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    三穗鴨ATF4基因多態(tài)性鑒定及其與蛋殼品質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析

    2020-05-11 06:06:33譚光輝李杰章覃媛鈺吳磊張依裕
    關(guān)鍵詞:多態(tài)性

    譚光輝 李杰章 覃媛鈺 吳磊 張依裕

    摘要:【目的】探討三穗鴨轉(zhuǎn)錄激活子4基因(ATF4)多態(tài)性與蛋殼品質(zhì)的相關(guān)性,揭示禽類ATF4的生物學(xué)功能及其遺傳特性,為進(jìn)一步研究蛋殼品質(zhì)的調(diào)控機(jī)制打下基礎(chǔ)?!痉椒ā恳匀滕啚檠芯繉?duì)象,經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得ATF4基因后采用直接測(cè)序法檢查三穗鴨ATF4基因全部編碼區(qū)的變異位點(diǎn),運(yùn)用SHEsis計(jì)算基因型頻率、等位基因頻率、單倍型頻率及基因型分布卡方值(c2)等,利用PopGen32計(jì)算各SNP位點(diǎn)的觀察雜合度(He)、有效等位基因(Ne)及多態(tài)信息量(PIC),并以SPSS 18.0中的一般線性模型(GLM)分析SNP位點(diǎn)對(duì)蛋殼品質(zhì)的遺傳效應(yīng)?!窘Y(jié)果】在三穗鴨ATF4基因第3外顯子(Exon-3)上發(fā)現(xiàn)3個(gè)SNPs位點(diǎn)(g.2394G>A、g.2571A>G和g.2667A>G),均屬于同義突變。3個(gè)SNPs位點(diǎn)在三穗鴨群體中均呈中度多態(tài)性(0.25G位點(diǎn)對(duì)三穗鴨蛋重和蛋殼重的影響達(dá)顯著水平(P<0.05,下同),g.2667A>G位點(diǎn)對(duì)蛋殼厚度的影響達(dá)顯著水平,g.2394G>A位點(diǎn)對(duì)蛋殼品質(zhì)性狀指標(biāo)的影響不顯著(P>0.05);雙倍型H2H2(AAGGGG)的蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋形指數(shù)均最高,是對(duì)三穗鴨蛋殼品質(zhì)最有利的基因型,且3個(gè)SNPs位點(diǎn)共同對(duì)蛋殼品質(zhì)的影響效應(yīng)明顯大于單個(gè)SNP位點(diǎn)?!窘Y(jié)論】三穗鴨ATF4基因存在3個(gè)SNPs位點(diǎn)(g.2394G>A、g.2571 A>G和g.2667A>G),均屬于同義突變,其中g(shù).2571A>G和g.2667A>G位點(diǎn)對(duì)蛋殼品質(zhì)有顯著影響,3個(gè)SNPs位點(diǎn)組合基因型對(duì)蛋殼品質(zhì)也產(chǎn)生顯著影響,可作為鴨蛋蛋殼品質(zhì)選擇的分子遺傳標(biāo)記。

    關(guān)鍵詞: 三穗鴨;ATF4基因;SNP位點(diǎn);多態(tài)性;蛋殼品質(zhì)

