香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性研究

楊溢爍，曾德永，劉　艷，張麗香，張　智

(東北林業(yè)大學林學院，哈爾濱　150040)

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香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性研究

楊溢爍，曾德永，劉艷，張麗香，張智

(東北林業(yè)大學林學院，哈爾濱150040)

目的：探究香菇多糖的體內(nèi)抗氧化活性。方法：以灌胃生理鹽水的小鼠為正常對照組，將香菇多糖藥物組分為低、中、高3種劑量組。小鼠在灌胃3w后，由眼眶取血，按照試劑盒要求測定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量。結(jié)果：香菇多糖可顯著提高小鼠血清中SOD和GSH-Px的活力，同時減少血清中MDA含量。結(jié)論：香菇多糖對小鼠體內(nèi)抗氧化活性的提高具有顯著作用。

香菇多糖；體內(nèi)；抗氧化活性

香菇(Lentinula edodes)屬口蘑科微香菇屬的真菌，內(nèi)含豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，既可作食用菌，也可作藥用菌[1,2]。現(xiàn)代醫(yī)學和藥理學研究表明，香菇多糖具有提高人體免疫力[3,4]、抗腫瘤[5-7]、降血壓、降血脂[8-10]等作用，在醫(yī)藥和食品領(lǐng)域都有很好的應用價值。目前與香菇多糖相關(guān)的研究多是關(guān)于香菇多糖的免疫功能，對香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性的研究較少。本試驗通過比較香菇多糖藥物組和正常對照組小鼠血清中的多種抗氧化酶活性及含量，對香菇多糖的體內(nèi)抗氧化能力進行探討，為香菇多糖的進一步開發(fā)提供科學依據(jù)。

1　材料與方法

1.1原料

香菇：森王東北香菇，黑龍江省北珍綠色食品有限公司。

香菇多糖的制備方法：干香菇粉碎，加入適量水及復合酶(纖維素酶與木瓜蛋白酶等比例)，在55℃下提取1.5h后離心(3 000r/min，10min)取上清液，Sevag試劑脫蛋白，得到香菇粗多糖提取液，將粗提液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/3，醇沉、離心、沉淀、干燥后得到香菇粗多糖，按照劑量要求配置相應劑量的香菇多糖溶液[11-13]。

1.2試劑

無水乙醇、葡萄糖、苯酚、濃硫酸、三氯甲烷、正丁醇等(均為分析純)；超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒，南京建成生物工程研究所。

1.3實驗動物

小白鼠，雄性，體重(20±2)g，購于黑龍江中醫(yī)藥大學。

1.4儀器與設(shè)備

DHG-9030A電熱恒溫鼓風干燥箱，上海一恒科技有限公司；JH-722s可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司；RE-85Z旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海青浦滬西儀器廠；AL204電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；HWSY21-K4型電熱恒溫水浴鍋，北京市長風儀器儀表公司。

1.5香菇多糖(Len)體內(nèi)抗氧化活性試驗

1.5.1實驗動物灌胃及取樣將適應喂養(yǎng)后的小鼠隨機分成4組：(1)普通對照組NG(0.9%生理鹽水，0.2mL/d)；(2)Len低劑量組(1 000mg/kg，0.2mL/d)；(3)Len中劑量組(1 800mg/kg，0.2mL/d)；(4)Len高劑量組(2500mg/kg，0.2mL/d)。每組10只，灌胃3w，最后1d空腹過夜，第2d稱重，眼眶采血，低溫離心分離血清(3 000r/min，10min)[14-16]。

1.5.2檢測方法在小鼠灌胃過程中，每7d對小鼠體質(zhì)量進行一次測定，在最后一次灌胃空腹過夜后，對各組小鼠進行眼眶采血并低溫分離血清，按各試劑盒的測定要求測定小鼠血清中MDA含量、SOD及GSH-Px活力。

