TRIM24在膀胱尿路上皮癌中的表達及意義

張秀偉，徐慧慧，薛東煒

（中國醫(yī)科大學附屬第四醫(yī)院 1.病理科；2.泌尿外科，沈陽 110032）

·論著·

TRIM24在膀胱尿路上皮癌中的表達及意義

張秀偉1，徐慧慧1，薛東煒2

（中國醫(yī)科大學附屬第四醫(yī)院 1.病理科；2.泌尿外科，沈陽 110032）

目的檢測轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子1α（TRIM24）在膀胱尿路上皮癌中的表達及其與臨床病理因素間的關(guān)系。方法應用免疫組化方法檢測膀胱尿路上皮癌中TRIM24的蛋白表達情況。結(jié)果TRIM24在41.7%（30/72）的膀胱尿路上皮癌中陽性表達，且其過表達與腫瘤T分期（P=0.029）和分化（P=0.043）相關(guān)。結(jié)論TRIM24在膀胱尿路上皮癌中過表達，且其過表達與腫瘤分期、分化相關(guān)，可能成為治療人類膀胱尿路上皮癌的候選靶基因。

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子1α；膀胱尿路上皮癌；免疫組織化學

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子1α（tripartite motif-containing 24，TRIM24）又名TIF 1α（transcription intermediaryfactor 1α），是TIF1s家族成員，其參與基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)，作為維甲酸信號共同調(diào)節(jié)因子被識別［1］。近年來，越來越多的研究表明TRIM24與某些人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其表達上調(diào)提示預后不良且與化療耐藥相關(guān)。迄今為止，TRIM24在人類膀胱癌中未見報道，其生物學作用尚不清楚。本研究應用免疫組化方法檢測TRIM24蛋白在72例膀胱尿路上皮癌中表達情況，并分析其表達與臨床病理因素的相關(guān)性，對于闡明膀胱尿路上皮癌的演進機制，及尋求早期診斷分子標志物和生物治療的分子靶點奠定理論基礎。

1　材料與方法

1.1組織來源

收集2010年至2011年于中國醫(yī)科大學附屬第四醫(yī)院行外科手術(shù)切除的原發(fā)性膀胱尿路上皮癌72例及相應癌旁膀胱組織。標本均經(jīng)4%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，HE常規(guī)染色后明確診斷。患者術(shù)前均未接受放化療。根據(jù)2006 WHO分類標準［2］進行分期。其中男51例，女21例，平均年齡59歲。

1.2免疫組織化學染色

將石蠟組織塊切成4 μm厚切片，脫蠟，脫水，按S-P法和抗體說明操作。兔抗人多克隆TRIM24抗體（1∶600，Proteintech，美國）4℃孵育過夜。以PBS代替一抗作為空白對照。結(jié)果判定：所有的樣本均經(jīng)過2位病理醫(yī)師進行評估，TRIM24免疫組化陽性信號定位于細胞核。將Rsf-1染色強度分為細胞核無著色（0），細胞核淡黃弱陽性（+），細胞核棕黃染色強陽性（++）。將細胞染色比例分為0%，＞0%～5%，＞5%～25%，＞25%～75%，＞75%～100%，并分別記為0～4分。將染色比例乘以染色強度得到表達分值，將得分＜4分記作TRIM24陰性，得分4～8分記作TRIM24陽性。免疫組化S-P劑盒及DAB顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3統(tǒng)計學分析

采用SPSS 11.5統(tǒng)計分析軟件，對TRIM24異常

表達和臨床病理因素的關(guān)系用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1TRIM24蛋白在膀胱尿路上皮癌組織中高表達

采用免疫組化方法研究了72例原發(fā)性膀胱尿路上皮癌和相應癌旁組織中TRIM24蛋白的表達情況，結(jié)果TRIM24蛋白定位于腫瘤細胞細胞核，在正常的膀胱上皮中呈陰性表達，而在膀胱尿路上皮癌組織中陽性率為41.7%（30/72）（圖1）。

圖1　TRIM 24在膀胱尿路上皮癌組織中高表達Fig.1　Overexpression pattern o f TRIM 24 protein in BUCC tissues