    0 引言

    【研究意義】蛋殼作為禽蛋天然保護(hù)殼,在其保存、運(yùn)輸及孵化等方面發(fā)揮著重要作用;高質(zhì)量蛋殼不僅能延長(zhǎng)禽蛋的保質(zhì)期,減少運(yùn)輸中的破損率,還能調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育過程中的氣體交換,并為胚胎的生長(zhǎng)提供鈣源,而有利于幼禽孵化(俞路等,2008;宋凌子,2019)。隨著畜禽養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,禽蛋的生產(chǎn)及銷售已形成巨大產(chǎn)業(yè)鏈,而蛋殼破損帶來的經(jīng)濟(jì)損失也日益突出。因此,有效提高蛋殼品質(zhì),減少蛋殼破損,已成為家禽育種研究的重要內(nèi)容之一?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】蛋殼在蛋殼腺形成過程中需要大量的鈣離子沉積(宋凌子,2019)。轉(zhuǎn)錄激活子4(Activating transcription factor 4,ATF4)最初被認(rèn)為是一種廣泛表達(dá)的哺乳動(dòng)物DNA結(jié)合蛋白,又稱為環(huán)腺苷酸連接效應(yīng)元件2(cAMP-response element binding protein 2,cREB2),在各種應(yīng)激信號(hào)誘導(dǎo)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,也是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上細(xì)胞內(nèi)鈣離子釋放的基本調(diào)控因子,對(duì)機(jī)體內(nèi)鈣離子的沉積具有調(diào)控作用(Rzymski et al.,2009;St-Arnaud and Mandic,2010;Singleton and Harris,2012;王慧和劉勤江,2018;Tesei et al.,2019)。ATF4基因是鴨蛋蛋殼品質(zhì)調(diào)控候選基因IP3R2的下游基因,其生物功能的發(fā)揮需要鈣離子活化激活,同時(shí)又是鈣離子釋放的基本調(diào)控因子之一(Sun et al.,2015),位于第1號(hào)染色體上,其mRNA全長(zhǎng)1065 bp,DNA序列全長(zhǎng)2914 bp,含3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子。Chen等(2011)研究揭示,ATF4基因多態(tài)性與豬臀部脂肪厚度(BFT)、腰眼高度(LEH)、腰眼面積(LEA)及骨骼發(fā)育顯著相關(guān)。Voloshanenko等(2018)研究發(fā)現(xiàn),結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖依賴于b-連環(huán)蛋白及獨(dú)立的Wnt信號(hào)傳導(dǎo)途徑,在Wnt信息傳導(dǎo)路徑中ATF4和ATF2能調(diào)控多種目標(biāo)基因表達(dá)。此外,ATF4和ATF2基因沉默會(huì)降低靶基因原膠原賴氨酸-2-酮戊二-5-雙加氧酶(Recombinant procollagen lysine-2-oxoglutarate-5-dioxygenase,PLOD2)和配體依賴的輔阻遏物(Ligand-dependent corepressor,LCOR)表達(dá),推測(cè)ATF4基因涉及Wnt信號(hào)傳導(dǎo),而對(duì)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖有一定影響(De,2011;Ackers and Malgor,2018)。此外,ATF4基因在動(dòng)物的眼部和骨骼發(fā)育等方面發(fā)揮重要作用。Ameri和Harris(2008)研究表明,若缺失ATF4基因,小鼠則表現(xiàn)出盲眼、貧血及鈣離子分泌不足造成骨骼發(fā)育不良等癥狀。Rzymski等(2009)、Saito等(2011)研究發(fā)現(xiàn),在成骨細(xì)胞的分化進(jìn)程中,PERK-Eif2a-ATF4信號(hào)路徑能誘導(dǎo)成骨必需基因的表達(dá),如骨鈣素基因。綜上所述,ATF4能調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞內(nèi)鈣離子的釋放,影響細(xì)胞的凋亡與增殖,而直接或間接影響生物體表型性狀?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】近年來,有關(guān)ATF4生物學(xué)功能的研究主要集中在人類和小鼠上(秦蜀等,2018;張晟等,2019;Xin et al.,2019),而鮮見針對(duì)禽類ATF4的研究報(bào)道?!緮M解決的關(guān)鍵問題】以三穗鴨為研究對(duì)象,探討ATF4基因多態(tài)性與其蛋殼品質(zhì)的相關(guān)性,揭示禽類ATF4的生物學(xué)功能及其遺傳特性,為進(jìn)一步研究蛋殼品質(zhì)的調(diào)控機(jī)制打下基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1. 1 試驗(yàn)材料