2　結(jié)果與分析

2.1不同劑量香菇多糖對小鼠體質(zhì)量的影響

小鼠的體質(zhì)量變化在一定程度上反映了小鼠的生長發(fā)育情況。由表1可以發(fā)現(xiàn)，隨著灌胃天數(shù)的增加，各組小鼠的體質(zhì)量都在不斷增加。將香菇多糖組的小鼠體質(zhì)量與普通對照組比較，并無顯著差異(P>0.05)，這說明香菇多糖并不影響小鼠的體質(zhì)量，即不影響小鼠的正常生長發(fā)育。

2.2不同劑量香菇多糖對小鼠血清SOD、GSH-Px、MDA的影響

將不同劑量的香菇多糖組與普通對照組相比較可以發(fā)現(xiàn)，小鼠在連續(xù)灌胃香菇多糖3w后，血清中的SOD和GSH-Px活力均有顯著的提高，MDA含量顯著減少。MDA是脂質(zhì)過氧化過程中的代謝產(chǎn)物，其含量間接反映了自由基對機體造成的損傷程度，MDA含量高則表明機體清除自由基的能力較弱，易受到較為嚴重的自由基攻擊[17，18]。由表2數(shù)據(jù)可得，灌胃不同劑量的香菇多糖都可以顯著或極顯著降低小鼠血清中的MDA含量，表明Len能夠顯著或極顯著地抑制小鼠體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化過程，降低自由基對機體的損傷程度。

表1　不同劑量香菇多糖對小鼠體質(zhì)量的影響

表2　不同劑量香菇多糖對小鼠血清MDA、SOD活力、GSH-Px活力的影響

注：*與普通對照組比較，有顯著差異(P<0.05)；**與普通對照組比較，有極顯著差異(P<0.01)。

SOD能夠調(diào)節(jié)機體的氧化與抗氧化平衡，SOD活性高則機體清除氧自由基的能力高[19-21]。由表2數(shù)據(jù)可得，灌胃不同劑量的香菇多糖后，小鼠血清中的SOD活性都有極顯著的提高，表明香菇多糖可以有效降低體內(nèi)氧自由基，調(diào)節(jié)氧化與抗氧化的平衡。

GSH-Px屬于過氧化物分解酶，可以分解機體內(nèi)的過氧化物以及脂質(zhì)氧化過程中產(chǎn)生的氫過氧化物，降低自由基以及脂質(zhì)過氧化對機體的傷害。由表2數(shù)據(jù)得，不同劑量的香菇多糖均能極顯著地提高小鼠血清中的GSH-Px活性，這表明香菇多糖可以有效分解過氧化物，降低自由基對機體組織的傷害。

隨著香菇多糖劑量的增加，SOD和GSH-Px活力的提高幅度與MDA含量的降低幅度均增加。Len高劑量組較其他香菇多糖組小鼠血清中MDA含量降幅更大，SOD與GSH-Px活力提高幅度更大，能使小鼠血清MDA含量降低26.7%、SOD活力增加21.8%、GSH-Px活力增加41.4%，這表明高劑量的香菇多糖具有更好的體內(nèi)抗氧化活性。

3　結(jié)論

由香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性研究結(jié)果可知，香菇多糖能夠顯著提高血清中SOD和GSH-Px的活力，同時降低MDA含量，表明香菇多糖具有很好的清除體內(nèi)自由基的作用，能夠有效降低自由基氧化對機體的損傷，起到抗氧化的功能。因此，香菇多糖具有良好的體內(nèi)抗氧化作用，并隨著香菇多糖劑量的增加，抗氧化能力越好，這為今后香菇多糖相關(guān)產(chǎn)品的的開發(fā)利用提供了一定的科學依據(jù)?！?/p>

[1]張松.食用菌學[M].廣州：華南理工大學出版社，2000：153.

[2]何貴香，宋文明，謝景文，等.三種食用菌營養(yǎng)成分的含量測定[J].食藥用菌，2013，21(3)：156-157.

