動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振成像特征與乳腺癌患者病理及免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性

朱 默 楊 玲 王希明 郝光宇 郝正梅 胡春洪

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院放射科，江蘇 蘇州 215006)

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動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振成像特征與乳腺癌患者病理及免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性

朱 默 楊 玲 王希明 郝光宇 郝正梅 胡春洪

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院放射科，江蘇 蘇州 215006)

目的 探討動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振成像(DCE-MRI)特征與乳腺癌患者病理及免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性。方法 乳腺癌患者76例均行DCE-MRI，并對手術(shù)切除的組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，分析DCE-MRI表現(xiàn)和免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果 雌激素受體(ER)染色陽性78.75%，孕激素受體(PR)染色陽性73.75%，人表皮生長因子受體2(Her-2)染色陽性63.75%，增殖細(xì)胞核抗原(Ki-67)染色陽性66.25%，腫塊大小與Ki-67呈正相關(guān)(r=0.281，P=0.039)，腫塊形態(tài)與Her-2(r=0.306，P=0.024)和Ki-67(r=0.427，P=0.001)呈正相關(guān)，腫塊邊緣與ER(r=0.288，P=0.032)和PR(r=0.295，P=0.030)呈正相關(guān)，腫塊強(qiáng)化類型與PR呈負(fù)相關(guān)(r=-0.243，P=0.036)，TIC類型與Ki-67呈正相關(guān)(r=0.336，P=0.006)，早期增強(qiáng)率與Her-2呈正相關(guān)(r=0.275，P=0.044)。結(jié)論 乳腺癌的DCE-MRI表現(xiàn)與病理及免疫組化指標(biāo)存在一定程度相關(guān)性，提示通過DCE-MRI推測乳腺癌相關(guān)生物學(xué)特征的可能性，亦可以據(jù)此為患者安排治療方案和判斷預(yù)后提供參考。

乳腺癌；動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振成像

乳腺癌的早期診斷依賴于影像學(xué)檢查，包括X線、超聲、磁共振成像(MRI)等，其中X線檢查對鈣化灶敏感，但對乳腺內(nèi)致密性病變顯示不佳，超聲檢查則高度依賴醫(yī)師的操作水平，對小、微病灶缺乏敏感性〔1〕。動(dòng)態(tài)增強(qiáng)MRI(DCE-MRI)不僅可以顯示病灶的形態(tài)，還可以通過信號(hào)強(qiáng)度變化提供病灶的血流動(dòng)力學(xué)信息，重復(fù)性高，無輻射，具有優(yōu)秀的檢出率〔2〕。本研究分析乳腺癌DCE-MRI的表現(xiàn)與病理免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性，為乳腺癌的早期診斷、預(yù)后判斷提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 選擇我院2013年1月至2015年1月收治的乳腺癌患者76例，均為女性，年齡31～62〔平均(45.67±13.52)〕歲，其中有4例患者為雙側(cè)乳腺癌；位于左側(cè)44例，右側(cè)36例；浸潤性導(dǎo)管癌72例，導(dǎo)管內(nèi)癌2例，浸潤性篩狀癌3例，原位癌、浸潤性小葉癌、髓樣癌各1例?；颊咦栽附邮蹹EC-MRI檢查，均經(jīng)病理證實(shí)為乳腺癌且自愿選擇進(jìn)行乳腺癌切除術(shù)，所有患者術(shù)前均未進(jìn)行過放療、化療、穿刺檢查。所有患者或家屬均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 DCE-MRI方法 使用GE HDxt 3.0T超導(dǎo)磁共振掃描儀，搭配使用乳腺檢查專用表面線圈。檢查時(shí)，患者取俯臥位，雙側(cè)乳房自然垂于線圈內(nèi)，掃描視野為340 mm×340 mm，參數(shù)流程：①快速反轉(zhuǎn)恢復(fù)自旋回波T1W1序列，層厚4.0 mm，重復(fù)時(shí)間(TR)4 300 ms，回波時(shí)間(TE)61 ms，激勵(lì)2次；②快速小角度激發(fā)三維成像T1W1序列，層厚4.0 mm，TR 6.0 ms，TE 2.50 ms，激勵(lì)1次；③動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描，采用快速小角度激發(fā)三維成像脂肪抑制T1W1序列，層厚1.2 mm，TR 4.66 ms，TE 1.66 ms，重復(fù)掃描6次，第二次掃描的同時(shí)使用高壓注射器經(jīng)肘靜脈快速注射釓噴酸葡胺注射液，劑量為0.1 mmol/kg，速度為2.0 ml/s。所有病例的DCE-MRI圖像均經(jīng)過2名影像科醫(yī)師獨(dú)立診斷，診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)美國放射學(xué)會(huì)制定的乳腺影像報(bào)告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)MRI部分〔3〕，對病灶的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)、信號(hào)強(qiáng)度和增強(qiáng)率進(jìn)行分析記錄，當(dāng)診斷出現(xiàn)異議時(shí)，由兩位醫(yī)師協(xié)商決定。

