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    顯齒蛇葡萄的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

    2016-11-11 03:04:14劉慧穎崔秀明劉迪秋王承瀟楊曉艷
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年27期
    關(guān)鍵詞:藤茶楊梅提取物

    劉慧穎, 崔秀明, 劉迪秋, 楊 野,王承瀟, 楊曉艷, 曲 媛*

    (1.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,云南昆明 650500;2.昆明市道地藥材可持續(xù)發(fā)展利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南昆明 650500)

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    顯齒蛇葡萄的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

    劉慧穎1,2, 崔秀明1,2, 劉迪秋1,2, 楊 野1,2,王承瀟1,2, 楊曉艷1,2, 曲 媛1,2*

    (1.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,云南昆明 650500;2.昆明市道地藥材可持續(xù)發(fā)展利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南昆明 650500)

    顯齒蛇葡萄為藥食兩用植物,具有疏風(fēng)解毒、祛瘀消腫、止血止痛功效,對(duì)顯齒蛇葡萄的化學(xué)成分(黃酮類、酚類、甾體類、多糖類、揮發(fā)油類等)、藥理作用及其機(jī)制(抗氧化、抑菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抗癌、抗病毒等)進(jìn)行綜述,以期為其臨床應(yīng)用及全面開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

    顯齒蛇葡萄;化學(xué)成分;藥理作用

    顯齒蛇葡萄Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang是葡萄科蛇葡萄屬的一種野生藤本植物,主要分布于廣東、廣西、云南、貴州、湖南、湖北、江西、福建等地[1]。由顯齒蛇葡萄的嫩葉經(jīng)過(guò)殺青、揉捻、烘干而成的類茶飲料稱為藤茶。藤茶為藥食兩用植物,其加工產(chǎn)品有藤茶餅、袋泡茶、速溶茶、含片以及果凍等[2-4]。藤茶性微溫,有疏風(fēng)解毒、祛瘀消腫、止血止痛等功效。國(guó)內(nèi)外學(xué)者在生藥學(xué)、化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用等方面對(duì)顯齒蛇葡萄進(jìn)行了大量研究,特別是從中發(fā)現(xiàn)了許多新的生物活性,并闡明了其作用機(jī)理。筆者對(duì)顯齒蛇葡萄的化學(xué)成分及藥理作用進(jìn)行了綜述,為其綜合開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

    1 化學(xué)成分

    1.1黃酮類化合物顯齒蛇葡萄中黃酮類化合物的含量高達(dá)45%(圖1),主要有二氫楊梅素、(2R,3S) -5,7,3′,4′,5′-五羥基二氫黃酮醇、楊梅素、楊梅素-3-O-L-鼠李糖苷、楊梅素-3′-O-β-D-吡喃木糖苷、楊梅素-3-O-β-D-半乳糖苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、山柰酚、紫云英苷、阿福豆素、芹菜素、二氫山柰酚、5,7,3′,4′,5′-五羥基二氫黃酮、橙皮素、旗松素[5-6]。

    1.2酚類目前,顯齒蛇葡萄中酚類化合物有沒(méi)食子酸、沒(méi)食子酸乙酯、沒(méi)食子酸甲酯、兒茶素、表兒茶素等[6]。

    1.3氨基酸類及微量元素顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中總氨基酸含量高達(dá)2.53 g/l00 g,包含17種氨基酸,8種人體所必需的氨基酸,其中包括γ-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨基酸。同時(shí),研究發(fā)現(xiàn)顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中包含多種微量元素。其中,對(duì)人體健康與疾病防治有重要影響的無(wú)機(jī)元素如Fe、Cu、Mn、Zn、Se等在顯齒蛇葡萄中均有較高含量[7]。

    1.4多糖熊皓平等[8]分析不同季節(jié)顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中水浸出物、水溶性糖和氨基酸總量發(fā)現(xiàn),顯齒蛇葡萄春、夏幼嫩莖葉的水浸出物含量最高,水溶性糖含量約為 10%,氨基酸含量約為5%。羅祖友等[9]從顯齒蛇葡萄中分離得到2種蛋白質(zhì)的復(fù)合多糖AGP-3、AGP-4,經(jīng)過(guò)鑒定兩者均為分子量相對(duì)均一的蛋白多糖。

    1.5甾體及萜類化合物從該植物中分離得到的甾體主要有豆甾醇(stigmasterol)、齊墩果酸(oleanplic acid)、β-谷甾醇(β-sitosterol)等[10-12]。袁阿興等[13]研究發(fā)現(xiàn)顯齒蛇葡萄中萜類化合物主要為龍涎香醇。