[3]閆慧丹.新型香菇多糖的純化、鑒定與免疫活性研究[D].廣州：華南理工大學，2013.

[4]WONGKH，LAICKM，CHEUNGPCK.Immunomodulatoryactivitiesofmushroomsclerotialpolysaccharides[J].FoodHydrocolloids，2011，25(2)：150-158.

[5]李雪，李鵬飛，李曉東，等.5種長白山野生食用菌的抗腫瘤活性研究[J].食品機械，2015，31(1)：152-154.

[6]陳開旭，王為蘭，劉軍.食用菌活性成分抗腫瘤作用的研究進展[J].生物技術(shù)通報，2015，31(3)：35-42.

[7]ChenHuo-liang，JuYing，LiJun-jie，etal.AntioxidantactivitiesofpolysaccharidesfromLentinusedodesandtheirsignificancefordiseaseprevention[J].InternationalJournalofBiologicalMacromolecules，2012，50(1)：214-218.

[8]王衛(wèi)國.真菌多糖藥理作用及其提取、純化研究進展[J].河南工業(yè)大學學報，2008，29(2)：87-92.

[9]楊文建，趙立艷，安辛欣，等.食用菌營養(yǎng)與保健功能研究進展[J].食藥用菌，2011，19(1)：15-18.

[10]金茜，朱彬，羅宿星，等.食用菌多糖生物活性的研究進展[J].遵義師范學院學報，2010，12(4)：75-77.

[11]王廣慧，戴明，魏雅冬.香菇多糖的提取工藝研究[J].食品科技，2013，38(1)：192-194.

[12]陳君琛，賴譜富，周學化，等.響應面法優(yōu)化大球蓋菇粗多糖提取工藝[J].食品科學，2012，33(2)：139-142.

[13]陳煉紅，等.響應面法優(yōu)化松茸多糖酶法提取工藝及其體外抗氧化性分析[J].食品科學，2014，35(16)：23-28.

[14]鄒磊，甄少波，宋楊.食品抗氧化能力檢測方法的研究進展[J].食品工業(yè)科技，2011，32(6)：463-465.

[15]Sun，Hanju，etal.Purification，chemicalcompositionandinvitroantioxidantactivityoftwoprotein-boundpolysaccharidesfromrapeseedmeal[J].FoodScienceandBiotechnology，2009，18(6)：1386-1391.

[16]羅麗萍，高蔭榆，洪雪娥，等.薯蔓黃酮和多糖體內(nèi)抗氧化作用研究[J].食品科學，2005，26(8)：408-410.

[17]丁紅秀，高蔭榆，晁紅娟，等.毛竹葉多糖體內(nèi)抗氧化作用研究[J].食品科學，2008，29(5)：427-430..

[18]林海生，曹文紅，盧虹玉，等.牡蠣蛋白酶解物改善小鼠學習記憶能力及其體內(nèi)抗氧化活性的研究[J].食品科技，2013，38(4)：37-41.

[19]弓建紅，等.白扁豆多糖對正常小鼠體內(nèi)抗氧化和免疫實驗研究[J].食品工業(yè)科技，2010，31(9)：337-338.

[20]石娟，張曼莉，孫漢巨，等.黑米花青素體內(nèi)抗氧化研究[J].食品工業(yè)科技，2015，36(5)：348-351.

[21]武永福，張寧.黃花菜粗多糖抗氧化活性研究[J].中國食物與營養(yǎng)，2014，20(11)：60-62.

(責任編輯李婷婷)

Study on Antioxidation Effect of Lentinan in Vivo

YANG Yi-shuo，ZENG De-yong，LIU Yan，ZHANG Li-xiang，ZHANG Zhi(College of Forestry，Northeast Forestry University，Harbin 150040，China)

lentinan；vivo；antioxidanteffect

東北林業(yè)大學本科生創(chuàng)新性實驗項目(2014年國家級201410225053)。

楊溢爍(1994—)，女，本科生，研究方向：食品科學與工程。

FoodandNutritioninChina