鹽酸拉貝洛爾時控緩釋微丸的研制

高捷 朱淼 沃聯(lián)群 王文喜

1.浙江醫(yī)藥高等專科學(xué)校實驗實訓(xùn)中心，浙江寧波315100；2.浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，浙江杭州310014

鹽酸拉貝洛爾時控緩釋微丸的研制

高捷1朱淼2沃聯(lián)群1王文喜2

1.浙江醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校實驗實訓(xùn)中心，浙江寧波315100；2.浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，浙江杭州310014

目的研究制備鹽酸拉貝洛爾時控緩釋微丸。方法采用擠出滾圓法制備載藥丸芯，通過流化床包衣法分別覆上交聯(lián)羧甲基纖維素鈉作為溶脹層、乙基纖維素和羥丙甲纖維素作為控釋層制備時控緩釋微丸，通過單因素考察篩選溶脹層、控釋層的處方組成對體外釋藥性能的影響。結(jié)果以微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉和乳糖為添加劑可制得性能良好的高載藥微丸。隨著溶脹層厚度的增加，藥物釋放時滯變短，速率顯著增加；隨著控釋層包衣厚度的增加，時滯延長，釋藥減慢；控釋層中羥丙甲纖維素用量增加，時滯縮短；控釋層中增塑劑用量增加，時滯延長。結(jié)論所得包衣微丸具有良好的釋藥性能，有廣闊的應(yīng)用前景。

鹽酸拉貝洛爾；時控緩釋微丸；溶脹層；控釋層

鹽酸拉貝洛爾（1abeta1o1hydroch1oride）是兼具α、β受體阻斷作用的抗高血壓藥物，臨床用于治療各種類型的高血壓［1-4］。高血壓的發(fā)生具有明顯的時辰節(jié)律性，市售鹽酸拉貝洛爾制劑多為注射液、片劑和膠囊等普通制劑，需一日多次給藥且不能滿足夜間治療的要求［5-6］。本研究針對其發(fā)作的時間特殊性，制備具有3 h時滯的時控緩釋微丸，使其達(dá)到晚間睡前服藥，發(fā)病高峰期維持治療療效的血藥濃度。微丸是多單元釋藥體系，可以避免個別單元因制造缺陷或不尋常的胃刺激引起的藥物解體失效的弊端，具有更好的重現(xiàn)性［7-9］。本研究采用擠出滾圓法制備載藥丸芯，以高溶脹性能的交聯(lián)羧甲基纖維素鈉CC-Na作溶脹層，以羥丙甲纖維素（HPMC）和乙基纖維素（EC）混合物為控釋層，通過單因素考察篩選溶脹層、控釋層的處方組成，并對其體外釋藥性能和釋藥機制進(jìn)行初步考察。

1 儀器與試劑

Mini DPL 0.2多功能制粒/包衣機（重慶精工制藥機械有限責(zé)任公司）；Mini-250低溫擠出滾圓機（深圳信宜特科技有限公司）；ZRS-8G型智能溶出儀（天大天發(fā)科技有限責(zé)任公司）；FA2004B型電子天平（上海佑科儀器儀表有限公司）；He1iosλ紫外可見分光光度計（美國熱電公司）；FT-2000型脆碎度儀（天津大學(xué)精密儀器廠）。

鹽酸拉貝洛爾（南京愛里凱德化工有限公司）；微晶纖維素（MCC）、羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉（CC-Na）、羥丙基甲基纖維素（HPMC）、檸檬酸三乙酯（TEC）、蓖麻油均由安徽山河藥用輔料股份有限公司惠贈；乙基纖維素（EC）（卡樂康公司），其他試劑皆為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 載藥丸芯的制備

采用擠出滾圓法制備載藥丸芯，稱取處方用量的鹽酸拉貝洛爾、MCC、CMS-Na和乳糖，混合均勻后，加適量純化水制軟材，經(jīng)擠出滾圓機制成載藥微丸［10］。擠出速率為25 r/min，滾圓轉(zhuǎn)速為1200 r/min，滾圓時間為4min，40℃烘干過夜，過篩，取18～24目微丸，備用。

