研究該化合物的活性發(fā)現(xiàn)其對丙型肝炎絲氨酸蛋白酶具有抑制活性，其IC50值為0.32 mg /mL。Kim等[25]用巖白菜素治療由四氯化碳所致的小鼠肝損傷模型，發(fā)現(xiàn)巖白菜素可以降低肝損傷小鼠的谷氨酸丙酮轉(zhuǎn)移酶和山梨醇脫氫酶的釋放，同時巖白菜素還能降低谷胱甘肽還原酶含量及提高谷胱甘肽的含量，很明顯巖白菜素是通過調(diào)節(jié)谷胱甘肽和抑制自由基的釋放來護肝的。

3.4 抗炎作用

李享東等[26]研究虎耳草提取物不同有效部位對二甲苯致小鼠耳腫脹實驗的抑制作用和對小鼠瓊脂肉芽腫的抑制作用，以小鼠耳廓腫脹度、腫脹抑制率為評價指標(biāo)，虎耳草乙酸乙酯部位腫脹度最小，腫脹抑制率最低，水溶部位次之，其他部位抑制效果不明顯。以瓊脂肉芽腫和對肉芽腫增重的抑制率為指標(biāo)進(jìn)行評價，乙酸乙酯部位肉芽腫最輕，肉芽腫抑制率最高，水溶部位次之，其他部位抑制作用不顯著。曾穎等[27]探討寶興虎耳草對慢性增生性前列腺炎的藥理作用，通過向前列腺兩葉注射0.2 mL消痔靈注射液成功建立大鼠慢性增生性前列腺炎模型，檢測大鼠血清中SOD和ACP的含量，不同濃度以及不同給藥時間的虎耳草水煎液對慢性增生性前列腺炎均有一定的治療作用，并且呈現(xiàn)劑量依賴性和作用時間依賴性。

3.5 止咳作用

李享東等[26]虎耳草提取物不同有效部位對氨水引小鼠咳的抑制作用，以小鼠咳嗽潛伏期及2 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)為指標(biāo)來評價，乙酸乙酯部位作用后潛伏期最長，咳嗽次數(shù)最少，其他部位與模型組相比差異不明顯。

3.6 抗癌作用

周欣等[28]對虎耳草抗前列腺癌活性部位進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)分析，得到巖白菜素、槲皮素-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、槲皮素，還有大量的黃酮類化合物，槲皮素-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷和槲皮素具有良好的抗前列腺癌PC-3細(xì)胞活性。丁家欣等[29]研究從虎耳草中提取不同的有效部位，運用流式細(xì)胞儀，觀察不同提取物對體外培養(yǎng)的前列腺癌細(xì)胞增殖的影響，該實驗最終結(jié)果顯示虎耳草不同提取物對前列腺癌細(xì)胞均有明顯誘導(dǎo)凋亡的作用，對前列腺癌細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用，這提示虎耳草可用于前列腺癌的治療。

3.7 對小鼠急性肺損傷的保護作用

竇偉等[30]研究虎耳草水煎液對小鼠急性肺損傷的作用，以100倍百草枯稀釋液灌胃染毒建立急性肺損傷的動物模型，然后在該模型基礎(chǔ)上用虎耳草水煎液予以治療，對比治療組與模型組肺組織病理變化和肺中表面活性蛋白A的含量變化，結(jié)果顯示與模型組相比，水煎液組肺損傷明顯好轉(zhuǎn)，模型組SP-A表達(dá)的積分光密度明顯高于治療組，提示虎耳草水煎液有促進(jìn)SP-A合成與分泌的作用，能減輕百草枯中毒所致的急性肺損傷。

