消除重度脂血、溶血、黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)干擾的研究探討

摘要：本文在探討人血生化檢測(cè)中的干擾因素與干擾機(jī)制的基礎(chǔ)上，對(duì)消除重度脂血、溶血、黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)干擾的研究新進(jìn)展進(jìn)行了綜述，借以為提高血清生化檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性提供參考。

關(guān)鍵詞：血清生化檢測(cè)；重度脂血；溶血；黃疸

脂血、溶血與黃疸是血清生化檢測(cè)中的常見干擾因素，直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性，因此消除脂血、溶血與黃疸具有非常重要的作用。本文就消除重度脂血、溶血、黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)干擾的研究新進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

1 血清生化檢測(cè)干擾因素與干擾機(jī)制

脂血的發(fā)生是因?yàn)槿槊游⒘Ｔ龆嘣斐傻?，由于乳糜微粒具有散射光，影響化學(xué)反應(yīng)的吸光度與產(chǎn)物顏色變化，因此在采用比濁法、比色法測(cè)定的過程中往往受到嚴(yán)重的干擾。并且這種干擾造成的誤差會(huì)因乳糜微粒的增加變大，呈現(xiàn)出正相關(guān)關(guān)系[1]。

在臨床生化檢測(cè)中，血液標(biāo)本溶血是一種最為常見的干擾因素，主要可分為體內(nèi)與體外溶血，體內(nèi)溶血通常由疾病、手術(shù)、藥物等因素所致；而體外溶血?jiǎng)t是因抽血操作負(fù)壓大、血液標(biāo)本冷凍、強(qiáng)烈震蕩、接觸表面活性劑等物理或化學(xué)因素所致，其干擾機(jī)制在于：首先，紅細(xì)胞高濃度的LDH、AST與鉀等物質(zhì)經(jīng)溶血進(jìn)入到血清，進(jìn)而增加了血清中相應(yīng)物質(zhì)的濃度，造成檢測(cè)結(jié)果偏高。其次，本身血紅蛋白干擾，并且血紅蛋白的干擾在不同的分析方法中干擾程度也存在較大的差異。另外，一些細(xì)胞成分也會(huì)干擾化學(xué)反應(yīng)[2]。

黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)的干擾機(jī)制可歸納為兩點(diǎn)：一方面是因?yàn)槟懠t素本身是一種還原劑，能夠?qū)υ噭┲芯哂醒趸缘闹虚g反應(yīng)產(chǎn)物、成分進(jìn)行中和，消耗中間產(chǎn)物、影響試劑量，對(duì)基于重氮反應(yīng)原理或者NAD（P）H脫氫原理的生化反應(yīng)造成負(fù)干擾。另一方面，水溶液中的膽紅素的穩(wěn)定性極差，易自行氧化成膽褐素或者膽綠素，同時(shí)也容易發(fā)生烯醇化，導(dǎo)致本底吸光度升高[1]。

2 消除重度脂血、溶血、黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)干擾的研究探討

2.1標(biāo)本正確處理與保存消除干擾 由于脂血、溶血、黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)干擾主要是通過對(duì)血液標(biāo)本本底的增加來干擾檢測(cè)結(jié)果的，因此通過對(duì)標(biāo)本的正確處理可消除這種干擾。例如，對(duì)血清樣本、試劑空白通過稀釋來消除干擾物光吸收本底和吸收曲線漂移影響。如朱征等[3]在輕度與中度脂血樣本的處理中提出了一點(diǎn)終點(diǎn)與兩點(diǎn)終點(diǎn)法，即設(shè)置樣本空白與固定時(shí)間法，前者可扣除樣本本底吸光度，后者目的在于消除樣本與實(shí)際樣色、濁度等干擾物質(zhì)的影響。

當(dāng)樣本為重度脂血樣本可采用高速離心、超濾、PEG或者磷鎢酸-鎂等措施消除干擾。但相關(guān)研究也指出，在消除脂血對(duì)TC與TG的干擾中，并不適合采用高速離心法，這是因?yàn)槿槊游⒘Ｖ泻胁糠諸C（4%）與TG（86%），因此消除重度脂血的干擾，可通過對(duì)原血清稀釋進(jìn)行再測(cè)定。有研究指出，可將聚苯乙烯與血紅蛋白抗體結(jié)合后加入到溶血血清中，然后經(jīng)離心獲得上清液，消除血紅蛋白干擾。國(guó)外相關(guān)報(bào)道指出，脂質(zhì)清除劑Lipoclear○R能夠有效的消除脂血對(duì)生化檢測(cè)的干擾，而隆維東等[4]對(duì)正常與脂血樣本的檢測(cè)中，通過Lipoclear○R實(shí)際的處理，對(duì)18項(xiàng)生化指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干擾消除效果良好，各項(xiàng)常規(guī)生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果改善較好。

