烏鱧消化道黏膜　6種重要酶的組織化學(xué)定位

謝毓玲，王錦乙，袁保勤，張海燕，彭遷遷，張盛周

（安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，安徽省重要生物資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蕪湖 241000）

烏鱧消化道黏膜6種重要酶的組織化學(xué)定位

謝毓玲，王錦乙，袁保勤，張海燕，彭遷遷，張盛周*

（安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，安徽省重要生物資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蕪湖 241000）

目的 研究烏鱧消化道黏膜酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（ALP）、腺苷三磷酸酶（ATPase）、非特異性酯酶（NSE）、過(guò)氧化物酶（POX）、琥珀酸脫氫酶（SDH）等6種重要酶的分布與組織定位。方法 從烏鱧食道、胃賁門(mén)、胃體、胃幽門(mén)、幽門(mén)盲囊、前腸、中腸和后腸等8個(gè)部位取材，利用冰凍切片進(jìn)行酶組織化學(xué)染色和光密度定量分析。結(jié)果 ACP主要分布于中腸和后腸黏膜上皮細(xì)胞底部，食道、賁門(mén)和胃體酶活力微弱。ALP主要分布于前腸和中腸黏膜上皮細(xì)胞頂部和基底部，胃中酶活力明顯較弱。ATPase主要分布于胃腺中，食道中酶活力明顯較弱。NSE主要分布于胃體上皮細(xì)胞和腺體中，后腸中酶活力明顯較弱。POX在賁門(mén)和胃體的腺上皮細(xì)胞中活力最強(qiáng)，食道和胃幽門(mén)中活力明顯較弱。SDH在賁門(mén)和胃體的腺體中活力最強(qiáng)，食道中活力微弱。結(jié)論 烏鱧消化道黏膜6種酶的分布表明其中腸和后腸有較強(qiáng)吸收蛋白質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)消化功能，胃體是脂類(lèi)的主要消化部位，前腸和中腸是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的主要部位。

烏鱧；消化道；酶組織化學(xué)

烏鱧（Ophiocephalus argus）俗名黑魚(yú)，隸屬鱸形目鱧科鱧屬，是中國(guó)的土著魚(yú)類(lèi)之一。烏鱧肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，生長(zhǎng)迅速，適應(yīng)能力強(qiáng)，且具有較強(qiáng)的繁殖能力，其人工養(yǎng)殖已在我國(guó)各地大規(guī)模推廣［1-3］。烏鱧的人工繁殖和飼養(yǎng)相關(guān)基礎(chǔ)研究也隨之不斷深入開(kāi)展［1，3，4］。消化酶的活力是反映動(dòng)物消化吸收功能的重要指標(biāo)，烏鱧消化液中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活力已有研究報(bào)道［5，6］，酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（ALP）、腺苷三磷酸酶（ATPase）、非特異性酯酶（NSE）、過(guò)氧化物酶（POX）和琥珀酸脫氫酶（SDH）等6種酶在動(dòng)物的消化和吸收過(guò)程中發(fā)揮重要作用，但這些消化道黏膜的重要酶的活性分布尚未見(jiàn)報(bào)道。本文采用酶的組織化學(xué)方法對(duì)烏鱧消化道黏膜該6種重要酶的分布和組織定位進(jìn)行了研究，旨在增進(jìn)對(duì)烏鱧消化生理功能的認(rèn)識(shí)，為其人工養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)資料。

材料和方法

1 實(shí)驗(yàn)材料

人工養(yǎng)殖烏鱧12條，重600～700g，均購(gòu)自蕪湖市菜市場(chǎng)，健康活體，解剖前于清水中暫養(yǎng)3～4h。用大解剖剪柄部用力迅速敲打其頭部至其腦死亡后立即解剖取出完整的消化道，于冰袋上將食道、胃賁門(mén)、胃體、胃幽門(mén)、幽門(mén)盲囊、前腸、中腸和后腸等8部分進(jìn)行精確分離取樣。各個(gè)部位樣品經(jīng)0.01mol／L磷酸鹽緩沖液（PBS，pH7.2）溶液漂洗片刻后，OCT包埋劑包埋，于-26℃下制作冰凍切片，厚度為6μm，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2 酶組織化學(xué)染色