    用于檢測(cè)ATF4基因多態(tài)性的288羽三穗鴨樣本來自貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院農(nóng)場(chǎng),45周齡,健康無病,且均采取單體籠飼養(yǎng)的管理方式。采用無抗凝劑的普通生化管對(duì)每羽三穗鴨翅靜脈采血1.0~1.5 mL,采血管編號(hào)與其翅號(hào)一致,靜置斜放待血清析出后用移液槍將血清轉(zhuǎn)移至離心管中,離心至樣品清澈透亮,-20 ℃保存?zhèn)溆?。逐一收集記錄產(chǎn)蛋情況并編號(hào)(與翅號(hào)一致),進(jìn)行蛋殼品質(zhì)測(cè)定。全血DNA提取試劑盒購(gòu)自天根生化科技(北京)有限公司,2×Taq PCR MasterMix試劑和瓊脂糖購(gòu)自北京康為世紀(jì)生物科技有限公司,DM2000 DNA Marker購(gòu)自重慶擎科生物科技有限公司。主要儀器設(shè)備:DYY-2C電泳儀(北京六一生物科技有限公司),PTC200梯度PCR儀(美國(guó)Bio-Rad公司),BL-320H電子天平(日本島津公司),EFR-01蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀(北京天翔飛域儀器設(shè)備有限公司),EA-01蛋品質(zhì)分析儀(北京天翔飛域儀器設(shè)備有限公司),HRLM-80高壓滅菌鍋(上海申安醫(yī)療器械廠)。

    1. 2 試驗(yàn)方法

    1. 2. 1 基因組DNA提取 按照動(dòng)物全血DNA提取試劑盒說明抽提血清基因組DNA,DNA編號(hào)對(duì)應(yīng)三穗鴨翅號(hào),以1.0%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)合核酸濃度測(cè)定儀進(jìn)行檢測(cè),稀釋至終濃度100 ng/mL,備用。

    1. 2. 2 引物設(shè)計(jì)與合成 根據(jù)GenBank已公布的鴨ATF4基因序列(登錄號(hào)NC_040046.1),以Primer 3.0(http://primer3.ut.ee/)設(shè)計(jì)擴(kuò)增ATF4基因所有編碼區(qū)的5對(duì)引物(表1),所有引物委托生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

    1. 2. 3 DNA池PCR擴(kuò)增及測(cè)序分型 PCR反應(yīng)體系20.0 mL:PCR MasterMix 8.0 mL,正、反向引物各1.0 mL,DNA模板1.0 mL,RNase-Free Water 9.0 mL。擴(kuò)增程序:95 ℃預(yù)變性6 min;94 ℃ 30 s,退火50 s,72 ℃ 45 s,進(jìn)行35個(gè)循環(huán);72 ℃延伸5 min。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物采用1.0%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè),然后送至生工生物工程(上海)股份有限公司進(jìn)行測(cè)序,并以MegAlign篩選單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)。根據(jù)SNP位點(diǎn),以個(gè)體DNA為模板,選用相應(yīng)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物送至生工生物工程(上海)股份有限公司測(cè)序,并進(jìn)行基因分型。

    1. 3 數(shù)據(jù)處理

    運(yùn)用SHEsis(http://analysis.bio-x.cn/)計(jì)算基因型頻率、等位基因頻率、單倍型頻率、基因型分布卡方值(c2)和連鎖不平衡的D和g2,采用PopGen32計(jì)算各SNP位點(diǎn)的觀察雜合度(He)、有效等位基因(Ne)及多態(tài)信息量(PIC),并利用SPSS 18.0中的一般線性模型(GLM)分析SNP位點(diǎn)基因型和雙倍型與蛋殼品質(zhì)性狀指標(biāo)的相關(guān)性。

    2 結(jié)果與分析

    2. 1 三穗鴨ATF4基因多態(tài)性分析結(jié)果

    使用MegAlign對(duì)三穗鴨ATF4基因多態(tài)性進(jìn)行分析,結(jié)果在鴨ATF4基因第3外顯子(Exon-3)上共發(fā)現(xiàn)3個(gè)SNPs位點(diǎn),且每個(gè)SNP位點(diǎn)均存在3種基因型,如圖2所示。3個(gè)SNPs位點(diǎn)分別是:g.2394G>A、g.2571A>G和g.2667A>G。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),3個(gè)SNPs位點(diǎn)均屬于同義突變,未引起編碼氨基酸變化。