    1.6揮發(fā)油類成分顯齒蛇葡萄葉中香氣成分主要有α-萜品醇、β-環(huán)梓檬醛、芳樟醇、壬酸、癸酸、橙花醇、香葉基丙酮、β-紫羅蘭酮、2,4-二叔丁基苯酚、橙花叔醇、柏木腦、鄰苯二甲酸異丁基辛基酯、金合歡基丙酮、氯二苯甲酮等;莖中香氣成分為香葉醇、水楊酸甲酯、壬酸、癸酸、香葉基丙酮、6,10,14-三甲基-2-十五烷酮、柏木腦、β-畢橙茄醇、鄰苯二甲酸二異丁酯。這些特征香氣成分是造成顯齒蛇葡萄制品具有特殊“青味”的成分[14]。

    2 藥理作用及其機(jī)制

    2.1抗氧化作用Wang等[15]研究發(fā)現(xiàn)黃酮類和酚類是顯齒蛇葡萄莖提取物中主要負(fù)責(zé)DPPH自由基清除活動(dòng)的物質(zhì)。梁琍等[16]研究梵凈山野生藤茶中二氫楊梅素的體外抗氧化作用發(fā)現(xiàn),在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi),藤茶中二氫楊梅素清除 DPPH·的能力高于蘆丁,二氫楊梅素濃度達(dá) 50 mg/L 時(shí),其清除率高于Vc;隨著二氫楊梅素濃度的增加,其清除·OH 的能力逐步提高。Zheng等[17]研究發(fā)酵藤茶(顯齒蛇葡萄)中主要總黃酮類化合物的成分和其抗氧化作用發(fā)現(xiàn),大鼠給予100 mg/kg的二氫楊梅素后,在4 h時(shí)大鼠血清對(duì)DPPH還原水平達(dá)到最高,在4 h后開(kāi)始下降;與二氫楊梅素相比,總黃酮類化合物顯示出同樣的時(shí)間依賴,但抗氧化活性更高。Kou等[18]分析顯齒蛇葡萄中蛇葡萄素對(duì)H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡的神經(jīng)保護(hù)作用表明,蛇葡萄素可通過(guò)激活ERK和Akt的信號(hào)途徑來(lái)強(qiáng)化細(xì)胞的抗氧化防御,同時(shí)誘導(dǎo)HO-1的表達(dá),從而保護(hù)PC12細(xì)胞中H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。肖浩等[19]研究發(fā)現(xiàn)藤茶多酚是一種較好的天然抗氧化劑,在相同濃度的情況下,藤茶多酚對(duì)·OH和O2-·的清除能力比Vc強(qiáng)。同時(shí),藤茶多糖在一定濃度范圍內(nèi)也具有顯著的體外抗活性氧能力[20]。

    圖1 顯齒蛇葡萄中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formula flavonoids compounds in A.grossedentata

    2.2抑菌作用顯齒蛇葡萄的提取物對(duì)常見(jiàn)呼吸道致病菌如葡萄球菌、肺炎球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌等均有抑制效果。研究發(fā)現(xiàn),顯齒蛇葡萄總黃酮直接作用于金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌時(shí)有明顯的抑菌作用,特別對(duì)臨床分離金黃色葡萄球菌作用更強(qiáng);顯齒蛇葡萄總黃酮局部用藥時(shí),藥物濃度達(dá)抑菌濃度以上,對(duì)某些細(xì)菌的抑菌作用優(yōu)于華素片(西地碘)[21]。顯齒蛇葡萄總黃酮還具有一定的體內(nèi)抑菌作用[21]。廣西藤茶提取物APS 對(duì)金葡菌、MRSA 的TdR、UR合成均有明顯的抑制作用,但對(duì)綠膿桿菌的TdR、UR的合成無(wú)明顯的抑制作用[22]。熊大勝等[23]通過(guò)體外抑菌試驗(yàn)表明,顯齒蛇葡萄嫩莖葉提取物對(duì)金黃葡萄球菌、枯草桿菌均有很強(qiáng)的抑制作用,對(duì)黑曲霉、黃曲霉、青霉、交鏈霉均有不同程度的抑制效果。

