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    高含量痢菌凈溶液的制備

    2016-11-11 06:24:44侯美如高俊峰馮萬宇徐馨周慶民
    中國獸醫(yī)雜志 2016年8期
    關(guān)鍵詞:水楊酸鈉凈含量超純水

    侯美如,高俊峰,馮萬宇,徐馨,周慶民

    (黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所,黑龍江齊齊哈爾161006)

    高含量痢菌凈溶液的制備

    侯美如,高俊峰,馮萬宇,徐馨,周慶民

    (黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所,黑龍江齊齊哈爾161006)

    通過了解痢菌凈在不同溶劑及助溶劑的溶解情況,篩選并組合最佳溶劑,以制備高含量痢菌凈溶液,為臨床藥劑開發(fā)提供參考依據(jù)。運(yùn)用全波長掃描選取最適痢菌凈檢測(cè)波長,并建立痢菌凈含量檢測(cè)方法,測(cè)定不同溶劑及助溶劑對(duì)痢菌凈的最大溶解量,組合形成可溶解高含量痢菌凈溶液的混合溶劑。結(jié)果表明,痢菌凈在373.0 nm、368.0 nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm均有吸收峰,經(jīng)與其他所選溶劑及助溶劑全波長掃描圖譜比較,選取373為最適檢測(cè)吸收波長。建立的痢菌凈含量檢測(cè)方法在1.25~20 μg/mL濃度范圍內(nèi),吸收度與濃度呈良好的線性關(guān)系,R2=0.9992。不同溶劑及助溶劑中,單一溶劑或助溶劑對(duì)痢菌凈的溶解程度均較混合溶劑差,且以水楊酸鈉效果最好,但其在350.0~500.0 nm區(qū)間有較低的吸收峰,對(duì)運(yùn)用紫外分光光度法測(cè)定痢菌凈含量有一定的影響,2種混合溶劑均有較好的溶解效果,混合溶劑1溶解量最大,達(dá)54.37 mg/mL。為以后痢菌凈緩釋藥劑的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

    痢菌凈;溶劑;助溶劑;溶解

    1試驗(yàn)材料

    1.1儀器WT-1003H型電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);ZNCL-S自能恒溫磁力攪拌器(上海羌強(qiáng)儀器設(shè)備有限公司);PINE-TREE帕恩特標(biāo)準(zhǔn)試劑級(jí)超純水機(jī)(北京湘順源科技有限公司);UV-1900PC/UV-1901雙束紫外可見分光光度計(jì)(上海佑科儀器儀表有限公司)。

    1.2試劑水楊酸鈉、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、丙二醇、甘油、聚乙二醇及苯甲醇均為分析純。

    1.3對(duì)照品乙酰甲喹,中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所,批號(hào):H0111008,純度:99.6%。

    1.4樣品痢菌凈原粉,南通天辰藥業(yè)公司。

    2方法

    2.1痢菌凈全波長掃描取經(jīng)105℃干燥恒重的痢菌凈標(biāo)準(zhǔn)品用超純水制成20 μg/mL水溶液,以超純水為空白對(duì)照,置于1 cm石英吸收池中,用雙光束紫外分光光度計(jì)在200~500 nm波長間掃描,掃描間隔1.0 nm,繪制痢菌凈紫外吸收?qǐng)D譜,記錄最大吸收峰。

    2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制利用電子天平精密稱取痢菌凈標(biāo)準(zhǔn)品0.027 g,置于10 mL離心管中,加純水8.1 mL溶解,為母液備用。待完全溶解后,取36 μL痢菌凈母液加水6 mL即得濃度為20 μg/mL的痢菌凈溶液,并對(duì)其進(jìn)行2倍倍比稀釋分別得濃度為10、5、2.5、1.25 μg/mL痢菌凈溶液,于“2.1”試驗(yàn)結(jié)果中選取最大吸收峰時(shí)波長,進(jìn)行吸收度測(cè)定。

    2.3溶劑、助溶劑及混合溶劑全波長掃描溶劑:N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、丙二醇、甘油、聚乙二醇及苯甲醇分別配制成濃度為40%、20%、30%、25%、20%及1%溶液。

    助溶劑:取水楊酸鈉25 g,置于100 mL容量瓶中,加超純水溶解,待完全溶解后定容至刻度。

    混合溶劑1、2(專利申請(qǐng)中):量取混合溶劑50 mL加水定容至100 mL。

    以超純水為空白對(duì)照,將以上溶液分別置于1 cm石英吸收池中,用雙光束紫外分光光度計(jì)在200~500 nm波長間掃描,繪制各藥劑吸收?qǐng)D譜。

    2.4不同溶劑及助溶劑對(duì)痢菌凈的溶解程度

    分別按“2.3”試驗(yàn)配制不同溶劑、助溶劑及混合溶劑1、2的溶液100 mL,分別加入過量的痢菌凈于溶液中,使其達(dá)到飽和溶液,于室溫磁力攪拌72 h,靜置取上層清液,經(jīng)0.22 μm有機(jī)相濾膜過濾后,用紫外分光光度計(jì)于“2.1”試驗(yàn)中選定的最大吸收峰來測(cè)定痢菌凈在該溶劑、助溶劑或混合溶劑中的最大溶解量。