2.2TRIM24蛋白高表達與膀胱尿路上皮癌的浸潤深度和腫瘤分級相關(guān)

本研究分析了TRIM24陽性表達與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)TRIM24的表達上調(diào)與浸潤深度（T2～T4）（P=0.029）和高的腫瘤分級（高級別）相關(guān)（P=0.043），但與年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)，見表1。

3　討論

膀胱癌是泌尿生殖系第二高發(fā)的惡性腫瘤［3］，對人類健康造成嚴重危害。部分膀胱尿路上皮癌具有腫瘤穿過基底層或侵至肌層的侵襲特性［4］。臨床上，侵襲性膀胱癌的治療仍以外科手術(shù)切除為主，其5年腫瘤特異生存率為50%左右。盡管外科手術(shù)技術(shù)進步，近10年其生存率仍沒有顯著提高［5，6］。因此，探討潛在的分子靶點對膀胱移行細胞癌治療及預后有十分重要的意義。

TRIM24又名TIF 1α，是TIF1s家族成員，其參與基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)，作為維甲酸信號共同調(diào)節(jié)因子被識別［1］。TRIM24在正常胚胎干細胞中大量存在，隨著分化成熟，僅在生殖器等少數(shù)器官中存在［7］。近年來，越來越多的研究表明TRIM24與某些人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。TRIM24在急性粒細胞白血病、骨髓增殖綜合征、甲狀腺乳頭狀癌中存在過表達［8～10］；在乳腺癌中過表達，并與ER、PR密切相關(guān)，且是乳腺癌的一個不良預后指標［11］；非小細胞肺癌中TRIM24也存在過表達，并與腫瘤細胞的分化程度及P-TNM分期正相關(guān)［12］；也有研究［13，14］表明其與胃癌、膠質(zhì)瘤細胞的化療耐藥相關(guān)。盡管上述研究表明，TRIM24在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演了一個腫瘤癌基因的角色，但是也有研究［15］表明TRIM24在小鼠肝臟組織中又是一個抑癌基因。迄今為止，目前國內(nèi)尚無TRIM24在人類膀胱癌中的研究報道，本研究應用免疫組化方法檢測TRIM24蛋白在72例膀胱尿路上皮癌及癌旁組織中表達情況，并且分析了其表達與臨床病理因素的相關(guān)性。結(jié)果在正常的膀胱上皮中TRIM24呈陰性表達，在膀胱尿路上皮癌組織中TRIM24核陽性表達，其陽

性表達率為41.7%（30/72），進一步的分析發(fā)現(xiàn)TRIM24的陽性表達與膀胱尿路上皮癌的浸潤深度、高級別相關(guān)，這表明TRIM24與膀胱尿路上皮癌的惡性程度存在一定關(guān)系。

表1　72例膀胱尿路上皮癌中TRIM 24與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系Tab.1　Distribution of TRIM 24 status in BUCC according to clinicopathological characteristics

綜上所述，本研究證實了TRIM24在人膀胱尿路上皮癌中存在蛋白陽性表達，且TRIM24的陽性表達與膀胱癌的T分期、分化相關(guān)。進一步研究TRIM24在膀胱尿路上皮癌中的分子機制，使其可能成為治療該腫瘤的新靶點是今后努力的方向。

［1］Le Douarin B，Nielsen AL，Garnier JM，et al.A possible involvement of TIF1 alpha and TIF1 beta in the epigenetic control of transcription by nuclear receptors［J］.EMBO J，1996，15（23）：6701-6715.

［2］Eble JN，Sauter G，Jonathan I，et al.泌尿系統(tǒng)及男性生殖器官腫瘤病理學和遺傳學［M］.丁華野，李青，譯.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：93.

［3］Siegel R，Naishadham D，Jemal A.Cancer statistics，2012［J］.CA Cancer J Clin，2012，62（1）：10-29.

［4］Sapre N，Anderson PD，Costello AJ，et al.Gene-based urinary biomarkers for bladder cancer：an unfulfilled promise［J］.Urol Oncol，2014 32（1）：48-49.

［5］Sanchez-Carbayo M.Hypermethylation in bladder cancer：biological pathways and translational applications［J］.Tumour Biol，2012，33 （2）：347-361.

