• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜制備及體外釋放研究

    2017-01-06 11:33:36陳勝黃秀榕祁明信王曉穎胡俊馮春燕柯發(fā)杰胡艷紅
    中國中醫(yī)眼科雜志 2016年5期
    關(guān)鍵詞:藥膜香烯羧甲基

    陳勝,黃秀榕,祁明信,王曉穎,胡俊,馮春燕,柯發(fā)杰,胡艷紅

    欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜制備及體外釋放研究

    陳勝1,黃秀榕2,祁明信1,王曉穎3,胡俊1,馮春燕1,柯發(fā)杰1,胡艷紅1

    目的探討欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜制備及體外釋放,以期為有效防治后發(fā)性白內(nèi)障提供新的給藥途徑。方法將欖香烯乳液和羧甲基殼聚糖完全溶漲,混合均勻后涂布在玻璃板上,烘干備用,采用高效液相色譜法檢測藥膜的濃度;并通過體外釋放實(shí)驗(yàn)摸索藥膜的體外釋放特性。結(jié)果顯微鏡觀察結(jié)果顯示制備的藥膜呈乳白色半透明柔軟薄膜,成膜性能良好;體外釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隨著時間的延長釋藥速率逐漸減慢,4小時累計(jì)釋藥率為72.59%。結(jié)論欖香烯-羧甲基殼聚糖藥膜成膜性能良好,與欖香烯原藥相比,欖香烯-羧甲基殼聚糖藥膜具有一定的緩釋性能,為臨床后發(fā)性白內(nèi)障的防治途徑及中藥給藥途徑的更新提供了基本參考。

    欖香烯;緩釋系統(tǒng);羧甲基殼聚糖;體外釋放

    欖香烯(Elemene,Ele)是天然藥物溫郁金的主要成分,已有報道Ele能抑制腫瘤細(xì)胞生長、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡〔1-2〕。我們前期的研究發(fā)現(xiàn):Ele能抑制體外培養(yǎng)的牛晶狀體上皮細(xì)胞(1ensepithelialcell,LEC)增殖并誘導(dǎo)其凋亡;Ele可抑制人晶狀體上皮(human lensepithelial,HLE-B3)細(xì)胞增殖及細(xì)胞內(nèi)膠原蛋白的合成,并探討了其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及蛋白質(zhì)組學(xué)機(jī)制〔3-5〕。從前期研究結(jié)果看,Ele可望成為防治后發(fā)性白內(nèi)障的有效藥物。但Ele是一種揮發(fā)油,難溶于水,如何在白內(nèi)障手術(shù)中或手術(shù)后安全有效的給藥是本研究的出發(fā)點(diǎn)。

    殼聚糖是甲殼素部分或全部脫乙酰基的產(chǎn)物,作為一種新型的天然高分子材料藥物載體,具有無毒、無刺激性、良好的生物相容性和生物可降解性,可提高藥物的穩(wěn)定性和生物利用度,降低藥物的毒副作用等特點(diǎn)〔6〕。羧甲基殼聚糖為殼聚糖的羧甲基化產(chǎn)物,保留了殼聚糖的優(yōu)良性能,又極大地改善了水溶性,應(yīng)用更加廣泛,尤其在醫(yī)藥領(lǐng)域中其優(yōu)勢正逐漸被學(xué)者所認(rèn)知〔7〕。為提高Ele的水溶性,進(jìn)而改善其藥物釋放特性,且便于手術(shù)中使用,本研究以生物可降解的羧甲基殼聚糖為載體材料,制備了Ele-羧甲基殼聚糖藥膜擬固定在人工晶狀體襻上作為眼內(nèi)植入劑,在白內(nèi)障手術(shù)的同時隨人工晶狀體一起植入眼內(nèi),并對Ele-羧甲基殼聚糖藥膜的制備工藝進(jìn)行了研究,同時考察了載藥藥膜的體外釋放行為,現(xiàn)報道如下。

