• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甘肅黃芪和紅芪總黃酮含量對比測定方法探索研究

    2016-12-03 11:07:02葉迎包強王瑞海柏冬薛欣張立石劉麗梅
    中國中醫(yī)藥信息雜志 2016年9期

    葉迎 包強 王瑞海 柏冬 薛欣 張立石 劉麗梅

    摘要:目的 探索建立甘肅黃芪和紅芪藥材中總黃酮含量對比的測定方法。方法 以毛蕊異黃酮苷等為對照品,采用紫外分光光度法和比色法(顯色劑:NaNO2-Al(NO3)3-NaOH、AlCl3、Mg(Ac)2、NaOH、磷鉬酸、鹽酸-鎂粉),考察樣品和對照品吸收曲線。結(jié)果 采用比色法,黃芪、紅芪樣品和對照品的最大吸收波長不一致,峰形有差別或差別較大。采用紫外法測定,毛蕊異黃酮苷在Ⅱ帶260 nm處呈現(xiàn)特征肩峰吸收,黃芪和紅芪亦在Ⅱ帶呈現(xiàn)特征肩峰吸收,吸收波長分別為263、265 nm,吸收波長與對照品基本一致。結(jié)論 常用的顯色反應(yīng)不適合甘肅黃芪和紅芪中總黃酮含量的對比測定;異黃酮類化合物吸收Ⅱ帶作為特征吸收帶,適于黃芪和紅芪樣品中總黃酮含量的對比研究。

    關(guān)鍵詞:黃芪;紅芪;總黃酮;紫外-可見分光光度法;比色法;含量測定

    DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2016.09.024

    中圖分類號:R284.1 文獻標識碼:A 文章編號:1005-5304(2016)09-0099-07

    Study on Determination Method of Total Flavonoids in Gansu Astragali Radix and Hedysarum Polybotrys YE Ying1, BAO Qiang2, WANG Rui-hai1, BAI Dong1, XUE Xin1, ZHANG Li-shi1, LIU Li-mei1 (1. Institute of Basic Theory Research of TCM, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China; 2. Department of Pharmacy, Gansu Province Hospital of TCM, Lanzhou 730050, China)

    Abstract: Objective To study the determination method of total flavonoids in Gansu Astragali Radix and Hedysarum Polybotrys. Methods Calycosin glycosides etc. was selected as reference substances, comparison on the difference of absorption curves was done by ultraviolet spectroscopy and colorimetric method (NaNO2-Al(NO3)3- NaOH, AlCl3, Mg(Ac)2, NaOH, phosphomolybdic acid, HCl-Mg power). Results With colorimetric method, the maximum absorption wavelength of referrence and the test was inconsistent. The absorption peak shape was also different. With UV method, Calycosin glycosides in band Ⅱ (260 nm) showed a shoulder absorption. Astragali Radix and Hedysarum Polybotrys also showed characteristic shoulder absorptions in band Ⅱ with absorption wavelength at 263 nm and 265 nm. So the sample absorption wavelength is basically the same as that of the control sample. Conclusion Colorimetries usually used for determination of total flavonoids are not suitable for the comparison determination of Gansu Astragali Radix and Hedysarum Polybotrys. It is suitable for determining the contents of total flavonoids in samples by UV spectrophotometry at the band Ⅱ, which is the characteristic absorption band of isoflavone compound.

    Key words: Astragali Radix; Hedysarum Polybotrys; total flavonoids; ultraviolet-visible spectrophotometry; colorimetric method; determination

    黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge的干燥根,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》;紅芪為豆科植物多序巖黃芪Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.的

    基金項目:中國中醫(yī)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費自主選題項目(YZ-1438)

    通訊作者:劉麗梅,E-mail:liulimeihrb@sina.com

    干燥根,最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》黃芪項下,并列為上品。二者均具有補氣升陽、固表止汗、利水消腫、生津養(yǎng)血、行滯通痹、脫毒排膿、斂瘡生肌的功效[1]。黃芪和紅芪為同科異屬植物,傳統(tǒng)用藥時二者?;煊貌⑾嗷ヌ娲晕鞅钡貐^(qū)尤甚[2-3]。在歷代本草文獻中,黃芪項下的“赤水耆”“赤色者”即為西北地區(qū)應(yīng)用歷史悠久的紅芪,在我國西北、西南、港澳臺地區(qū)及東南亞一些地區(qū)至今仍有以紅芪用作黃芪替代品的習(xí)慣,認為紅芪是黃芪的優(yōu)良品種[4]?!吨腥A人民共和國藥典》1977年版將紅芪列為正品黃芪之一,1985年版開始將兩者分開,1995年版又將紅芪與膜莢黃芪、蒙古黃芪同列在黃芪項下[3,5],而2005、2010、2015年版又將其分開。張氏等[6]采用ISSR分子標記技術(shù)對不同居群的黃芪和紅芪進行相關(guān)分析表明紅芪和黃芪親緣關(guān)系較遠?!包S芪和紅芪不分”和“黃芪、紅芪為2種中藥”,以及“紅芪的品質(zhì)優(yōu)于黃芪”這些說法的科學(xué)依據(jù)是什么?甘肅是黃芪和紅芪的道地產(chǎn)區(qū),我們對甘肅黃芪和紅芪從化學(xué)成分表征、成分含量測定、體內(nèi)成分等多方面開展對比研究。本研究探索建立進行二者總黃酮含量對比的測定方法,從總黃酮含量分析討論該問題。