1.2.2 病理標(biāo)本處理和免疫組織化學(xué)染色方法 經(jīng)10%甲醛固定后的組織標(biāo)本，清洗后用石蠟包埋，5 μm連續(xù)切片，在60℃恒溫烤箱中烤干1 h，室溫冷卻后標(biāo)記備用，切片依據(jù)不同染色試劑盒操作要求進(jìn)行免疫組化染色，首先進(jìn)行脫水處理，用3%過氧化氫(H2O2)滅活內(nèi)源性酶，再用乙二胺四乙酸(EDTA)抗原修復(fù)液修復(fù)抗原，磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗后滴加牛血清白蛋白(BSA)封閉液，孵育10 min后添加一抗，4℃冰箱孵育18 h，添加二抗室溫孵育20 min，PBS沖洗2～3次，加二氨基聯(lián)苯胺(DAB)溶液顯色10 min，蘇木素復(fù)染30 s，梯度酒精脫水，中性樹膠封片，室溫晾干，鏡下觀察。分別對每份組織標(biāo)本進(jìn)行雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人表皮生長因子受體2(Her-2)和增殖細(xì)胞核抗原(Ki-67)的免疫化學(xué)染色。

1.2.3 染色結(jié)果判定 所有切片由病理醫(yī)師在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察，ER和PR陽性表達(dá)見于細(xì)胞核中棕黃色顆粒，Her-2陽性表達(dá)見于細(xì)胞膜中棕色著色，陽性表達(dá)細(xì)胞<10%為陰性(-)，陽性表達(dá)細(xì)胞≥10%為陽性(+)；Ki-67陽性表達(dá)見于細(xì)胞核中棕黃色顆粒，陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為10個(gè)隨機(jī)高倍鏡視野下陽性表達(dá)細(xì)胞平均≥14%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、χ2檢驗(yàn)及Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 DCE-MRI表現(xiàn) 76例乳腺癌共計(jì)80個(gè)原發(fā)癌灶，均為腫塊型：①腫塊大小≤2 cm 44例，>2 cm 36例；②類圓形腫塊12例，分葉形26例，不規(guī)則性腫塊42例；③腫塊邊緣光滑5例，邊緣不規(guī)則31例，邊緣毛刺44例；④腫塊均勻強(qiáng)化16例，不均勻強(qiáng)化40例，環(huán)形強(qiáng)化24例；⑤腫瘤動(dòng)態(tài)增強(qiáng)曲線-時(shí)間-信號(hào)強(qiáng)度曲線(TIC)類型Ⅰ型(漸增型)6例，Ⅱ(平臺(tái)型)31例，Ⅲ(廓清型)43例；⑥早期增強(qiáng)率<50% 6例，50%≤早期增強(qiáng)率<100% 33例，早期增強(qiáng)率為100%的41例。