2.2 鹽酸拉貝洛爾含量測定方法學(xué)研究

2.2.1 吸收波長的選擇將鹽酸拉貝洛爾溶于0.1 mo1/L的鹽酸中，配制成適宜濃度的溶液，另取相同處方用量的空白輔料于鹽酸中，過濾，取續(xù)濾液，在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描測定其紫外吸收行為。結(jié)果見圖1。從圖中可看出，鹽酸拉貝洛爾在此波長范圍內(nèi)有三個吸收峰，而輔料僅在200 nm附近有末端吸收，考慮到方法的專屬性，故選定300 nm作為鹽酸拉貝洛爾的檢測波長。

圖1 鹽酸拉貝洛爾和輔料溶液的紫外吸收圖譜

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立精密稱定鹽酸拉貝洛爾標(biāo)準(zhǔn)品適量，配成1000μg/mL的儲備液，分別稀釋成10、20、40、60、80、100、120μg/mL濃度，以溶出介質(zhì)作空白對照，在300 nm處測其吸光度，以吸光度（A）對濃度（C）（μg/mL）作線性回歸，得回歸方程為A= 0.007 13C+0.004 29，相關(guān)系數(shù)r=0.9998。表明在10～120μg/mL范圍內(nèi)，鹽酸拉貝洛爾的吸光度（A）和濃度（C）線性關(guān)系良好。

2.2.3 回收率試驗精密稱取鹽酸拉貝洛爾80、100、120 mg各三份，置于100 mL容量瓶內(nèi)，分別按處方比例加入其他輔料，加入0.1mo1/L鹽酸溶解，超聲30min，加入鹽酸至刻度，搖勻，過濾，棄初濾液，稀釋，制備成80、100、120μg/mL的溶液，在波長300 nm處，測吸光度，計算回收率結(jié)果見表1。三個濃度的平均回收率是102.80%、101.87%、99.55%，RSD是0.62%、 0.70%、0.28%，結(jié)果符合要求。

表1 回收率試驗（n=3）

2.2.4 精密度試驗精密稱取鹽酸拉貝洛爾適量，溶解稀釋配制成80、100、120μg/m L的三種濃度，用紫外分光光度法分別在同日內(nèi)不同時間和不同日內(nèi)測其吸光度，考察精密度。結(jié)果見表2。

表2 精密度試驗（n=3）

2.3 載藥丸芯的質(zhì)量評價

2.3.1 外觀及圓整度測定采用測定微丸的長短徑比作為圓整度的評價指標(biāo)。取微丸200粒以上，均勻分散在背景板上，控制微丸間的間隙，拍照后使用Image Pro p1us軟件處理，先剔除連在一起的微丸，再測長短徑之比［11］。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)鹽酸拉貝洛爾的藥物含量超過60%時制備的丸芯成球性能較差，加入乳糖可提高圓整度，最佳處方的長短徑比為1.26。

2.3.2 脆碎度精密稱取6.5 g左右的微丸，加入10粒直徑為3 mm的玻璃珠，一起置于脆碎度檢測儀中旋轉(zhuǎn)8min，收集微丸并精密稱定其重量，計算失重百分率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加入降低藥物含量，提高乳糖用量可降低脆碎度，最佳處方的脆碎度為0.26%。

2.3.3 溶出度測定精密稱取微丸適量，照《中國藥典》2015年版四部溶出度與釋放度測定法第二法裝置測定，以900mLpH值6.8磷酸緩沖液為介質(zhì)，轉(zhuǎn)速75 r/min。在預(yù)定時間取樣5mL（同時補充同溫等量純化水），經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液適當(dāng)稀釋，在300 nm波長處測定吸光度，計算各時間點的累積釋藥百分率。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)丸芯內(nèi)無CMS-Na時，藥物釋放不完全，加入10%的CMS-Na可以提高釋藥速率。綜合考慮丸芯的脆碎度、圓整度和體外溶出度，最終選擇的處方為：m（鹽酸拉貝洛爾）：m（MCC）：m（CMS-Na）：m（乳糖）=50：35：10：5，其在1 h內(nèi)即能釋藥完全。其溶出度曲線見圖2。