3.8 抗氧化作用

虎耳草中的抗氧化活性成分主要是山奈酚、巖白菜素、槲皮素、槲皮苷、沒食子酸、原兒茶酸和谷甾醇等物質(zhì)，潘國慶等[31]采用測定油脂過氧化的方法，以維生素C為對照，用藏藥篦齒虎耳草乙醇提取物對3種食用油脂的抗氧化性進(jìn)行研究，結(jié)果顯示篦齒虎耳草對三種食用油脂均有一定的抗氧化作用，其效果與Vc相當(dāng)，特別是對菜籽油和芝麻油效果尤為明顯，對篦齒虎耳草的抗氧化性的研究以期獲得一種天然的抗氧化劑是有可能的。李享東等[32]通過建立小鼠急性肺損傷模型研究虎耳草乙酸乙酯部位的抗氧化活性，結(jié)果表明：虎耳草乙酸乙酯部位連續(xù)給藥急性肺損傷小鼠，可導(dǎo)致小鼠肺濕干重比明顯降低，小鼠肺水腫情況改善，肺組織中SOD活性升高，MDA含量降低，肺損傷減輕。劉佳等[33]對虎耳草中的抗氧化活性物質(zhì)進(jìn)行提取工藝優(yōu)化，并以虎耳草中抗氧化活性物質(zhì)對DPPH自由基的清除作用研究其抗氧化活性，結(jié)果表明虎耳草提取液對DPPH自由基的清除率可達(dá)到80.32%，這說明虎耳草具有良好的抗氧化活性。

4 結(jié) 語

虎耳草在我國有悠久的藥用歷史，具有多種藥理作用，藥用價值突出，近年來，對虎耳草的研究主要集中于活性成分巖白菜素、槲皮素等抗癌活性、治療急性肝損傷癥狀等方面，但其作用機制需要進(jìn)一步研究。此外，有關(guān)虎耳草有效成分的體內(nèi)藥動學(xué)行為及代謝產(chǎn)物的研究尚有限，這在一定程度上限制了虎耳草的開發(fā)應(yīng)用，故以后的研究可著重于這些方面，為更好地開發(fā)這一豐富資源提供科學(xué)的理論依據(jù)。

[1] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學(xué)出版社，2005：75.

[2] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典：上冊[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1977.

[3] 劉玉梅.兩種中草藥(虎耳草、訶子)化學(xué)成分的研究[D].貴陽：貴州大學(xué)，2007.

[4] 李振，鄭曉珂，李原京，等.虎耳草的化學(xué)成分研究[C]// 中國藥學(xué)會中藥與天然藥物專業(yè)委員會.第十屆全國中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會論文集，2009：4.

[5] 羅厚蔚，吳葆金，陳節(jié)庵，等.虎耳草有效成分的研究[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報，1988(1)：1-3.

[6] CHEN Z，LIU Y M，YANG S，et al.Studies on the chemical constituents and anticancer activity of Saxifraga stolonifera(L.)Meeb[J].Bioorganic & Medicinal Chemistry，2008，16(3)：1337-1344.

[7] 先春，黃志金，周欣，等.虎耳草的化學(xué)成分及生物活性研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2014(1)：64-68.

[8] FENG W S，LI Z，ZHENG X，et al.Chemical constituents of Saxifraga stolonifera(L.)Meeb[J].Acta Pharm Sin，2010，45(6)：742-746.

[9] 覃容貴，龍慶德，范菊娣，等.炮制對虎耳草中巖白菜素及其止咳抗炎作用的影響[J].中成藥，2013(5)：1027-1030.

[10] 鄭巖，王紅霞，陳隨清.虎耳草顆粒的質(zhì)量控制方法[J].中國醫(yī)藥指南，2014，23：46-47.

[11] 冉啟軍，丁寧.高效液相色譜法測定虎耳草中巖白菜素含量[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，05：474-475.

[12] 鄭一敏，楊艷紅，胥秀英，等.高效液相色譜法測定虎耳草中槲皮苷的含量[J].中國藥房，2005，18：1418-1419.

[13] 張秋海，丁家欣，張玲.不同產(chǎn)地與采收季節(jié)虎耳草中原兒茶酸的含量測定[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2004(4)：30-31.

