飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長、飼料利用及肌肉營養(yǎng)成分的影響

■ 左亞男 鄭 偉，2 夏長革,3 劉凡寧，3 陳秀梅 王桂芹*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長春130118；2.延邊州水產(chǎn)技術(shù)推廣站，吉林延邊133002；3.吉林省新立城水庫管理局，吉林長春130119）

賴氨酸也稱為L-賴氨酸鹽酸鹽，是一種必需氨基酸，它是蛋白質(zhì)必不可少的組成部分。飼料中必需氨基酸的組成及含量直接影響蛋白質(zhì)的利用率，飼料中氨基酸比例越平衡，蛋白質(zhì)的利用率越高。目前，有關(guān)賴氨酸在陸生動(dòng)物[1-4]和水產(chǎn)方面[5]均有研究。尼羅羅非魚（Tilapia nilotica linnaeus）[5]、鳡幼魚（Elopich?thys bambusa）[6]、異育銀鯽（Carassiusauratusgibelio）[7]的研究表明，賴氨酸可提高干物質(zhì)和蛋白表觀消化率；黃顙魚幼魚（Pelteobagrus fulvidraco）[8]、草魚（Cteno?pharyngodon idellus）[9]的研究表明，賴氨酸可提高魚肌肉粗蛋白含量；團(tuán)頭魴（Parabramis pekinensis）[10-11]、許氏平鲉（Sebastods schlegelii）[12]、卵形鯧鲹（Trachino?tus ovatus）[13]的研究表明，賴氨酸可顯著提高魚的增重率和特定生長率。目前關(guān)于賴氨酸對(duì)雅羅魚生長、飼料利用和肌肉營養(yǎng)成分的影響沒有相關(guān)報(bào)道，所以本試驗(yàn)選取生長快、肉質(zhì)細(xì)嫩、肉味鮮美和氨基酸含量高等優(yōu)點(diǎn)而備受青睞的雅羅魚為研究對(duì)象，在飼料中添加不同水平的賴氨酸飼喂雅羅魚，旨在探討賴氨酸對(duì)雅羅魚生長、飼料利用和肌肉營養(yǎng)成分的影響，以確定雅羅魚飼料中賴氨酸的適宜添加量。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚粉為蛋白源，配制添加包膜賴氨酸（80%L-賴氨酸，北京市星火科技有限公司）的等氮（37%）、等能（17 MJ/kg）的六種飼料，通過添加丙氨酸來調(diào)整飼料等蛋白質(zhì)水平，賴氨酸水平為1.82%、2.27%、2.72%、3.17%、3.62%、4.07%。飼料原料經(jīng)粉碎過40目篩，按配方稱重、采用逐級(jí)擴(kuò)大的方法均勻混合，加工成直徑為1.2 mm的顆粒，晾干后置于-20℃冰柜中保存、備用。飼料配方及營養(yǎng)水平見表1，飼料中氨基酸組成見表2。

1.2 試驗(yàn)魚和飼養(yǎng)管理

雅羅魚試驗(yàn)前暫養(yǎng)在室內(nèi)水族箱中，馴化15 d。暫養(yǎng)期間投喂基礎(chǔ)日糧作為馴化飼料，飽食投喂，試驗(yàn)開始之前，停止投喂1 d。

挑選健康活潑、規(guī)格一致的試驗(yàn)雅羅魚，體質(zhì)量為（13.44±1.20）g，隨機(jī)分配到18個(gè)水族箱中，隨機(jī)分成6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾。每天飽食投喂兩次（09：00，16：00），每次投料前觀察魚的活動(dòng)，投喂1 h后觀察殘餌情況，用虹吸法吸出殘餌并及時(shí)調(diào)整投喂量，每天記錄水溫和投喂量。試驗(yàn)期間水溫23～30 ℃，pH值7.1±0.1，溶解氧大于5.0 mg/l，氨氮小于0.5 mg/l。養(yǎng)殖持續(xù)8周。

1.3 樣品收集及指標(biāo)計(jì)算

飼養(yǎng)8周后取樣，分別稱體重，測體長，計(jì)算平均增重率、特定生長率、蛋白質(zhì)效率、蛋白沉積率、氮沉積率、肥滿度；取側(cè)線以上、背鰭以下的白肌，測定其營養(yǎng)成分，采用GB/T 6435—2006、GB/T6432—1994、GB/T6438—2007、GB/T6433—2006 和 GB/T18246—2000分別測定飼料中的水分、粗蛋白質(zhì)、粗灰分、粗脂肪和氨基酸的含量，然后取內(nèi)臟稱重，計(jì)算臟體比。