    2. 2 三穗鴨ATF4基因群體遺傳學(xué)分析結(jié)果

    對(duì)三穗鴨ATF4基因檢測(cè)到的3個(gè)SNPs位點(diǎn)進(jìn)行遺傳特性分析,結(jié)果(表2)表明,g.2571A>G位點(diǎn)以GA基因型為優(yōu)勢(shì)基因型,其基因型頻率為0.479,以G為優(yōu)勢(shì)等位基因,其頻率為0.573;該SNP位點(diǎn)在三穗鴨群體中的He為0.489。g.2667A>G位點(diǎn)以AA基因型為優(yōu)勢(shì)基因型,其基因型頻率為0.469,以A為優(yōu)勢(shì)等位基因,其頻率為0.672;該SNP位點(diǎn)在三穗鴨群體中的He為0.441。g.2394G>A位點(diǎn)以GG基因型為優(yōu)勢(shì)基因型,其基因型頻率為0.458,以G為優(yōu)勢(shì)等位基因,其頻率為0.682;該SNP位點(diǎn)在三穗鴨群體中的He為0.434。3個(gè)SNPs位點(diǎn)在三穗鴨群體中均呈中度多態(tài)性(0.25

    2. 3 三穗鴨ATF4基因SNP位點(diǎn)的連鎖不平衡分析結(jié)果

    D和g2是常用于衡量連鎖不平衡的2個(gè)重要參數(shù),其中,區(qū)域內(nèi)重組事件發(fā)生連鎖不平衡的概率通過D反映,而連鎖分析通過g2反映(Mayo,2008)。當(dāng)D>0.8時(shí),表明SNP位點(diǎn)間強(qiáng)連鎖且不平衡,當(dāng)g2>0.330時(shí),表明SNP位點(diǎn)間緊密連鎖且趨向于一個(gè)整體遺傳(Ardlie et al.,2002;Slatkin,2008)。由表3可知,g.2667A>G位點(diǎn)與g.2571A>G位點(diǎn)間的D為1.0,大于0.8,且g2為0.665,大于0.330,可確定這2個(gè)位點(diǎn)間處于強(qiáng)連鎖不平衡狀態(tài),即g.2667A>G位點(diǎn)和g.2571A>G位點(diǎn)為高度連鎖,趨向整體遺傳;g.2394G>A位點(diǎn)與g.2571A>G位點(diǎn)間的D為1.0,大于0.8,且g2為0.347,大于0.330,可確定這2個(gè)位點(diǎn)間存在強(qiáng)連鎖不平衡狀態(tài);g.2667A>G位點(diǎn)與g.2394G>A位點(diǎn)間的D為1.0,大于0.8,但g2為0.227,小于0.330,說明這2個(gè)位點(diǎn)間不存在強(qiáng)連鎖不平衡。

    2. 4 三穗鴨ATF4基因SNP位點(diǎn)的單倍型和雙倍型分析結(jié)果

    三穗鴨ATF4基因SNP位點(diǎn)的單倍型和雙倍型分析結(jié)果如表4所示,3個(gè)SNPs位點(diǎn)在三穗鴨群體中共檢測(cè)到4種單倍型(H1、H2、H3和H4)和9種雙倍型(H1H2、H1H3、H1H4、H2H2、H2H3、H2H4、H3H3、H3H4和H4H4)。其中,H2(AGG)為優(yōu)勢(shì)單倍型,其頻率為0.328,H1(AAG)為劣勢(shì)單倍型,其頻率為0.099;H2H3(GAGAGA)為優(yōu)勢(shì)雙倍型,其頻率為0.219,H1H2(AAGAGG)和H1H3(GAAAGG)為劣勢(shì)雙倍型,其頻率均為0.063。

    2. 5 三穗鴨ATF4基因SNP位點(diǎn)基因型與蛋殼品質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果

    三穗鴨ATF4基因3個(gè)SNPs位點(diǎn)基因型與蛋殼品質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果(表5)表明,g.2571A>G位點(diǎn)不同基因型個(gè)體間的蛋重和蛋殼重存在一定差異,以GA基因型個(gè)體的蛋重和蛋殼重最高,其次是GG基因型個(gè)體,AA基因型個(gè)體的最低,GA基因型個(gè)體的蛋重和蛋殼重均顯著高于AA基因型個(gè)體(P<0.05,下同);g.2667A>G位點(diǎn)不同基因型個(gè)體間的蛋殼厚度存在一定差異,GG基因型個(gè)體的蛋殼最厚,AA基因型個(gè)體的蛋殼最薄,二者差異顯著;g.2394G>A位點(diǎn)不同基因型個(gè)體間的蛋殼品質(zhì)未存在顯著差異(P>0.05,下同)。

