血清AFP、AFU、GP73及SF聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌早期診斷中應用價值分析

宮英博，李立文

（1.中國醫(yī)科大學，遼寧沈陽110000；2.華北理工大學附屬醫(yī)院，河北唐山063015）

血清AFP、AFU、GP73及SF聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌早期診斷中應用價值分析

宮英博1，李立文2

（1.中國醫(yī)科大學，遼寧沈陽110000；2.華北理工大學附屬醫(yī)院，河北唐山063015）

目的 探討血清甲胎蛋白（AFP）、α-L-巖藻糖苷酶（AFU）、高爾基體蛋白73（GP73）及鐵蛋白（SF）四者聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌（PHC）早期診斷中的應用價值。方法 選取2014年10月至2015年10月華北理工大學附屬醫(yī)院收治的60例PHC患者作為觀察組，并選取同一時期我院收治的40例肝炎肝硬化患者作為疾病對照組，及40例健康志愿者作為健康對照組，采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）分別檢測三組入選者血清AFP、AFU、GP73及SF水平。結果 觀察組患者血清AFP、AFU、GP73及SF水平均顯著高于疾病對照組與健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；觀察組患者AFP、AFU、GP73、SF及四者聯(lián)合檢測的陽性率均顯著高于疾病對照組與健康對照組的檢測陽性率，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；在PHC的診斷中，AFP、AFU、GP73及SF四者聯(lián)合檢測的靈敏度為95.0%，顯著高于四者單獨檢測的靈敏度65.0%、73.3%、78.3%、61.7%，同時上述四指標聯(lián)合檢測的特異度為67.5%，顯著低于四者單獨檢測的靈敏度76.3%、77.5%、78.8%、83.8%，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；而四指標聯(lián)合檢測的準確度略高于單獨檢測，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論 血清AFP、AFU、GP73及SF檢測對原發(fā)性肝癌的診斷均具有較好的臨床價值，而AFP、AFU、GP73及SF四者聯(lián)合檢測能夠顯著提高檢測的靈敏度，對PHC的早期診斷具有重要的臨床意義。

甲胎蛋白； α-L-巖藻糖苷酶； 高爾基體蛋白73； 鐵蛋白； 原發(fā)性肝癌

原發(fā)性肝癌（PHC）是一種在世界范圍內常見的惡性腫瘤之一，又稱肝癌，具有惡性程度高、侵襲力強、死亡率高及嚴重影響患者生存質量等特點，其病死率居全球惡性腫瘤死亡率的第三位，而在我國更是高居第二位，僅次于肺癌［1-2］。此外，我國肝癌患者人數(shù)約占全球肝癌患者的55%，并且其病死率正逐年上升［3］。同時由于B超、CT、MRI及血管造影等常規(guī)臨床檢測不能有效檢出肝癌的早期病灶，絕大多數(shù)患者在確診時已屬肝癌中晚期，失去了最佳的手術治療時間，導致其臨床療效差，死亡率居高不下［4］。因此尋找一種有效的 PHC早期診斷手段成為提高臨床療效及延長患者生存期的有效手段之一，隨著免疫學技術及分子生物學的不斷進展，腫瘤標志物檢測在PHC早期診斷方面的研究發(fā)展十分迅速，單項指標檢測及多項指標聯(lián)合檢測在臨床上較為常用，但因單項指標檢測的局限性，眾多研究者更傾向于多項腫瘤標記物的聯(lián)合檢測，以達到及早發(fā)現(xiàn)、及早治療的目的。本研究通過檢測PHC患者、良性肝病患者與健康志愿者血清AFP、AFU、GP73及SF表達水平，探討 AFP、AFU、GP73及SF四者聯(lián)合檢測在PHC早期診斷中的價值。

材料和方法

1 一般資料

入選2014年10月至2015年10月華北理工大學附屬醫(yī)院（實習）收治的PHC患者60例作為觀察組，其中男41例，女19例，年齡31～76歲，平均年齡49.5±4.3歲；肝炎肝硬化患者40例作為疾病對照組，其中男27例，女13例，年齡30～74歲，平均年齡47.8±4.2歲；另選同時期于我院進行體檢的健康志愿者40例作為健康對照組，其中男26例，女14例，年齡29～77歲，平均年齡48.6±4.5歲。所有入選的原發(fā)性肝癌及肝炎肝硬化患者均符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》［5］與《慢性乙型肝炎防治指南》［6］中的相關診斷標準，同時排除其他嚴重心肝腎疾病及其他惡性腫瘤者；所有入選的健康志愿者均經健康檢查，顯示其心肝腎等重要器官均正常，且排除甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒感染。以上三組一般資料組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），組間可比。