    黃酮類成分為黃芪和紅芪共有的有效成分,主要包括異黃酮、黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、查耳酮等,其中毛蕊異黃酮、毛蕊異黃酮苷、芒柄花素、芒柄花素苷4種成分均為異黃酮類,且含量較高[7-8]。目前,中藥總黃酮的含量測定方法主要有紫外-可見分光光度法、薄層色譜法等,前者廣泛用于中藥總黃酮成分的含量測定[9]。黃芪總黃酮含量測定多以蘆丁為對照品,采用鋁鹽比色法(NaNO2-Al(NO3)3-NaOH、AlCl3)在可見區(qū)進行測定[10],近幾年出現(xiàn)了采用毛蕊異黃酮苷為對照品在紫外區(qū)進行測定的方法[11]。紅芪總黃酮含量測定報道較少,也是采用鋁鹽比色方法[12]。但是我們研究發(fā)現(xiàn),采用鋁鹽進行反應(yīng),樣品在可見光區(qū)域未呈現(xiàn)吸收或者吸收值很弱,難以定量。鑒于黃芪和紅芪所含黃酮類成分不完全相同,采用何種對照品、何種方法測定含量更適宜,本試驗對此開展了探索研究,以期建立適合甘肅黃芪和紅芪總黃酮含量對比的測定方法。

    1 儀器與試藥

    BT25S型電子天平(德國,賽多利斯),8453型紫外可見分光光度儀(美國,Agilent公司),DZKW-4型電子恒溫水浴鍋(北京中興偉業(yè)儀器有限公司),RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海振捷實驗設(shè)備有限公司),KQ-250型超聲波清洗機(昆山市超聲儀器有限公司)。

    對照品毛蕊異黃酮苷(批號111920-201304)、芒柄花素(批號111703- 200603),中國食品藥品檢定研究院;對照品毛蕊異黃酮(批號PS13081501)、芒柄花苷(批號PS12051101),成都普思生物科技有限公司;對照品蘆?。ㄅ?0141125),北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司;黃芪、紅芪飲片,甘肅省宕昌縣六合中藥材合作社,經(jīng)中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所胡世林教授鑒定,分別為蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao和多序巖黃芪Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.的根;Al(NO3)3、NaNO2、AlCl3、Mg(Ac)2、磷鉬酸、鎂粉、甲醇、無水乙醇均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 對照品溶液的制備

    取毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、芒柄花素和蘆丁對照品適量,精密稱定,置10 mL量瓶中,加甲醇溶解,并稀釋至刻度,搖勻,制成含毛蕊異黃酮苷217 ?g/mL、毛蕊異黃酮212 ?g/mL、芒柄花苷231 ?g/mL、芒柄花素187 ?g/mL、蘆丁221 ?g/mL的對照品溶液,備用。

    2.2 供試品溶液的制備

    稱取黃芪和紅芪粉末(過50目)各1.5 g,精密稱定,置圓底燒瓶中,精密吸取70%乙醇45 mL,水浴回流3 h,趁熱過濾,濾液回收乙醇至干,殘渣加水10 mL溶解,用水飽和正丁醇萃取4次,每次10 mL,合并正丁醇液,減壓回收溶劑,殘渣用甲醇溶解并移至10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得含生藥濃度為150 mg/mL的黃芪、紅芪供試品溶液。

    2.3 總黃酮含量測定

    2.3.1 NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法 分別精密吸取“2.1”項下對照品溶液毛蕊異黃酮苷1.5 mL、毛蕊異黃酮3.0 mL、芒柄花素苷1.0 mL、芒柄花素1.0 mL、蘆丁1.0 mL和“2.2”項下黃芪和紅芪供試品溶液各1.0 mL,置于25 mL容量瓶中,精密加入蒸餾水使至6 mL,然后精密加入5%NaNO2 1.0 mL,搖勻,放置6 min,再精密加入10%Al(NO3)3 1.0 mL,搖勻,放置6 min,再精密加入4%NaOH 10 mL,加蒸餾水至刻度,搖勻(其中毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、芒柄花素、蘆丁濃度分別為13.02、25.44、9.24、7.48、8.84 ?g/mL,黃芪、紅芪原藥材濃度均為6.0 mg/mL),放置15 min,以相應(yīng)的試劑為空白,在200~900 nm進行掃描[10],結(jié)果見圖1。可見,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色后,黃芪和紅芪的λmax分別為398 nm和394 nm,與蘆丁λmax(510 nm)及其他4個對照品溶液吸收光譜λmax不同,且光譜峰形相差較大。

