3種真空采血管對部分生化項目檢測結(jié)果的比較分析

摘要：目的 評估肝素鋰抗凝血漿和分離膠促凝血清對常規(guī)生化項目測定結(jié)果的影響，探討以此方法縮短正流轉(zhuǎn)時間（TAT）的可行性。方法 用含肝素鋰的真空采血管和含促凝劑的分離膠真空采血管分別采集37份靜脈血液，測定18項常規(guī)生化項目，并與不含添加劑的普通紅管血清進(jìn)行比較。結(jié)果 與普通紅管比較，肝素鋰抗凝血漿除Cre、UA、CKMB等3項結(jié)果間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）外，其余15項差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；分離膠促凝血清 TP、ALB、ALP、Che、Urea、Cre、CK、Ca、GLU等9項差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）外，其余9項差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 肝素鋰抗凝血漿、分離膠促凝血清對常規(guī)生化項目的測定均存在不同程度的影響，若為了縮短正流轉(zhuǎn)時間（TAT）而選擇血漿，應(yīng)根據(jù)實驗室的具體情況建立相關(guān)血清血漿的換算體系，或者建立相應(yīng)的血漿正常參考區(qū)間；若選擇分離膠/促凝劑，在投入應(yīng)用前，應(yīng)進(jìn)行全面評估，選用質(zhì)量過關(guān)的產(chǎn)品。

關(guān)鍵詞：肝素鋰；分離膠；促凝劑；正流轉(zhuǎn)時間

隨著醫(yī)療技術(shù)的快速發(fā)展，臨床診療對臨床實驗室的要求已經(jīng)不僅僅停留在對檢測結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度上，近年來對如何有效縮短各檢驗項目的正流轉(zhuǎn)時間（TAT）越來越重視。對于生化檢驗，傳統(tǒng)的血清分離方法由于受到血凝速度的限制，不利于檢測報告的快速發(fā)出，這一影響在冬季尤為明顯，這是造成TAT延長的重要環(huán)節(jié)之一。因此，肝素鋰抗凝、分離膠和促凝劑在生化標(biāo)本采集中的應(yīng)用越來越廣泛。為了解肝素鋰抗凝血漿和含促凝劑的分離膠血清對生化檢測結(jié)果的影響，本文對37例健康體檢者的肝素鋰抗凝血漿和含促凝劑的分離膠血清分別與不含添加劑的紅管血清進(jìn)行比較分析，探討以此縮短TAT方法的可行性。

1資料與方法

1.1標(biāo)本來源 本院健康體檢志愿者37例，其中男13例，女24例。標(biāo)本避免脂血和溶血。

1.2采血管與分組 紅管組：不含促凝劑的普通真空采血管（紅管）為血清對照組；黃管組：含促凝劑和分離膠的真空采血管（黃管）；綠管組：含肝素鋰抗凝劑的真空采血管（綠管）。三種采血管均由美國BD公司提供。

1.3檢測指標(biāo) 總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（γ-GT）、膽堿酯酶（CHE）、尿素（Urea）、肌酐（Cre）、尿酸（UA）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶MB型同工酶（CKMB）、乳酸脫氫酶（LDH）、鉀（K）、鈉（Na）、氯（Cl）、鈣（Ca）、葡萄糖（GLU），共18項。

1.4儀器和試劑 ROCHE MODULAR PP 模塊全自動生化分析儀，所有項目所用的試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品均為Roche公司提供的配套產(chǎn)品，嚴(yán)格按照試劑使用說明書進(jìn)行參數(shù)設(shè)置。

1.5方法 分別用紅管、綠管和黃管采集同一患者坐姿清晨空腹靜脈血約3mL。紅管和黃管采樣后于室溫或37℃放置30min ；綠管采樣后輕輕顛倒混勻3～5次，三組標(biāo)本分別于低速離心機3000r/min 離心5min ，排除高脂血、溶血、高膽紅素血標(biāo)本。均于抽血后3h內(nèi)完成全部項目的檢測。所有測定項目均嚴(yán)格按照試劑盒說明書設(shè)定測定參數(shù)，采用配套校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，確認(rèn)質(zhì)控結(jié)果在控后，同時對3組標(biāo)本進(jìn)行測定。綠管組和黃管組測定結(jié)果分別與紅管組進(jìn)行比較。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法 采用 Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以x±s表示，組間比較采用配對計量資料t檢驗；以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

18項檢測指標(biāo)中，綠管組與紅管組檢測結(jié)果間比較，除Cre、UA、CKMB等3項結(jié)果間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）外，其余15項差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；黃管組與紅管組檢測結(jié)果間比較， TP、ALB、ALP、Che、Urea、Cre、CK、Ca、GLU等9項差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）外，其余9項差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3討論

