熒光定量快檢產(chǎn)品—林可霉素熒光定量快速檢測試紙條

□ 范　煒 河北省動物衛(wèi)生監(jiān)督所

□ 徐天艦 赤峰市飼料質量監(jiān)督檢驗站

□ 李楠 熊雅婷 北京維德維康生物技術有限公司

熒光定量快檢產(chǎn)品—林可霉素熒光定量快速檢測試紙條

□ 范煒 河北省動物衛(wèi)生監(jiān)督所

□ 徐天艦 赤峰市飼料質量監(jiān)督檢驗站

□ 李楠 熊雅婷 北京維德維康生物技術有限公司

林可霉素（Lincomycin）屬于林可胺類抗生素，主要用鏈霉菌發(fā)酵得到，對革蘭氏陽性菌有較強抗菌作用，對支原體也有抑制作用。林可霉素對敏感人群副作用較強，可引起消化道反應，如惡心、嘔吐等，還可導致過敏反應，如皮疹、蕁麻疹、多形性紅斑等。該藥物常作為飼料添加劑，預防動物疾病，不規(guī)范用藥可導致在動物組織、動物產(chǎn)品以及乳品中殘留，不僅影響動物性產(chǎn)品的加工生產(chǎn)，而且還會嚴重影響消費者的身體健康。農(nóng)業(yè)部頒布的《動物性食品中獸藥最高殘留限量》（235號公告）規(guī)定了林可霉素在牛奶中的最大殘留限量為150μg/kg。針對林可霉素的定量測定國際通用方法為采用儀器方法，儀器方法靈敏度高，但是操作復雜，費用昂貴，需要專門的技術人員進行操作，不宜推廣。因此，急需建立一類準確、快速、簡便的林可霉素檢測方法。近幾年，雖然膠體金免疫層析技術已經(jīng)誕生，但由于膠體金標記抗體檢測信號的局限性，限制了其方法學的靈敏度。熒光定量檢測系統(tǒng)由于簡單快速、即時定量，從而作為一項新的檢測方法嶄露頭角。

圖1　標準曲線

表1　林可霉素三種不同快速檢測產(chǎn)品參數(shù)比較

方法優(yōu)勢

林可霉素熒光定量試紙條是北京維德維康生物技術有限公司自主研制出的熒光定量檢測產(chǎn)品之一，根據(jù)標準曲線對樣品中林可霉素含量進行定量檢測，通過建立標準曲線可知，其IC50=28，線性定量范圍：20～80ppb，檢測限（LOD）為7.8ppb，定量限（LOQ）為20.7ppb。

其標準曲線如圖1所示。

將林可霉素熒光定量檢測卡與已有的林可霉素膠體金檢測卡、試劑盒等產(chǎn)品進行對比，比較其各項指標參數(shù)，結果見表1。通過比較發(fā)現(xiàn)，熒光定量檢測卡彌補了膠體金無法進行定量檢測的不足，在標準曲線內可以進行定量檢測，同時具備了較高的靈敏度，為其檢測準確度提供了保障。此外，與試劑盒相比，熒光定量檢測卡達到了相同檢出限水平，同時，在進行樣品前處理時無需稀釋處理，使操作變得更便捷。相比之下，熒光定量檢測卡綜合了高靈敏度定量檢測性能，同時又具備快捷的操作能力，具有顯著優(yōu)勢。

方法確證

基于熒光定量檢測卡的各項參數(shù)，再結合實際樣品檢測，對檢測時間、回收率、精確度等進行對比驗證及方法確證。

檢測時間為檢測前將檢測卡在50℃下孵育3min，加樣10min后在檢測配套的便攜式儀器內讀數(shù)，即可得出待檢樣品中藥物的含量值。對于回收率和精確度的測量需分別在20種待測樣品（包括不同地域不同批次）中添加不同藥物濃度，并驗證其回收率及精確度，結果見表2。

由表2可知，熒光定量檢測卡的回收率和精確度均達到較好水平。

為了證明熒光定量檢測卡的實際應用情況，分別將空白樣品以及添加不同藥物濃度的樣品進行儀器方法驗證。根據(jù)SN/T 2218-2008《進出口動物源食品中林可酰胺類藥物殘留量檢測方法液相色譜-質譜/質譜法》中所述的檢測方法，選取HPLC-MS檢測作為驗證方法，比較兩種檢測方法的檢測結果及回收率，結果如表3所示。

由表3所示，熒光定量檢測卡的檢測結果與儀器檢測水平一致，當藥物添加濃度達到40ppb時，熒光定量檢測卡的回收率甚至超過HPLC-MS檢測結果。說明熒光定量檢測卡能夠對藥物殘留進行定量準確檢測。

相較于儀器方法的復雜操作和昂貴儀器，熒光定量檢測卡只需簡單處理樣品，檢測成本低、檢測速度快、準確度高，對保障食品安全、實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測具有重要意義。

表2　回收率與精確度數(shù)據(jù)統(tǒng)計

表3　熒光定量檢測卡與HPLC-MS檢測結果對比

討論

北京維德維康生物技術有限公司自主研發(fā)的熒光定量檢測系統(tǒng)有效地解決了膠體金等快檢方法信號局限性的問題，實現(xiàn)了食品中農(nóng)藥獸藥殘留、非法添加物、霉菌毒素以及污染物等有害物質濃度的準確定量檢測。通過與膠體金試紙條、試劑盒以及儀器方法的對比分析，結果發(fā)現(xiàn)，熒光定量檢測卡的準確度、靈敏度以及實用性均達到了較高水平，具有顯著優(yōu)勢。熒光定量檢測系統(tǒng)憑借著簡單、快速、時效性強、準確度高，可定量檢測、操作便捷、低成本等優(yōu)勢，能夠最大限度地減少甚至避免各類食品安全事件帶來的傷害，有效提高食品安全監(jiān)管工作的效率，提升食品安全監(jiān)管系統(tǒng)的完善水平，對確保大流通環(huán)境下的食品安全起到積極作用，引領食品安全快速檢測技術發(fā)展的新方向。