不同粒度的炙甘草煮散飲片中成分煎出率及干膏收率比較

王 蓓

（廣西民族大學(xué)醫(yī)院藥劑科，南寧530006）

不同粒度的炙甘草煮散飲片中成分煎出率及干膏收率比較

王 蓓

（廣西民族大學(xué)醫(yī)院藥劑科，南寧530006）

目的分析比較不同粒度的炙甘草煮散飲片中成分煎出率及干膏收率。方法將炙甘草粉碎制成4種不同粒度的煮散飲片，記為A、B、C、D組，將傳統(tǒng)炙甘草飲片作為對(duì)照組，對(duì)比各組甘草酸、甘草苷煎出情況及干膏收率。結(jié)果炙甘草煮散的甘草酸和甘草苷含量、干膏收率高于對(duì)照組，D組甘草苷、干膏收率高于其他組別，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；D組甘草酸煎出率評(píng)分、甘草苷煎出率評(píng)分和干膏收率評(píng)分的總分高于其他組別，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論1.19～2.36 mm粒度范圍的炙甘草煮散可達(dá)到較佳的藥材煎出效果，臨床上可根據(jù)這一結(jié)果篩選炙甘草煮散飲片的最佳粉碎粒度。

炙甘草；不同粒度；煎出率；炮制

《神農(nóng)本草經(jīng)》中指出“藥性有宜丸者，有宜散者，宜水者，宜膏煎者，并隨藥性，不得違越”［1］。中藥煮散是一種特殊類型的散劑，是指將中藥材粉碎成適宜粒度，與水共煎后去渣取汁服用的一種用藥形式。煮散不僅保留了傳統(tǒng)湯劑煮藥合煎、隨癥加減的優(yōu)點(diǎn)，亦具有散劑便于服用和攜帶的優(yōu)點(diǎn)。有關(guān)研究［2］指出，中藥材的粉碎粒度與藥物有效成分的浸出有關(guān)。本研究將炙甘草粉碎制成4種不同粒度的煮散飲片，分析比較不同粒度的炙甘草煮散飲片中成分煎出率及干膏收率，為制作炙甘草煮散時(shí)粒度的選擇提供參考，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器高效液相色譜儀；高速多功能粉碎機(jī)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱；Kromasil C18色譜柱；天平。

1.2 試藥炙甘草飲片；甘草酸銨；超純水；色譜乙腈；甘草苷；其他試劑均為分析純。

1.3 研究方法

1.3.1 煮散的制備將炙甘草飲片粉碎為4種不同粒度的煮散：⑴可通過50目篩而無法通過80目篩的粉末，粒度0.18～0.35 mm記為A組；⑵可通過30目篩而無法通過50目篩的粉末，粒度0.36～0.60 mm記為B組；⑶可通過16目篩而無法通過30目篩的粉末，粒度0.61～1.18 mm記為C組；⑷可通過8目篩而無法通過16目篩的粉末，粒度1.19～2.36 mm記為D組。同時(shí)將傳統(tǒng)飲片作為對(duì)照組。

1.3.2 水煎液的制備煮散飲片水煎液的制備：分別稱取10 g炙甘草煮散飲片共6份，置于容量為250 ml的燒瓶中，將3份樣品加入10倍量水煎煮30 min后去渣取汁，再將濾渣加入10倍量水分別煎煮30 min，過濾，將2次濾液合并濃縮，定容至50 ml。傳統(tǒng)飲片水煎液的制備：分別稱取10 g炙甘草飲片共6份，制備方法與煮散飲片水煎液的制備方法相同。

1.3.3 甘草苷與甘草酸的含量測(cè)定

1.3.3.1 供試品溶液的制備分別取4 ml煮散飲片水煎液和傳統(tǒng)飲片水煎液，以8000 r/min的速度進(jìn)行離心處理，10 min后取上層清液，并經(jīng)微孔（0.22 μm）濾膜過濾，得到待測(cè)樣品。

