南昌實(shí)驗(yàn)小鼠腸道寄生蟲(chóng)調(diào)查

郭海寧，高寶荷，肖秋萍，陳茂金，劉立恒

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330045）

南昌實(shí)驗(yàn)小鼠腸道寄生蟲(chóng)調(diào)查

郭海寧，高寶荷，肖秋萍，陳茂金，劉立恒

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330045）

用飽和鹽水漂浮檢測(cè)法及剖檢法對(duì)南昌3個(gè)動(dòng)物房（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組）3種日齡段（20～25、28～32、35日齡以上成年）的135只小鼠進(jìn)行調(diào)查。糞檢結(jié)果：被檢小鼠感染球蟲(chóng)、線蟲(chóng)、絳蟲(chóng)的感染率分別為4.4%、11.1%和5.2%，以線蟲(chóng)最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲(chóng)總感染率分別為（16/45）35.6%、（10/45）22.2%和（4/45）8.9%。剖檢結(jié)果：被檢小鼠感染四翼無(wú)刺線蟲(chóng)、隱藏管狀線蟲(chóng)、短膜殼絳蟲(chóng)的感染率分別為14.07%、5.2%、9.6%，以四翼無(wú)刺線蟲(chóng)最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲(chóng)總感染率分別為（19/45）42.2%、（16/45）35.6%和（4/45）8.9%。糞檢、剖檢結(jié)果均表明：以第Ⅰ組寄生蟲(chóng)感染率為最高，第Ⅲ組最低。3組3種年齡段小鼠寄生蟲(chóng)感染率20～25日齡為最低；28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大。

小鼠；寄生蟲(chóng)；調(diào)查

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧獸醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等諸多領(lǐng)域中。在開(kāi)放環(huán)境飼養(yǎng)條件下的實(shí)驗(yàn)小鼠群中，常有各種寄生蟲(chóng)感染。Simmos（1964）、Flynn等（1965）和Eaton（1972）在實(shí)驗(yàn)小鼠中檢出隱藏管狀線蟲(chóng)、四翼無(wú)刺線蟲(chóng)和微小膜殼絳蟲(chóng)。蔣金書(shū)等（1984）在LACA小鼠中發(fā)現(xiàn)大量的微小膜殼絳蟲(chóng)。冉靖北等（1987）對(duì)615小鼠作了調(diào)查，查出四翼無(wú)刺線蟲(chóng)和隱藏管狀線蟲(chóng)［1］。這往往會(huì)使小鼠的生理，生化等內(nèi)環(huán)境發(fā)生一系列的變化，使實(shí)驗(yàn)研究受到干擾，甚至影響結(jié)論的正確性，從而降低科研的科學(xué)性、準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性。另外，有些寄生蟲(chóng)還能引起人獸共患疾病，威脅實(shí)驗(yàn)人員的身體健康［2］。隨著國(guó)家對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量要求的不斷提高，對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腸道寄生蟲(chóng)的調(diào)研也勢(shì)在必行。為了解南昌市實(shí)驗(yàn)小鼠腸道寄生蟲(chóng)的感染情況，對(duì)南昌市內(nèi)3個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房小鼠進(jìn)行了調(diào)查，報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1動(dòng)物小鼠，購(gòu)自南昌3個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組），每組又分20～25、28～32、35日齡以上成年3種日齡段，每日齡段15只，共135只，雌雄不限。

1.2器皿生物顯微鏡，放大鏡（10倍），數(shù)碼相機(jī)，玻片鑷，載玻片，普通鑷子（14 cm），眼科剪，眼科鑷，方盤(pán)（16×22 cm），500 mL量筒，平皿（16 cm直徑），小口試劑瓶（35 mL），擦鏡紙，燒杯（250 mL），滴管（膠頭），全套寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵分離器皿，專(zhuān)用配套小鼠籠具。

1.3藥品飽和食鹽水本實(shí)驗(yàn)室配置。

1.4糞便采集及蟲(chóng)卵檢查將每只小鼠置于干凈的籠內(nèi)，待小鼠排出糞便10～12粒，用普通鑷子拾起于燒杯內(nèi)，用膠頭滴管吸取少許飽和食鹽水濕潤(rùn)5～10 min，用玻棒搗碎拌成糊狀，續(xù)加40 mL飽和食鹽水?dāng)嚢杈鶆蚝蟮谷胄】谠噭┢績(jī)?nèi)且瓶口形成凸面，靜置20 min，載玻片中央觸及凸面迅速翻轉(zhuǎn)，加蓋玻片置16×10倍顯微鏡下逐行尋找蟲(chóng)卵或卵囊，出現(xiàn)蟲(chóng)卵或卵囊后數(shù)碼照相并記錄小鼠患寄生蟲(chóng)病的陰陽(yáng)性數(shù)。