式中：I——攝入飼料的重量（g）；

t——試驗(yàn)時(shí)間（d）；

W0、Wt——試驗(yàn)初始和結(jié)束時(shí)雅羅魚的總重量(g);

C——飼料蛋白質(zhì)的含量（%）；

L——每尾魚的體重（g）和體長（cm）；

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平（%干物質(zhì)基礎(chǔ)）

表2 試驗(yàn)飼料氨基酸組成（%干物質(zhì)基礎(chǔ)）

Wv——內(nèi)臟質(zhì)量（g）；

Pt——魚末蛋白含量（g）；

P0——魚初蛋白含量（g）；

Nf——魚末氮含量（g）；

N——飼料氮含量（%）；N0——魚初氮含量（g）。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS（20.0）軟件進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan's法多重比較進(jìn)行組間差異顯著性比較。數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長的影響（見表3）

由表3可知，飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚的增重率、特定生長率具有不同程度的影響，增重率和特定生長率均隨著飼料賴氨酸水平的提高呈先升高后下降的趨勢(shì)，在飼料賴氨酸為水平1.82%～3.17%范圍時(shí)，雅羅魚平均增重率和特定生長率分別隨著賴氨酸添加量的增加而顯著提高，3.17%組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但是賴氨酸水平為在3.17%～4.07%范圍時(shí)，平均增重率和特定生長率不再提高且有下降趨勢(shì)，3.17%組顯著高于4.07%組（P＜0.05）。雅羅魚臟體比和肥滿度各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長的影響

將飼料的不同賴氨酸水平（x）和試驗(yàn)雅羅魚的平均增重率（y）做拋物線回歸分析，見圖1。所得方程為：

拋物線回歸分析結(jié)果與方差分析結(jié)合起來得出雅羅魚增重率的最適賴氨酸范圍為3.17%～3.3%。

圖1 雅羅魚增重率與飼料賴氨酸水平的關(guān)系

2.2 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用的影響（見表4）

由表4可知，飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用具有不同程度的影響。存活率沒有受到飼料賴氨酸水平的影響（P＞0.05）。在賴氨酸的水平為1.82%～2.72%范圍時(shí)，雅羅魚飼料效率和蛋白沉積率隨著賴氨酸添加量的增加而提高，且各組之間差異顯著（P＜0.05）。當(dāng)飼料賴氨酸水平超過3.17%時(shí)，飼料效率和蛋白沉積率不再提高，且各組差異不顯著（P＞0.05）。蛋白質(zhì)效率隨著賴氨酸的添加量增加而不斷提高，3.17%組顯著高于對(duì)照組和2.27%組（P＜0.05）。在賴氨酸水平為3.17%～4.07%范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)效率沒有明顯提高且差異不顯著（P＞0.05）。氮沉積率隨著賴氨酸水平的提高而先增加后下降，賴氨酸水平為3.17%組的氮沉積率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

表4 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用的影響(%)

將飼料賴氨酸水平（x）和養(yǎng)殖雅羅魚的蛋白質(zhì)效率（y）做拋物線回歸分析，見圖2。所得方程為：

拋物線回歸分析結(jié)果與方差分析結(jié)合起來得出雅羅魚最大蛋白質(zhì)效率的最適賴氨酸水平范圍為3.17%～3.21%。

2.3 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營養(yǎng)成分的影響

飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營養(yǎng)成分有顯著影響（P＜0.05）（見表5），但是主要影響的是粗蛋白含量。粗蛋白含量隨著飼料賴氨酸水平的增加而增加，在3.62%組顯著高于對(duì)照組和其他各組（P＜0.05）。飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉的粗脂肪、水分和灰分沒有顯著影響，各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

圖2 雅羅魚蛋白質(zhì)效率與飼料賴氨酸水平的關(guān)系

2.4 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉氨基酸含量的影響

飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉氨基酸含量具有不同程度的影響（見表6）。賴氨酸水平對(duì)肌肉賴氨酸含量的影響呈先上升后下降的趨勢(shì)，當(dāng)飼料賴氨酸水平為3.17%時(shí)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），在1.82%～3.17%之間，呈上升趨勢(shì)，在3.17%～4.07%之間，魚體賴氨酸含量呈下降趨勢(shì)，但各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