    1 材料與方法

    1.1試劑和儀器

    欖香烯乳液(大連金港制藥有限公司);β-欖香烯標(biāo)準(zhǔn)品(中國食品藥品檢定研究院);羧甲基殼聚糖(青島弘海生物技術(shù)有限公司);乙腈(國藥集團(tuán)有限公司)。高效液相色譜儀(LC-20AT,日本島津公司);冷凍干燥機(jī)(ALPHA1-2LDplus,德國Christ公司);數(shù)顯小型恒溫真空干燥箱(DZF-150,鄭州長城科工貿(mào)有限公司);小型高速離心機(jī)(Centrifuge5418,德國eppendorf公司);十萬分之一電子天平[MS105DU,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司];電熱恒溫振蕩水槽(DKZ-2,上海一恒科技有限公司);電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(DHG-9240,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

    1.2緩釋藥膜的制備測定及體外釋放

    1.2.1欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜的制備:取羧甲基殼聚糖(CMCS,10萬分子量),加2ml超純水,0.25g甘油,5ml欖香烯注射液(相當(dāng)于欖香烯25mg),使CMCS完全溶漲,混合均勻,涂布在玻璃板上,面積大小8cm× 8cm。然后置于40℃烘箱中烘干(約2h),即得。

    1.2.2欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜中β-欖香烯含量測定高效液相色譜法(highperformanceliquidchro鄄matography,HPLC)檢測欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜中β-欖香烯含量。色譜條件:迪馬C18柱(4.6mm× 150mm,5μm),乙腈∶水(85∶15),柱溫30℃,流速1ml/min;檢測波長:210nm,進(jìn)樣量20μl。標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定:取β-欖香烯對照品適量,配制系列濃度β-欖香烯對照品溶液,如上述所用HPLC條件進(jìn)行檢測。

    1.2.3欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜體外釋放:用打孔器取直徑為7mm圓片狀藥膜,分別置于透析袋(截留分子量為14 000)中,加1ml釋放介質(zhì)(pH7.4磷酸緩沖鹽)后迅速將透析袋用夾子封好,立即置于200ml 37℃的釋放介質(zhì)(pH7.4磷酸緩沖鹽)中振蕩,按設(shè)定時間取出透析袋,倒出透析袋內(nèi)藥膜及介質(zhì),用蒸餾水洗透析袋內(nèi)部,清洗液與倒出的藥膜及介質(zhì)置于玻璃小瓶中冷凍,8h后,用冷凍干燥機(jī)干燥12h。干燥后的殘?jiān)靡欢考状紡?fù)溶,渦旋3min,13000rpm離心,除去不溶鹽類,取上清液,HPLC檢測。

    2 結(jié)果

    2.1欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜表觀形貌

    實(shí)驗(yàn)所制得的欖香烯-羧甲基殼聚糖藥膜為乳白色半透明柔軟薄膜,成膜性良好,藥膜表面未見明顯藥物顆粒(圖1),并且可以很好的固定在人工晶狀體襻上,不改變?nèi)斯ぞ铙w襻的大致形狀,從而不會影響手術(shù)中人工晶狀體的安裝。

    圖1 欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜表觀形貌

    2.2β-欖香烯標(biāo)準(zhǔn)曲線及藥膜中β-欖香烯含量測定

    如上述所用HPLC條件進(jìn)行檢測,標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2和圖3所示,以峰面積(Y)對濃度(X)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程:Y=21650X-19837,R2=0.9999,線性關(guān)系良好。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出直徑為7mm圓片狀藥膜平均每片含β-欖香烯16.16μg。

    2.3欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜體外釋放速率

    欖香烯-羧甲基殼聚糖藥膜釋放速率,30min時累計(jì)釋藥率為50%左右,4h時累計(jì)釋藥率達(dá)72.59%,與原藥相比,具有一定的緩釋效果(P<0.01)。且藥膜在30 min前釋藥速率較快,此后隨著時間的延長釋藥速率逐漸減慢(圖4)。