1.3.3.2 對(duì)照品溶液的制備取適量對(duì)照品甘草酸銨、甘草苷，依據(jù)甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207，加甲醇制作成濃度為1.92 mg/ml的甘草酸和1.02 mg/ml的甘草苷。

1.3.3.3 色譜條件以磷酸水（0.05%）為流動(dòng)相A；以乙腈為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為237 nm，流速為1.0 ml/ min，采用梯度洗脫，具體條件見表1。

表1 梯度洗脫條件

1.3.3.4 方法學(xué)考察⑴線性關(guān)系考察：取濃度為1.92 mg/ml的甘草酸和1.02 mg/ml的甘草苷的對(duì)照品溶液，以5、8、10、12、16、20 μl進(jìn)樣，縱坐標(biāo)為峰面積，橫坐標(biāo)為對(duì)照品含量，得回歸方程Y1（甘草酸）= 104.1X1+16.3，R2=0.9895；Y2（甘草苷）=1288X2+ 2457.8，R2=0.9782。結(jié)果顯示，甘草酸在9.5～38.3 μg之間，甘草苷在5.0～20.6 μg之間，進(jìn)樣量和對(duì)照品峰面積具有良好的線性關(guān)系。⑵穩(wěn)定性試驗(yàn)：取供試品溶液每間隔4 h以10 μl進(jìn)樣，測(cè)定兩種成分的峰面積值，RSD值為0.52%、1.01%，提示24 h內(nèi)樣品中的成分含量穩(wěn)定。⑶精密度測(cè)試：取供試品溶液以5 μl連續(xù)6次進(jìn)樣，測(cè)定兩種成分的峰峰面積值，RSD值為0.95%、2.05%，提示儀器精密度良好。⑷重復(fù)性試驗(yàn)：取供試品溶液，分為6份，各以10 μl進(jìn)樣，結(jié)果RSD值為0.71%、2.06%，提示該方法具有良好的重復(fù)性。⑸加樣回收率試驗(yàn)：取6份1 ml已知含量的樣品溶液（甘草酸0.203 mg/ml，甘草苷0.138 mg/ml），分別加入0.2 ml的混合對(duì)照品溶液（甘草酸1.060 mg/ml，甘草苷0.643 mg/ ml），依據(jù)色譜條件測(cè)定并計(jì)算回收率。甘草酸和甘草苷的加樣回收情況見表2、表3，試驗(yàn)結(jié)果提示兩種物質(zhì)的RSD為2.45%、1.65%，平均加樣回收率為99.11%、98.36%，說明該方法符合含量測(cè)定要求，可靠性較高。

表2 甘草酸加樣回收情況

表3 甘草苷加樣回收情況

1.3.3.5 樣品含量測(cè)定將待測(cè)樣品分別精密吸取10 μl進(jìn)行測(cè)定，并代入回歸方程，算出甘草酸和甘草苷的含量。

1.3.3.6 干膏收率測(cè)定精密量取供試品溶液50 ml，置于已恒重的蒸發(fā)皿內(nèi)，采用水浴蒸干，行干燥處理，待其恒重后冷卻0.5 h，快速稱重，記錄干膏收率。

1.4 觀察指標(biāo)記錄各組煎煮30 min后甘草酸和甘草苷的含量、干膏收率，并采用加權(quán)評(píng)分方法評(píng)價(jià)甘草酸和甘草苷煎出率評(píng)分、干膏收率評(píng)分，甘草酸和甘草苷測(cè)定權(quán)重系數(shù)取0.3，干膏收率測(cè)定權(quán)重系數(shù)取0.4。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，各指標(biāo)間關(guān)系采用直線相關(guān)分析及多元線性回歸分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比各組間甘草酸和甘草苷含量、干膏收率炙甘草煮散的甘草酸和甘草苷含量、干膏收率高于對(duì)照組，D組甘草苷、干膏收率高于其他組別，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 對(duì)比各組間甘草酸和甘草苷含量、干膏收率（%）