    3結(jié)果

    3.1痢菌凈全波長掃描由吸收光譜可知在373.0 nm、368.0 nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm等處均有最大吸收峰。

    3.2溶劑、助溶劑及混合溶劑全波長掃描由全波長掃描圖譜可以看出波長200~350 nm處痢菌凈與其他藥物均有吸收值,為避免其他藥物吸收對(duì)所建檢測(cè)方法的影響,選取373 nm為痢菌凈含量的檢測(cè)波長。

    3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將以上數(shù)據(jù)以痢菌凈濃度為X(μg/mL)軸,吸光值為Y(Abs)軸進(jìn)行回歸分析,其回歸曲線見圖1。

    圖1痢菌凈標(biāo)準(zhǔn)曲線

    回歸方程為:Y=0.0488XR2=0.9992

    試驗(yàn)結(jié)果表明,在1.25~20 μg/mL濃度范圍內(nèi),吸收度與濃度呈良好的線性關(guān)系。

    3.4不同溶劑及助溶劑對(duì)痢菌凈的溶解程度

    將檢測(cè)吸光度值代入“3.2”所得方程,其不同溶劑及助溶劑對(duì)痢菌凈的溶解量見表1。

    由表1可知,混合溶劑1對(duì)痢菌凈的溶解能力最大,為54.37 mg/mL,單一溶劑或助溶劑中水楊酸鈉溶解效果最好,可達(dá)35.69 mg/mL,但均較3種混合溶劑少。

    表1不同溶劑或助溶劑痢菌凈的最大溶解量

    4討論

    4.1對(duì)痢菌凈在200~500 nm全波長掃描結(jié)果,共有5個(gè)吸收峰,分別為373.0 nm、368.0 nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm,241.0 nm及254.0 nm較高,373.0 nm、368.0 nm及356.0 nm較低,均可單獨(dú)作為檢測(cè)波長使用,實(shí)踐中應(yīng)結(jié)合所配伍藥品的最大吸收峰來選取特定的檢測(cè)波長。

    4.2對(duì)常用溶劑、助溶劑及混合溶劑的全波長掃描,僅水楊酸鈉在350.0~500.0 nm區(qū)間有較低波峰的干擾,其他僅在200.0~350.0 nm區(qū)間處有吸收曲線且吸收數(shù)值較高,混合溶劑也未顯示在350.0~500.0 nm處有吸收峰。為此,373.0 nm將作為痢菌凈檢測(cè)時(shí)的最佳檢測(cè)波長。

    4.3本試驗(yàn)在選定的檢測(cè)波長373.0 nm繪制痢菌凈水溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線,其在1.25~20 μg/mL有良好的線性關(guān)系,R2為0.9992,在一定范圍內(nèi)吸光度值與濃度符合比爾-郎伯爾定律。

    4.4單一溶劑或助溶劑對(duì)痢菌凈的溶解程度均較混合溶劑差,且以水楊酸鈉效果最好,但其在350.0~500.0 nm區(qū)間有較低的吸收峰,對(duì)運(yùn)用紫外分光光度法測(cè)定痢菌凈含量有一定的影響,本試驗(yàn)同時(shí)也運(yùn)用40%乙醇溶液代替純水來配制不同溶劑及助溶劑,觀察對(duì)痢菌凈的溶解情況,其結(jié)果顯示,會(huì)大幅度提升痢菌凈的溶解量,二甲亞砜、苯甲醇、甘油、聚乙二醇、丙二醇、N,N-二甲基甲酰胺及水楊酸鈉可分別形成濃度為14.55 mg/mL、19.80 mg/mL、12.73 mg/mL、14.26 mg/mL、16.01 mg/mL、29.74 mg/mL及46.18 mg/mL。2種混合溶劑均有較好的溶解效果,混合溶劑1溶解量最大,達(dá)54.37 mg/mL。為以后痢菌凈緩釋藥劑的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

    [1]中國獸藥典委員會(huì).中華人民共和國獸藥規(guī)范(一部,1992年版).北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1-2,附16.

    [2]中國獸藥典委員會(huì)編.獸藥手冊(cè)(第3版).北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1992,96-97.

    [3]李榮譽(yù),王紅霞.利用助溶性輔料制備2%痢菌凈注射液的研究[J].河南畜牧獸醫(yī),1999,6(20):7-9.

    S859.7911H10N2O3),對(duì)牛、豬細(xì)菌性腸炎及豬短螺旋體引起的痢疾均有良好的療效[1-2],但因其水溶性較差[3],難以制備高濃度藥液,使其劑型較為單一,生物利用率低,影響了該藥物在臨床上的使用。為此,本試驗(yàn)選取多種常用溶劑、助溶劑及混合溶劑,為以后該藥劑高濃度溶液的配制提供參考依據(jù)。

    B

    0529-6005(2016)08-0113-03痢菌凈又名乙酰甲喹(C

    2015-05-20

    侯美如(1985-),女,助理研究員,碩士,主要從事動(dòng)物疫病防控工作,E-mail:houmeiru168@126.com

    周慶民,E-mai:ssyzqm@163.com

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