圖2 丸芯處方溶出曲線

2.4 溶脹層的確定

HPMC E5加水溶解，加入處方量的CC-Na，攪拌過夜，制成均勻分散體系。取載藥丸芯50 g，采用流化床底噴包衣法對載藥微丸進(jìn)行包衣。工藝參數(shù)為：風(fēng)機頻率25 Hz，進(jìn)風(fēng)溫度45℃，物料溫度35℃，進(jìn)液速率1.3～1.4mL/min，霧化壓力0.175 MPa。

在沒有控釋層存在的情況下，先考察溶脹層增重45%對藥物釋放的影響，從圖中可看出，在沒有控釋層時，溶脹層增重對于丸芯藥物的釋放幾乎沒有影響，1 h內(nèi)的藥物釋放均超過80%。結(jié)果見圖3。

再按“2.5”項下對包有溶脹層的微丸進(jìn)行控釋層包衣，控制控釋層增重14%，考察溶脹層增重對釋藥行為的影響，隨著溶脹層厚度增加，時滯變短，釋藥速率顯著加快。結(jié)果見圖4。

2.5 控釋層考察

將HPMC加入95%乙醇中溶解，依次加入處方量的TEC、EC和滑石粉，攪拌過夜，制備成均勻分散體系。取丸芯50 g，采用流化床底噴包衣法對微丸進(jìn)行包衣。工藝參數(shù)為：風(fēng)機頻率25 Hz，進(jìn)風(fēng)溫度45℃，物料溫度35℃，進(jìn)液速率1.6～1.8 mL/min，霧化壓力0.175MPa。

2.5.1 HPMC的比例對釋藥行為的影響按照“2.3”項下的包衣操作，控制溶脹層增重為45%，調(diào)整控釋層包衣中EC與HPMC的比例分別為2：1和4：1，考察EC與HPMC的比例對體外釋放的影響，從圖中可看出，隨著控釋層處方中HPMC比例的增加，時滯變短，藥物釋放速率變快。但是EC與HPMC的比例為2：1時，藥物釋放時滯較短，且釋放較快，不符合時滯后緩釋的目的，故選用EC與HPMC的比例為4：1做進(jìn)一步考察。結(jié)果見圖5。

2.5.2 增塑劑對釋藥行為的影響根據(jù)“2.4”和“2.5”項下的包衣操作，控制溶脹層增重45%，在控釋層14%水平下考察控釋層中增塑劑TEC及蓖麻油對體外釋放的影響，從圖中可看出，增塑劑TEC對時滯有明顯的影響，不含增塑劑的微丸具有很短的時滯，但加入增塑劑蓖麻油后，藥物無釋放，因此選用TEC作為最優(yōu)處方增塑劑。結(jié)果見圖6。

圖3 溶脹層厚度對無控釋層載藥微丸釋放度的影響

圖4 溶脹層厚度對藥物釋放的影響（控釋層增重14%）

圖5 EC和HPMC E5的比例對藥物釋放的影響

2.5.3 控釋層的厚度對釋藥行為的影響選用溶脹層增重45%的微丸，按照“2.5”項下的包衣操作，得到控釋層增重7%、14%、21%的小丸三批，考察控釋層厚度對釋藥行為的影響，隨著控釋層厚度的增加，釋放的時滯變長，藥物釋放速率變慢。結(jié)果見圖7。

圖6 增塑劑對藥物釋放的影響

圖7 控釋層厚度對藥物釋放的影響

圖8 釋放介質(zhì)對釋放行為的影響

2.6 釋放介質(zhì)考察

取最優(yōu)處方時控緩釋微丸，分別以水、pH值1.2的鹽酸、PBS以及先2 h鹽酸后轉(zhuǎn)入PBS為介質(zhì)測定其釋藥行為，考察釋放介質(zhì)對最終產(chǎn)品藥物釋放的影響，釋放介質(zhì)對藥物的釋放無明顯影響。結(jié)果見圖8。

2.7 包衣膜爆破考察

取微丸適量于溶出杯中，按“2.3.3”項下條件操作，分別于每小時取出微丸，用數(shù)字顯微鏡觀察微丸的外觀變化，微丸的外觀變化和體外釋放曲線基本吻合。前3 h微丸的膜表面完整，沒有明顯的破裂，在這段時間內(nèi)藥物基本無釋放，而當(dāng)4 h時，微丸的膜已經(jīng)破裂，藥物大量釋放出來。這說明藥物的時控緩釋釋放是由于微丸膜的破裂。結(jié)果見圖9。

