UPLC-QTRAP-MS/MS法同時測定蒼耳類藥材中酚酸、蒽醌及黃酮類成分

劉娟秀，羅益遠，劉訓紅，宋建平，華愉教，王勝男

(1.南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210023；2.鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術學院，江蘇 鹽城 224006)

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UPLC-QTRAP-MS/MS法同時測定蒼耳類藥材中酚酸、蒽醌及黃酮類成分

劉娟秀1，羅益遠1，劉訓紅1，宋建平2，華愉教1，王勝男1

(1.南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210023；2.鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術學院，江蘇 鹽城 224006)

建立了超高效液相色譜-三重四極桿-線性離子阱質譜(UPLC-QTRAP-MS/MS)同時測定蒼耳草、蒼耳子藥材中酚酸、蒽醌及黃酮類18種活性成分的方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)，以甲醇-0.2%甲酸水溶液為流動相，梯度洗脫，柱溫為35 ℃，選擇電噴霧離子源(ESI)，負離子多反應監(jiān)測(MRM)掃描方式檢測。結果表明：在一定的濃度范圍內，18種目標化合物的線性關系良好，線性相關系數(shù)均大于0.999 4，精密度、重復性和穩(wěn)定性的RSD值均小于3%；加樣回收率在96.81%～102.78%之間，RSD小于3%。該方法簡便準確、靈敏度高、重復性好，適用于蒼耳類藥材中多元活性成分的同時測定，可為蒼耳類藥材內在質量的綜合評價和全面控制提供方法參考。

蒼耳草；蒼耳子；超高效液相色譜-三重四極桿-線性離子阱質譜(UPLC-QTRAP-MS/MS)；酚酸；蒽醌；黃酮；同時測定

蒼耳類藥材蒼耳草、蒼耳子系菊科植物蒼耳XanthiumsibiricumPatr.的地上部分和成熟帶總苞的果實，為相同基源不同藥用部位的藥材[1]，分別記載于1989年版《江蘇省中藥材標準》和2015年版《中國藥典》。蒼耳草性微寒，具清風熱、解毒之功效，主治鼻淵、風寒頭痛、風濕痹痛、風疹、濕疹、疥癬等癥，民間用藥歷史悠久[2]；蒼耳子性溫，具散風寒、通鼻竅、祛風濕之功效，為歷代治療鼻淵及頭痛的要藥[3]?，F(xiàn)代研究表明，蒼耳類藥材含多種酚酸、蒽醌、黃酮類成分[4-6]，其中酚酸類成分具有抗炎、抗菌、抗血栓等作用[7-8]；蒽醌類成分具有抗菌消炎、抗病毒、降血脂、提高免疫等作用[9]；黃酮類成分具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等作用[10-11]。中藥療效的發(fā)揮是多種成分綜合作用的結果，針對蒼耳類藥材多種活性成分的特點，建立多元活性成分同時測定的方法，對探討多指標成分的綜合評價體系具有實用性和有效性。

目前，關于蒼耳類藥材的質量評價主要集中在酚酸、蒽醌及黃酮類成分的分析[12-17]，其分析方法多為高效液相色譜法(HPLC)[18-22]或高效毛細管電泳法(HPCE)[23]，尚未見上述多元活性成分同時測定的報道。液相色譜-串聯(lián)質譜(LC/MS)技術具有高靈敏度、高選擇性和高準確性等特點，其檢測限可低至pg級，適用于化合物的快速定性定量分析[24]。

本實驗擬采用超高效液相色譜-三重四極桿/線性離子阱質譜(UPLC-QTRAP-MS/MS)法同時測定蒼耳草、蒼耳子藥材中酚酸、蒽醌和黃酮類成分的含量，并對不同商品藥材的測定結果進行比較分析，考察其加工炮制前后目標成分的動態(tài)變化和同植株不同部位目標成分的積累差異，旨為蒼耳類藥材的安全性、有效性綜合評價和內在質量的全面控制提供可靠的檢測方法及科學依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 儀器和材料