[14] ZHOU M，CHEN H G，XIAN C，et al.HPLC fingerprint of ethyl acetate extraction of Saxifraga stolonifera][J].China Journal of Chinese Materia Medica，2013，38(7)：1026-1029.

[15] 徐應(yīng)淑，龍艷鈺.紫外分光光度法測定虎耳草乙酸乙酯萃取物中總黃酮的含量[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011(3)：298-300.

[16] 先春，龔小見，楊占南.虎耳草的薄層色譜研究[J].貴州師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2012(3)：7-8.

[17] 鄭巖，陳隨清，王紅霞.虎耳草的薄層色譜鑒別及水分、灰分、浸出物測定[J].中醫(yī)研究，2010，11：29-31.

[18] 陳晨，趙曉輝，文懷秀，等.虎耳草石油醚提取物的化學(xué)成分分析[J].中國野生植物資源，2011(4)：57-60.

[19] 張知俠.虎耳草石油醚提取物的化學(xué)成分分析[J].咸陽師范學(xué)院學(xué)報，2014(6)：36-38.

[20] 劉世旺，徐艷霞.虎耳草乙醇提取物抑菌作用的研究[J].資源開發(fā)與市場，2007(6)：481-482.

[21] 陳嬌，代光輝，顧振芳，等.58種植物提取液對葡萄霜霉病菌的抑菌活性篩選研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2002(5)：9-13.

[22] 梁宇翔.寶興虎耳草活性成分的提取分離及其體外抗前列腺癌活性的初步研究[D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[23] 張立石，丁家欣，張秋海，等.虎耳草提取物對大鼠成纖維細(xì)胞的抑制作用[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2005，12：920.

[24] 左國營，張志軍，陳麗蓉，等.藏藥黑蕊虎耳草的化學(xué)成分[J].云南植物研究，2005(6)：691-694.

[25] KIM H S，LIM H K，CHUNG M W，et al.Antihepatotoxic activity of bergenin，the major constituent of Mallotus japonicus，on carbon tetrachloride-intoxicated hepatocytes[J].Journal of Ethnopharmacology，2000，69(1)：79-83.

[26] 李亨東.四川寶興虎耳草活性部位的篩選及其初步藥效學(xué)研究[D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[27] 曾穎.四川寶興虎耳草對大鼠慢性增生性前列腺炎的藥理作用研究[D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[28] 周欣，陳華國，黃志金，等.響應(yīng)面法優(yōu)選虎耳草抗前列腺癌活性部位提取工藝[J].中草藥，2013，13：1768-1773.

[29] 丁家欣，張立石，張玲，等.虎耳草提取物對前列腺癌細(xì)胞凋亡的影響[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2005，12：905.

[30] 竇偉.四川寶興虎耳草有效成分提取及初步藥理學(xué)研究[D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[31] 潘國慶，王寶存.藏藥蓖齒虎耳草抗氧化性研究[J].青海師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2007(4)：70-72.

[32] 李亨東，李英倫，范巧佳，等.四川寶興虎耳草活性部位篩選[J].中草藥，2009，S1：187-189.

[33] 劉佳，焦士蓉，孫璇，等.虎耳草中抗氧化活性物質(zhì)的提取及成分研究[J].生物加工過程，2012(6)：42-46.

Research Progress of Herba Saxifragae

He Hongmei1，Dai Yue2，Xia Yufeng1*

(1.Department of Chinese Materia Medica Analysis；2.Department of Pharmacology ofChinese Materia Medica，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China)

This paper summarized the studies on chemical constituents，analysis and pharmacological activities of herba Saxifragae to provide a scientific basis for future development and utilization of this crude drug.

herba Saxifragae；chemical constituents；analysis；pharmacological activities

10.3969/j.issn.1006-9690.2017.02.018

2016-08-21

何紅梅(1991—)，女，在讀碩士研究生，主要從事中藥成分的體內(nèi)分析研究。E-mail：1065535839@qq.com

*通訊作者： 夏玉鳳。E-mail：yfxiacpu@126.com

R284；R285

A

1006-9690(2017)02-0075-04