紫外可見分光光度法測定絲瓜絡(luò)配方顆粒中多糖含量

田　健，朱　凱

(長春中醫(yī)藥大學(xué),長春 130117)

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紫外可見分光光度法測定絲瓜絡(luò)配方顆粒中多糖含量

田健，朱凱*

(長春中醫(yī)藥大學(xué),長春 130117)

目的用紫外可見分光光度法測定絲瓜絡(luò)配方顆粒中多糖的含量。方法采用苯酚硫酸法對(duì)供試品與對(duì)照品進(jìn)行處理，用紫外可見分光光度法測定其吸光度值。結(jié)果測得的最大吸收波長為490 nm，葡萄糖濃度在1.427 0～14.271 0 mg/mL范圍內(nèi)，與吸收度呈良好線性關(guān)系，精密度RSD為0.78%，平均回收率為98.9%。結(jié)論本法簡便易行，精確度高，測定速度快。

絲瓜絡(luò)；多糖；紫外分光光度法

絲瓜絡(luò)為葫蘆科植物絲瓜Luffacylindrica(L.)Roem.的干燥成熟果實(shí)的維管束。別名又稱絲瓜殼、天蘿筋、瓜絡(luò)、絲瓜筋等，在夏、秋二季絲瓜成熟、果皮發(fā)黃干枯后摘下，除去外皮、果肉及種子，洗凈曬干，即為絲瓜絡(luò)[1-3]。絲瓜絡(luò)味甘，性寒，有通行經(jīng)絡(luò)和涼血解毒的作用，用于痹痛拘攣，胸脅脹痛，乳汁不通，乳癰腫痛[4-6]?！侗静菥V目》記載“絲瓜老者，筋絡(luò)貫串，房隔聯(lián)屬，能通人脈絡(luò)臟腑，而祛風(fēng)解毒，消腫化痰，祛痛殺蟲，及治諸血病也?！苯z瓜絡(luò)富含木糖醇、甘露聚糖和半乳聚糖等成分[7-8]。絲瓜絡(luò)配方顆粒是以絲瓜絡(luò)飲片為原料，經(jīng)過提取、分離、濃縮、干燥、制粒、包裝等生產(chǎn)工藝，加工制成的一種新型配方用藥。本實(shí)驗(yàn)采用紫外可見分光光度法對(duì)絲瓜絡(luò)配方顆粒中的多糖進(jìn)行含量測定。為絲瓜絡(luò)資源進(jìn)一步的開發(fā)和利用提供幫助。

1　儀器與試劑

葡萄糖化學(xué)對(duì)照品:購于中國藥品生物制品檢定所。批號(hào)：110833-200904。TU-1810PC紫外可見分光光度計(jì)：北京瑞利分析儀器公司。BP211D電子分析天平：德國Sartorius公司。電動(dòng)恒溫水浴鍋：江蘇常熟醫(yī)療器械廠。實(shí)驗(yàn)室用純水機(jī)sco80179：四川沃特爾科技發(fā)展有限公司。

2　方法與結(jié)果

2.1溶液的制備

2.1.1對(duì)照品溶液的制備精密稱定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，置于100 mL容量瓶中，加蒸餾水溶解稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL含多糖99.9 μg)。

2.1.2供試品溶液的制備取絲瓜絡(luò)水煎干膏適量，研細(xì)，過二號(hào)篩，精密稱取0.1 g，置50 mL容量瓶中，精密加入蒸餾水30 mL，超聲處理(功率150 W，頻率40 kHz)20 min，取出放冷后，加蒸餾水定容至刻度，濾過，精密吸取續(xù)濾液5 mL，至25 mL容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，即得。

2.2最大吸收波長的確定取適量對(duì)照品溶液及供試品溶液，在300～600 nm波長范圍內(nèi)測定吸光度，結(jié)果對(duì)照品與供試品在490 nm處均有最大吸收，經(jīng)空白試驗(yàn)無干擾，確定490 nm為測定波長。