    2.3.2 AlCl3比色法 分別精密吸取“2.1”項下對照品溶液毛蕊異黃酮苷0.25 mL、蘆丁0.5 mL和“2.2”項下黃芪和紅芪供試品溶液各0.5 mL,置于10 mL容量瓶中,以甲醇補足至5.0 mL,搖勻,再精密加入1%AlCl3溶液4 mL,用甲醇稀釋至刻度,搖勻(其中毛蕊異黃酮苷、蘆丁濃度分別為5.43、11.05 ?g/mL,黃芪、紅芪原藥材濃度均為7.5 mg/mL)放置15 min,以相應(yīng)的試劑為空白,在波長200~900 nm進行掃描[13],結(jié)果見圖2。可見,AlCl3顯色后供試品溶液在400 nm左右未見吸收,毛蕊異黃酮苷在相應(yīng)波長處也沒有吸收峰出現(xiàn),蘆丁的λmax在369 nm,但是峰形與毛蕊異黃酮苷對照品峰形不一致。

    圖2 AlCl3比色法吸收曲線

    2.4 總異黃酮含量測定

    2.4.1 NaOH比色法 分別精密吸取“2.1”項下對照品溶液毛蕊異黃酮苷1.0 mL、毛蕊異黃酮1.0 mL、芒柄花苷1.0 mL、芒柄花素1.0 mL、蘆丁1.5 mL,置于25 mL量瓶中,精密加入0.01 moL/L NaOH溶液20.0 mL;精密吸取“2.2”項下黃芪和紅芪供試品溶液0.8 mL,置于10 mL容量瓶中。均用0.01 moL/L NaOH溶液定容至刻度,搖勻(其中毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、芒柄花素、蘆丁濃度分別為8.68、8.48、9.24、7.48、13.26 ?g/mL,黃芪、紅芪原藥材濃度均為12.0 mg/mL),70 ℃水浴加熱 15 min,冷卻至室溫,以相應(yīng)試劑為空白,在200~900 nm波長范圍內(nèi)進行掃描[14],結(jié)果見圖3。可見,NaOH作用后毛蕊異黃酮苷和蘆丁的λmax分別為291 nm和360 nm,黃芪和紅芪的λmax分別為277 nm和271 nm,供試品和其他對照品峰形相差較大, λmax也不一致。

    2.4.2 磷鉬酸比色法 分別精密吸取“2.1”項下毛蕊異黃酮苷對照品0.5 mL、“2.2”項下黃芪和紅芪供試品溶液各0.25 mL,置于25 mL容量瓶中,以70%乙醇補足至3.0 mL,搖勻,精密加入硼砂-碳酸鈉緩沖液10 mL,搖勻,再精密加入磷鉬酸溶液1.3 mL,搖勻,室溫放置5 min,精密加入NaOH試液0.2 mL,搖勻,于65 ℃水浴加熱5 min,取出,放冷至室溫,精密加入70%乙醇至刻度,搖勻(其中毛蕊異黃酮苷濃度為4.34 ?g/mL,黃芪、紅芪供試品原藥材濃度均為1.5 mg/mL),以相應(yīng)的試劑為空白,在波長200~900 nm進行掃描[15],結(jié)果見圖4。可見,磷鉬酸作用后毛蕊異黃酮苷λmax為313 nm,黃芪和紅芪λmax分別為279 nm和280 nm,且存在較強的背景吸收干擾,對照品和樣品λmax不一致。

    2.4.3 紫外分光光度法 精密吸取“2.1”項下的對照品和“2.2”項下供試品適量,甲醇稀釋后,在波長200~900 nm進行掃描,結(jié)果見圖5。可見,毛蕊異黃酮苷在紫外區(qū)λmax為260 nm,毛蕊異黃酮λmax為248 nm,芒柄花苷λmax為260 nm,芒柄花素λmax為249 nm,供試品黃芪和紅芪的λmax分別為263 nm和265 nm,呈肩峰吸收。毛蕊異黃酮苷和芒柄花苷與供試品峰形基本一致,并且結(jié)果顯示樣品中毛蕊異黃酮苷的含量高于芒柄花苷。

    2.5 黃酮、黃酮醇、異黃酮含量測定通用方法

    2.5.1 醋酸鎂甲醇比色法 精密吸取“2.1”項下對照品毛蕊異黃酮苷0.25 mL、毛蕊異黃酮0.25 mL、芒柄花素苷0.25 mL、芒柄花素0.25 mL、蘆丁0.5 mL,“2.2”項下紅芪、黃芪供試品溶液各0.10 mL,置10 mL具塞刻度試管中,水浴揮干溶劑,精密加入1% Mg(Ac)2甲醇溶液至刻度,搖勻(其中毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、芒柄花素、蘆丁分別為5.43、5.30、5.78、4.68、11.05 ?g/mL,黃芪、紅芪原藥材濃度均為1.5 mg/mL),放置15 min,在波長200~900 nm進行掃描[16],結(jié)果見圖6??梢?,黃芪和紅芪的吸收圖譜未見明顯吸收,各個對照品與供試品的λmax不一致,峰形相差很大。