2.2干化學(xué)分析儀消除干擾 干化學(xué)分析儀是根據(jù)Kubelka-Munk理論為基礎(chǔ)的多層薄膜的固相試劑技術(shù)，能夠?qū)崿F(xiàn)將液相反應(yīng)物中的反應(yīng)轉(zhuǎn)移到固相載體上，利用基于離子選擇電極（ISE）的差示電位法與反射光度法進(jìn)行檢測(cè)，第1層能夠有效的對(duì)大分子進(jìn)行過濾，使標(biāo)本均勻分布，將脂血、溶血與黃疸的干擾降到最低，同時(shí)提高分析特異性；第2層對(duì)反應(yīng)的序列進(jìn)行控制；第3層則為指示劑層，產(chǎn)生顯色復(fù)合物。與是化學(xué)法相比，更適合除去脂血、溶血與黃疸對(duì)血清生化檢測(cè)的干擾。在探討干化學(xué)法對(duì)脂血標(biāo)本的抗干擾能力的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，采用Vitros-250干化學(xué)分析儀能夠有效的消除不同程度脂血（輕、中與重度）對(duì)血清生化檢測(cè)的干擾，有效測(cè)定了AST、GGT、AKP、ALT、TP、Urea、ALB、肌醉、Glu、LDH、CK、K+、Na+、C1-檢測(cè)項(xiàng)目。

2.3副波長(zhǎng)消除干擾 脂血、溶血與黃疸血清樣本在較寬的波長(zhǎng)范圍內(nèi)吸光譜普遍較強(qiáng)，其中脂血樣本中，脂質(zhì)吸收光譜在300～600nm均有吸收；在溶血樣本中血紅蛋白在540nm與580nm有較強(qiáng)的吸收峰；而膽紅素則在400～500nm具有較強(qiáng)的吸收峰。由于干擾物質(zhì)波長(zhǎng)與檢測(cè)波長(zhǎng)部分重疊，因此為消除干擾可在充分考慮檢測(cè)物質(zhì)與干擾物質(zhì)的特性基礎(chǔ)上，選擇適當(dāng)?shù)母辈ㄩL(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，若副波長(zhǎng)選擇不當(dāng)，則可能導(dǎo)致某些檢測(cè)指標(biāo)無法測(cè)定。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，測(cè)定無機(jī)磷時(shí)采用540nm作為副波長(zhǎng)能夠有效消除黃疸干擾。在檢測(cè)待測(cè)物時(shí)，同時(shí)采用兩個(gè)波長(zhǎng)來進(jìn)行檢測(cè)，將主波長(zhǎng)吸光度減去副波長(zhǎng)吸光度，進(jìn)而計(jì)算檢測(cè)物的濃度。

2.4實(shí)驗(yàn)指數(shù)設(shè)置消除干擾 石玲玉等[5]研究發(fā)下按，血紅蛋白的濃度變化值，即H指數(shù)與溶血后的AP、AST、CK、LDH、Na+與CK-MB等指標(biāo)目有關(guān)，因此將測(cè)得的H指數(shù)與檢測(cè)結(jié)果建立回歸方程，然后對(duì)輕度與中度溶血標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行校正，但該方法在重度溶血標(biāo)本中結(jié)果并不理想，需要進(jìn)行樣本的重新采集。

3 結(jié)語

脂血、溶血與黃疸是血清生化檢測(cè)中的常見干擾因素，直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)、可靠與準(zhǔn)確性，因此消除脂血、溶血與黃疸具有非常重要的意義。

綜上所述，對(duì)脂血、溶血與黃疸的正確處理，有效消除其干擾是獲得較為準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵，進(jìn)而為臨床提供準(zhǔn)確的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳明坤，李聞捷，張建榮.溶血、脂血、黃疸樣本對(duì)生化項(xiàng)目檢測(cè)的干擾機(jī)制及消除[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，（16）：2272-2275.

[2]孟凡超，趙宗玲，張梅，等.三酰甘油對(duì)臨床生化檢查的干擾劑量效應(yīng)分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2014，（18）：2526-2528.

[3]朱征，丁顯平，楊敏，等.消除高脂血對(duì)臨床生化測(cè)定影響的方法研究[J].西南軍醫(yī)，2013，（2）：147-148.

[4]隆維東，黃冬悅，李堅(jiān)，等.脂質(zhì)清除劑Lipoclear○R消除脂血對(duì)常規(guī)生化項(xiàng)目檢測(cè)干擾的效果評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，（1）：72-74. [5]石玉玲，陳建蕓，張亞松.應(yīng)用溶血指數(shù)探討溶血對(duì)多個(gè)生化項(xiàng)目的干擾情況[J].生物技術(shù)通訊，2012.23（5）： 722-726.

編輯/蔡睿琳