氟吡菌酰胺與噁霉靈混劑對五種果樹病菌的室內(nèi)毒力測定

摘要：采用室內(nèi)生長速率法，以葡萄霜霉病菌（Plasmopara uiticola）、蘋果褐斑病菌（Marssonina coronaria）、芒果蒂腐病菌（Phomopsis mangiferae）、梨樹黑星病菌（Venturia nashicola）和香蕉黑條葉斑病菌（Mycosphaerella fijiesis）為作用目標(biāo)，研究了氟吡菌酰胺與噁霉靈混配對5種果樹病菌的聯(lián)合毒力。結(jié)果表明，當(dāng)噁霉靈和氟吡菌酰胺的混配比例為3∶1時(shí)，對葡萄霜霉病菌和蘋果褐斑病菌的共毒系數(shù)分別為200.04和190.71；混配比例為1∶6時(shí)，對芒果蒂腐病菌的共毒系數(shù)為203.13；混配比例為1∶10時(shí)，對梨樹黑星病菌的共毒系數(shù)為198.07；混配比例為1∶15時(shí)，對香蕉黑條葉斑病菌的共毒系數(shù)為190.97。表明噁霉靈和氟吡菌酰胺按適當(dāng)比例混配對5種果樹病原菌具有明顯的增效作用。

關(guān)鍵詞：生長速率法；共毒系數(shù)；氟吡菌酰胺；噁霉靈；增效作用

中圖分類號：S436.67；S482.2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）13-3352-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.13.020

氟吡菌酰胺（Fluopyram，CAS號658066-35-4）為吡啶乙基苯甲酰胺類廣譜性殺菌劑，作用機(jī)制是對線粒體呼吸鏈的復(fù)合物II中的琥珀酸脫氫酶起抑制作用，從而阻止細(xì)胞三磷酸腺苷（ATP）酶合成，抑制靶標(biāo)真菌的種孢子萌發(fā)、芽管和菌絲體生長[1]。具有獨(dú)特內(nèi)吸傳導(dǎo)性，使其在保護(hù)老的植物組織同時(shí)，對新生長出來的葉片、花和果實(shí)也有很好的保護(hù)作用。經(jīng)木質(zhì)部傳輸，速度快，2 d傳導(dǎo)至新梢的部位。它還能經(jīng)過韌皮部傳輸，施用在葉片上就能被迅速傳導(dǎo)至其他部位[2]。除此之外，在植物表面具有活性，滲透性強(qiáng)，能夠滲透到植物細(xì)胞里，具有薄層穿透活性和有一定的治療活性，不受環(huán)境影響，應(yīng)用最佳期為孢子萌發(fā)和發(fā)病初期階段[3]。用于莖葉處理防治包括葡萄、梨和核果、蔬菜和大田作物等在內(nèi)的70多種作物上的灰霉病、白粉病、菌核病以及念珠菌屬引起的病害[4]。

噁霉靈（Hymexazol，CAS號10004-44-1）是一種高效、低毒、環(huán)保、廣譜的內(nèi)吸性殺菌劑，能直接被植物根部吸收，在根系內(nèi)僅3 h便移動到莖部， 24 h移動至全株植物，施用兩周內(nèi)仍有殺菌活性[5]。該產(chǎn)品作用機(jī)理獨(dú)特，能抑制病原真菌菌絲體的正常生長或直接殺滅病菌，并具有促進(jìn)作物根系生長發(fā)育、生根壯苗提高成活率的作用，對枯萎病、立枯病、黃萎病、猝倒病、紋枯病、爛秧病、菌核病、疫病、干腐病、黑星病、菌核軟腐病、苗枯病、莖枯病、葉枯病、漚根、連作重茬障礙有特效[6，7]。

噁霉靈目前應(yīng)用較為廣泛，但由于長期使用，許多地方都出現(xiàn)了抗藥性問題，導(dǎo)致用量不斷加大，殘留風(fēng)險(xiǎn)增加，不利于食品安全。尋求科學(xué)、合理的農(nóng)藥復(fù)配，是解決這一問題較好的辦法。氟吡菌酰胺殺菌譜廣、對作物病害防治優(yōu)良，但成本高昂，目前在國內(nèi)應(yīng)用較少。筆者將氟吡菌酰胺和噁霉靈進(jìn)行復(fù)配，測定兩種藥劑混配對5種重要農(nóng)業(yè)病原菌的聯(lián)合毒力，旨在明確兩者不同混配比例對5種常見果樹病原菌的增效作用，篩選出最佳配比，為兩種藥劑的實(shí)際混配應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