    2.5.2 鹽酸-鎂粉比色法 精密吸取“2.1”項下對照品毛蕊異黃酮苷0.10 mL,“2.2”項下供試品溶液經(jīng)過適當稀釋后黃芪和紅芪樣品溶液分別各取0.10 mL和0.05 mL,置含有300 mg鎂粉的具塞刻度試管中,將試管置于15~16 ℃水浴,緩慢滴加鹽酸4 mL,不時振搖試管,滴畢,搖勻,再精密加入70%乙醇至體積為10 mL,搖勻,置沸水浴中60 min,取出,冰浴迅速冷卻,搖勻,在波長200~900 nm進行掃描[17],結(jié)果見圖7??梢?,鹽酸-鎂粉作用后毛蕊異黃酮苷λmax為328 nm,黃芪和紅芪的λmax分別為339 nm和341 nm,吸收波長接近,但黃芪、紅芪樣品的峰形和對照品不一致。

    3 討論

    3.1 采用比色法開展黃芪、紅芪總黃酮含量對比的探討

    黃芪和紅芪中所含的黃酮化合物類型主要包括黃酮、異黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、查耳酮等[7],進行含有多種類型結(jié)構(gòu)的總黃酮含量的對比,除了要求2個供試品采用的顯色劑、測定波長統(tǒng)一外,還要和對照品的測定條件一致。為此,本試驗根據(jù)各種類型黃酮的化學(xué)結(jié)構(gòu)特征的不同,選擇多種試劑與黃芪和紅芪供試品作用顯色,篩選適于二者總黃酮含量測定的方法。

    3.1.1 金屬鹽類試劑 黃酮類化合物分子中一般具有3,5-酚羥基、4-羰基或3',4'-鄰二酚羥基的結(jié)構(gòu),可以和鋁鹽、鋯鹽、鍶鹽等離子反應(yīng),多生成有色的金屬絡(luò)合物,可用于定性和定量分析,常用的試劑為1%AlCl3或Al(NO3)3[18]。Al(NO3)3比色法是藥典最常用的總黃酮含量測定的顯色劑,在堿性條件下,其與黃酮類化合物絡(luò)合形成紅色螯合物,使吸收峰帶Ⅱ紅移,以蘆丁為對照品,在510 nm左右呈現(xiàn)吸收[9]。AlCl3比色法與Al(NO3)3比色法類似,是在非堿性條件下絡(luò)合顯色,生成黃色絡(luò)合物進行含量測定。本試驗結(jié)果表明,Al(NO3)3與黃芪和紅芪樣品進行顯色后,吸收峰帶Ⅱ的確發(fā)生紅移,與蘆丁出現(xiàn)的吸收不同(510 nm),而是在390 nm左右出現(xiàn)吸收,且顯色后供試品溶液不穩(wěn)定,吸光度隨時間延長呈降低的趨勢。其原因可能是供試品中所含的黃酮類成分較少,或雜質(zhì)干擾,和Al3+未能形成穩(wěn)定的絡(luò)合物。毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、芒柄花素對照品與Al3+顯色反應(yīng),對照品與供試品峰形有差異或差異很大,最大吸收波長不一致。文獻報道AlCl3顯色反應(yīng)發(fā)生在3-羥基、4-羰基和鄰二酚羥基上,只存在5-羥基、4-羰基的黃酮類物質(zhì)與AlCl3也不發(fā)生反應(yīng)[19-20]。黃芪和紅芪中的黃酮成分主要為異黃酮,沒有3-羥基、5-羥基的結(jié)構(gòu),其化學(xué)結(jié)構(gòu)不能滿足上述顯色反應(yīng)的要求,本試驗結(jié)果與文獻報道一致。

    3.1.2 NaOH比色法 鮑氏等[14]以染料木素為對照品,采用0.01 moL/L NaOH進行反應(yīng),在266 nm處測定海南木蓮葉和枝總異黃酮含量。本試驗中,對照品和供試品與NaOH作用后,吸收峰發(fā)生了紅移但不明顯,吸收圖譜峰形不吻合,且二者最大吸收波長也有差異。

    3.1.3 磷鉬酸比色法 吳氏等[15]在硼砂-碳酸鈉緩沖液的堿性條件下,以磷鉬酸為顯色劑,在紫外區(qū)的268 nm處測定參芪潤肺顆粒中總異黃酮。本試驗采用該方法,對照品和供試品吸收圖譜背景吸收強烈,吸收波長不一致。

    3.1.4 醋酸鎂甲醇比色法 醋酸鎂甲醇溶液是黃酮類成分金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)試劑之一[21]。參照李氏等[16]測定大黃配方顆粒中總蒽醌的含量的方法(以1.0%醋酸鎂甲醇溶液為顯色劑),本試驗中樣品與醋酸鎂甲醇溶液作用后,峰形變化不大,未見明顯的吸收。

    3.1.5 鹽酸-鎂粉比色法 黃酮、黃酮醇、二氫黃酮醇均易在鹽酸鎂粉作用下被還原,生成橙色到紅紫色物質(zhì),在可見光區(qū)進行含量測定。劉氏等[17]以鹽酸-鎂粉為顯色劑,進行苦參湯有效部位總黃酮含量測定。本試驗用該法測定的紅芪樣品中總黃酮含量為1.27%,為黃芪中總黃酮含量的5.5倍,原因可能是紅芪中含有如3-羥基-9-甲氧基香豆苯醚、3,9-二羥基香豆苯醚等香豆素類[22]成分與顯色劑反應(yīng),導(dǎo)致其含量偏高。