    2. 6 三穗鴨ATF4基因SNP位點(diǎn)雙倍型與蛋殼品質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果

    三穗鴨ATF4基因雙倍型與蛋殼品質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果(表6)表明,H2H2個(gè)體的蛋殼厚度顯著高于H1H4個(gè)體和H4H4個(gè)體,H2H2個(gè)體和H3H4個(gè)體的蛋殼強(qiáng)度顯著高于H3H3個(gè)體,H2H2個(gè)體的蛋形指數(shù)顯著高于H4H4個(gè)體,H4H4個(gè)體的蛋重顯著高于H1H2個(gè)體和H2H2個(gè)體,H4H4個(gè)體的蛋殼重顯著高于H3H3個(gè)體,其他雙倍型與蛋殼指標(biāo)間未產(chǎn)生顯著影響。

    3 討論

    近年來,有關(guān)ATF4基因多態(tài)性的研究主要集中在人類和動(dòng)物上(Qu et al.,2010;Morris et al.,2014)。本研究在貴州地方品種三穗鴨ATF4基因的Exon-3上檢測(cè)到3個(gè)SNPs位點(diǎn):g.2394G>A、g.2571A>G和g.2667A>G,均屬于同義突變,且這3個(gè)SNPs位點(diǎn)的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。Hardy-Weinberg平衡常用于預(yù)測(cè)未來世代的基因型和等位基因頻率,評(píng)估當(dāng)前種群的平衡狀態(tài),在一個(gè)大孟德爾群體中的個(gè)體間進(jìn)行隨機(jī)交配,同時(shí)不存在選擇、突變、遷移和遺傳漂變發(fā)生時(shí),其基因頻率將保持不變,即這個(gè)群體被稱為處于Hardy-Weinberg平衡(Mayo,2008)。由此推測(cè),本研究中的3個(gè)SNPs位點(diǎn)尚未受到突變、選擇及遺傳漂變等的影響。畜禽基因組功能結(jié)構(gòu)基因的變異可能會(huì)影響其生產(chǎn)性狀,而變異位點(diǎn)間的連鎖關(guān)系則決定群體遺傳結(jié)構(gòu)的變化。本研究通過3個(gè)SNPs位點(diǎn)的連鎖不平衡分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)g.2667A>G位點(diǎn)和g.2394G>A位點(diǎn)間不存在強(qiáng)連鎖不平衡,說明這2個(gè)SNPs位點(diǎn)間趨向獨(dú)立遺傳,而其他SNP位點(diǎn)間均處于強(qiáng)連鎖不平衡狀態(tài);此外,3個(gè)SNPs位點(diǎn)在三穗鴨群體中共檢測(cè)到4種單倍型(H1、H2、H3和H4)和9種雙倍型(H1H2、H1H3、H1H4、H2H2、H2H3、H2H4、H3H3、H3H4和H4H4),但理論上應(yīng)該有8種單倍型和36種雙倍型,實(shí)際觀測(cè)值與理論值存在差異,可能是長(zhǎng)期人工選育致使其他單倍型個(gè)體消失,也可能與本研究選擇的三穗鴨群體數(shù)量較少有關(guān)。由于3個(gè)SNPs位點(diǎn)均處于中度多態(tài)性,更有利于遺傳選擇(陳祥等,2017;李青等,2019),可在今后的遺傳選育工作中獲得更高的遺傳潛力;且3個(gè)SNPs位點(diǎn)的He相近,表明三穗鴨群體具有較高的遺傳質(zhì)量(張躍博等,2018),但更精確的遺傳多樣性評(píng)價(jià)可能需要更多的樣本數(shù)量來支持。