血清是指離體的血液凝固之后，經(jīng)血凝塊聚縮所釋出的液體；而血漿是指離開血管的血液經(jīng)抗凝處理后，通過離心沉淀所獲得的不含細(xì)胞成分的液體。傳統(tǒng)方法通常采用血清標(biāo)本進(jìn)行生化檢驗，但由于血液凝固需要一段時間，血液標(biāo)本需孵育30min 后再離心、上機檢測、報告結(jié)果，從而使報告時間延長，這在冬季尤為明顯，影響急診標(biāo)本報告的及時性，也不利于縮短TAT。此外，對于臨床采用抗凝治療的患者，其血液凝固及析出血清的時間會相應(yīng)延長，另外纖維蛋白凝塊會干擾分析儀，可能導(dǎo)致儀器樣品針和管道堵塞，造成嚴(yán)重的后果，這方面在透析患者的血液檢驗特別明顯。肝素抗凝劑能夠較好地避開血液凝固的過程，盡快對標(biāo)本進(jìn)行分離和檢測；而分離膠促凝采血管具有快速分離血清、易保存等優(yōu)點，從而縮短TAT，這對于挽救臨床危急患者的生命至關(guān)重要。

實驗資料表明，肝素鋰抗凝血漿與血清比較，Cr、UA、CKMB等項目差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；而TP、ALB、ALT、AST、ALP、γ-GT、CHE、Urea、CK、LDH、K、Na、Cl、Ca、GLU等項目差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與國內(nèi)文獻(xiàn)報道不盡一致[1，2]；含促凝劑的分離膠血清與普通紅管血清比較，TP、ALB、ALP、Che、Urea、Cre、CK、Ca、GLU等項目差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；而ALT、AST、γ-GT、UA、CKMB、LDH、K、Na、Cl等項目差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。產(chǎn)生差異的原因可能與分析系統(tǒng)、方法學(xué)以及抗凝劑、分離膠、促凝劑的質(zhì)量等因素有關(guān)。

實驗資料結(jié)果顯示，部分生化項目的肝素鋰抗凝血漿與普通紅管血清結(jié)果之間存在一定差異，因為血清與血漿畢竟是有差異的，這主要是由復(fù)雜的凝血過程導(dǎo)致的，由此產(chǎn)生了相應(yīng)檢測指標(biāo)的差異。對于常規(guī)生化檢查，血清中某些指標(biāo)的測定值會明顯高于機體真實值，如AST、LDH、ALP、K等；而某些指標(biāo)的測定值會明顯低于機體真實值，如GLU、TP等[3]。以血K為例，本實驗結(jié)果顯示，肝素鋰血漿K較紅管血清K平均偏低約0.2mmol/L，與文獻(xiàn)報道一致[4]，主要原因有：一是由于血液凝固時血小板會釋放出鉀離子，導(dǎo)致血清鉀濃度增高；二是血液凝固過程中血塊收縮擠壓，細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變，使紅細(xì)胞中發(fā)生離子交換從而使血清中離子濃度發(fā)生改變；三是肝素與血液中陽離子結(jié)合，即肝素與K等結(jié)合，影響離子電極對K的響應(yīng)，導(dǎo)致血清K濃度較肝素鋰抗凝血漿高[3，4]。這一差異在正常參考區(qū)間的上限和下限附近時容易給臨床診斷和治療造成誤導(dǎo)。

分離膠促凝真空采血管是在惰性分離膠真空管中加入促凝劑，以達(dá)到快速促凝，快速分離血清的目的，相對于普通紅管，其優(yōu)點明顯，即血清的分離速度快、分離效果好，且分離膠界于血清和血細(xì)胞之間，可有效地保護(hù)血清成分，從而實現(xiàn)原管上機，原管保存血清備查，減少了再次轉(zhuǎn)管引起誤差的可能性[5]。實驗資料結(jié)果顯示，18項常規(guī)生化項目與普通紅管血清的結(jié)果間比較，有一半項目其差異有統(tǒng)計學(xué)意義。由于分離膠和促凝劑都是惰性物質(zhì)，一般不會對生化指標(biāo)產(chǎn)生影響[6-8]，也有學(xué)者報道分離膠對部分生化指標(biāo)檢驗有影響[9]，我們分析引起差異的主要原因可能與分離膠和（或）促凝劑含雜質(zhì)等質(zhì)量因素有關(guān)。

綜上所述，使用肝素鋰抗凝血漿、分離膠/促凝血清可以有效縮短TAT，尤其是急診，對挽救危重患者生命有著十分重要的意義。但鑒于國內(nèi)多數(shù)生化指標(biāo)的正常參考區(qū)間均來源于血清，若選擇血漿，由于血清與血漿之間存在一定的差異，應(yīng)根據(jù)實驗室的具體情況建立相關(guān)血清血漿的換算體系[1]，或者建立相應(yīng)的血漿正常參考區(qū)間，確保檢驗報告的溯源性。若選擇分離膠/促凝劑，鑒于添加劑質(zhì)量造成的影響問題，在投入應(yīng)用前，應(yīng)進(jìn)行全面評估，選用質(zhì)量過關(guān)的產(chǎn)品，確保檢驗報告的質(zhì)量。

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