齒瓣石斛多糖含量測(cè)定比較

摘要：石斛是中國(guó)名貴中藥材，多糖是石斛的主要有效成分之一。本文測(cè)定了不同產(chǎn)地，種植方式以及不同部位的齒瓣石斛多糖含量，對(duì)齒瓣石斛栽培應(yīng)用有重要意義。

關(guān)鍵詞：齒瓣石斛多糖；含量測(cè)定；比較

石斛屬（Dendrobium）是蘭科第二大屬，全球約有1500種，主要集中分布在我國(guó)華南和西南地區(qū)[1]。石斛為我國(guó)名貴中藥，具有滋陰清熱、益胃生津等功效。齒瓣石斛化學(xué)成分類(lèi)型多樣，其中糖類(lèi)也是重要化學(xué)成分，廣西的加工品一級(jí)楓斗含量高達(dá)45.89%[2]。本文對(duì)不同齒瓣石斛多糖含量進(jìn)行測(cè)定比較。

1儀器和試藥

1.1儀器 UV-2450紫外分光光度計(jì)（日本島津）；電子天平；分析天平（FA200413）。

1.2試藥 對(duì)照品：D-無(wú)水葡萄糖（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110833-201205）。

1.3試劑 雙蒸水：自制；無(wú)水乙醇，95%乙醇，苯酚。

1.4藥材 見(jiàn)表1。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定石斛多糖含量[3]。

2.1.1對(duì)照品溶液的配置 取D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加水制成每1 ml含94.66ug的溶液，即得。

2.1.2供試品溶液的制備 取石斛鮮品莖約60 g，精密稱(chēng)定，置于九陽(yáng)豆?jié){機(jī)中，選擇五谷模式榨汁，加水定容至1000ml，混勻，離心（轉(zhuǎn)速為4000轉(zhuǎn)/min）20min，上清液稀釋8倍，精密量取2ml置10ml塑料離心管中，精密加入無(wú)水乙醇10ml，搖勻，冷藏1 h，離心，棄上清，加80%乙醇洗滌2次，每次8ml，離心，棄上清，沉淀用熱水溶解，轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，搖勻，即得。

2.1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密量取對(duì)照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分別置10 mL具塞棕色試管中，加水補(bǔ)至1.0 ml，加5%苯酚溶液（臨用時(shí)配）1.0 ml，搖勻，迅速加入濃硫酸5.0mL，置沸水浴加熱20min，取出，立即置冰水浴中冷卻5 min后取出，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外-可見(jiàn)分光光度法在488nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量（c）為橫坐標(biāo)，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得回歸方程為A=0.0097c+0.0032（r=0.9997，n=7）。結(jié)果表明，D-無(wú)水葡萄糖的進(jìn)樣量在0～94.66ug范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.1.4樣品測(cè)定方法 精密量取供試品溶液1 ml，置于10 ml干燥具塞棕色試管中，照\(chéng)"2.1.3\"項(xiàng)下方法自\"加水至1.0 ml\"起依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品溶液中所含D-無(wú)水葡萄糖的重量（ug），計(jì)算，即得，見(jiàn)表2。

2.2結(jié)果 對(duì)收集到的10批云南不同產(chǎn)地、不同栽培方式、不同采收時(shí)間、不同保存方法齒瓣石斛多糖的含量測(cè)定，見(jiàn)表2。

多糖含量（%）=C*D*V*f/W

C：樣品溶液中葡萄糖濃度（ug/ml）；D：樣品溶液的稀釋因素；V：樣品溶液體積（ml）；f：換算因素；W：樣品的重量（g）

3討論

通過(guò)不同采收時(shí)間比較，齒瓣石斛存放時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，多糖含量有所降低；不同的保存方式對(duì)齒瓣石斛多糖含量影響不大，建議常溫通風(fēng)干燥保存，更方便保存運(yùn)輸；不同的種植方式的齒瓣多糖含量為基質(zhì)種植>橫木種植>活樹(shù)種植>自然生長(zhǎng)。不同種樣品中多糖含量均較高，但也有較大的差異，提示各藥材的品質(zhì)有差異，樣品生長(zhǎng)環(huán)境、生長(zhǎng)年限、保存方式及種植方式對(duì)齒瓣石斛多糖含量有影響。

參考文獻(xiàn)：

[1]明興加，張明，陶文靜，等.名貴中藥齒瓣石斛的開(kāi)發(fā)前景[J].重慶中草藥研究，2006，54（2）：51.

[2]李滿(mǎn)飛，徐國(guó)鈞.中國(guó)石斛類(lèi)多糖的含量測(cè)定[J].中草藥，1990，10（21）：10-12.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄30、265.編輯/丁一