酶組織化學(xué)染色參照呂大成等［7］的方法進(jìn)行，在反應(yīng)條件和時(shí)間上略有改變。

2.1酸性磷酸酶（ACP）

采用鉛法顯色。取12ml 0.1mol／L醋酸緩沖液（pH5.2），12ml 0.24%硝酸鉛溶液和3ml 3%β-甘油磷酸鈉溶液，混勻后置于37℃水浴內(nèi)30min，過(guò)濾制成孵育液。將冰凍切片置于濕盒中，在切片上滴加孵育液并放入37℃恒溫箱中反應(yīng)40min。取出用蒸餾水洗凈，再滴加1%硫化銨溶液反應(yīng)1min，立即用蒸餾水沖洗，烘干后用樹(shù)膠封片。

2.2堿性磷酸酶（ALP）

采用NBT／BCIP法顯色。取9.9 μl 5%硝基藍(lán)四唑（NBT）溶液與1.5ml 0.1mol／L堿性磷酸緩沖液（PB，pH9.5）混勻，再加入4.95 μl 5%5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸鹽（BCIP）溶液，制成孵育液，現(xiàn)配現(xiàn)用，滴加于冰凍切片上，室溫反應(yīng)10min，用蒸餾水洗凈，烘干后用樹(shù)膠封片。

2.3腺苷三磷酸酶（ATPase）

采用鈣-鈷法顯色。取腺苷三磷酸二鈉鹽（ATP鈉鹽）12 mg溶于4 ml蒸餾水中，用NaOH調(diào)節(jié) pH至9.2，加入2 ml 2%巴比妥鈉溶液和1ml 2%無(wú)水CaCl2溶液，混勻，再加入 5mg 2，4-二硝基苯酚（DNP）和3ml蒸餾水，調(diào)節(jié)pH至9.0，置于37℃水浴中12min，取出過(guò)濾制成孵育液。將冰凍切片置于濕盒中，先滴加1%CaCl2溶液于37℃反應(yīng)5min，蒸餾水洗凈；再滴加孵育液于37℃作用1.5h，蒸餾水洗凈；滴加2%硝酸鈷溶液室溫下顯色5min，蒸餾水洗凈；放入4%中性甲醛溶液內(nèi)室溫下固定2min，蒸餾水洗凈。最后滴加 1%硫化銨溶液反應(yīng)1min，蒸餾水洗凈，烘干后用樹(shù)膠封片。

2.4非特異性酯酶（NSE）

采用偶氮法顯色。取0.4g堿性品紅粉末，溶于0.6ml濃鹽酸中用玻璃棒迅速攪拌呈棕紫糊狀，加入8ml蒸餾水溶解后過(guò)濾，取1.2ml溶液與等量的4% NaNO2水溶液混合制成六偶氮副品紅溶液。取0.01g醋酸-1-萘酯溶于0.4ml丙酮中，加入40μl PBS，再加入2.4ml六偶氮副品紅混合，滴加于冰凍切片上，室溫下反應(yīng)30min。蒸餾水洗凈，烘干后用樹(shù)膠封片。

2.5過(guò)氧化物酶（POX）

采用DAB法顯色。取15mg二氨基聯(lián)苯胺（DAB）粉末溶于 1.5ml 0.1mol／L Tris-HCl緩沖液（TBS）中，待完全溶解后分裝于30個(gè)小管內(nèi)并保存于-20℃的冰箱中備用。每次實(shí)驗(yàn)取一小管DAB溶液，加入1ml TBS，再加入 3μl H2O2混合后制成孵育液。將冰凍切片置于濕盒中，滴加孵育液后于37℃恒溫箱中反應(yīng)1h，取出后用蒸餾水沖洗，再用PBS溶液作用5min，蒸餾水洗凈，烘干后用樹(shù)膠封片。