98%氟吡菌酰胺原藥，由拜耳作物科學(xué)公司提供；96%噁霉靈原藥，由東營新博化工有限公司提供。

1.2 供試菌株

葡萄霜霉病菌（Plasmopara uiticola）、芒果蒂腐病菌（Phomopsis mangiferae）、梨樹黑星病菌（Venturia nashicola）和香蕉黑條葉斑病菌（Mycosphaerella fijiesis）為廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所王彥輝博士惠贈；蘋果褐斑病菌（Marssonina coronaria）為河南科技學(xué)院資源與環(huán)境學(xué)院植物病理研究室鑒定并提供。試驗(yàn)前，菌株在PDA平板培養(yǎng)基中，置于20～25 ℃條件下培養(yǎng)48 h活化，后轉(zhuǎn)移菌種于斜面培養(yǎng)基上，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 單劑抑制作用測定 參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則NY/T 1156.2-2006》[8]，采用含藥培養(yǎng)基生長速率法進(jìn)行測定[9]。在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將氟吡菌酰胺和噁霉靈分別以丙酮溶解為供試母液，用滅菌水配成5～8個(gè)濃度梯度，將1 mL不同濃度梯度的待測藥液注入直徑為9 cm的無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，倒入5 mL（55～65 ℃）PDA培養(yǎng)基，混勻，制成含藥平板培養(yǎng)基，對照只加等量的無菌水。每個(gè)處理3次重復(fù)。于培養(yǎng)基表面接種直徑為5 mm的菌餅，置于25 ℃條件下恒溫培養(yǎng)6 d，用十字交叉法測量菌落直徑，計(jì)算殺菌劑對病菌菌絲生長的抑制率[6]。抑制率公式為：抑制率=（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/對照菌落直徑×100%。以處理濃度的對數(shù)值為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的抑制幾率值為縱坐標(biāo)，求出毒力回歸方程，并求出抑制中濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)（r），以上計(jì)算用SAS 6.12統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析[10]。

1.3.2 混劑聯(lián)合毒力測定 根據(jù)單劑毒力測定結(jié)果，以單劑氟吡菌酰胺和噁霉靈的有效中濃度為基礎(chǔ)，按質(zhì)量配比進(jìn)行藥劑配制，對各個(gè)配比的藥劑設(shè)定5～8個(gè)濃度梯度，按生長速率法進(jìn)行測定，并求出毒力回歸曲線、EC50及相關(guān)系數(shù)r。根據(jù)單劑和混劑的EC50計(jì)算共毒系數(shù)（CTC），根據(jù)Sun等[11]的共毒系數(shù)法來評價(jià)藥劑混用的增效作用，即CTC≤80為拮抗作用，80

2 結(jié)果與分析

2.1 氟吡菌酰胺與噁霉靈混配對葡萄霜霉病菌的增效作用

氟吡菌酰胺、噁霉靈及其二者不同比例的混配對葡萄霜霉病菌的毒力測定結(jié)果見表1。由表1可知，噁霉靈∶氟吡菌酰胺以1∶5、1∶3、1∶1、3∶1、5∶1、10∶1的比例混配增效作用較明顯，當(dāng)噁霉靈∶氟吡菌酰胺為3∶1時(shí)，共毒系數(shù)最大，為200.04，增效作用最明顯。綜合增效作用和經(jīng)濟(jì)效益兩方面考慮，噁霉靈與氟吡菌酰胺防治葡萄霜霉病菌以1∶5～10∶1復(fù)配較好。

2.2 氟吡菌酰胺與噁霉靈混配對蘋果褐斑病菌的增效作用

氟吡菌酰胺、噁霉靈及其二者不同比例的混配對蘋果褐斑病菌的毒力測定結(jié)果見表2。由表2可知，噁霉靈∶氟吡菌酰胺以3∶1的配比共毒系數(shù)最大，為190.71，增效作用最明顯。綜合增效作用和經(jīng)濟(jì)效益兩方面考慮，噁霉靈與氟吡菌酰胺防治蘋果褐斑病菌以1∶3～6∶1復(fù)配較好。