    2.3抗炎、鎮(zhèn)痛張亞兵[24]研究發(fā)現(xiàn)蛇葡萄素能減輕三硝基苯磺酸/乙醇誘導(dǎo)的大鼠試驗(yàn)性結(jié)腸炎,其作用機(jī)制與蛇葡萄素下調(diào)結(jié)腸NF-kB p65表達(dá)、Th1促炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β和上調(diào)Th2抑炎性細(xì)胞因子IL-10有關(guān)。Hou等[25]分析發(fā)現(xiàn)顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素通過(guò)抑制NF-kB的激活以及p38和JNK的磷酸化來(lái)發(fā)揮其局部抗炎作用;二氫楊梅素既能抑制LPS處理的小鼠體內(nèi)促炎性細(xì)胞因子水平,如TNF-α、IL-1β和IL-6,也能增加抗炎細(xì)胞因子IL-10水平;二氫楊梅素能減少巨噬細(xì)胞中一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α和環(huán)氧合酶-2(COX-2)的蛋白表達(dá)量;二氫楊梅素抑制了經(jīng)LPS刺激的巨噬細(xì)胞NF-kappa B(NF-κB)和IκBα的磷酸化以及p38和JNK的磷酸化。鐘正賢等[26]用小鼠耳廓腫脹和小鼠扭體試驗(yàn)研究顯齒蛇葡萄提取物的消炎鎮(zhèn)痛作用,結(jié)果表明其明顯抑制小鼠耳廓腫脹,減少小鼠扭體次數(shù),具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用。林建峰等[27]證實(shí)顯齒蛇葡萄水提取液對(duì)小鼠醋酸性扭體反應(yīng)和熱水反應(yīng)有一定的鎮(zhèn)痛作用,能提高小鼠的痛閾水平。

    2.4抗癌作用Jeon等[28]采用體外細(xì)胞毒性抑制試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素對(duì)人體常見(jiàn)致癌細(xì)胞, 如肺癌 H1299 細(xì)胞、白血病 HL-60、K562細(xì)胞均有較強(qiáng)的抑制作用。姚欣等[29]通過(guò)采用流式 Annexin V/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,研究顯齒蛇葡萄提取物對(duì)人前列腺癌 LNcap 細(xì)胞凋亡的作用,結(jié)果表明,藤茶提取物可顯著誘導(dǎo) LNcap 細(xì)胞凋亡,在加入提取物24 h后,腫瘤細(xì)胞的凋亡率顯著上升,且呈量效關(guān)系。楊秀芬等[30]分析發(fā)現(xiàn)蛇葡萄素與苯并芘合用,可明顯誘導(dǎo)CYP1A 1、CYP1A 2基因和谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶基因GST-m 1、GST-pi的表達(dá),表明兩者合用可以加速苯并芘代謝形成非致癌物而解毒和加速排泄。Zhou等[31]研究顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素對(duì)高轉(zhuǎn)移性人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的細(xì)胞侵襲作用及其機(jī)制發(fā)現(xiàn),二氫楊梅素能夠抑制MDA-MB-231細(xì)胞的增殖、明膠酶活性和MMP-2/-9蛋白質(zhì)表達(dá)水平,并抑制MMP-2/-9 mRNA的表達(dá)水平;二氫楊梅素抑制MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲來(lái)對(duì)抗癌細(xì)胞,侵襲的抑制可能與MMP-2/-9蛋白表達(dá)水平的下降有關(guān)。Zhao等[32]研究發(fā)現(xiàn)顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素(DHM)潛在的抗腫瘤活性與p38 MAPK和AMPKα/ GSK-3β/ Sox2信號(hào)通路有關(guān),且一些患者化療后出現(xiàn)較低的p-AMPK表達(dá)量,表明DHM可以成為治療骨肉瘤的候選藥。Zeng等[33]評(píng)估顯齒蛇葡萄中DHM在細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期分布和人類黑色素瘤SK-MEL-28細(xì)胞系中細(xì)胞凋亡的作用發(fā)現(xiàn),DHM可作為一個(gè)抑制黑色素瘤細(xì)胞增長(zhǎng)的新型有效的候選藥物。此外,Xia等[34]研究發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素誘導(dǎo)的自噬抑制了HepG2細(xì)胞的細(xì)胞增殖,其機(jī)制參與抑制mTOR的激活和調(diào)節(jié)相關(guān)的上游信號(hào)通路。