    3 討論

    殼聚糖為甲殼素脫乙?;a(chǎn)物,來源廣泛,價格便宜,易被降解為無毒小分子氨基葡萄糖,是至今發(fā)現(xiàn)的唯一天然堿性多糖。該化合物具有良好的生物活性、生物相容性和生物可降解性。但由于殼聚糖不溶于水只溶于酸或酸性溶液,而且產(chǎn)品呈微酸性,對人體稍有刺激作用,因此其應(yīng)用范圍受到很大限制〔6〕。羧甲基殼聚糖為殼聚糖的衍生物,具有優(yōu)良的水溶性、抗菌性、成膜性、保濕性和吸附性。作為醫(yī)用材料可應(yīng)用在體內(nèi)和體外,作為藥物載體具有水溶性、膠凝性、促滲透性、生物相容性和可降解性等特點(diǎn),能夠延長藥物在體內(nèi)特定部位的滯留時間,提高藥物的生物利用度等〔7〕。羧甲基殼聚糖具有良好的成膜性,形成的膜光滑透明、柔韌且透氣性好〔8〕。羧甲基殼聚糖可單獨(dú)或與其他材料復(fù)合制成各種膜制劑,用于疾病的治療。如羧甲基殼聚糖與其他材料復(fù)合可制成皮膚再生材料,幫助深度燙傷創(chuàng)面的全層修復(fù),治療燙傷〔9〕。羧甲基殼聚糖口腔復(fù)合膜可治療智牙冠周炎〔10〕。羧甲基殼聚糖絡(luò)合碘復(fù)合材料止血等〔11〕。

    Ele乳液是從姜科植物溫郁金中提取的抗癌有效成分,其主要生物學(xué)活性為降低腫瘤細(xì)胞有絲分裂能力,誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤細(xì)胞的生長。目前Ele乳液在臨床上主要用于癌性胸、腹水及某些惡性實(shí)體瘤的治療,可用于介入、腔內(nèi)化療及癌性胸腹水的輔助治療。我們前期研究發(fā)現(xiàn)Ele能抑制LEC的增殖,有望成為防治后發(fā)性白內(nèi)障的天然藥物。但Ele乳液腹腔注射后,藥物在脂肪組織含量最高??诜詹?,生物利用度僅為18.8%。靜脈注射后,藥物在腦、心、肺、腎、脾、脂肪和肝中含量較多,但由于血-腦屏障的影響,進(jìn)入眼內(nèi)的濃度非常低。如在白內(nèi)障手術(shù)過程中直接采用Ele乳液灌注,有效濃度很難掌握;術(shù)中或術(shù)后前房內(nèi)直接給藥會造成短時間內(nèi)藥物濃度太高引起眼內(nèi)副作用。本研究將一定濃度的Ele乳液與羧甲基殼聚糖混合后可制備成乳白色半透明柔軟薄膜,成膜性能良好,可以很好的將載藥藥膜固定在人工晶狀體的襻上,以便白內(nèi)障手術(shù)中在安裝人工晶狀體的同時將Ele-羧甲基殼聚糖藥膜安放在眼內(nèi)。本研究的體外釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隨著時間的延長釋藥速率逐漸減慢,4 h累計(jì)釋藥率為72.59%,具有一定的緩釋效果,可以避免藥物濃度瞬間在眼內(nèi)過高引起眼內(nèi)副作用。