    本研究的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示,g.2571A>G位點(diǎn)對(duì)蛋殼品質(zhì)產(chǎn)生明顯影響,GA基因型個(gè)體和GG基因型個(gè)體的蛋重分別比AA基因型個(gè)體重2.569和2.105 g,其差異均達(dá)顯著水平,且GA基因型個(gè)體的蛋殼重顯著高于AA基因型個(gè)體;g.2667A>G位點(diǎn)對(duì)蛋殼厚度產(chǎn)生明顯影響,GG基因型個(gè)體的蛋殼厚度顯著高于AA基因型個(gè)體;g.2394G>A位點(diǎn)不同基因型與蛋殼品質(zhì)性狀間的相關(guān)性尚未達(dá)顯著水平。綜合各蛋殼品質(zhì)性狀指標(biāo)與不同基因型間的相關(guān)性,可初步確定GG基因型是對(duì)蛋殼品質(zhì)有利的基因型。單個(gè)核苷酸堿基突變可引起蛋白構(gòu)象變化,增加或降低熵值,影響基因復(fù)制速度、轉(zhuǎn)錄剪接過程及蛋白翻譯速度,甚至影響其半衰期,即通過調(diào)控基因表達(dá)水平進(jìn)而影響畜禽生產(chǎn)性能(Gahlon et al.,2018)。g.2571A>G位點(diǎn)和g.2667A>G位點(diǎn)與蛋殼品質(zhì)存在顯著相關(guān)性,推測(cè)其原因是A→G突變影響ATF4基因剪接的外顯子基序(Moura et al.,2011;Sauan and Kimchi-Sarfaty,2011;Supek et al.,2014),而基因剪接是基因表達(dá)中最重要的過程,直接影響ATF4基因編碼蛋白翻譯及蛋白功能、構(gòu)象和表達(dá)水平的變化,進(jìn)而影響機(jī)體鈣離子表達(dá)及引起機(jī)體調(diào)控蛋殼形成相關(guān)組織細(xì)胞的增殖和凋亡,間接或直接對(duì)蛋殼品質(zhì)產(chǎn)生影響。

    動(dòng)物表型除受單個(gè)核苷酸堿基突變影響外,多個(gè)SNPs位點(diǎn)的組合效應(yīng)也對(duì)其表型產(chǎn)生明顯影響。將多個(gè)SNPs位點(diǎn)進(jìn)行組合產(chǎn)生的基因型分析能同步考慮非等位基因的相互作用及突變位點(diǎn)間的連鎖不平衡,具有更好的統(tǒng)計(jì)效力(Orozco et al.,2009)。本研究的SNP位點(diǎn)雙倍型與蛋殼品質(zhì)關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明,3個(gè)SNPs位點(diǎn)聯(lián)合組成的雙倍型對(duì)蛋殼品質(zhì)性狀指標(biāo)有不同程度的影響,H2H2個(gè)體的蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋形指數(shù)均最高,綜合各項(xiàng)蛋殼品質(zhì)性狀指標(biāo)在不同雙倍型個(gè)體間的差異,認(rèn)為H2H2(AAGGGG)雙倍型是對(duì)三穗鴨蛋殼品質(zhì)最有利的基因型,且3個(gè)SNPs位點(diǎn)共同對(duì)蛋殼品質(zhì)的影響效應(yīng)明顯大于單個(gè)SNP位點(diǎn),說明3個(gè)SNPs位點(diǎn)共同聯(lián)合引起基因結(jié)構(gòu)變化強(qiáng)于單個(gè)SNP位點(diǎn),其對(duì)蛋殼品質(zhì)的調(diào)控作用可能更有效。但由于部分雙倍型個(gè)體數(shù)量相對(duì)較少,其統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果尚需進(jìn)一步增加測(cè)試樣本以確定研究結(jié)論。

    4 結(jié)論

    三穗鴨ATF4基因存在3個(gè)SNPs位點(diǎn)(g.2394G>A、g.2571A>G和g.2667A>G),均屬于同義突變,其中g(shù).2571A>G和g.2667A>G位點(diǎn)對(duì)蛋殼品質(zhì)有顯著影響,3個(gè)SNPs位點(diǎn)組合基因型對(duì)蛋殼品質(zhì)也產(chǎn)生顯著影響,可作為鴨蛋蛋殼品質(zhì)選擇的分子遺傳標(biāo)記。

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    (責(zé)任編輯 蘭宗寶)

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