飼料賴氨酸添加量對(duì)魚體其他氨基酸含量有不同程度的影響。除絲氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、丙氨酸、甘氨酸和酪氨酸各組影響不顯著外（P＞0.05），其他必需氨基酸均隨著飼料賴氨酸添加量的增加而呈先增加后降低。

表5 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營養(yǎng)成分的影響(%)

表6 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉氨基酸含量的影響(%)

3 討論

3.1 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長的影響

飼料中缺乏某種必需氨基酸時(shí)，往往都會(huì)導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物的生長減緩，在水產(chǎn)動(dòng)物蛋白質(zhì)的合成和生長上，賴氨酸起著重要的作用。賴氨酸作為必需氨基酸之一，其含量不足或者含量過高都會(huì)引起氨基酸的不平衡，影響魚類的生長。楊威等[6]在鳡幼魚飼料中添加晶體賴氨酸，賴氨酸水平為1.96%～2.95%之間時(shí)，增重率和特定生長率均隨著賴氨酸水平的升高而升高，當(dāng)超過4.45%時(shí)，生長性能開始下降。在草魚[14]和異育銀鯽幼魚[7]飼料中加入晶體賴氨酸的研究也有相同的結(jié)果。在黃尾鰤、大西洋鮭等魚類的飼料中加入賴氨酸可以提高試驗(yàn)魚的增重率和生長速度，但是當(dāng)賴氨酸水平超過一定劑量后便對(duì)實(shí)驗(yàn)魚的增重和生長沒有了影響[15-17]。通過對(duì)尼羅羅非魚和花鱸等魚類的研究發(fā)現(xiàn)，過量的賴氨酸也會(huì)抑制魚類的生長[18-19]。這些結(jié)果都說明了在飼料中加入過量或者不足的賴氨酸都會(huì)使魚類生長受到抑制，可能由于氨基酸不平衡，加重了多余的氨基酸的脫氮作用，所以影響了飼料利用。還可能由于過量的賴氨酸可能產(chǎn)生毒性作用，也可能由于對(duì)精氨酸有頡頏作用[20]。在本試驗(yàn)條件下，在低水平的賴氨酸條件下，雅羅魚生長性能很低，隨著賴氨酸水平的增加，在2.27%～3.17%之間，其雅羅魚的增重率和特定生長率逐漸增加，當(dāng)賴氨酸水平超過了3.17%之后便開始出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，說明飼料中添加適宜的賴氨酸可提高雅羅魚的生長性能，促進(jìn)雅羅魚的生長。

3.2 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用的影響

魚類對(duì)蛋白質(zhì)的需求就是對(duì)氨基酸的需求，飼料中氨基酸的組成是決定飼料轉(zhuǎn)化效率的最重要因素，而在理想蛋白質(zhì)模式中，氨基酸的組成比例是以賴氨酸為基礎(chǔ)確定，合理利用氨基酸的需要量會(huì)達(dá)到很好的養(yǎng)殖效果，養(yǎng)殖效果主要包括魚體的生長速率和魚體對(duì)飼料的利用率（如飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率等）。大量研究數(shù)據(jù)表明，賴氨酸可顯著提高魚體對(duì)飼料的利用。Forster等[21]研究表明，飼料中添加合成賴氨酸水平從2.2%提高到4.9%時(shí)，牙鲆日采食量提高了72%；同樣真鯛[21]飼料中賴氨酸添加水平從2.5%提高到5.9%，日采食量提高67%。鄢華等[22]同樣報(bào)道，通過添加一定量的賴氨酸可以增加日本比目魚和鯉的采食量。趙春蓉[23]研究結(jié)果表明，當(dāng)飼料添加賴氨酸水平從0%提高到1.2%，鯉攝食量和蛋白質(zhì)沉積率極顯著提高。張永正等[24]認(rèn)為飼料賴氨酸水平從2.08%上升到3.25%，黑鯛幼魚蛋白質(zhì)沉積率顯著提高。張滿隆等[25]報(bào)道鯉飼料中添加0.25%賴氨酸，可以降低飼料系數(shù)，減少鯉養(yǎng)殖成本。而不添加合成賴氨酸時(shí)，鯉蛋白質(zhì)沉積率降低了10%。黃尾鰤賴氨酸缺乏時(shí)，蛋白質(zhì)效率和氮沉積分別降低了25%和31%。本試驗(yàn)條件下，飼料賴氨酸水平為3.17%時(shí)，可顯著提高雅羅魚的氮沉積，添加量再增加則無顯著效果。這說明適當(dāng)提高飼糧賴氨酸水平有利于氮利用效率的提高，即賴氨酸能促使魚對(duì)各種營養(yǎng)物質(zhì)的吸收均衡有效，能促進(jìn)魚體內(nèi)各種生化反應(yīng)，以調(diào)節(jié)新陳代謝，增強(qiáng)魚體內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化率。