2.3線性關(guān)系的考察精密量取對(duì)照品溶液(99.9 μg/mL)0.1、0.2、0.4、0.6 m、0.8、1，分別置于10 mL具塞試管中，分別加水補(bǔ)至1.0 mL，精密加入5%苯酚溶液1 mL，搖勻，迅速加入濃硫酸5 mL，搖勻，置于100 ℃水浴中保溫15 min，取出，迅速冷卻至室溫15 min，以相應(yīng)的試劑為空白，在490 nm的波長處測定上述溶液的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為C=17.534 38 A-2.875 87,r=0.999 4。結(jié)果表明，葡萄糖濃度在1.427 0～14.271 0 μg/mL范圍內(nèi)，與吸收度呈良好線性關(guān)系。結(jié)果見表1。

表1　標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4精密度考察取對(duì)照品溶液適量，在490 nm的波長處連續(xù)測6次吸光度值，記錄吸光度值，計(jì)算，考察精密度，平均吸光度值為0.485，RSD為0.78%，表明儀器、方法的精密度良好，測定結(jié)果可信。測定結(jié)果見表2。

表2　精密度試驗(yàn)

2.5穩(wěn)定性考察取同一供試品溶液，每隔一段時(shí)間分別測定吸光度值，記錄吸光度值，計(jì)算，考察穩(wěn)定性。結(jié)果顯示對(duì)照品溶液在24 h內(nèi)測定結(jié)果的RSD值為0.22%，說明供試品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性較好，測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

2.6重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取同一樣品6份，按2.1.2供試品溶液項(xiàng)下方法制備成供試品溶液，依法獨(dú)立測定樣品含量，以考察本法的重現(xiàn)性。結(jié)果顯示多糖平均含量為12.37 mg/g，RSD=1.83%，說明重現(xiàn)性較好。

2.7加樣回收取已知含量供試品溶液6份，分別加入適量葡萄糖對(duì)照品，依法測定，計(jì)算回收率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示平均回收率為104.33%，RSD值為0.46%，回收率良好，方法可行。

2.8樣品含量測定取10批樣品，按2.1.2供試品溶液項(xiàng)下方法制備成供試品溶液，每批樣品處理2份，測定吸光度值，計(jì)算10批樣品中多糖的含量。結(jié)果見表3。

表3　10批樣品中多糖的含量

3　小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)制備供試品溶液的提取方法選用超聲提取法，本法獨(dú)具的物理特性能，促使細(xì)胞組織破壁或變形。其中的成分可直接擴(kuò)散到溶劑中，使有效成分提取更充分，提取速度快，能耗較低。

絲瓜絡(luò)中多糖為主要有效成分[9-12]，本試驗(yàn)中采用紫外分光光度法進(jìn)行測定，選用苯酚濃硫酸法作為測定絲瓜絡(luò)多糖含量的顯色方法，通過光譜吸收峰的變化，計(jì)算多糖的含量[13-17]。該方法顯色穩(wěn)定，線性關(guān)系良好，精密度、重復(fù)性及回收率均達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求，所以該方法是測定絲瓜絡(luò)中多糖的較佳方法。

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Content of UV Vis spectrophotometric determination of Luffa granules in polysaccharide

TIAN Jian,ZHU Kai*

(Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)

ObjectiveContent by UV Vis spectrophotometric determination of Luffa granules in polysaccharide.MethodsThe samples were treated with phenol sulfuric acid method,and the absorbance value was determined by UV Vis spectrophotometry.ResultsMeasured maximum absorption wavelength of 490nm,the glucose concentration in the 1.427 0 mg/mL-14.2710 mg/range,and absorbance was linear.RSD of 0.78% and the average recovery was 98.9%.ConclusionThis method is simple,high accuracy,fast measurement speed.

Loofah;polysaccharide;UV spectrophotometry

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.05.013

吉林省中醫(yī)藥科技項(xiàng)目“一種人參藥性菌質(zhì)指紋圖譜的研究”(2014-Q33)。

田健(1988-)，男，碩士研究生，助理實(shí)驗(yàn)師，主要從事中藥學(xué)研究。

朱凱，男，碩士研究生導(dǎo)師，電話-18686659711，電子信箱-12759797@qq.com

R284.3

A

2095-6258(2016)05-0917-03

2016-05-03)