2.6琥珀酸脫氫酶（SDH）

采用四唑鹽法顯色。取12μl 5%硝基藍(lán)四唑（NBT）溶液，1.5ml 0.1mol／L PB和0.03g琥珀酸鈉鹽混勻制成孵育液。將冰凍切片置于濕盒中，滴加孵育液于37℃恒溫箱中反應(yīng)30min，蒸餾水洗凈，烘干后用樹(shù)膠封片。

3 酶活性光密度測(cè)定與數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

在Olympus BX61型顯微鏡下觀察，10×40倍視野下顯微拍照。利用Image-Pro Plus圖像分析軟件，對(duì)所選取的8個(gè)部位6種酶的組織化學(xué)染色部位進(jìn)行光密度分析，同時(shí)測(cè)出切片中陽(yáng)性部位的累積光密度（integrated optical density，IOD）和面積（Area），計(jì)算出平均光密度（MOD）以示酶活力大小。利用軟件IBM SPSS Statistics 20進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），顯示各種酶在消化道不同部位的活力差異顯著性，P＜0.05表示差異顯著。

結(jié)　果

1 ACP的組織化學(xué)定位

ACP酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物呈棕黃色，在胃中主要分布于胃腺部，上皮細(xì)胞頂部及基底部有少量分布（圖1A1），在幽門(mén)盲囊和前腸主要分布于黏膜上皮細(xì)胞頂部，固有層中有少量分布（圖1A2），在中腸和后腸中密集分布于黏膜上皮細(xì)胞底部（圖1A3）。光密度分析和各部位間兩兩比較顯示，中腸和后腸酶活力最強(qiáng)，其次為胃幽門(mén)、前腸和幽門(mén)盲囊，胃體、胃賁門(mén)和食道酶活力微弱（表1）。

2 ALP的組織化學(xué)定位

ALP酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物呈藍(lán)紫色，在食道和胃中主要分布于固有層中，在腸道和幽門(mén)盲囊中主要分布于上皮細(xì)胞頂部和底部，其中前腸上皮細(xì)胞頂部紋狀緣酶活力較高（圖1B1），中腸上皮細(xì)胞基底部酶活力較高（圖1B2）。光密度分析和各部位間兩兩比較顯示，前腸和中腸酶活力最強(qiáng)，其次為后腸、幽門(mén)盲囊和食道，胃各部位酶活力較弱。

3 ATPase的分布與組織定位

ATPase酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性部位呈棕黑色，在胃的各部位均主要分布于腺體和固有層中（圖1C1），在幽門(mén)盲囊和腸道各部位均主要分布于上皮細(xì)胞頂部、底部和固有層中（圖1C2）。光密度分析和各部位間兩兩比較顯示，胃體酶活力最強(qiáng)，其次為胃幽門(mén)、胃賁門(mén)和幽門(mén)盲囊，腸道各部位酶活力較弱，食道中酶活力最弱。

4 NSE的分布與組織定位

NSE酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性部位呈橘紅色，在食道中主要分布于上皮細(xì)胞頂部和底部（圖1D1），胃賁門(mén)和胃幽門(mén)中酶活力很弱，分布于上皮細(xì)胞底部，腺體中無(wú)明顯酶活力，在胃體的上皮細(xì)胞底部和腺體中則有較高的酶活力（圖1D2），在幽門(mén)盲囊和腸道各部位主要分布于紋狀緣，上皮細(xì)胞的底部有少量分布（圖1D3）光密度分析和各部位間兩兩比較顯示，胃體酶活力最強(qiáng)，其次為食道和幽門(mén)盲囊，胃賁門(mén)、胃幽門(mén)和腸道各部位酶活力較弱。

5 POX的分布與組織定位

POX酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性部位呈棕黃色顆粒狀分布，在胃體和賁門(mén)中主要分布于上皮細(xì)胞、固有層和腺體中（圖1E1），在幽門(mén)盲囊和腸道各部位的黏膜上皮細(xì)胞和固有層中呈不規(guī)則的顆粒狀分布（圖1E2）。光密度分析和各部位間兩兩比較顯示，胃體和賁門(mén)酶活力最強(qiáng)，其次為幽門(mén)盲囊和腸道，胃幽門(mén)和食道酶活力最弱。