［6］Atkins CD，Wrzesinski SH.Radiotherapy plus chemotherapy in muscle-invasive bladder cancer［J］.N Engl J Med，2012，367（4）：380.

［7］Remboutsika E，Lutz Y，Gansmuller A，et al.The putative nuclear receptor mediator TIF1alpha is tightly associated with euchromatin ［J］.J Cell Sci，1999，112（Pt11）：1671-1683.

［8］Klugbauer S，Rabes HM.The transcription coactivator HTIF1 and a related protein are fused to the RET receptor tyrosine kinase in childhood papillary thyroid carcinomas［J］.Oncogene，1999，18 （30）：4388-4393.

［9］Zhong S，Delva L，Rachez C，et al.A RA-dependent，tumour-growth suppressive transcription complex is the target of the PML-RARalpha and T18 oncoproteins［J］.Nat Genet，1999，23（3）：287-295.

［10］Belloni E，Trubia M，Gasparini P，et al.8p11 myeloproliferative syndrome with a novel t（7；8）translocation leading to fusion of the FGFR1 and TIF1 genes［J］.Genes Chromosomes Cancer，2005，42（3）：320-325.

［11］Chambon M，Orsetti B，Berthe ML，et al.Prognostic significance of TRIM24/TIF-1 α gene expression in breast cancer［J］.Am J Pathol，2011，178（4）：1461-1469.

［12］Li H，Sun L，Tang Z，et al.Overexpression of TRIM24 correlates with tumor progression in non-small cell lung cancer［J］.PLoS One，2012，7（5）：e37657.

［13］Miao ZF，Wang ZN，Zhao TT，et al.TRIM24 is upregulated in human gastric cancer and promotes gastric cancer cell growth and chemoresistance［J］.Virchows Arch，2015 466（5）：525-532.

［14］Zhang LH，Yin AA，Cheng JX，et al.TRIM24 promotes glioma progression and enhances chemoresistance through activation of the PI3K/Aktsignaling pathway［J］.Oncogene，2015，34（5）：600-610.

［15］Herquel B，Ouararhni K，Khetchoumian K，et al.Transcription cofactors TRIM24，TRIM28，and TRIM33 associate to form regulatory complexes that suppressmurine hepatocellular carcinoma［J］. Proc Natl Acad Sci USA，2011，108（20）：8212-8217.

（編輯于溪）

Expression and Significanceof TRIM 24 in Uroepithelium CellCarcinoma ofBladder

ZHANGXiu-wei1，XUHui-hui1，XUEDong-wei2
（1.Department of Pathology，The Fourth Affiliated Hospital of China Medical University，Shenyang 110032，China；2.Department of Urology，The Fourth Affiliated HospitalofChinaMedicalUniversity，Shenyang 110032，China）

ObjectiveTo detect the expression of TRIM24 in uroepithelium cell carcinoma of bladder（BUCC）and analyze the relationship between its expression and clinical pathological factors.M ethods Immunohistochemical methods were employed to evaluate protein level of TRIM24 in BUCC.Results TRIM24 expressionwasobserved in thenuclear compartmentsof tumor cells，whilenormalepitheliaofbladder tissuesexhibited negative results.For 72 BUCC tissues，TRIM24 overexpression（score≥4）was observed in 41.6%of cases（30/72）.TRIM24 expression correlated with invasive depth（P=0.029）and patients with high TRIM24 expression had high grade of BUCC（P=0.043）.ConclusionThere was significantoverexpression of TRIM24 in BUCC，whichwascorrelatedwith poordifferentiation and high gradeofBUCC.Itmaybecomea candidate targetgene for the treatmentofhumanuroepithelium cellcarcinomaofbladder.

TRIM24；uroepithelium cell carcinoma of bladder；immunohistochemistry

R734.2

A

0258-4646（2016）04-0365-03

10.12007/j.issn.0258-4646.2016.04.019

張秀偉（1973-），女，主治醫(yī)師，博士. E-mail：xuejyun@126.com

2015-06-30

網(wǎng)絡出版時間：

網(wǎng)絡出版地址