    3.2 黃芪和紅芪總黃酮含量測定方法、對照品、測定波長的確定

    黃酮類化合物因為分子中存在桂皮?;?、苯甲酰基組成的共軛體系,故其甲醇溶液在200~400 nm區(qū)域存在2個主要吸收帶,分別為峰帶Ⅰ(300~400 nm)及峰帶Ⅱ(220~280 nm),不同類型的黃酮在帶Ⅰ和帶Ⅱ的吸收強度不同[21,23]。異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇這3類化合物中,除有由A-苯甲酰系統(tǒng)引起的帶Ⅱ吸收(主峰)外,因B-環(huán)均不與吡喃環(huán)上的羥基共軛(或共軛很小),故帶Ⅰ很弱,常在主峰的長波方向顯一肩峰[21]。

    本試驗結(jié)果表明,黃芪和紅芪中含量占總黃酮絕大部分的4種成分(毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花素苷、芒柄花素)[8]的對照品及甘肅黃芪和紅芪中總黃酮的甲醇溶液紫外吸收光譜符合“在帶Ⅱ的260 nm左右呈現(xiàn)肩峰吸收”這一規(guī)律,其中毛蕊異黃酮葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、芒柄花葡萄糖苷、芒柄花素對照品λmax分別為260、248、260、249 nm,黃芪、紅芪樣品λmax分別為263、265 nm,樣品λmax與對照品毛蕊異黃酮葡萄糖苷和芒柄花葡萄糖苷的λmax基本一致,考慮到濃度相近的情況下毛蕊異黃酮葡萄糖苷吸光度(0.615 18)明顯大于芒柄花葡萄糖苷吸光度(0.316 12),說明毛蕊異黃酮葡萄糖苷在此波長下吸收更強,故選擇其為含量測定對照品。因為黃芪和紅芪樣品總黃酮中含有多種類型的黃酮成分,并且含有一定的雜質(zhì),所以樣品最大吸收波長與對照品略有偏差。由于對照品λmax(260 nm)和樣品λmax(263、265 nm)處吸光度值偏差小于0.009 AU和0.003 AU,所以確定260 nm為樣品測定波長。該方法可為對比甘肅不同產(chǎn)地紅芪和黃芪中總黃酮含量奠定基礎(chǔ)。

    3.3 黃芪和紅芪總黃酮含量測定前處理方法的確定

    本試驗中對樣品提取方法(回流、超聲)、純化方法(正丁醇、乙酸乙酯萃?。?、提取溶劑(70%乙醇、甲醇)、提取時間(1、2、3 h)、溶劑用量(15、25、35 mL)進行了篩選。結(jié)果顯示:黃芪、紅芪總黃酮含量采用回流提取優(yōu)于超聲提取,采用正丁醇萃取優(yōu)于乙酸乙酯萃?。ㄒ姳?);采用70%乙醇提取略優(yōu)于甲醇提取(見表2);提取時間3 h和4 h含量相差不大,選擇提取3 h(見表3);提取溶劑用量25、35 mL含量相當,均高于15 mL,選擇25 mL溶劑提?。ㄒ姳?)。

    3.4 小結(jié)

    本研究對相關(guān)文獻報道的總黃酮含量測定方法進行了研究,結(jié)果表明,比色法并不適用于黃芪和紅芪中總黃酮含量對比的測定。近年來有采用紫外分光光度法,以蘆丁或毛蕊異黃酮苷為對照品,在250~287 nm之間測定黃芪中總黃酮含量的報道[11,24-25]。本研究結(jié)果顯示,與比色法相比,采用紫外分光光度法更適合于紅芪和黃芪總黃酮含量的測定。

    參考文獻:

    [1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:302-303,152-153.

    [2] 袁毅君,王廷璞,李蕊,等.甘肅道地藥材紅芪的質(zhì)量控制研究進展[J].天水師范學(xué)院學(xué)報,2010,30(5):43-46.

    [3] 余黎,曹宜,魏筱,等.黃芪與紅芪不同提取液免疫調(diào)節(jié)作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(36):20623-20624,20627.

    [4] 李云志,黃靜,郭弘川,等.紅芪化學(xué)成分和抗腫瘤活性研究[J].中草藥,2009,40(8):1195-1198

    [5] 李金田,朱向東,戴恩來,等.隴原藥圃 百草飄香——甘肅代表性道地藥材的生態(tài)條件和藥用價值分析[J].中國現(xiàn)代中藥,2013,15(1):80.

    [6] 張蔓,孫紅國,吳海燕,等.甘肅不同產(chǎn)地黃芪與紅芪的ISSR指紋圖譜鑒別研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2013,24(12):2917-2919.

    [7] 溫燕梅.黃芪的化學(xué)成分研究進展[J].中成藥,2006,28(6):879-883.

    [8] 汪德清,田亞平,向蘭.黃芪總黃酮生物學(xué)活性作用的化學(xué)成分基礎(chǔ)研究[J].軍醫(yī)進修學(xué)院學(xué)報,2006,27(1):13-15.

    [9] 馬陶陶,張群林,李俊.中藥總黃酮的含量測定方法[J].安徽醫(yī)藥, 2007,11(11):1030-1032.