2.2 對(duì)比各組間甘草酸和甘草苷煎出率評(píng)分、干膏收率評(píng)分D組總分高于其他組別，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表5。

表5 對(duì)比各組間甘草酸和甘草苷煎出率評(píng)分、干膏收率評(píng)分（分）

3 討論

中醫(yī)上甘草及其炮制品應(yīng)用較為廣泛，是國(guó)內(nèi)年銷量最大的一種中藥飲片，素有十方九草之稱［3］。炙甘草歸脾、肺、心經(jīng)，應(yīng)用于補(bǔ)益類藥方，具有補(bǔ)脾和胃、益氣的作用［4］。炙甘草煮散沿用歷史悠久，在治療多種疾病方面療效顯著，因此研究不同粒度的炙甘草煮散飲片中成分煎出率及干膏收率具有重要的意義。

中藥飲片成分復(fù)雜多樣，其療效是建立在各種成分綜合作用的基礎(chǔ)之上，采用色譜分析可提取出藥材的化學(xué)信息，得到相關(guān)藥材的共有峰圖譜，同時(shí)本研究選取炙甘草的指標(biāo)性成分和干膏收率評(píng)定炙甘草煮散的煎出效率，經(jīng)過一系列研究及分析發(fā)現(xiàn)，炙甘草煮散的甘草酸和甘草苷含量、干膏收率高于對(duì)照組，說明炙甘草煮散藥材使用率高于傳統(tǒng)飲片，臨床上可根據(jù)這一結(jié)果將灸甘草飲片制備成炙甘草煮散，可節(jié)省藥材，提高藥材有效成分的利用率。D組總分高于其他組別，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明1.19～2.36 mm粒度的灸甘草煮散有利于藥材有效成分的溶出，減少藥物的實(shí)際用量。秦凡非［5］等在其研究中顯示，粒度為1.19～2.36 mm組的藥材各成分總分為9.62分，高于其他粒度組，與本研究結(jié)果保持一致，進(jìn)一步說明炙甘草煮散飲片粒度在1.19～2.36 mm之間較為適宜。

綜上所述，1.19～2.36 mm粒度范圍的炙甘草煮散可達(dá)到較佳的藥材煎出效果，臨床上可根據(jù)這一結(jié)果篩選炙甘草煮散飲片的最佳粉碎粒度。

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（本文編輯：楊杰 本文校對(duì)：王濤 收稿日期：2016-06-17）

Comparison on Components Decocting Rate and Dry Extract Yield of Zhigancao Boiled Powder in Pieces of Different Size

WANG Bei
Department of Pharmacy，The Hospital of Guangxi University for Nationalities，Nanning 530006，China

Objective To compare components decocting rate and dry extract yield of Zhigancao boiled powder in pieces of different size.Methods Licorice was crushed and made into 4 kinds of different sizes of boiled pieces.We remembered them as A，B，C and D group.Traditional moxibustion and licorice decoction pieces were considered as control group.The extraction conditions and the yield of dry extract were compared in each group.Results Zhigancao boiled powder of glycyrrhizic acid and liquiritin and yield of dry extract were higher than those of the control group，group D of liquiritin and dry extract yield were higher than those in the other groups，and the difference was statistically significant（P＜0.05）.The score of D group，the score of the rate of extraction of the acid，the ratio of the extract rate and the yield of dry extract were higher than other groups，and the difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion 1.19～2.36mm size range of moxibustion and licorice decoction can achieve a better effect of medicinal herbs decoction，and the optimal size of the decoction can be selected according to the results.

Zhigancao boiled pieces；different size；decocting rate；processing

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.20.065

1672-2779（2016）-20-0142-03

楊杰 本文校對(duì)：王醊恩

2016-06-14）