2.2 免疫組化染色結(jié)果 80個(gè)乳腺癌組織標(biāo)本，病理類型經(jīng)檢查均為浸潤性導(dǎo)管癌，免疫組化結(jié)果：①ER染色陽性63例(78.75%)，陰性表達(dá)17例(21.25%)；②PR染色陽性59例(73.75%)，陰性21例(26.25%)；③Her-2染色陽性51例(63.75%)，陰性29例(36.25%)；④Ki-67染色陽性53例(66.25%)，陰性27例(33.75%)。見圖1。

2.3 DCE-MRI表現(xiàn)與免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性 相關(guān)性分析顯示，腫塊大小與Ki-67呈正相關(guān)，即腫塊增大，Ki-67陽性表達(dá)亦增高；腫塊形態(tài)與Her-2和Ki-67呈正相關(guān)，即陽性表達(dá)在類圓形、分葉形和不規(guī)則性中Her-2和Ki-67陽性表達(dá)依次升高；腫塊邊緣與ER、PR呈正相關(guān)，即在腫塊邊緣光滑、不規(guī)則和毛刺中ER和PR陽性表達(dá)依次增高；腫塊強(qiáng)化類型與PR呈負(fù)相關(guān)，即腫塊環(huán)形強(qiáng)化時(shí)，PR陽性表達(dá)率降低；TIC類型與Ki-67呈正相關(guān)，即腫瘤TIC類型增加時(shí)，Ki-67表達(dá)陽性率增加；早期增強(qiáng)率與Her-2呈正相關(guān)，早期增強(qiáng)率越高Her-2陽性越高。見表1。

a:ER陽性表達(dá)，細(xì)胞核可見棕黃色顆粒；b:PR陽性表達(dá)，細(xì)胞核可見棕黃色顆粒；c:Her-2陰性表達(dá)，細(xì)胞膜未見著色顆粒；d:Ki-67陽性表達(dá)，細(xì)胞核可見深棕色顆粒。圖1 免疫組化染色結(jié)果

3 討 論

乳腺癌是起源于導(dǎo)管和腺上皮的腫瘤，從腺上皮增生逐漸發(fā)展為浸潤癌；乳腺癌也是高度血管依賴的腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移都依靠微血管網(wǎng)，乳腺癌內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子的過度表達(dá)是導(dǎo)致腫瘤增殖活躍的重要因素，因此血管的形成情況可以反映乳腺癌的生物學(xué)特征，這也是DCE-MRI用于評價(jià)乳腺癌的病理基礎(chǔ)〔4〕。乳腺的生長、發(fā)育均依賴于性激素的作用，乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)的ER和PR分別接受雌激素和孕激素的刺激達(dá)到促進(jìn)乳腺導(dǎo)管生長和腺泡發(fā)育的作用，乳腺內(nèi)ER和PR的含量決定其對性激素的應(yīng)答情況〔5〕。ER被雌激素激活可上調(diào)靶基因的表達(dá)，促進(jìn)相關(guān)蛋白的合成，PR與孕激素的復(fù)合物，可以增強(qiáng)雌激素對ER的反應(yīng)，產(chǎn)生協(xié)同作用。ER、PR陽性高表達(dá)時(shí)，腫瘤對激素敏感，采取內(nèi)分泌治療效果良好；反之，ER、PR陰性表達(dá)高時(shí)，腫瘤一般惡性程度高，分化程度低，侵襲力強(qiáng)，預(yù)后差。提示ER和PR的表達(dá)情況不僅可以作為治療方案的重要參考，也是預(yù)后的重要指標(biāo)。Her-2是人表皮生長因子受體，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化能力的作用，在正常乳腺組織中低表達(dá)，Her-2高表達(dá)表明腫瘤分化程度低，惡性程度高，腫瘤易轉(zhuǎn)移，預(yù)后差，但是Her-2高表達(dá)的腫瘤對細(xì)胞周期毒性藥物敏感，可據(jù)此選擇相應(yīng)治療藥物，因此Her-2可以指導(dǎo)治療用藥的選擇〔6〕。Ki-67是公認(rèn)的細(xì)胞增殖標(biāo)志物，其在腫瘤組織中高度表達(dá)，是判斷腫瘤增殖活性和侵襲力的重要指標(biāo)，Ki-67高表達(dá)的腫瘤對化療藥物敏感，可以據(jù)此安排化療方案〔7〕。