    [10] 李春紅,田吉,何兵,等.紫外分光光度法測定黃芪總黃酮的含量[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2011,36(8):954-956.

    [11] 王治平,高英,李衛(wèi)民,等.大孔吸附樹脂純化黃芪總黃酮和總皂苷的研究[J].中藥材,2010,33(7):1163-1166.

    [12] 程衛(wèi)東,王永炎,藺海明,等.施肥對栽培紅芪中多糖和總黃酮含量影響研究[J].中藥材,2010,33(6):847-850.

    [13] 裴詠萍,李維林,張涵慶.三氯化鋁比色法測定中藥中總黃酮含量的方法改進[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐,2009,23(4):58-60.

    [14] 鮑長余,劉冰晶,畢和平,等.紫外分光光度法測定破布葉枝和葉總異黃酮的含量[J].食品科技,2012,37(10):260-263.

    [15] 吳文飛,李玉平,胡蘋.參芪潤肺顆粒中總異黃酮的含量測定[J].中國藥師,2008,11(6):675-677.

    [16] 李敏,劉渝,李麗霞.大黃配方顆粒總蒽醌含量測定的方法學(xué)研究[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2006,29(1):47-50.

    [17] 劉斌,石任兵,周素蓉.苦參湯有效部位總黃酮含量測定方法研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2004,10(6):24-26.

    [18] 任珊珊,包保全,毛婷,等.中藥中總黃酮的含量測定方法研究進展[J].北方藥學(xué),2015,12(3):112-115.

    [19] 陳業(yè)高.植物化學(xué)成分[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2004:196.

    [20] 馬陶陶,張群林,李俊,等.三氯化鋁比色法測定中藥總黃酮方法的探討[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(1):54-56.

    [21] 姚新生.天然藥物化學(xué)(第二版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:199-200,208-210.

    [22] 海力茜,梁鴻,趙玉英,等.多序巖黃芪化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志,2002,27(11):843-845.

    [23] 張欽得.中藥制劑分析技術(shù)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2003:221- 222.

    [24] 房樹標,李艷彥,劉必旺,等.紫外分光光度法測定蒙古黃芪中總黃酮的含量[J].中國藥物與臨床,2007,7(12):899-901.

    [25] 郭帥,夏厚林,吳強,等.梭果黃芪總黃酮純化工藝研究[J].中藥與臨床,2013,4(2):25-28.