6 SDH的分布與組織定位

SDH酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性部位呈藍(lán)紫色，主要分布于胃體腺和賁門(mén)腺中（圖1F1）；在食道黏膜上皮和胃幽門(mén)上皮細(xì)胞頂部有少量分布（圖1F2）；幽門(mén)盲囊和腸道中SDH主要分布于黏膜上皮細(xì)胞頂部，上皮細(xì)胞底部酶活力相對(duì)較弱（圖1F3）。光密度分析和各部位間兩兩比較顯示，胃體和胃賁門(mén)酶活力最強(qiáng)，其次為幽門(mén)盲囊、前腸和胃幽門(mén)，后腸和中腸酶活力較弱，食道酶活力最弱。

表1　烏鱧消化道黏膜6種酶的分布Table 1　The distribution of six types of enzymes in the digestive mucosa of Ophiocephalus argus

圖1　6種重要酶在烏鱧消化道黏膜中的組織化學(xué)定位。A，酸性磷酸酶在胃幽門(mén)（A1）、幽門(mén)盲囊（A2）和后腸（A3）的分布；B，堿性磷酸酶在前腸（B1）和中腸（B2）的分布；C，腺苷三磷酸酶在胃體（C1）和中腸（C2）的分布；D，非特異性酯酶在食道（D1）、胃體（D2）和中腸（D3）的分布；E，過(guò)氧化物酶在胃體（E1）和中腸（E2）的分布；F，琥珀酸脫氫酶在胃體（F1）、胃幽門(mén)（F2）和前腸（F3）的分布；LP，固有層；ME，黏膜表皮；FG，胃底腺；PG，幽門(mén)腺；SB，紋狀緣；比例尺，50μmFig.1　Histochemical localization of six essential enzymes in the digestive mucosa of Ophiocephalus argus.A，distribution of ACP in the pylorus（A1），pyloric caecum（A2）and hindgut（A3）；B，distribution of ALP in the foregut（B1）and midgut（B2）；C，distribution of ATPase in the gastric body（C1）and midgut（C2）；D，distribution of NES in the esophagus（D1），gastric body（D2）and midgut（D3）；E，distribution of POX in the gastric body（E1）and midgut（E2）；F，distribution of SDH in the gastric body（F1），pylorus（F2）and foregut（F3）；LP，lamina propria；ME，mucosal epithelia；FG，fundic glands；PG，pyloric glands；SB，striated border；Scale bar，50μm

討　論

磷酸酶是一類(lèi)能夠催化各類(lèi)含磷化合物水解的酶，根據(jù)其最適pH值不同常將其分為酸性磷酸酶和堿性磷酸酶。酸性磷酸酶是溶酶體的標(biāo)志酶，是參與細(xì)胞內(nèi)消化的重要水解酶。魚(yú)類(lèi)消化道細(xì)胞可通過(guò)內(nèi)吞作用將食糜吞入細(xì)胞內(nèi)，在溶酶體的作用下進(jìn)行胞內(nèi)消化和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收［8］。本研究顯示，烏鱧消化道中酸性磷酸酶主要分布于中腸和后腸，其次為前腸和胃幽門(mén)。與許氏平鲉（Sebastes schlegeli）［9］主要分布于中腸基本一致，與褐菖鲉（Sebastiscus marmoratus）［10］主要分布于胃幽門(mén)，其次分布于幽門(mén)盲囊和腸道中有一定差異，而與項(xiàng)帶重牙鯛（Diplodus vulgaris）［11］主要分布在直腸，而較少分布于中腸和后腸明顯不同。可見(jiàn)，酸性磷酸酶在魚(yú)類(lèi)消化道內(nèi)的分布存在一定的物種特異性。烏鱧消化道酸性磷酸酶的分布表明其中腸和后腸有較強(qiáng)吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)消化功能。