SIL-20A XR超快速液相色譜儀：日本島津公司產品；API 5500四極桿-線性離子阱質譜儀：美國AB Sciex公司產品，配有Analyst Software 1.5.2數(shù)據(jù)采集處理工作站；ME36S型電子分析天平：德國賽多利斯公司產品；KQ-500E型超聲波清洗器(功率500 W，頻率40 kHz)：昆山市超聲儀器有限公司產品；DHG-9140A型電熱恒溫鼓風干燥箱：上海滬粵明科學儀器有限公司產品；H1650-W高速離心機：湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司產品。

綠原酸(批號：110753-200413)、阿魏酸(批號：110773-201012)、咖啡酸(批號：110885-200102)、蘆薈大黃素(批號：110756-201007)、大黃素(批號：110756-200110)、大黃酚(批號：110796-201017)、槲皮素(批號：100081-200907)、蘆丁(批號：0080-9705)、金絲桃苷(批號：111521-200303)、紫云英苷(批號：11092001)：純度均大于98%，購于中國食品藥品檢定研究院；新綠原酸(批號：12112712)、隱 綠 原 酸(批號：12112605)、1,3-二咖啡?？鼘幩?批號：12061112)、3,5-二咖啡酰奎寧酸(批號：12022803)、4,5-二咖啡?？鼘幩?批號：12022804)：純度均大于98%，購于成都普瑞法科技開發(fā)有限公司；原兒茶醛(批號：YECQ20140819)、原兒茶酸(批號：YECS20140411)、3,4-二咖啡?？鼘幩?批號：YLYB2014041901)：純度均大于98%，購于南京春秋生物工程有限公司；實驗用水為超純水；甲醇、甲酸：均為色譜純，德國默克公司產品；其余試劑均為分析純。

蒼耳類藥材經南京中醫(yī)藥大學中藥鑒定教研室劉訓紅教授鑒定，S1～S18為蒼耳草，系菊科植物蒼耳XanthiumsibiricumPatr.的干燥地上部分；S19～S40為蒼耳子，系菊科植物蒼耳XanthiumsibiricumPatr.的干燥成熟帶總苞的果實。其中，S26、S27分別為S23、S25根據(jù)2015年版《中國藥典》(一部)炒蒼耳子制法制得的對應炮制品；S18和S25為同一植株不同部位藥材。S15～S25樣品為實地采集，其余樣品均為商品藥材，留樣憑證存放于南京中醫(yī)藥大學中藥鑒定實驗室，詳細情況列于表1。

表1 蒼耳類藥材樣品的基本情況

1.2 實驗條件

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)；流動相：甲醇(A)-0.2%甲酸水溶液(B)；梯度洗脫：0～10 min、20%～30%A，10～20 min、30%～35%A，20～30 min、35%～80%A，30～45 min、80%～100%A，45～48 min、100%～20%A；流速1.0 mL/min；柱溫35 ℃；進樣量5 μL。

1.2.2 質譜條件 電噴霧離子源(ESI)，多反應監(jiān)測模式(MRM)檢測，檢測離子為負離子，離子化溫度550 ℃，噴霧電壓-4 500 V，霧化氣流速55 L/min，輔助氣流速55 L/min，氣簾氣流速35 L/min。其他優(yōu)化的質譜參數(shù)列于表2。

表2 18種目標化合物的質譜參數(shù)

1.3 溶液制備

1.3.1 對照品溶液的制備 精密稱取1.62 mg綠原酸、1.46 mg新綠原酸、1.91 mg原兒茶醛、0.97 mg原兒茶酸、1.09 mg隱綠原酸、1.20 mg咖啡酸、1.18 mg 1,3-二咖啡?？鼘幩?、1.00 mg阿魏酸、1.43 mg 3,4-二咖啡?？鼘幩?、1.08 mg 3,5-二咖啡酰奎寧酸、1.12 mg 4,5-二咖啡?？鼘幩?、2.70 mg蘆薈大黃素、2.97 mg大黃素、2.07 mg大黃酚、2.11 mg蘆丁、1.55 mg槲皮素、1.78 mg紫云英苷、1.50 mg金絲桃苷對照品，分別置于10 mL容量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度，得對照品儲備液。取各對照品母液適量，加入甲醇配制成含上述對照品的混合儲備液，然后逐級稀釋，得到一系列不同濃度的混合對照品溶液，經0.22 μm微孔濾膜過濾，待分析。