    后發(fā)性白內(nèi)障是白內(nèi)障術(shù)后常見的并發(fā)癥,盡管手術(shù)技巧不斷進(jìn)步、手術(shù)設(shè)備不斷更新、人工晶狀體材料和設(shè)計(jì)越來越理想,但后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生率仍居高不下,尤其在兒童,幾乎每一例都會出現(xiàn)后發(fā)性白內(nèi)障,目前除了采用摻釹釔鋁石榴石(Neosymiumyttrium Aluminum Garnet,Nd:YAG)激光治療外尚沒有好的治療和預(yù)防方法,而YAG激光后黃斑水腫等潛在的風(fēng)險不容忽視。因此,后發(fā)性白內(nèi)障作為臨床尚未解決的白內(nèi)障手術(shù)并發(fā)癥成為眼科學(xué)者研究的重點(diǎn)。而后發(fā)性白內(nèi)障發(fā)生的主要原因是術(shù)后殘留的晶狀體上皮細(xì)胞(1ens epithelial cells,LECs)增生并向后囊膜移行,我們前期研究發(fā)現(xiàn)Ele能抑制LEC的增殖,本研究將Ele乳液制備成Ele-羧甲基殼聚糖藥膜,固定在人工晶狀體襻上并隨手術(shù)植入眼內(nèi),既不會影響手術(shù)的操作難度,也不會延長手術(shù)的時間,且藥膜具有一定的緩釋效應(yīng),在體內(nèi)作用于殘留的晶狀體上皮細(xì)胞,從而預(yù)防后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生,不失為一種較好的給藥途徑,但Ele-羧甲基殼聚糖藥膜對后發(fā)性白內(nèi)障的防治作用及眼內(nèi)副作用有待于下一步的在體實(shí)驗(yàn)研究。

    圖2 β-欖香烯標(biāo)準(zhǔn)曲線

    圖3 7mm圓片狀藥膜載藥量HPLC圖譜

    圖4 欖香烯-羧甲基殼聚糖緩釋藥膜與欖香烯原藥體外釋放曲線

    [1]Dong Y,Li L,Wang L,et al.Preliminary study of the effects of β-el鄄emene on MCF-7/ADM breast cancer stem cells[J].Genetics and Molecular Research,2015,14(1):2347-2355.

    [2]Zhao S,Wu J,Zheng F,et al.β-elemene inhibited expression of DNA methyltransferase 1 through activation of ERK1/2 and AMPK signalling pathways in human lung cancer cells:the role of Sp1[J]. Journal of Cellular Molecular Medicine,2015,19(3):630-641.

    [3]胡艷紅,黃秀榕,祁明信,等.欖香烯對人晶狀體上皮細(xì)胞增生及細(xì)胞周期的影響[J].眼科研究,2009,27(11):969-972.

    [4]胡艷紅,黃秀榕,祁明信,等.欖香烯抑制人晶狀體上皮細(xì)胞增殖的蛋白質(zhì)組研究[J].中華眼科雜志,2010,46(5):427-431.

    [5]Hu Y H,Huang X R,Qi M X,et al.Mechanisms of inhibition of el鄄emene on human lens epithelial cell proliferation in vitro[J].Interna鄄tional Journal of Ophthalmology,2011,4(3):255-258.

    [6]黃道龍,張明杰,崔進(jìn).殼聚糖的改性及應(yīng)用研究進(jìn)展[J].化學(xué)與生物工程,2015,12(4):6-9.

    [7]王美娜,李苑新,蔡興.羧甲基殼聚糖的性能及應(yīng)用概況[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2015,21(1):228-232.

    [8]殷雪,周巋,王春穎,等.殼聚糖改性、抑菌性及成膜性研究[J].武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報,2008,27(3):22-26.

    [9]黃愛賓,郭瑞,徐少駿,等.膠原-磺化羧甲基殼聚糖/硅橡膠皮膚再生材料的制備及其對小型豬燙傷創(chuàng)面全層皮膚缺損的修復(fù)研究[J].高分子學(xué)報,2009,12(2):111-117.

    [10]劉起群.羧甲基殼聚糖口腔復(fù)合膜劑對智牙冠周炎療效的觀察[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2015,12(1):134-136.

    [11]李冬冬,吳岳林,繆震元,等.羧甲基殼聚糖絡(luò)合碘復(fù)合材料的合成和止血活性評價[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志,2015,12(2):125-126,178.