    国产一区二区 视频在线| 欧美激情高清一区二区三区| 欧美97在线视频| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产伦理片在线播放av一区| 国产免费现黄频在线看| 久久中文字幕一级| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| av欧美777| 久久久久久久国产电影| 国产主播在线观看一区二区| av有码第一页| 精品福利永久在线观看| 久9热在线精品视频| 视频区图区小说| 首页视频小说图片口味搜索| www日本在线高清视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品国产乱子伦一区二区三区 | 久久人人爽人人片av| 丝袜美足系列| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 精品亚洲成国产av| 深夜精品福利| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久久国产成人免费| 桃花免费在线播放| 国产高清videossex| 狂野欧美激情性xxxx| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久久久久久精品精品| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲欧美精品自产自拍| 免费观看a级毛片全部| 国产区一区二久久| 日本av手机在线免费观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 免费日韩欧美在线观看| 黄色 视频免费看| 免费黄频网站在线观看国产| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲av日韩在线播放| 久久性视频一级片| 一级片'在线观看视频| 色视频在线一区二区三区| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产99久久九九免费精品| 丝袜美足系列| 狂野欧美激情性bbbbbb| 丝袜在线中文字幕| 亚洲视频免费观看视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 99国产精品一区二区蜜桃av | 不卡一级毛片| 精品国产一区二区三区四区第35| 视频区欧美日本亚洲| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美黄色淫秽网站| 久久青草综合色| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 成人国产一区最新在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 母亲3免费完整高清在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲免费av在线视频| 欧美大码av| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲熟女毛片儿| 成人国产一区最新在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 在线看a的网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 日韩中文字幕视频在线看片| 在线观看舔阴道视频| 亚洲五月色婷婷综合| av在线老鸭窝| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 欧美黄色淫秽网站| 热99久久久久精品小说推荐| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久国产成人免费| 午夜久久久在线观看| 男人操女人黄网站| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲 国产 在线| 美女视频免费永久观看网站| 国产又色又爽无遮挡免| 中国美女看黄片| 日本vs欧美在线观看视频| 国产高清国产精品国产三级| a 毛片基地| 97在线人人人人妻| 一区福利在线观看| 午夜福利乱码中文字幕| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲天堂av无毛| 国产精品免费大片| 亚洲av成人一区二区三| 中文字幕制服av| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成年动漫av网址| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲国产av影院在线观看| 久久影院123| 国产精品免费大片| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产又爽黄色视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产国语露脸激情在线看| 国产精品欧美亚洲77777| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 国产欧美亚洲国产| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 日本av免费视频播放| 夫妻午夜视频| 99国产精品一区二区三区| 午夜91福利影院| 人妻人人澡人人爽人人| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 十八禁网站网址无遮挡| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一级片'在线观看视频| 咕卡用的链子| 亚洲国产成人一精品久久久| 秋霞在线观看毛片| 久热这里只有精品99| 俄罗斯特黄特色一大片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 首页视频小说图片口味搜索| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产亚洲一区二区精品| 黄片小视频在线播放| 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久久久视频综合| 丝袜美足系列| av在线app专区| 国产一区二区三区综合在线观看| 日韩大码丰满熟妇| 伦理电影免费视频| 手机成人av网站| 亚洲少妇的诱惑av| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 黄片大片在线免费观看| 中国国产av一级| 曰老女人黄片| tube8黄色片| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 一区二区三区激情视频| 欧美国产精品一级二级三级| 国产精品久久久久久精品电影小说| 无遮挡黄片免费观看| 日韩三级视频一区二区三区| 人人妻人人澡人人看| 国产99久久九九免费精品| 热re99久久精品国产66热6| 成年动漫av网址| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲avbb在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 又紧又爽又黄一区二区| 久久久欧美国产精品| cao死你这个sao货| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 高清欧美精品videossex| 亚洲全国av大片| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲九九香蕉| 亚洲国产av影院在线观看| 久久久国产一区二区| 免费日韩欧美在线观看| 精品视频人人做人人爽| 久久人妻熟女aⅴ| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 午夜精品国产一区二区电影| 国产三级黄色录像| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 中国国产av一级| 欧美成人午夜精品| 99国产精品免费福利视频| av网站免费在线观看视频| 国产男人的电影天堂91| av不卡在线播放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 国产精品 国内视频| 少妇的丰满在线观看| 丰满少妇做爰视频| 国产精品免费视频内射| 国产91精品成人一区二区三区 | av有码第一页| 最新在线观看一区二区三区| 咕卡用的链子| 一个人免费看片子| 亚洲九九香蕉| 人妻久久中文字幕网| 一本久久精品| 免费黄频网站在线观看国产| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲综合色网址| 岛国在线观看网站| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久久久精品人妻al黑| 日本一区二区免费在线视频| 国产精品一区二区在线不卡| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 一级毛片电影观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲一区二区三区欧美精品| 9191精品国产免费久久| 成年动漫av网址| 十八禁人妻一区二区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 麻豆乱淫一区二区| 成人免费观看视频高清| 中文字幕色久视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 国产一区二区激情短视频 | 欧美日韩av久久| 久久狼人影院| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲精品国产一区二区精华液| 一区二区三区乱码不卡18| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 91大片在线观看| 久久久精品区二区三区| 成在线人永久免费视频| 亚洲欧洲日产国产| 三上悠亚av全集在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 日本wwww免费看| 99九九在线精品视频| 老汉色∧v一级毛片| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 少妇人妻久久综合中文| 91精品国产国语对白视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 人成视频在线观看免费观看| 男女国产视频网站| 日韩免费高清中文字幕av| av网站在线播放免费| 亚洲国产精品成人久久小说| 精品乱码久久久久久99久播| 久久国产精品大桥未久av| 各种免费的搞黄视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美另类亚洲清纯唯美| 精品福利观看| 国产欧美日韩一区二区三 | 999久久久国产精品视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 麻豆乱淫一区二区| 亚洲,欧美精品.