1.3.2 供試品溶液的制備 精密稱取1.0 g樣品粉末(過3號篩)，置于100 mL具塞錐形瓶中，加入40 mL 70%甲醇，稱其質量后，于室溫下超聲(500 W，40 kHz)提取30 min，取出放冷，以70%甲醇補足質量損失，搖勻，提取液以12 000 r/min離心10 min；取上清液，經0.22 μm微孔濾膜過濾，得供試品溶液。

1.4 分析方法

采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱對色譜條件進行優(yōu)化，確定最佳的分離條件。按照優(yōu)化的條件進行UPLC-QTRAP-MS/MS分析，采用外標法計算各樣品中18種目標成分的含量。

2 結果與討論

2.1 色譜-質譜條件的優(yōu)化

實驗考察了甲醇-水溶液、乙腈-水溶液、甲醇-0.1%甲酸水溶液、甲醇-0.2%甲酸水溶液等溶劑作為流動相的洗脫效果。由于甲醇可電離出[H+]，較乙腈有更高的響應和較好的峰形，故選用甲醇作為流動相的有機相。在流動相中加入一定比例的甲酸可增強樣品中待測物的保留，減少色譜峰拖尾，從而提高方法的分離效率和靈敏度。經優(yōu)化，選擇甲醇-0.2%甲酸水溶液作為流動相進行梯度洗脫。

在質譜條件優(yōu)化中，考察了正、負兩種離子模式測定18種目標成分的響應特點。結果顯示，18種目標成分在負離子模式下均有較強的響應，其提取離子流圖及多反應監(jiān)測質譜圖示于圖1。但在正離子模式下，咖啡酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、金絲桃苷、槲皮素、蘆丁、紫云英苷成分的離子響應值較弱。因此，本實驗選用負離子模式進行分析。

2.2 供試品制備方法的優(yōu)化

實驗對提取溶劑(50%、70%、90%、100%甲醇)、料液比(1∶20、1∶30、1∶40、1∶50)、提取時間(30、60、90、120 min)及提取方法(回流、超聲處理)進行了考察。結果表明：采用70%甲醇作為溶劑可以提取出更多的待測物；以料液比1∶40，超聲提取30 min具有較高的提取效率。

2.3 方法學考察

2.3.1 線性方程、檢測限和定量限 精密吸取1.3.1節(jié)中100 μL混合對照品溶液，置于10 mL容量瓶中，依次逐級稀釋，制成一系列濃度的混合對照品溶液，按1.2節(jié)條件進樣分析。以對照品峰面積(y)對相應濃度(x)進行線性回歸，得到線性方程、相關系數(shù)和線性范圍；以各化合物信噪比S/N=3時對應的濃度為最低檢測限(LOD)，以各化合物信噪比S/N=10時對應的濃度為最低定量限(LOQ)，詳細結果列于表3。

注：1.綠原酸；2.新綠原酸；3.原兒茶醛；4.原兒茶酸；5.隱綠原酸；6.咖啡酸；7.1,3-二咖啡?？鼘幩?；8.阿魏酸；9.3,4-二咖啡?？鼘幩?；10.3,5-二咖啡?？鼘幩?；11.金絲桃苷；12.蘆丁；13.4,5-二咖啡?？鼘幩?；14.紫云英苷；15.蘆薈大黃素；16.大黃素；17.大黃酚；18.槲皮素

表3 18種目標化合物的線性方程、相關系數(shù)、線性范圍、方法檢測限和定量限

2.3.2 精密度、穩(wěn)定性和重復性 取一定濃度的混合對照品溶液，在1 d內連續(xù)進樣6次，考察日內精密度；連續(xù)3 d，每天連續(xù)進樣2次，考察日間精密度。取蒼耳草(S7)樣品供試品溶液，分別在0、2、4、6、12、24 h進樣6次，測定18種目標成分峰面積的RSD，考察樣品溶液中18種目標成分的穩(wěn)定性。取約1.0 g蒼耳子(S37)樣品，按2.2節(jié)方法平行制備6份供試品溶液，分別進樣，測定峰面積，計算18種目標成分含量及其RSD，考察方法的重復性。結果表明，儀器的精密度良好，18種目標成分在24 h內穩(wěn)定，方法的重復性良好，詳細結果列于表4。