3 討論

載藥丸芯的制備主要有空白丸芯上藥法、離心造粒法和擠出滾圓法等［12-14］。其中擠出滾圓法由于具有載藥量高、粒徑分布窄、圓整度好、機械性能強等優(yōu)點，已成為應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一［15-16］。本研究選用MCC為成丸骨架材料，制得含藥量高達(dá)50%的載藥丸芯，進(jìn)一步提高藥物含量，則不能得到球狀微丸。研究中發(fā)現(xiàn)，不含CMS-Na的處方藥物釋放不完全，加入CMS-Na可促進(jìn)藥物釋放完全，但圓整度略有降低，加入少量乳糖可提高微丸的圓整度和機械性能。

圖9 溶出過程中微丸外觀變化

脈沖控釋微丸的釋藥原理主要有滲透壓控制型、溶蝕型和溶脹爆破型等［17-19］。溶脹爆破型是由于溶脹層吸水膨脹后使控釋膜破裂導(dǎo)致藥物脈沖釋放，因此溶脹層的厚度對釋藥時滯有非常重要的影響。從結(jié)果中可看出，隨著溶脹層厚度的增加時滯明顯縮短，隨著溶脹層厚度的增加，其吸水產(chǎn)生的溶脹力更大，故能在更短時間內(nèi)脹破外膜，所以時滯變短。

控釋層的處方也是脈沖釋藥系統(tǒng)的關(guān)鍵，EC為最常用的控釋膜材之一，但單獨使用時透水性太差，常需加入適量致孔劑來調(diào)節(jié)水分的滲入［20］。本研究采用HPMC作為致孔劑考察其用量對釋藥性能的影響，增加HPMC用量可以提高吸水速率，同時會降低膜的刺穿強度，因此，會縮短時滯，提高藥物釋放速率?？蒯寣又性鏊軇㏕EC的加入會增加膜的韌性，從而提高控釋膜耐受脹破的能力，故加入增塑劑可延長藥物的釋放時滯［21］。

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Preparation of tim e-controlled of labetalol hyd rochloride sustained-release pellets

GAO Jie1ZHU Miao2WO Lianqun1WANGWenxi2
1.Experimenta1 and Training Center，Zhejiang Pharmaceutica1Co11ege，Zhejiang Province，Ningbo 315100，China；
2.Co11ege of Pharmaceutica1Science，Zhejiang University of Techno1ogy，Zhejiang Province，Hangzhou 310014，China

Objective To deve1op a nove1 time-contro11ed pe11ets for 1abeta1o1 hydroch1oride with sustained-re1ease behavior.M ethods The 1abeta1o1-1oaded pe11ets cores were prepared by extrusion-spheronization，then were coated with croscarme11ose sodium as swe11ing 1ayer，fo11owed by themixture of ethy1 ce11u1ose and hydroxypropy1methy1ce1-1u1ose as contro11ed re1ease 1ayer via the f1uid bed coating equipment.The effects of swe11ing 1ayer and contro11ed re-1ease membrane on the profi1e of drug re1ease in vitro were investigated by sing1e factor test.Resu lts The high 1abeta1o1-1oaded pe11et coresmade ofm icroce11u1ose，sodium carboxymethy1 starch and 1actose showed satisfactory characters.With the thickness of the swe11ing 1ayer increasing，the 1ag time of drug re1ease was pro1onged and the re1ease rate increased.With the increase of HPMC ratio in the contro11ed re1ease 1ayer，the 1ag time increased.The 1ag time was a1so pro1onged with the addition of p1asticizer.Con lusion The obtained pe11ets disp1ay good drug re1ease behavior，which suggests a great potentia1 in c1inic app1ication.

Labeta1o1hydroch1oride；Sustained-re1ease pe11ets of time-contro11ed；Swe11ing 1ayer；Contro11ed-re1ease 1ayer

R943

A

1673-7210（2016）07（a）-0026-05

2016-02-18本文編輯：趙魯楓）

浙江省藥品監(jiān)督管理局計劃項目（2014012）。

高捷（1976-），女，高級實驗師，主要從事藥物制劑研究。

王文喜（1977-），男，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事藥物新劑型與新技術(shù)研究。