    Preparation and release kinetics of Elemene-Chitosan delivery system


    CHEN Sheng,HUANG Xiurong,QI Mingxin,et al.The Second Affiliated People's Hospital of Fujian College of Traditional Chinese Medicine,F(xiàn)uzhou 350003,China

    OBJECTIVETo discuss the preparation and release of Elemene-Chitosan delivery system in or鄄der to provide new route of administration for after cataract.METHODSElemene emulsion and carboxymethyl chi鄄tosan were in completely swelling,and then were mixed evenly and coated on the glass plate.After that,it was dried for application.The high performance liquid chromatographic method was used for the determination of membrane concentration phase;and in vitro release experiment was performed to explore itscharacteristicsof in vitro release.RESULTSA certain concentration of elemene emulsion and carboxymethyl chitosan mixture could be prepared into milky white translucent soft film which was of strong plasticity.The in vitro release experiment results showed that with the time extended,its release delivery rate gradually slowed down.Specifically,4 hours cumulative release rate of drug was 72.59%.CONCLUSIONSElemene-chitosan membrane had strong plasticity and was easy to install in operation.In contrast to original drug of elemene,it showed some slow-release property,which provoked basic refer鄄ences for new solution of prevention and treatment on after cataract and new route of administration of traditional Chinese medicine.

    elemene;sustained release system;carboxymethyl chitosan;release in vitro

    R944.9

    A

    1002-4379(2016)05-0285-04

    10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2016.05.002

    福建省衛(wèi)生廳中青年骨干人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2014-ZQN-JC-31);福建省衛(wèi)生廳中醫(yī)藥重點(diǎn)項(xiàng)目(wzhw201301)

    1福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院,福州350003;2福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院,福州350122;3福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,福州350122

