對ABO血型鑒定正反定型不符標準操作規(guī)程的建立及探討

摘要：目的 探討通過制定ABO血型鑒定正反不符的標準操作規(guī)程，為輸血科檢驗人員提供指導(dǎo)，在遇到ABO血型鑒定正反定型不符時提供一個簡單有效的處理辦法。方法 對我院2013年～2015年間遇到的19例ABO血型鑒定正反定型不符通過疑難血型SOP進行檢測和分析。結(jié)果 19例ABO血型正反不符均得到解決，患者得以順利輸上血液。其中9例因冷凝集效價較高所致，6例因抗體減弱所致，3例因不規(guī)則抗體的檢出所致，1例因血漿蛋白異常干擾所致。結(jié)論 冷凝集素、抗體減弱及不規(guī)則抗體的出現(xiàn)都是導(dǎo)致ABO血型鑒定正反不符的常見原因之一，不同的原因有不同的檢測方法，制定一個疑難血型的標準操作規(guī)程，能有效縮短檢測時間，有利于血型的正確定型，以便選擇合適的血液，保障輸血的及時性和安全性。

關(guān)鍵詞：ABO血型鑒定正反不符；疑難血型標準操作規(guī)程

輸血是臨床上常用的一種治療手段，正確鑒定血型則是臨床安全輸血的重要前提，造成ABO血型正反定型不符的原因很多，本科室就2013年～2015年間發(fā)現(xiàn)的的19例ABO血型正反定型不符做回顧性分析，探討制定一個標準的鑒定疑難血型的操作規(guī)程，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1標本來源 選取我院2013年～2015年間住院患者中檢出的19例ABO血型鑒定正反不符病例，年齡從25～70歲不等，內(nèi)科患者15例，外科患者4例。

1.2試劑來源 ABO紅細胞試劑和抗A、抗B血清由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供，抗篩試劑由長春博德公司提供，微柱凝膠卡由長春博訊公司提供。

1.3試驗方法 按照《臨床檢驗技術(shù)操作規(guī)程》中制定的血型血清學(xué)操作規(guī)程進行操作[1]，采用鹽水試管法、微柱凝膠法兩種方法進行。

1.4 ABO血型鑒定正反不符SOP操作規(guī)程

1.4.1 第一步 核對患者信息：包括患者姓名、科室、住院號、血樣編號等信息，確認無誤。

1.4.2 第二步 了解病史：查看患者年齡、妊娠史、輸血史等信息，以及臨床診斷、輸血目的、血紅蛋白量等，初步考慮血型鑒定正反不符是否與年齡、妊娠及疾病有關(guān)，如某些白血病、惡性腫瘤、自身免疫性疾病等均可引起ABO血型鑒定正反不符。

1.4.3 第三步 標本處理：將血樣置離心機于3000r/min下離心3min，吸取患者紅細胞用生理鹽水洗滌三遍做ABO血型正定型，吸取上層血漿做ABO反定型，同時做直接抗人球蛋白試驗、抗體篩查、自身對照試驗。

1.4.4 第四步 結(jié)果記錄及判斷：做個簡單列表，見表1。

①如果后三項陰性，正反定型不符先考慮是否人為差錯、ABO亞型或抗原抗體減弱。一般人為差錯重做后可糾正；懷疑抗原抗體減弱可將室溫反應(yīng)時間延長15minmin、反復(fù)離心或置4℃冰箱10 min觀察結(jié)果、同時可將血清加倍與紅細胞反應(yīng)，如無法解決，加做吸收放散試驗進行檢測；懷疑ABO亞型可用抗A1、抗AB、抗H、A2細胞等加做試驗即可解決，如確因試劑缺乏就送至上一級單位進行協(xié)助鑒定；②如果后三項任何一個陽性，都可引起血型鑒定正反定型不符，可考慮是否冷凝、有意外抗體的出現(xiàn)或疾病致血漿蛋白異常及紅細胞全凝集現(xiàn)象的影響等。按照先簡后繁的原則進行檢測，見圖1。

2結(jié)果

我科根據(jù)疑難血型鑒定操作規(guī)則，進行多種試驗，結(jié)合臨床資料做出血型最終定型，最終我院2013～2015年遇到的19例ABO血型正反定型不符均得到解決，9例因冷凝集效價較高所致，6例因抗體減弱所致，3例因不規(guī)則抗體的檢出所致，1例因血漿蛋白異常干擾所致。

3討論

輸血是臨床上常見的一種治療手段，正確鑒定血型是保證安全輸血的前提。在血型分類中沒有疑難血型，迄今為止在文獻中也查不到\"疑難血型\"的定義，因為\"疑難血型\"是1 種血型難以檢定或判定的\"現(xiàn)象\"， 而不是1種型別。檢定1份標本是否屬\"疑難血型\"，除了標本本身的特殊性外， 還與實驗室的設(shè)備、技術(shù)人員的水平、經(jīng)驗等多種因素有關(guān)[2]，在遇到血型鑒定正反不符的時候，很多檢驗人員無法進一步做鑒定，常常顯得手足無措，在急診搶救時更是亂了陣腳，遇到此類情況時，如果能制定一個標準的疑難血型操作流程，給檢驗人員提供參考，則會節(jié)約很多檢測時間，避免多做一些不必要的試驗，不至于毫無章法，為血型的正確定型和交叉配血的順利進行找準方向。導(dǎo)致ABO血型鑒定正反定型不符原因很多，實驗之前必須全面分析病歷情況，有選擇的運用相應(yīng)手段來解決問題，其中導(dǎo)致血型鑒定困難的常見因素有高效價冷凝素和不規(guī)則抗體[3]，像我院遇到的血型正反定型不符中冷凝現(xiàn)象造成的非常常見，一般人血清中冷凝素效價多在1：16以下，且 < 4℃才有活性，20℃即不凝集。某些患者如自身免疫性溶血性貧血、支原體肺炎、腎功能不全、肝硬化患者等血清中含有較高效價的病理性自身冷凝素，導(dǎo)致血型鑒定和交叉配血困難，這種情況只需將紅細胞和血清分別放在37℃的溫水中，然后再進行正反定型，或者在試驗進行中將試管放入37°C水浴中搖晃數(shù)秒即可解決。對于由血型不規(guī)則抗體所致的ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合，則可通過譜細胞或吸收放散試驗來確定其血型的型別[4]。本文重點探討一些簡易的判斷方法，不管何種原因，我們都可通過疑難血型SOP進行檢測，遵從先簡后繁的原則，利用逐步分析法，按照不同的確診試驗分別進行鑒定分析判斷。總之，在遇到ABO血型鑒定正反定型不符時，基層醫(yī)院如能制定一個相應(yīng)的操作流程尤為重要，使一線工作人員熟練掌握相應(yīng)的理論知識和技能，遇到疑難血型時能按SOP 要求進行操作[5]，規(guī)范操作流程，會為臨床合理安全用血打下良好基礎(chǔ)，保障其用血的安全性。

參考文獻：

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編輯/申磊