    2.5降血脂、降血糖顯齒蛇葡萄具有明顯的降血脂作用,陳玉瓊等[35]研究恩施高硒藤茶水提取物(ESTC)發(fā)現(xiàn),ESTC對(duì)大鼠TC、TG有明顯的降低作用,對(duì)HDL-C有明顯的升高作用,說(shuō)明 ESTC 對(duì)試驗(yàn)大鼠有輔助降血脂作用;人體臨床試驗(yàn)表明,試驗(yàn)組服用ESTC 30 d后,受試組血清膽固醇、甘油三酯明顯下降,與試用前及對(duì)照組比較,差異極顯著,說(shuō)明ESTC對(duì)人體也具有輔助降血脂的功能。梁柱第等[36]研究發(fā)現(xiàn)藤茶雙氫楊梅素對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化具有一定的防治作用,其作用機(jī)制是通過(guò)改善動(dòng)脈粥樣硬化大鼠炎癥因子水平,抑制sPLA2-II AmRNA 的表達(dá)。黃先菊等[37]研究蛇葡萄素對(duì)2型糖尿病大鼠的降糖作用發(fā)現(xiàn),高、低劑量蛇葡萄素均能降低2型糖尿病大鼠的血糖水平。由于骨骼肌胰島素抵抗(SMIR)在2型糖尿病的發(fā)病機(jī)理中起著重要的作用,Shi等[38]研究二氫楊梅素對(duì)SMIR的影響及其機(jī)制表明,二氫楊梅素可通過(guò)由AMPK信號(hào)通路的激活誘導(dǎo)的自噬來(lái)改善SMIR,從而給2型糖尿病的治療帶來(lái)新思路。Jiang等[39]研究二氫楊梅素對(duì)甲基乙二醛誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞中氧化應(yīng)激和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)活性影響及其相關(guān)機(jī)制發(fā)現(xiàn),二氫楊梅素能夠抑制PC12細(xì)胞中氧化應(yīng)激,平衡葡萄糖代謝;二氫楊梅素降低GLUT4的轉(zhuǎn)運(yùn)功能障礙,提高Glo-1和 p-AMPKα的表達(dá)量;二氫楊梅素能夠保護(hù)PC12細(xì)胞抵抗甲基乙二醛誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和糖代謝紊亂,成為一種新型治療糖尿病患者腦病的候選試劑。

    2.6保肝作用Murakamia等[40]研究大鼠的D-氨基半乳糖誘導(dǎo)的肝損傷發(fā)現(xiàn),顯齒蛇葡萄莖和葉中保肝作用的主要成分是二氫楊梅素,含有1%的50%乙醇提取物和0.1%二氫楊梅素的食物顯著地抑制了LDH、ALT、AST、α-維生素E水平和半乳糖胺引起的GSG/ GSSH的增加。徐靜娟等[41]采用《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》提供的方法,研究從顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素的生物功效,發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素能夠有效地預(yù)防乙醇性肝損傷;二氫楊梅素毒性很小,對(duì)小鼠灌胃30 d 后能有效地阻止乙醇導(dǎo)致的肝臟GSH耗竭和MDA升高,能降低TG含量,減輕肝細(xì)胞脂肪變性。Chen等[42]研究二氫楊梅素對(duì)非酒精性脂肪肝病人的葡萄糖和脂質(zhì)代謝,炎癥介質(zhì)以及幾個(gè)生物指標(biāo)的影響,并進(jìn)行了雙盲臨床試驗(yàn),結(jié)果表明,二氫楊梅素的補(bǔ)充可改善非酒精性脂肪肝疾病患者的糖脂代謝以及各種生化參數(shù),其治療效果可能歸因于其可改善胰島素抵抗,降低腫瘤壞死因子-α、細(xì)胞角蛋白-18和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-21的血清水平。

    2.7增強(qiáng)免疫閻莉等[43]報(bào)道顯齒蛇葡萄總黃酮通過(guò)提高正常小鼠單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能,促進(jìn)血清溶血素和補(bǔ)體C3的生成,增加總補(bǔ)體活性,能夠增強(qiáng)正常小鼠的免疫功能。曾春暉等[44]分析發(fā)現(xiàn)廣西藤茶提取物APS可以明顯提高小鼠的脾臟指數(shù),增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的功能,增強(qiáng)淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng),增加溶血素抗體水平和2,4-二硝基氯苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹,使小鼠免疫增強(qiáng)。此外,藤茶多糖也具有增強(qiáng)荷瘤小鼠免疫能力的作用[45]。