    胡艷紅,E-mail:46665871@qq.com

    猜你喜歡
    藥膜香烯羧甲基
    β-欖香烯對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞遷移的影響及其機(jī)制研究
    欖香烯注射液對吉非替尼在PC-9/GR細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)動力學(xué)影響
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:19:37
    β-欖香烯對人胃癌細(xì)胞SGC7901的抑制作用及部分機(jī)制
    生物可吸收性復(fù)方奧硝唑緩釋藥膜的制備及臨床應(yīng)用
    膠原/纖維蛋白膠復(fù)合藥膜的性質(zhì)及其體外抑瘤效應(yīng)初步研究
    羧甲基纖維素鈉凝膠載體的制備及其控制釋放作用的研究
    羧甲基羅望子膠的制備與表征
    點(diǎn)陣激光治療皮膚病后治療方式與實(shí)施
    羧甲基甘薯淀粉鈉的理化特性研究
    羧甲基玉米淀粉合成過程的優(yōu)化
    亚洲内射少妇av| 性色av一级| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 欧美潮喷喷水| 热re99久久精品国产66热6| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产av不卡久久| 亚洲怡红院男人天堂| av国产免费在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 高清av免费在线| 中国国产av一级| av在线播放精品| 久久精品综合一区二区三区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久久国产一区二区| 少妇的逼好多水| 欧美少妇被猛烈插入视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产视频首页在线观看| 我要看日韩黄色一级片| 99九九线精品视频在线观看视频| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 18禁在线播放成人免费| 日本av手机在线免费观看| 观看美女的网站| 午夜亚洲福利在线播放| 免费观看性生交大片5| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 激情 狠狠 欧美| 国产高清国产精品国产三级 | 夫妻午夜视频| 97在线视频观看| 我要看日韩黄色一级片| av国产精品久久久久影院| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产成人一区二区在线| 特级一级黄色大片| 午夜免费男女啪啪视频观看| 免费黄频网站在线观看国产| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产欧美日韩精品一区二区| 天堂网av新在线| 91狼人影院| 久久精品国产亚洲av涩爱| 欧美日韩综合久久久久久| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久久99热这里只有精品18| 九色成人免费人妻av| 男女边吃奶边做爰视频| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲国产成人一精品久久久| 一级爰片在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 精品酒店卫生间| 亚洲av日韩在线播放| 欧美bdsm另类| 亚洲内射少妇av| 国模一区二区三区四区视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲图色成人| 午夜视频国产福利| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 校园人妻丝袜中文字幕| 日本一二三区视频观看| 嘟嘟电影网在线观看| 男人添女人高潮全过程视频| 国产成人精品福利久久| 日本黄大片高清| 日韩伦理黄色片| 国产精品三级大全| av国产久精品久网站免费入址| 干丝袜人妻中文字幕| 夜夜爽夜夜爽视频| 九草在线视频观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久久久久久久大av| 听说在线观看完整版免费高清| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 亚洲综合色惰| 激情 狠狠 欧美| 亚洲最大成人手机在线| 欧美日韩亚洲高清精品| 男人添女人高潮全过程视频| 少妇高潮的动态图| 神马国产精品三级电影在线观看| av免费在线看不卡| 综合色丁香网| 男人爽女人下面视频在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 午夜免费观看性视频| 久久女婷五月综合色啪小说 | 黄色怎么调成土黄色| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲三级黄色毛片| 三级经典国产精品| 国产精品国产三级专区第一集| 日韩av免费高清视频| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久这里有精品视频免费| 精品酒店卫生间| 黄片无遮挡物在线观看| 精品久久久久久久久av| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩欧美精品免费久久| 内地一区二区视频在线| 欧美最新免费一区二区三区| 一级a做视频免费观看| 最近的中文字幕免费完整| 国产毛片在线视频| 在线观看一区二区三区| 五月天丁香电影| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久韩国三级中文字幕| 人妻 亚洲 视频| freevideosex欧美| 天天躁日日操中文字幕| 久热这里只有精品99| 亚洲精品视频女| 亚洲av一区综合| 亚洲人成网站在线播| 熟女电影av网| 久久影院123| 国产精品伦人一区二区| av.在线天堂| 欧美另类一区| av线在线观看网站| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 天天躁日日操中文字幕| 赤兔流量卡办理| 日韩欧美精品v在线| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲人成网站高清观看| 黄片无遮挡物在线观看| 在现免费观看毛片| 尾随美女入室| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日本熟妇午夜| 大码成人一级视频| 美女视频免费永久观看网站| 久久久久久久久久成人| 亚洲精品成人久久久久久| 亚洲va在线va天堂va国产| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产一区有黄有色的免费视频| 午夜日本视频在线| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 黄片无遮挡物在线观看| 一本一本综合久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产成人91sexporn| 国产精品一区www在线观看| 国产成人一区二区在线| 黑人高潮一二区| 在线免费观看不下载黄p国产| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| 香蕉精品网在线| 全区人妻精品视频| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 直男gayav资源| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 中文资源天堂在线| 97超视频在线观看视频| 欧美 日韩 精品 国产| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美国产精品一级二级三级 | 下体分泌物呈黄色| 久久久久久久久久久免费av| 男女国产视频网站| videos熟女内射| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色| 丝袜喷水一区| 国产黄频视频在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 老司机影院成人| 亚洲,欧美,日韩| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲色图综合在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲人与动物交配视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| 内地一区二区视频在线| 日韩欧美精品v在线| 热99国产精品久久久久久7| 内射极品少妇av片p| 亚洲av免费在线观看| 日韩一区二区三区影片| 日本黄大片高清| 久久精品久久精品一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产中年淑女户外野战色| 国产精品.