2.3 噁霉靈與氟吡菌酰胺混配對芒果蒂腐病菌的增效作用

噁霉靈、氟吡菌酰胺及其二者不同比例的混配對芒果蒂腐病菌的毒力測定結(jié)果見表3。由表3可知，噁霉靈與氟吡菌酰胺以1∶6的配比共毒系數(shù)最大，為203.13，增效作用最明顯。綜合增效作用和經(jīng)濟(jì)效益兩方面考慮，噁霉靈與氟吡菌酰胺對芒果蒂腐病的防治以1∶12～6∶1復(fù)配較好。

2.4 噁霉靈與氟吡菌酰胺混配對梨樹黑星病菌的增效作用

噁霉靈、氟吡菌酰胺及其二者不同比例的混配對梨樹黑星病菌的毒力測定結(jié)果見表4。由表4可知，噁霉靈與氟吡菌酰胺以1∶10的配比共毒系數(shù)最大，為198.07，增效作用最明顯。綜合增效作用和經(jīng)濟(jì)效益兩方面考慮，噁霉靈與氟吡菌酰胺防治梨樹黑星病以1∶10～10∶1復(fù)配較好。

2.5 噁霉靈與氟吡菌酰胺混配對香蕉黑條葉斑病菌的增效作用

噁霉靈、氟吡菌酰胺及其二者不同比例的混合對油菜菌核病菌的毒力測定結(jié)果見表5。由表5可知，噁霉靈與氟吡菌酰胺以1∶15的配比共毒系數(shù)最大，為190.97，增效作用最明顯。綜合增效作用和經(jīng)濟(jì)效益兩方面考慮，噁霉靈與氟吡菌酰胺防治香蕉黑條葉斑病菌以1∶15～5∶1復(fù)配較好。

3 小結(jié)與討論

氟吡菌酰胺是拜耳公司于2010年在美國登記，用于瓜果蔬菜作物病害的防治的新型廣譜型殺菌劑[12]。2012年在中國取得原藥正式登記，氟吡菌酰胺單獨(dú)使用或與其他殺菌劑復(fù)配在低劑量下即有非常好的藥效，并且很適合用于病害的抗性治理[13]。目前中國及國際市場上主要以其混劑方式進(jìn)行銷售，如氟吡菌酰胺+肟菌酯和氟吡菌酰胺+戊唑醇用于蘋果、櫻桃、草莓、花生、馬鈴薯、甜菜和葡萄等的病害[14]；氟吡菌酰胺+嘧霉胺用于防治杏、蘋果、阿月渾子、馬鈴薯和葡萄等的病害；氟吡菌酰胺+丙硫菌唑用于防治豆類作物、花生和甜菜等的病害[14]；巴斯夫的健達(dá)（唑菌酰胺+吡唑醚菌酯）用于防治香蕉、番茄等特殊經(jīng)濟(jì)作物的病害；也有報(bào)道對谷類、油料作物等關(guān)鍵病害有較好的預(yù)防和治療效果[15]。以氟吡菌酰胺化合物為主導(dǎo)的強(qiáng)力組合可能使中國的殺菌劑進(jìn)入一個(gè)新時(shí)代，因其較其他殺菌劑有更長的持效期，可大大降低施藥次數(shù)，減少環(huán)境污染，降低用藥成本[16]，擴(kuò)大氟吡菌酰胺的殺菌譜和使用范圍，增強(qiáng)對病菌的抑制作用，并降低抗性風(fēng)險(xiǎn)。

氟吡菌酰胺與噁霉靈混配產(chǎn)生的增效作用與兩者作用機(jī)理密切相關(guān)。其原因有二：一是兩種藥劑都具有極強(qiáng)的內(nèi)吸傳導(dǎo)性能，可靈活到達(dá)作物內(nèi)部病源，深層清除病菌；二是藥劑的雙作用位點(diǎn)和作用途徑，提高了對病菌的聯(lián)合毒力[17]。同時(shí)還具有更低的抗性風(fēng)險(xiǎn)，更適用于作物病害防治管理方案。試驗(yàn)結(jié)果表明，氟吡菌酰胺與噁霉靈按適當(dāng)比例混配對5種不同果樹病原菌都具有明顯的增效作用，可作為篩選和評價(jià)藥劑增效組合的依據(jù)。但其藥劑組合協(xié)同增效的作用機(jī)理和田間實(shí)際防治效果，還有待進(jìn)一步的研究。

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