2.3.3 加樣回收率實驗 取已知含量的0.5 g蒼耳子(S37)樣品，精密稱定6份，分別精密加入一定量的上述對照品溶液，按2.2節(jié)方法制備供試品溶液，進樣測定并計算18種目標成分的回收率，結果列于表5。

2.3.4 實際樣品的測定 將供試品溶液注入液相色譜-質譜聯(lián)用儀，按照1.2節(jié)條件測定，根據(jù)相應的線性關系計算供試樣品中18種目標成分的含量，結果列于表6。

結果表明，蒼耳類藥材中18種目標成分的含量存在一定差異，其中以綠原酸、原兒茶酸含量較高，蘆丁、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚含量較低。蒼耳草藥材中，3,4-二咖啡?？鼘幩?、蘆丁、原兒茶酸含量差異較大；而蒼耳子藥材中，隱綠原酸、3,4-二咖啡?？鼘幩岷坎町愝^大。蒼耳子藥材中，酚酸、蒽醌和黃酮的總量均比蒼耳草藥材高，雖然這2個同基源不同藥用部位的藥材中化學成分類型基本一致，但含量差異明顯，這可能是其功效不同的原因之一[25]。此外，蒼耳子藥材炮制前后，各化合物的含量發(fā)生變化，其中，生蒼耳子(S23、S25)中酚酸、蒽醌和黃酮的總量高于炒蒼耳子(S26、S27)；炒蒼耳子中，新綠原酸、阿魏酸、原兒茶醛含量相對較高。就同一植株而言，阿魏酸、4,5-二咖啡?？鼘幩?、蘆丁、紫云英苷在蒼耳草(S18)中含量較高，其余化合物均以蒼耳子(S25中)含量較高。

表4 18種目標成分的精密度、重復性和穩(wěn)定性

表5 18種目標成分的加樣回收率和相對標準偏差(n=6)

表6 實際樣品的測定結果(μg/g，n=3，X±SD)

Table 6 Determination results of actual samples (μg/g,n=3,X±SD)