久久久| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲图色成人| 免费观看a级毛片全部| 国产老妇伦熟女老妇高清| 免费大片黄手机在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 日日啪夜夜爽| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲欧美清纯卡通| 成人免费观看视频高清| 校园人妻丝袜中文字幕| 97超碰精品成人国产| 高清日韩中文字幕在线| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久久精品性色| 国产精品一区二区在线观看99| 激情五月婷婷亚洲| 一级爰片在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 韩国av在线不卡| 最近中文字幕2019免费版| 在线观看国产h片| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲精品第二区| 在线a可以看的网站| 久久久精品欧美日韩精品| 老女人水多毛片| 国产精品成人在线| 在线免费十八禁| 看十八女毛片水多多多| 超碰av人人做人人爽久久| 免费少妇av软件| 久久久久精品久久久久真实原创| 51国产日韩欧美| 99精国产麻豆久久婷婷| 午夜福利视频精品| 欧美人与善性xxx| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产91av在线免费观看| 亚洲天堂av无毛| 亚洲成人久久爱视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 日本wwww免费看| 午夜免费鲁丝| 亚洲国产成人一精品久久久| 免费av不卡在线播放| 一级二级三级毛片免费看| 黄色欧美视频在线观看| 七月丁香在线播放| 内地一区二区视频在线| 欧美日韩精品成人综合77777| 51国产日韩欧美| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 国产av码专区亚洲av| 有码 亚洲区| 18禁动态无遮挡网站| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产男人的电影天堂91| 亚洲美女搞黄在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 久久久久国产精品人妻一区二区| 成年女人看的毛片在线观看| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲最大成人中文| 精品少妇久久久久久888优播| 赤兔流量卡办理| 国产精品人妻久久久影院| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 免费看a级黄色片| 精品一区二区三区视频在线| 国产一区二区三区综合在线观看 | 久久国内精品自在自线图片| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 观看美女的网站| 少妇的逼水好多| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美成人午夜免费资源| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 精品熟女少妇av免费看| 97超视频在线观看视频| 成年免费大片在线观看| 不卡视频在线观看欧美| av国产免费在线观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 在线观看国产h片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲av成人精品一二三区| 热99国产精品久久久久久7| 少妇的逼水好多| 国产精品成人在线| av国产久精品久网站免费入址| 国产免费又黄又爽又色| 2022亚洲国产成人精品| 在线观看免费高清a一片| 免费黄网站久久成人精品| 免费观看av网站的网址| 久久久成人免费电影| 欧美激情在线99| 免费少妇av软件| 日韩av不卡免费在线播放| 91久久精品国产一区二区三区| 成年av动漫网址| 久久久午夜欧美精品| 亚洲精品影视一区二区三区av| 另类亚洲欧美激情| 一级毛片 在线播放| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产爱豆传媒在线观看| 久久精品夜色国产| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 日日啪夜夜撸| 国产视频内射| 街头女战士在线观看网站| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲精品,欧美精品| 在线免费观看不下载黄p国产| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 丝袜美腿在线中文| 波野结衣二区三区在线| 成人漫画全彩无遮挡| 国产综合懂色| 日韩大片免费观看网站| 精品久久久噜噜| 国产精品人妻久久久影院| 国产色爽女视频免费观看| 我的女老师完整版在线观看| 一级爰片在线观看| 国产男女内射视频| 久久久精品免费免费高清| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 丝袜喷水一区| 久久人人爽人人爽人人片va| 可以在线观看毛片的网站| 久久人人爽人人爽人人片va| 日韩视频在线欧美| 亚洲国产欧美人成| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 欧美性感艳星| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 六月丁香七月| 欧美区成人在线视频| 精品久久久精品久久久| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 久久久久久久大尺度免费视频| 日本色播在线视频| 国产爽快片一区二区三区| 最新中文字幕久久久久| 日本三级黄在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲精品一区蜜桃| 亚州av有码| 99热这里只有是精品50| 国产男女内射视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| 偷拍熟女少妇极品色| 尾随美女入室| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产精品一区二区在线观看99| 精品久久久久久久末码| 插逼视频在线观看| 一本一本综合久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲av国产av综合av卡| 国产精品久久久久久精品古装| 国产精品无大码| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产一区二区在线观看日韩| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 欧美精品国产亚洲| 久热这里只有精品99| 国产视频首页在线观看| 日本熟妇午夜| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 777米奇影视久久| 精品视频人人做人人爽| 国产精品精品国产色婷婷| 久久久久久久久久成人| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美成人一区二区免费高清观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 