| 欧美日韩成人在线一区二区| 9191精品国产免费久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 97人妻天天添夜夜摸| 久久久精品免费免费高清| 欧美精品一区二区免费开放| 精品国产国语对白av| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久ye,这里只有精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 在线观看免费午夜福利视频| 国产一级毛片在线| 欧美日韩视频精品一区| 999久久久精品免费观看国产| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 久久影院123| 在线观看免费视频网站a站| 首页视频小说图片口味搜索| 午夜免费成人在线视频| 一区二区av电影网| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 一进一出抽搐动态| 日韩制服丝袜自拍偷拍| bbb黄色大片| 老汉色∧v一级毛片| 人妻 亚洲 视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 我的亚洲天堂| 日本五十路高清| 成在线人永久免费视频| 日韩大片免费观看网站| 亚洲三区欧美一区| www.999成人在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 中国国产av一级| 精品人妻一区二区三区麻豆| 91国产中文字幕| 看免费av毛片| 男人操女人黄网站| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产精品免费视频内射| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲国产中文字幕在线视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 99久久99久久久精品蜜桃| 97在线人人人人妻| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 天天影视国产精品| 99热国产这里只有精品6| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 久久99一区二区三区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 丁香六月天网| 日韩大码丰满熟妇| 99国产精品一区二区三区| 亚洲国产日韩一区二区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 老司机靠b影院| 十八禁网站网址无遮挡| 精品国产乱码久久久久久小说| 99国产精品一区二区三区| 亚洲,欧美精品.| 成人国语在线视频| 国产亚洲一区二区精品| 啦啦啦 在线观看视频| 国产97色在线日韩免费| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久久久精品国产欧美久久久 | 十八禁网站网址无遮挡| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 免费人妻精品一区二区三区视频| 精品久久久精品久久久| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 99热网站在线观看| 不卡一级毛片| 最近最新中文字幕大全免费视频| 一级毛片电影观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产精品偷伦视频观看了| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 人妻久久中文字幕网| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲一码二码三码区别大吗| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 色94色欧美一区二区| 老司机福利观看| 国产亚洲av高清不卡| 天天添夜夜摸| 亚洲情色 制服丝袜| 在线观看人妻少妇| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 中文字幕人妻丝袜一区二区| 一本色道久久久久久精品综合| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| xxxhd国产人妻xxx| avwww免费| 视频区图区小说| 一二三四在线观看免费中文在| 国产一区二区激情短视频 | 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 男人舔女人的私密视频| 亚洲七黄色美女视频| 两个人看的免费小视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 在线观看免费日韩欧美大片| 午夜91福利影院| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 99热网站在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲国产日韩一区二区| 人妻久久中文字幕网| 飞空精品影院首页| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美黑人精品巨大| 免费不卡黄色视频| 亚洲专区国产一区二区| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲国产欧美在线一区| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 悠悠久久av| 日本a在线网址| 大片免费播放器 马上看| 在线永久观看黄色视频| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 老司机深夜福利视频在线观看 | 久久久国产一区二区| 考比视频在线观看| 黄片播放在线免费| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产免费福利视频在线观看| 秋霞在线观看毛片| 日韩有码中文字幕| 男女午夜视频在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| av视频免费观看在线观看| 成人影院久久| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 真人做人爱边吃奶动态| 91av网站免费观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产一区二区三区av在线| 自线自在国产av| 国产精品亚洲av一区麻豆| 成年动漫av网址| 91大片在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产成人精品无人区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品亚洲av一区麻豆| videos熟女内射| 91麻豆av在线| 国产一卡二卡三卡精品| 国产1区2区3区精品| 成在线人永久免费视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产色视频综合| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 欧美另类亚洲清纯唯美| www.999成人在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 国产成人精品久久二区二区91| 日韩一区二区三区影片| 99久久国产精品久久久| 青春草视频在线免费观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产三级黄色录像| 久久久久网色| 国产精品成人在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产精品 欧美亚洲| 深夜精品福利| 国产亚洲精品一区二区www | 久久99一区二区三区| 日韩一区二区三区影片| 国产麻豆69| 男人添女人高潮全过程视频| 我的亚洲天堂| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美另类一区| 亚洲精品美女久久av网站| 国产成+人综合+亚洲专区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产高清视频在线播放一区 | kizo精华| 亚洲国产欧美网| 啪啪无遮挡十八禁网站| 成人av一区二区三区在线看 | 国产伦理片在线播放av一区| 男男h啪啪无遮挡| 永久免费av网站大全| 欧美日韩黄片免| 最新在线观看一区二区三区| 国产一卡二卡三卡精品| 久久精品国产综合久久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 少妇粗大呻吟视频| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲,欧美精品.| 9191精品国产免费久久| 久久精品成人免费网站| 老熟女久久久| 亚洲欧洲日产国产| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 男男h啪啪无遮挡| 人成视频在线观看免费观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久久久国产一级毛片高清牌| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲激情五月婷婷啪啪| 嫩草影视91久久| 欧美中文综合在线视频| 国产精品.久久久| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久九九热精品免费| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产人伦9x9x在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 少妇 在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 精品久久久久久电影网| 午夜福利乱码中文字幕| 精品高清国产在线一区| 亚洲精品自拍成人| 十八禁高潮呻吟视频| 国产高清videossex| 午夜福利在线免费观看网站| 秋霞在线观看毛片| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久毛片免费看一区二区三区| 91精品国产国语对白视频| 亚洲黑人精品在线| www.自偷自拍.com| 国产精品欧美亚洲77777| 岛国毛片在线播放| a级毛片黄视频| 操出白浆在线播放| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 黄色毛片三级朝国网站| a级毛片在线看网站| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产精品.久久久| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产av又大| 青春草视频在线免费观看| 中文字幕av电影在线播放| 国产成人精品无人区| 三上悠亚av全集在线观看| 欧美中文综合在线视频| 女人久久www免费人成看片| 窝窝影院91人妻| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲全国av大片| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 我要看黄色一级片免费的| 中文欧美无线码| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 中亚洲国语对白在线视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 人人澡人人妻人| 天堂中文最新版在线下载| 成人av一区二区三区在线看 | 国产三级黄色录像| 又紧又爽又黄一区二区| 首页视频小说图片口味搜索| 国产在线视频一区二区| 水蜜桃什么品种好| 99久久精品国产亚洲精品| 国产91精品成人一区二区三区 | 亚洲国产看品久久| 国产成人a∨麻豆精品| 国产成人影院久久av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产99久久九九免费精品| 国产精品 国内视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲av男天堂| 国产精品二区激情视频| 丝袜脚勾引网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲精品国产av成人精品| 电影成人av| 国产野战对白在线观看| 看免费av毛片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 丁香六月欧美| 免费高清在线观看视频在线观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 精品少妇内射三级| 国产色视频综合| 欧美黑人精品巨大| 日韩免费高清中文字幕av| 精品熟女少妇八av免费久了| 1024香蕉在线观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲国产精品999| 曰老女人黄片| av片东京热男人的天堂| 捣出白浆h1v1| 97精品久久久久久久久久精品| 国产区一区二久久| 国产在线免费精品| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲国产欧美在线一区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 亚洲伊人色综图|