編號綠原酸新綠原酸隱綠原酸咖啡酸阿魏酸1,3-二咖啡?？鼘幩?,4-二咖啡酰奎寧酸3,5-二咖啡?？鼘幩?,5-二咖啡?？鼘幩嵩瓋翰枞┰瓋翰杷崽J薈大黃素大黃素大黃酚蘆丁槲皮素紫云英金絲桃苷S191.35±0.61120.77±0.4519.54±0.24390.81±0.6849.12±0.5541.49±0.2320.27±0.1317.68±0.1742.65±0.1947.82±0.37133.45±0.292.74±0.094.79±0.041.38±0.032.50±0.0435.81±0.322.55±0.0918.23±0.13S2248.65±0.06139.97±0.3966.88±0.1675.27±0.3877.19±0.10101.73±0.3560.33±0.1028.70±0.2478.21±0.1186.26±0.14381.66±0.292.68±0.034.47±0.061.55±0.0610.53±0.0855.95±0.194.71±0.12116.72±0.22S3104.40±0.57134.19±0.5137.75±0.32159.08±0.37133.19±0.1655.36±0.1421.33±0.2029.17±0.1653.58±0.1553.78±0.16140.79±0.212.64±0.032.95±0.104.46±0.069.55±0.0767.49±0.354.69±0.0524.23±0.58S4107.37±0.35131.92±0.4023.77±0.322.45±0.0551.75±0.2331.05±0.1130.57±0.2614.84±0.2441.16±0.0829.55±0.27121.64±0.282.68±0.011.19±0.031.47±0.0514.28±0.1543.59±0.3622.52±0.1841.37±0.22S591.72±0.35138.98±0.3427.34±0.20280.59±0.34136.60±0.2343.96±0.2421.58±05421.94±0.2066.76±0.0735.63±0.28170.35±0.262.67±0.041.76±0.050.92±0.0611.24±0.0641.84±0.284.42±0.1333.85±0.27S6169.49±0.72138.64±0.2250.22±0.212.46±0.0415.23±0.11114.30±0.2529.63±0.3451.25±0.1845.45±0.1961.84±0.12134.83±0.402.67±0.045.54±0.060.94±0.021.28±0.0460.96±0.115.19±0.0528.60±0.30S782.63±0.58138.01±0.3218.80±0.1544.54±0.516.84±0.1022.91±0.2116.69±0.1634.88±0.2451.57±0.1625.26±0.14155.14±0.092.74±0.080.90±0.080.85±0.030.44±0.0454.47±0.193.56±0.0652.20±0.20S8407.93±0.13141.08±0.4866.49±0.553.29±0.0839.45±0.2267.58±0.2172.52±0.3121.15±0.1448.79±0.3993.06±0.17327.58±0.332.69±0.040.90±0.030.57±0.056.64±0.1245.55±0.393.84±0.0810.27±0.32S987.02±0.17151.46±0.6119.23±0.1139.37±0.1435.13±0.1182.62±0.3822.68±0.4128.61±0.1322.35±0.2439.76±0.0690.25±0.132.75±0.071.90±0.021.08±0.031.16±0.0661.69±0.192.22±0.068.45±0.26S10315.54±0.45153.47±0.4678.61±0.292.54±0.0517.59±0.15340.99±0.2063.78±0.3835.60±0.2242.85±0.09112.64±0.15175.75±0.282.68±0.032.78±0.043.13±0.051.91±0.0561.94±0.183.76±0.1015.57±0.33S11185.60±0.39155.28±0.3230.21±0.1914.09±0.1350.03±0.22102.03±0.2682.96±0.1717.54±0.2669.26±0.2730.88±0.19310.91±0.302.72±0.082.85±0.034.90±0.044.73±0.1244.31±0.1912.65±0.2932.95±0.20S1265.19±0.22151.30±0.5717.00±0.1281.23±0.1646.84±0.2830.66±0.580.08±0.0131.59±0.2321.82±0.1130.86±0.1479.20±0.172.71±0.051.71±0.021.58±0.063.85±0.0942.96±0.152.76±0.2510.21±0.14S1326.81±0.24160.67±0.519.69±0.15117.52±0.307.06±0.1212.61±0.305.25±0.1521.95±0.079.43±0.0818.55±0.4829.77±0.312.73±0.061.45±0.041.32±0.0648.67±0.1540.87±0.491.83±0.125.75±0.10S14423.20±0.10164.81±0.4970.76±0.2229.41±0.2919.66±0.4197.82±0.33180.44±0.4119.14±0.1038.75±0.2052.25±0.10355.85±0.112.65±0.031.53±0.040.82±0.062.66±0.0963.89±0.317.18±0.1516.36±0.21S15941.11±0.74168.00±0.17182.14±0.1917.62±0.38274.91±0.25175.97±0.43328.17±0.2333.54±0.1980.43±0.0874.30±0.24779.74±0.542.66±0.041.43±0.022.62±0.050.37±0.0553.84±0.4250.32±0.24379.54±0.54S16482.29±0.14164.80±0.3088.48±0.6919.48±0.18111.77±0.32218.38±0.14130.50±0.3731.95±0.1176.71±0.2270.98±0.14523.64±0.232.66±0.021.07±±0.031.08±0.050.43±0.0543.94±0.1924.75±0.08223.37±0.29S17339.03±0.50164.78±0.2658.57±0.5328.40±0.22220.34±0.44273.77±0.3255.90±0.6025.85±0.1177.16±0.0559.75±0.12467.03±0.202.65±0.040.86±0.050.83±0.030.75±0.0352.70±0.1330.87±0.27186.97±0.55S18480.63±0.65145.27±0.25161.12±0.7215.81±0.40377.77±0.17364.92±0.27113.71±0.5218.15±0.0976.29±0.1439.58±0.12156.95±0.582.66±0.020.88±0.040.86±0.058.65±0.2041.28±0.2263.35±0.36198.68±0.48S19734.16±0.67170.14±0.38504.80±0.4661.24±0.29367.82±0.29143.94±0.22166.50±0.5416.42±0.1763.54±0.3464.77±0.18671.05±0.492.67±0.032.84±0.081.45±0.050.38±0.04147.95±0.0812.57±0.06196.73±0.44S20881.78±0.41154.15±0.74692.88±0.3529.03±0.30407.83±0.26195.17±0.32275.48±0.3319.69±0.1492.61±0.4846.12±0.18375.09±0.552.71±0.068.30±0.051.29±0.064.74±0.07151.11±0.1531.54±0.14382.33±0.42S21910.99±0.37155.62±0.63695.89±0.3837.80±0.361031.03±0.59143.05±0.17417.24±0.2331.87±0.1797.39±0.1446.68±0.13477.71±0.372.71±0.051.25±0.041.22±0.060.34±0.05125.76±0.255.90±0.25201.68±0.27