2 方法

分別抽取三組待測者的清晨空腹靜脈血，分離獲得其血清，分別通過相應的ELISA試劑盒檢測三組的血清AFP、AFU、GP73及SF水平，其中APF、AFU、GP73及SFELISA試劑盒分別購自上海拜力生物科技有限公司、南京森貝伽生物科技有限公司、上海潤裕生物科技有限公司及上海信裕生物科技有限公司，上述試驗操作均嚴格按照試劑盒及相關儀器說明書進行。其中分別以AFP＞20μg/L，AFU＞40U/L，GP73＞150μg/L，SF男＞240μg/L、女＞150μg/L為陽性計算其陽性率。

3 統(tǒng)計學處理

研究數(shù)據均采用SPSS19.0軟件進行分析，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，不符合正態(tài)分布的計量資料則采用中位數(shù)表示，采用t檢驗或Fisher’s精確檢驗；計數(shù)資料以率表示，采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 三組血清AFP、AFU、GP73及SF表達水平

觀察組患者血清AFP、AFU、GP73及SF水平均顯著高于疾病對照組與健康對照組，且疾病對照組AFP、GP73水平顯著高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；而疾病對照組和健康對照組AFU、SF表達水平組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

2 三組各標志物單獨及聯(lián)合檢測陽性率

觀察組患者AFP、AFU、GP73及SF檢測的陽性率，疾病對照組上述各指標檢測的陽性率，健康對照組陽性率，觀察組、疾病對照組及健康對照組上述四指標聯(lián)合檢測的陽性率分別見表2。觀察組患者AFP、AFU、GP73、SF及四者聯(lián)合檢測的陽性率顯著高于疾病對照組與健康對照組上檢測的陽性率，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表2 三組血清標志物AFP、AFU、GP73、SF單獨及聯(lián)合檢測陽性率比較［n（%）］

3 各血清標志物對PHC的診斷價值分析

在PHC的診斷中，AFP檢測的靈敏度、特異度及準確度分別為65.0%（39/60）、76.3%（61/80）、71.4%（100/140）；AFU檢測的靈敏度、特異度及準確度分別為73.3%、77.5%、75.7%；GP73檢測的靈敏度、特異度及準確度分別為78.3%、78.8%、78.6%；SF檢測的靈敏度、特異度及準確度分別為61.7%、83.8%、74.3%；上述四種血清標志物聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度及準確度分別為95.0%、67.5%、79.3%。相比單獨檢測來說，四者聯(lián)合檢測的靈敏度有所提升，而特性度有所下降，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；而準確度稍微提升，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 各血清標志物單獨與聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度及準確度比較（%）

討 論

PHC作為一種病死率位居我國惡性腫瘤死亡率第二的惡性腫瘤，由于其早期無明顯的臨床癥狀及缺乏有效的診斷方法，大多數(shù)患者在確診時已為癌癥中晚期，喪失了最佳的手術治療時期。因此，尋找一種有效的PHC早期診斷日益成為廣大醫(yī)務人員關注的重點，其中血清腫瘤標志物的檢測由于其操作簡便、結果反映及時準確越來越受到大家的重視，同時多腫瘤標志物的聯(lián)合檢測能夠有效提高檢測的靈敏度，成為廣大研究者關注的焦點［7-8］。

甲胎蛋白（AFP）作為一種在胚胎時期由肝臟細胞及卵黃囊細胞合成的糖原蛋白，其會在機體肝臟受損時合成分泌增多，目前普遍認為AFP是一種原發(fā)性肝癌診斷中最常用的腫瘤標志物，但其檢測的靈敏度僅為40%～65%，仍存在著約為30%左右的假陰性和假陽性問題［9］。α-L-巖藻糖苷酶（AFU）則是一種廣泛存在于哺乳動物細胞及體液中的溶酶體酸性水解酶，在肝腎組織中的活性最高，主要參與分解含巖藻糖基的蛋白、糖脂等多種生物活性大分子，其在PHC患者血清中的含量明顯升高，雖然出現(xiàn)此現(xiàn)象的機理尚未研究透徹，但絕大多數(shù)的研究結果基本一致，因此AFU可作為PHC早期診斷的檢測指標之一［10-11］。而高爾基體蛋白73（GP73）作為一種高爾基體跨膜蛋白，在疾病狀態(tài)下會分泌至細胞表面及細胞內，國內外的相關研究證實在PHC患者血清中的GP73水平顯著上升［12-13］，因此其可作為一種PHC診斷的可靠標志物，有研究［14］表明，其診斷的靈敏性及特異性均要高于AFP。血清鐵蛋白（SF）作為一種含鐵離子水溶性蛋白，是機體內含鐵量最豐富的蛋白之一，主要分布于機體的肝臟、脾臟、骨髓等部位，對 PHC患者血清中的 SF水平進行測定，發(fā)現(xiàn)在PHC患者中血清SF的水平較正常組明顯升高。此外，肝炎及肝硬化患者由于其肝臟細胞受到一定程度的損傷，部分肝細胞死亡裂解，同時機體產生相應的應激反應，致使部分胞內物質及應激反應分泌產物釋放入血，使得肝炎及肝硬化患者的血清AFP、AFU、GP73及SF水平也有所升高。本研究采用通過檢查PHC患者、肝炎肝硬化患者與健康志愿者血清標志物AFP、AFU、GP73及SF水平，來探討其單獨及聯(lián)合檢測在PHC早期診斷中的價值。