3.3 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營養(yǎng)組成的影響

魚類肌肉的主要營養(yǎng)成分受遺傳因子的影響，在一定生長發(fā)育階段是相對(duì)恒定的。但隨著飼料營養(yǎng)水平、生長環(huán)境、養(yǎng)殖技術(shù)管理、加工技術(shù)等外界環(huán)境的變化，其成分亦會(huì)有所改變[26]。肌肉營養(yǎng)成分是衡量養(yǎng)殖動(dòng)物產(chǎn)品肌肉品質(zhì)的重要指標(biāo)[27]。飼料中賴氨酸的添加量對(duì)營養(yǎng)成分的影響的報(bào)道不盡相同。有報(bào)道指出在飼料中添加不同水平的賴氨酸含量對(duì)肌肉蛋白質(zhì)含量不會(huì)產(chǎn)生影響，比如大菱鲆[28]。也有報(bào)道指出,添加賴氨酸對(duì)魚類蛋白含量有所提高，比如鱸魚[19]、大黃魚[29]和黑鯛[24]。杜強(qiáng)等[13]指出了不同賴氨酸水平?jīng)]有影響卵形鯧鲹魚體肌肉的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的含量，僅有2.28%水平的水分含量有所提高。張微微等[30]在克氏原螯蝦飼料中添加賴氨酸顯著降低蝦體水分含量，提高蝦體的粗蛋白和粗脂肪含量。于海瑞等[31]指出，補(bǔ)充氨基酸的魚體粗蛋白含量有所升高，但脂肪有所降低。本試驗(yàn)研究表明，飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉的粗蛋白有不同程度的影響，肌肉中的粗蛋白含量隨著賴氨酸水平的增加而增加，但是當(dāng)達(dá)到最大量時(shí)，粗蛋白含量反而減少。類似的研究結(jié)果在鯰魚[32]、虹鱒[33]、刺參[34]均有報(bào)道。黑鯛[24]、黃顙魚[8]和軍曹魚幼魚[35]研究都表明，飼料不同賴氨酸水平對(duì)魚體氨基酸含量都有顯著影響。于海瑞等[31]研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充賴氨酸對(duì)于羅非魚魚體氨基酸含量不產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)條件下，隨著賴氨酸水平的增加，賴氨酸含量也增加，但超過一定需要量后賴氨酸含量不再增加。隨著賴氨酸添加量的增加，其他氨基酸，比如組氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、谷氨酸和天冬氨酸也都出現(xiàn)先升高后不再增加的趨勢(shì)。造成本試驗(yàn)結(jié)果的原因可能是，在低水平賴氨酸添加量下，雅羅魚體內(nèi)缺少賴氨酸來滿足蛋白質(zhì)的合成，從而不能滿足機(jī)體正常的新陳代謝，隨著賴氨酸添加量的增加，賴氨酸含量也就隨著增加，一旦飼料中賴氨酸水平達(dá)到最適時(shí)，賴氨酸含量也達(dá)到最大，但超過需要量時(shí)，機(jī)體不再需要賴氨酸滿足蛋白質(zhì)合成，賴氨酸含量也就不再增加。也可能由于不同種類，不同種屬的魚類對(duì)于賴氨酸的需求量的不同以及試驗(yàn)的條件和飼養(yǎng)的環(huán)境的差異導(dǎo)致不同的結(jié)果。

4 結(jié)論

綜上所述，飼料中添加賴氨酸在一定程度上有利于雅羅魚的生長，促進(jìn)雅羅魚的蛋白質(zhì)代謝，提高肌肉等組織的營養(yǎng)組成水平，綜合增重率和蛋白質(zhì)效率指標(biāo)，13 g左右雅羅魚對(duì)飼料中賴氨酸需求量3.17%～3.21%。