堿性磷酸酶能催化一系列磷酸單酯的水解反應(yīng)，產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷酸和相應(yīng)的醇、酚或糖，亦能夠催化磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移反應(yīng)［12］。堿性磷酸酶在消化道中主要參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收、離子分泌和機(jī)體防御等作用［12］。本研究顯示，烏鱧消化道堿性磷酸酶主要分布于前腸和中腸，其次為后腸、幽門(mén)盲囊和食道，極少分布于胃中；與許氏平鲉［9］和褐菖鲉［10］堿性磷酸酶主要分布于前腸和中腸，少分布于胃中相一致；與項(xiàng)帶重牙鯛［11］主要分布于幽門(mén)盲囊和前腸，其次分布在中腸、后腸和直腸亦相似。可見(jiàn)，前腸和中腸是肉食性魚(yú)類(lèi)行使消化吸收功能的主要部位。

ATPase位于動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)膜上，可催化ATP水解為ADP和無(wú)機(jī)磷酸并釋放能量進(jìn)行物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)［13］。本研究顯示，烏鱧消化道ATPase主要分布于胃體中，其次為胃幽門(mén)、胃賁門(mén)和幽門(mén)盲囊，食道和腸道較少。鱖魚(yú)（Siniperca chautsi）［14］ATPase主要分布食道、胃、前腸和后腸，其次為幽門(mén)盲囊和中腸；兩棲類(lèi)虎紋蛙（Rana rugulosa）［7］ATPase主要分布于胃賁門(mén)部，其次為胃幽門(mén)部、胃體和食管，較少分布于空腸、十二指腸、直腸和回腸中?？梢?jiàn)，ATPase在不同動(dòng)物消化道內(nèi)的分布存在一定的物種特異性。烏鱧消化道ATPase主要分布于胃體，且定位于胃腺部，與胃酸和胃蛋白酶的分泌需要消耗較多ATP能量相適應(yīng)。

非特異性酯酶是一種羧酸水解酶，與動(dòng)物消化道內(nèi)脂肪和酯類(lèi)的消化吸收有關(guān)［15］。本研究顯示，烏鱧消化道非特異性酯酶主要分布于胃體，其次為食道和幽門(mén)盲囊，較少分布于胃賁門(mén)、胃幽門(mén)和腸道中；與褐菖鲉［10］主要分布于胃幽門(mén)，其次為胃體、幽門(mén)盲囊和胃賁門(mén)，較少分布于食道和腸道中有一定的相似性；與項(xiàng)帶重牙鯛［11］主要分布于前腸、中腸和直腸中則有明顯差異；與紅娘魚(yú)（Lepidotrigla cavillone）［16］主要分布于后腸，其次為前腸，較少分布于中腸和幽門(mén)盲囊亦明顯不同。可見(jiàn)，非特異性酯酶在魚(yú)類(lèi)消化道中的分布有明顯的物種特異性。烏鱧消化道NSE的分布表明胃體是其消化脂類(lèi)的主要部位。

過(guò)氧化物酶在動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化物酶體中執(zhí)行解毒作用，通過(guò)催化過(guò)氧化氫與氫供體之間的氧化反應(yīng)，將過(guò)氧化氫、酚、甲醛和醇類(lèi)等有毒物質(zhì)氧化［17］。此外，過(guò)氧化物酶還參與脂肪酸的β氧化［18］。本研究顯示，烏鱧消化道的過(guò)氧化物酶主要分布于胃體和賁門(mén)，其次為幽門(mén)盲囊和腸道，極少分布于胃幽門(mén)和食道中；與鱖魚(yú)［14］過(guò)氧化物酶主要分布于胃幽門(mén)，其次為胃賁門(mén)、幽門(mén)盲囊和腸道，較少分布于食道和胃體中有一定的相似性；與兩棲類(lèi)虎紋蛙［7］過(guò)氧化物酶主要分布于胃體和食管，其次為胃賁門(mén)、胃幽門(mén)、直腸和十二指腸，較少分布于空腸和回腸中有明顯差異。烏鱧消化道內(nèi)過(guò)氧化物酶的分布表明胃體和賁門(mén)是其消化道代謝作用旺盛，產(chǎn)生有毒物質(zhì)較多的部位。本研究還顯示，烏鱧胃中過(guò)氧化物酶的分布與非特異性酯酶有較高的相似性，這可能與其參與脂質(zhì)的代謝有關(guān)。