本研究結果顯示，觀察組患者血清AFP、AFU、GP73及SF水平均顯著高于疾病對照組與健康對照組，且疾病對照組AFP、GP73水平顯著高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；觀察組患者AFP、AFU、GP73、SF及四者聯(lián)合檢測的陽性率均顯著高于疾病對照組與健康對照組的檢測陽性率，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。并在PHC診斷中，AFP、AFU、GP73及SF四者聯(lián)合檢測的靈敏度為95.0%顯著高于四者單獨檢測的靈敏度65.0%、73.3%、78.3%、61.7%，同時上述四指標聯(lián)合檢測的特異度為67.5%顯著低于四者單獨檢測的靈敏度76.3%、77.5%、78.8%、83.8%，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；而四指標聯(lián)合檢測的準確度略高于單獨檢測，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。此外，甲胎蛋白異質體3（AFP-L3）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）等血清腫瘤標志物指標在PHC診斷中也具有重要意義。有研究顯示，血清AFP、AFP-L3、GP73及GPC-3四者聯(lián)合檢測的靈敏度為86.0%，低于本研究的95.0%，而其聯(lián)合檢測的特異度為72.5%，略高于本研究的67.5%［15］。上述結果說明，PHC患者的血清AFP、AFU、GP73及SF水平均顯著高于肝炎肝硬化患者與健康人群，同時肝炎肝硬化患者AFP、GP73水平顯著高于健康人群，而AFU、SF水平無明顯差異，即說明，原發(fā)性肝癌的發(fā)生會導致患者血清AFP、AFU、GP73及 SF水平顯著上升。因此上述四種血清標志物檢測在PHC早期診斷中具有一定的價值，同時四指標聯(lián)合檢測能夠有效提高檢測的靈敏度，并且其檢測的準確度也稍有提高，相比于已有研究，本研究的聯(lián)合檢測指標更為靈敏，雖說特異性有所下降，但四者聯(lián)合檢測在PHC診斷中的具有更高的臨床價值。

綜上所述，血清AFP、AFU、GP73及SF檢測對原發(fā)性肝癌的診斷均具有較好的臨床價值，而AFP、AFU、GP73及SF四者聯(lián)合檢測能夠顯著提高檢測的靈敏度，且檢測的準確度也稍有提升，聯(lián)合檢測對PHC的早期診斷具有重要的臨床意義。

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［3］中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會，中國抗癌協(xié)會臨床腫瘤學協(xié)作委員會，中華醫(yī)學會肝病學分會肝癌學組.原發(fā)性肝癌規(guī)范化診治專家共識.臨床腫瘤學雜志，2009，14（3）：259-269.

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（潘子昂編輯）

Diagnostic Value of Serum AFP，AFU，GP73 and SF in Patientswith Primary Hepatocellular Carcinoma

GONG Ying-bo，LILi-wen
（China Medical University，Shenyang 110000，China）

Objective To explore the diagnostic value of serum AFP，AFU，GP73 and SF in patients with primary hepatocellular carcinoma（PHC）.Methods A total of 60 cases of PHC who were treated in Affiliated Hospital of North China University during October2014 to October2015 were selected as observation group，40 cases of liver cirrhosiswho were treated in the same period was selected asdisease control group，and 40 normal volunteerswere selected ashealthy control group.ELISA method was used to detect serum AFP，AFU，GP73 and SF.Results Serum AFP，AFU，GP73 and SF in observation group were significantly higher than that of disease control group and healthy control group（P＜0.05）.The positive rate of individual AFP，AFU，GP73，SF and 4-panel testwere significantly higherin observation group than that of disease control group and health control group（P＜0.05）.In terms of diagnosis of PHC，the sensitivity of 4-panel ofAFP，AFU，GP73 and SF was 95.0%，which was significantly higher than that of individural detection（65.0%，73.3%，78.3%，61.7%，respectively，P＜0.05）.And the specificity of 4-panel test was 67.5%，which was significantly lower than that of individual detection（76.3%，77.5%，78.8%，83.8%，respectively，P＜0.05）.But the accuracy of 4-panel test just slightly higher than that of individural detection（P＞0.05）.Conclusion Serum FP，AFU，GP73 and SF are valuable in diagnosis of PHC.4-panel test of serum FP，AFU，GP73 and SF can significantly increase the sensitivity of detection，whichisworthy of further clinical application.

AFP； AFU； GP73； SF； PHC

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.06.016

2016-02-25；

2016-03-14

李立文，副主任醫(yī)師。