1.5剖檢小鼠分離蟲(chóng)體脫臼法處死小鼠于方盤(pán)內(nèi)，剖檢小鼠，取整個(gè)腸管并縱向剪開(kāi)，膠頭滴管吸清水沖洗腸管內(nèi)蟲(chóng)體及糞便于平皿內(nèi)，用手輕輕碾碎成團(tuán)糞便，加適量清水沉淀15 min傾上清留沉淀，重復(fù)加清水沉淀2次，平皿置黑色底板上，用10倍放大鏡尋找白色蟲(chóng)體，用膠頭滴管吸取蟲(chóng)體于載玻片上置顯微鏡下觀察識(shí)別蟲(chóng)種。

1.6蟲(chóng)卵、蟲(chóng)體大小測(cè)量及鑒定用測(cè)微法［3］在10×10倍、10×4倍顯微鏡下測(cè)量蟲(chóng)卵或卵囊以及蟲(chóng)體大小。蟲(chóng)卵種屬的鑒定依據(jù)蟲(chóng)卵形態(tài)、大小、顏色、卵殼和內(nèi)容物的典型特征，比對(duì)相關(guān)資料確認(rèn)［4-6］。

1.7感染率的計(jì)算感染率（%）=感染數(shù)÷總數(shù)× 100%。

2結(jié)果

2.1寄生蟲(chóng)種類(lèi)被檢小鼠腸道寄生有球蟲(chóng)，隱藏管狀線蟲(chóng)，四翼無(wú)刺線蟲(chóng)，短小膜殼絳蟲(chóng)4種。四翼無(wú)刺線蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種，感染率為46.67%（見(jiàn)表2）。

2.2糞檢小鼠體內(nèi)寄生蟲(chóng)情況被檢小鼠感染球蟲(chóng)、線蟲(chóng)、絳蟲(chóng)的感染率分別為4.4%、11.1%和5.2%，以線蟲(chóng)最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲(chóng)總感染率分別為（16/45）35.6%、（10/45）22.2%和（4/45）8.9%，以第Ⅰ組為最高，第Ⅲ組最低；3組3種日齡段小鼠寄生蟲(chóng)感染率均以20～25日齡為最低；28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大（見(jiàn)表1）。

表13個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房小鼠糞檢情況

2.3剖檢小鼠體內(nèi)寄生蟲(chóng)情況被檢小鼠感染四翼無(wú)刺線蟲(chóng)、隱藏管狀線蟲(chóng)、短膜殼絳蟲(chóng)的感染率分別為14.07%、5.2%、9.6%，以四翼無(wú)刺線蟲(chóng)最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲(chóng)總感染率分別為（19/ 45）42.2%、（16/45）35.6%和（4/45）8.9%，以第Ⅰ組最高，第Ⅲ組最低；3組3種日齡段小鼠寄生蟲(chóng)感染率20～25日齡為最低；28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大（見(jiàn)表2）。

表23個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房剖檢情況

2.4糞檢、剖檢情況糞檢法沒(méi)有或很少發(fā)現(xiàn)隱藏管狀線蟲(chóng)蟲(chóng)卵，剖檢法觀察不到球蟲(chóng)；小鼠線蟲(chóng)、絳蟲(chóng)的感染率，剖檢法比糞檢法稍高些；組別間均以第Ⅰ組最高，第Ⅱ組次之，第Ⅲ組最少，3組3種年齡間以20～25日齡為最低，28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大。

3分析與討論

3.1被檢小鼠4種蟲(chóng)體特性對(duì)檢測(cè)方法的影響

本次調(diào)查被檢小鼠腸道寄生蟲(chóng)有鐮形艾美球蟲(chóng)、隱藏管狀線蟲(chóng)、四翼無(wú)刺線蟲(chóng)和短小膜殼絳蟲(chóng)4種。它們均有一定的特性，了解這些特性有助于調(diào)查數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

3.1.1鐮形艾美球蟲(chóng)是原生動(dòng)物，在小鼠結(jié)腸或盲腸細(xì)胞內(nèi)形成合子后進(jìn)入腸道，隨小鼠糞便排出體外，卵囊大小為22.5×18.2 μm，感染7 d后通過(guò)糞檢方法檢測(cè)。