琥珀酸脫氫酶是三羧酸循環(huán)和有氧呼吸過(guò)程中的功能性成分，在細(xì)胞內(nèi)串聯(lián)線粒體基質(zhì)中的琥珀酸到延胡索酸的氧化和泛醌在線粒體膜上的還原兩個(gè)過(guò)程［19］。本研究顯示，烏鱧消化道琥珀酸脫氫酶主要分布于胃賁門(mén)和胃體，其次為幽門(mén)盲囊、前腸和胃幽門(mén)，較少分布于后腸、中腸和食道中；與鱖魚(yú)［14］琥珀酸脫氫酶在消化道的主要分布一致；與兩棲類(lèi)虎紋蛙［7］琥珀酸脫氫酶主要分布于直腸、食管和胃體，其次為空腸、回腸、十二指腸和胃賁門(mén)，較少分布于胃幽門(mén)中有一定的差異。烏鱧消化道琥珀酸脫氫酶集中分布于胃腺部，同ATPase的定位相一致，與胃腺分泌胃酸、胃蛋白酶需要消耗較多ATP能量相適應(yīng)。

總之，烏鱧消化道黏膜6種酶的分布與其他物種既有相似性也有其自身特點(diǎn)。烏鱧中腸和后腸有較強(qiáng)吸收蛋白質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)消化功能，胃體是脂類(lèi)的主要消化部位，前腸和中腸是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的主要部位。

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Histochemical localization of six essential enzymes in the mucosa of digestive tracts of the Ophiocephalus argus

Xie Yuling,Wang Jinyi,Yuan Baoqin,Zhang Haiyan,Peng Qianqian,Zhang Shengzhou*
（College of Life Sciences，Anhui Normal University，Key Laboratory for Conservation and Use of Important Biological Resources of Anhui Province，Wuhu 241000，China）

Objective To investigate the distribution and histological localization of acid phosphatase(ACP),alkaline phosphatase(ALP),adenosine triphophatase(ATPase),nonspecific esterase(NSE),peroxidase(POX),and succinate dehydrogenase (SDH)in the digestive mucosa of Ophiocephalus argus.Methods Tissue samples from eight parts(esophagus,stomachus cardiacus, stomachus corpus,stomachus pyloricus,pyloriccaeca,pre-intestine,mid-intestine,hind-intestine)of the digestive tract were studied by enzyme histochemical staining on frozen sections,and quantitative analysis of results with optical density.Results ACP is mainly located at the bottom of the epithelial cells of the midgut and hindgut；the enzymatic activity is weak in the esophagus,cardia and gastric body.ALP is mainly located at the top and bottom of the epithelial cells of the foregut and midgut；the enzymatic activity is weaker in the stomach.ATPase is mainly distributed in the epithelial cells of gastric glands；the enzymatic activity is significantly weaker in the esophagus.NSE is mainly distributed in the cells of epithelium and glands of the gastric body；the enzymatic activityis significantly weaker in the hindgut.The activity of POX is highest in the glandular epithelial cells of the gastric body and cardia,and significantly weaker in those of esophagus and pylorus.The activity of SDH is highest in the glandular epithelial cells of the gastric body and cardia, and weakest in the esophagus.Conclusion The distribution of six types of enzymes in the digestive mucosa of Ophiocephalus argus indicates that the midgut and hindgut have a strong ability of protein absorption and intracellular digestion,the gastric body is the main site for lipid digestion,and that the foregut and midgut are the main parts for nutrient absorption.

Ophiocephalus argus；digestive tract；enzyme histochemistry

Q174

A

10.16705／j.cnki.1004-1850.2016.05.007

2016-07-16

2016-10-09

安徽省自然科學(xué)基金（11040606M75）；國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（201510370058）；安徽省重要生物資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)基金

謝毓玲，女（1994年），漢族，本科

（To whom correspondence should be addressed）：szzhang＠m(xù)ail.ahnu.edu.cn