    2.8抗病毒閻莉等[46]研究藤茶中APS的體內(nèi)抗鴨乙肝病毒作用表明,APS對(duì)感染鴨血清DHBV-DNA水平均有顯著的抑制作用,且停藥3 d未見(jiàn)明顯的反跳現(xiàn)象,說(shuō)明APS有抑制乙肝病毒的作用。此外,藤茶還能防止敏感細(xì)胞感染艾滋病病毒(HIV-1),顯著降低HIV-1P24抗原的表達(dá),干擾HIV-1SF33吸附到MT-4細(xì)胞[47]。

    2.9其他作用方會(huì)龍等[48]研究顯齒蛇葡萄提取物對(duì)血吸蟲(chóng)病肝纖維化的治療作用表明,其提取物可改善血吸蟲(chóng)病肝臟形態(tài)及肝纖維化小鼠肝組織結(jié)構(gòu),減輕肝纖維化程度,對(duì)血吸蟲(chóng)病肝纖維化有明顯的治療作用。陳立峰等[49]研究顯齒蛇葡萄總黃酮抗口腔黏膜潰瘍的作用發(fā)現(xiàn),顯齒蛇葡萄總黃酮能使表皮葡萄球菌性、乙酸性口腔黏膜潰瘍模型的潰瘍直徑明顯縮小,炎癥指數(shù)降低,表明顯齒蛇葡萄總黃酮有減輕口腔黏膜潰瘍炎癥、促進(jìn)潰瘍愈合的作用。Meng等[50]對(duì)新生大鼠心肌細(xì)胞用二氫楊梅素預(yù)處理(0~320 μmol/L),隨后用Ang II(100 nmol/L)刺激24 h,通過(guò)細(xì)胞表面分析來(lái)評(píng)價(jià)肥大的程度,結(jié)果表明,二氫楊梅素對(duì)Ang II誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大有抗氧化活性衰減作用,且其衰減與以NO依賴方式的抗氧化活性有關(guān)。高輝等[51]研究二氫楊梅素對(duì)運(yùn)動(dòng)耐力的影響發(fā)現(xiàn),二氫楊梅素具有抗疲勞作用,這一作用可能與其抑制組織的過(guò)氧化水平有關(guān)。潘人琦等[52]證實(shí)醉酒小鼠給予二氫楊梅素后,顯著縮短了醒酒時(shí)間,說(shuō)明二氫楊梅素具有一定的防醉解酒作用。

    3 小結(jié)與展望

    顯齒蛇葡萄含有黃酮類、酚類、甾體類、多糖類、揮發(fā)油類等多種化學(xué)成分,其中二氫楊梅素為主要的功效成分,且含量高。藥理作用廣泛,包括抗氧化、抑菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抗癌、抗病毒、降血脂、降血糖、保肝以及增強(qiáng)免疫等作用。在我國(guó)顯齒蛇葡萄資源豐富,但絕大部分資源主要用于制備粗加工茶飲料產(chǎn)品,其開(kāi)發(fā)利用度不高。目前,顯齒蛇葡萄還沒(méi)有被列入國(guó)家藥典,但這些藥理作用為顯齒蛇葡萄的臨床應(yīng)用以及新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。顯齒蛇葡萄作為一種藥食兩用的植物,資源豐富,具有很好的開(kāi)發(fā)前景。

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    Research Progress of Chemical Constituents and Pharmacological Effects ofAmpelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang

    LIU Hui-ying1,2, CUI Xiu-ming1,2, LIU Di-qiu1,2, QU Yuan1,2*et al

    (1.Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming, Yunnan 650500; 2.Kunming Key Laboratory of Sustainable Development and Utilization of Famous-region Drug, Kunming, Yunnan 650500)

    Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang is a kind of plant resource used both as medicine and food, and it has the effects of dispelling wind to detoxification, eliminating stasis to resolve swelling, and hemostasis and analgesia.In this research, the chemical composition (flavonoids, phenols, steroids, polysaccharides, and volatile oils), pharmacological effects and mechanism (antioxidant, bacteriostasis, anti-inflammation, analgesia, anti-cancer, antivirus and so on) ofA.grossedentatawere reviewed, in order to provide the basis for its clinical application and the comprehensive exploitation and utilization.

    Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang; Chemical constituents; Pharmacological effects

    云南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013RE001); 昆明理工大學(xué)自然科學(xué)研究基金資助項(xiàng)目(KKSY201326022)。

    劉慧穎(1992- ),女,山東菏澤人,碩士研究生,研究方向:中藥質(zhì)量控制。*通訊作者,講師,博士,碩士生導(dǎo)師,從事中藥質(zhì)量控制研究。

    2016-08-05

    R 284

    A

    0517-6611(2016)27-0135-04

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