乳腺癌的病理學(xué)特征決定了它的形態(tài)學(xué)變化，因此可以在影像學(xué)檢查上看到不同的病灶。ER和PR與腫瘤大小的關(guān)系，國內(nèi)外研究尚未有統(tǒng)一結(jié)論，本研究也未發(fā)現(xiàn)它們與腫瘤大小的相關(guān)性。關(guān)于Ki-67與腫瘤MRI表現(xiàn)的研究較少，但有學(xué)者發(fā)現(xiàn)大的腫瘤組織中Ki-67表達(dá)更高〔8〕，與本研究一致。腫塊形態(tài)與Her-2和Ki-67呈正相關(guān)，腫瘤形態(tài)是反映腫瘤侵襲力的標(biāo)志，腫瘤的惡性程度越高其形態(tài)越?jīng)]有規(guī)則。Her-2和Ki-67均是反映腫瘤惡性程度的指標(biāo)，因此存在正相關(guān)性。腫塊邊緣與ER、PR呈正相關(guān)，腫瘤邊緣毛刺或不規(guī)則是腫瘤向周圍組織浸潤的表現(xiàn)，關(guān)于邊緣是否規(guī)則與腫瘤惡性程度的關(guān)系尚有爭議。本研究發(fā)現(xiàn)在毛刺邊緣和不規(guī)則邊緣癌組織中ER和PR有更高的表達(dá)水平，提示腫瘤具有更高的分化水平，侵襲力低，對內(nèi)分泌治療敏感。腫塊強(qiáng)化類型與PR呈負(fù)相關(guān)，強(qiáng)化類型的表現(xiàn)與檢查區(qū)域內(nèi)的血液供應(yīng)程度有關(guān)，強(qiáng)化不均勻提示腫瘤組織內(nèi)血液供給不均，環(huán)形強(qiáng)化則提示腫瘤邊緣微血管豐富。有研究認(rèn)為環(huán)形強(qiáng)化表明腫瘤灶中央出現(xiàn)壞死、纖維化，也有研究認(rèn)為該現(xiàn)象表明腫瘤具有更強(qiáng)的侵襲力〔9〕。本研究發(fā)現(xiàn)PR在環(huán)形和不均勻強(qiáng)化組織中表達(dá)下降，提示腫瘤惡性程度更高，預(yù)后差。TIC類型與Ki-67呈正相關(guān)，TICⅠ型常為良性病變，Ⅱ型為平臺(tái)型(良性病變和惡性病變中均可見)，Ⅲ型為流出性〔10〕(惡性病變的特征)，本研究發(fā)現(xiàn)TIC類型可以預(yù)測Ki-67的表達(dá)程度。早期增強(qiáng)率反映血液灌流情況，供血越充分早期增強(qiáng)率越高，早期增強(qiáng)率高的腫瘤Her-2表達(dá)水平更高，提示腫瘤惡性程度高。

1 何永勝，劉 斌，潘少輝，等.磁共振多參數(shù)成像技術(shù)對乳腺癌診斷效能評價(jià)〔J〕.實(shí)用放射學(xué)雜志，2015；31(3)：388-92.

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〔2015-11-14修回〕

(編輯 袁左鳴)

蘇州市2014年科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.SYS201459)

胡春洪(1965-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事分子影像、中樞神經(jīng)影像方面的研究。

朱 默(1978-)，男，在讀博士，主管技師，主要從事分子與功能影像方面的研究

R739

A

1005-9202(2016)19-4873-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.093