3.1.2隱藏管狀線蟲(chóng)是常見(jiàn)小鼠蟯蟲(chóng)，雌蟲(chóng)長(zhǎng)3.4～5.8 mm，雄蟲(chóng)較短，1.1～1.5 mm，肉眼可見(jiàn)。小鼠吞食蟲(chóng)卵后，在小腸中釋放出幼蟲(chóng)，24 h內(nèi)移行至盲腸。在盲腸停留10～11 d，發(fā)育成熟，交配。隨后雌蟲(chóng)移行至大腸，在小鼠會(huì)陰皮膚和毛上產(chǎn)卵后離開(kāi)宿主，糞便中不一定有蟲(chóng)卵，感染13～15 d后通過(guò)剖檢方法檢測(cè)。

3.1.3四翼無(wú)刺線蟲(chóng)是常見(jiàn)的小鼠的另一種蟯蟲(chóng)，雌蟲(chóng)體長(zhǎng)2.6～4.7 mm，雄蟲(chóng)稍短，頸部翼膜發(fā)達(dá)；蟲(chóng)卵呈紡錘狀，殼薄，大小為90×41 μm。感染23～25 d后通過(guò)糞檢或剖檢方法檢測(cè)。

3.1.4短小膜殼絳蟲(chóng)俗名侏儒絳蟲(chóng)，是已知惟一可有直接生活史，也可有間接生活史。成蟲(chóng)長(zhǎng)度可由7～100 mm變化不定。平均長(zhǎng)20～40 mm，寬1 mm。頭節(jié)球狀，長(zhǎng)有4個(gè)吸盤(pán)。蟲(chóng)卵大小為50～55×37～47 μm。卵圓形，卵殼薄而無(wú)色。卵內(nèi)胚胎球形，壁薄。每極有一節(jié)突，從此長(zhǎng)出6根細(xì)極絲。六鉤蚴具3對(duì)小鉤。11～16 d后通過(guò)糞檢或剖檢方法檢測(cè)。

3.2實(shí)驗(yàn)小鼠等級(jí)區(qū)分根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［7］規(guī)定，在實(shí)驗(yàn)小鼠的等級(jí)分類(lèi)中取消普通級(jí)，而分為清潔級(jí)、無(wú)特定病原體級(jí)和無(wú)菌級(jí)。清潔級(jí)小鼠中必須排除體外寄生蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)和全部蠕蟲(chóng)感染。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)南昌3個(gè)動(dòng)物房小鼠均有球蟲(chóng)、線蟲(chóng)及絳蟲(chóng)感染，作為清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)小鼠尚需加強(qiáng)管理，以控制實(shí)驗(yàn)小鼠寄生蟲(chóng)感染。

3.3小鼠感染寄生蟲(chóng)的原因及預(yù)防實(shí)驗(yàn)小鼠飼養(yǎng)在窄小的籠具中，排泄物和污濁的空氣易造成呼吸道、消化道疾病的傳播；物質(zhì)條件的低劣、食物供應(yīng)不穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)鼠體質(zhì)下降，抵抗力降低。小鼠身體素質(zhì)下降及實(shí)驗(yàn)小鼠管理不當(dāng)?shù)奶攸c(diǎn)，是小鼠感染寄生蟲(chóng)的主要原因。建議籠養(yǎng)的小鼠，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，合理安排換窩時(shí)間，加強(qiáng)墊料消毒管理，減少感染。有條件的可通過(guò)生物凈化手段引進(jìn)清潔級(jí)以上小鼠并在屏障系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng)和繁殖；定期對(duì)飲水、飼料、墊料及紫外燈、消毒鍋等的消毒效果進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)室內(nèi)落下菌及菌群進(jìn)行分析，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量。

［1］高誠(chéng)，邱新美.實(shí)驗(yàn)小鼠腸道寄生蟲(chóng)觀察［J］.上海農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，1990，02：125-130.

［2］李超，鄭安潔，張強(qiáng)，等.實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)寄生蟲(chóng)感染情況調(diào)查［J］.中國(guó)寄生蟲(chóng)病防治雜志，2005，02：163-164.

［3］孔繁瑤.家畜寄生蟲(chóng)學(xué)［M］.北京：農(nóng)業(yè)出版社，1981.

［4］徐彩云，張大維，邴國(guó)強(qiáng)，等.實(shí)驗(yàn)小動(dòng)物艾美球蟲(chóng)概述［J］.中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2004，05：66-68.

［5］馬超鋒，史柯，高庚渠，等.實(shí)驗(yàn)鼠類(lèi)腸道寄生蟲(chóng)調(diào)查與分析［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2008，35（02）：75-77.

［6］盧靜.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2010.

［7］中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)［S］.GB/TI4922.1-2001.

S852.71

B

0529-6005（2016）08-0117-03

2015-02-04

郭海寧（1991-），男，碩士生，從事特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)與疾病防治研究，E-mail：465440658@qq.com

劉立恒，E-mail：lihengliu0714@163.com