观看免费一级毛片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| a级一级毛片免费在线观看| 久久久久久久午夜电影| av在线亚洲专区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲色图av天堂| 美女内射精品一级片tv| 天堂中文最新版在线下载 | 全区人妻精品视频| 人妻少妇偷人精品九色| 熟女电影av网| 能在线免费看毛片的网站| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品一区www在线观看| 午夜福利在线在线| 午夜精品国产一区二区电影 | 嘟嘟电影网在线观看| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产69精品久久久久777片| 日本黄大片高清| 一级毛片久久久久久久久女| 丝袜喷水一区| 26uuu在线亚洲综合色| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 99久久精品一区二区三区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 高清av免费在线| 成年av动漫网址| 国产永久视频网站| 乱系列少妇在线播放| 免费高清在线观看视频在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩大片免费观看网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲电影在线观看av| 黄色视频在线播放观看不卡| 成人黄色视频免费在线看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国产亚洲91精品色在线| 国产毛片在线视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲精品aⅴ在线观看| a级毛色黄片| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲无线观看免费| 亚洲国产欧美人成| 夜夜爽夜夜爽视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 丝袜喷水一区| 99热网站在线观看| 高清在线视频一区二区三区| 草草在线视频免费看| 直男gayav资源| 久久人人爽人人爽人人片va| av线在线观看网站| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产黄色视频一区二区在线观看| 大话2 男鬼变身卡| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲国产日韩一区二区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 在线观看一区二区三区激情| 丰满人妻一区二区三区视频av| 日日啪夜夜爽| 久久99热这里只有精品18| 日本三级黄在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 免费看av在线观看网站| 婷婷色麻豆天堂久久| 最近手机中文字幕大全| 免费观看在线日韩| 国内精品宾馆在线| 亚洲电影在线观看av| 日本一二三区视频观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 欧美区成人在线视频| 一本久久精品| av.在线天堂| 国内精品宾馆在线| 三级国产精品欧美在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 国产av码专区亚洲av| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 丝瓜视频免费看黄片| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲,欧美,日韩| 性色avwww在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久精品国产亚洲av天美| 国产男人的电影天堂91| 十八禁网站网址无遮挡 | 久久99热这里只频精品6学生| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲怡红院男人天堂| 久久这里有精品视频免费| 欧美激情在线99| 成人毛片60女人毛片免费| 嘟嘟电影网在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 伊人久久精品亚洲午夜| 老司机影院成人| 亚洲精品日韩av片在线观看| 香蕉精品网在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 久久精品久久久久久久性| 欧美日韩在线观看h| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲内射少妇av| 国产欧美亚洲国产| 丝袜脚勾引网站| 26uuu在线亚洲综合色| 欧美潮喷喷水| 91精品伊人久久大香线蕉| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲欧洲日产国产| 一个人看的www免费观看视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 在线看a的网站| 少妇熟女欧美另类| 国产伦精品一区二区三区视频9| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 精品久久久久久久末码| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 极品少妇高潮喷水抽搐| 18禁在线播放成人免费| 熟女电影av网| 婷婷色av中文字幕| 黑人高潮一二区| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲国产精品成人久久小说| 又大又黄又爽视频免费| 国产免费又黄又爽又色| 成人漫画全彩无遮挡| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲精品视频女| av黄色大香蕉| 一级毛片电影观看| 亚洲av二区三区四区| av女优亚洲男人天堂| 最新中文字幕久久久久| 久久久欧美国产精品| 插阴视频在线观看视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 成人美女网站在线观看视频| 精品少妇久久久久久888优播| 1000部很黄的大片| 高清毛片免费看| 国产高清国产精品国产三级 | 国产一区二区在线观看日韩| 日韩欧美一区视频在线观看 | 视频中文字幕在线观看| 两个人的视频大全免费| 欧美成人午夜免费资源| 久久影院123| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 干丝袜人妻中文字幕| 国产av不卡久久| h日本视频在线播放| 国产精品国产三级国产专区5o| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 丝袜脚勾引网站| www.色视频.com| 欧美日本视频| 禁无遮挡网站| 日韩伦理黄色片| kizo精华| 亚洲av免费高清在线观看| 99热国产这里只有精品6| 久久久欧美国产精品| 午夜福利视频1000在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 赤兔流量卡办理| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲精品成人久久久久久| 国产在线男女| 国产在视频线精品| 国产 一区精品| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 男插女下体视频免费在线播放| 日韩中字成人| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 大香蕉97超碰在线| eeuss影院久久| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲四区av| 草草在线视频免费看| 高清视频免费观看一区二区| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲性久久影院| 国产精品一区www在线观看| 我的女老师完整版在线观看| www.av在线官网国产| 人妻系列 视频|