續(xù)表6

3 結論

本研究建立了超高效液相色譜-三重四極桿-線性離子阱質譜法同時測定蒼耳草、蒼耳子藥材中酚酸、蒽醌和黃酮類18種活性成分的含量，并對不同商品藥材、加工炮制前后及同植株不同部位中化合物的含量進行比較分析。結果發(fā)現(xiàn)，蒼耳類藥材中酚酸、蒽醌及黃酮等18種成分的含量存在一定差異，其中蒼耳子藥材的酚酸、蒽醌和黃酮的總量均比蒼耳草藥材高。蒼耳草藥材中，3,4-二咖啡?？鼘幩?、蘆丁、原兒茶酸含量差異較大；蒼耳子藥材中，隱綠原酸、3,4-二咖啡?？鼘幩岷坎町愝^大。蒼耳子藥材炮制前后，目標化合物含量發(fā)生變化，生蒼耳子中酚酸、蒽醌和黃酮的總量高于炒蒼耳子。同植株不同部位藥材中，蒼耳草中阿魏酸、4,5-二咖啡?？鼘幩?、蘆丁、紫云英苷含量較高，其余化合物均以蒼耳子含量較高。該方法可為蒼耳類藥材內在質量的綜合評價和全面控制提供可靠的檢測方法。

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Simultaneous Determination of Phenolic Acids,Anthraquinones and Flavonoids inXanthiiHerbaandXanthiiFructusby UPLC-QTRAP-MS/MS

LIU Juan-xiu1, LUO Yi-yuan1, LIU Xun-hong1, SONG Jian-ping2,HUA Yu-jiao1, WANG Sheng-nan1

(1.NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210023,China;2.YanchengHealthVocational&TechnicalCollege,Yancheng224006,China)

A comprehensive analytical method based on UPLC-QTRAP-MS/MS was developed for the simultaneous determination of eighteen bioactive components including phenolic acids, anthraquinones and flavonoids inXanthiiHerbaandXanthiiFructus. Under the optimized chromatographic conditions, extracts of eighteen target components were obtained on an Agilent ZORBAX SB-C18 column (250 mm×4.6 mm×5 μm) using methanol-0.2% formic acid as mobile phases for gradient elution. The flow rate was 1.0 mL/min and the column temperature was 35 ℃. The target compounds were analyzed in the negative ion multiple reaction monitoring (MRM) mode. The results show that eighteen components have good linearity, the correlation coefficients of all the calibration curves are higher than 0.999 4. Relative standard deviations (RSDs) of precision, repeatability and stability are lower than 3%. The recoveries range from 96.81% to 102.78%, and the RSDs are less than 3%. The established method is accurate, sensitive, and has good repeatability. It is suitable for simultaneous determination of eighteen components inXanthiiHerbaandXanthiiFructus, which can provide a reliable and effective technique for the quality control ofXanthiiHerbaandXanthiiFructus.

XanthiiHerba;XanthiiFructus; UPLC-QTRAP-MS/MS; phenolic acids; anthraquinones; flavonoids; simultaneous determination

2015-12-01;

2015-03-13

江蘇高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目(YSXK-2014)；鹽城市醫(yī)學科技發(fā)展計劃項目(YK2014051)資助

劉娟秀(1990—)，女(漢族)，江蘇人，碩士研究生，生藥學專業(yè)。E-mail: liujx0516@163.com

劉訓紅(1959—)，男(漢族)，江蘇人，教授，從事中藥鑒定與品質評價研究。E-mail: liuxunh1959@sohu.com

時間：2016-07-05；

http:∥www.cnki.net/kcms/detail/11.2979.TH.20160705.1357.024.html

O657.63

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1004-2997(2016)06-0542-12

10.7538/zpxb.youxian.2016.0026