阿勒泰沙棘葉中異鼠李素的含量測(cè)定

韓愛(ài)玲

【摘 要】 目的：探討阿勒泰沙棘葉中異鼠李素的含量測(cè)定方法。方法：高效液相色譜法。結(jié)果：異鼠李素在0.075～0.175μg（r=0.9991）范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為99.8%（RSD=0.025%） 。結(jié)論：所建立的方法合理可行，重復(fù)性好，可用于阿勒泰沙棘葉中異鼠李素的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】 沙棘葉；高效液相色譜法；異鼠李素

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2016）13-0021-02

Abstract：Objective To introduce altay hippop hae rhamnosides contained in different rat Li Su content determination method.Methods HPLC method. Results different rat Li Su mu in 0.075～0.075μg （r= 0.9991） scope inside sex good， the average recovery was 99.8% （RSD= 0.025%） . Conclusion The established method is reasonable and practical， good repeatability， can be used for quality control of altay hippophae rhamnosides.

Keywords：hippophae rhamnosides； High performance liquid chromatography； Different rat Li Su

沙棘，又稱醋柳、沙棗，為胡頹子科沙棘屬沙棘的成熟果實(shí)，既可藥用又可食用[1]。沙棘含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和大量生物活性物質(zhì)，在新疆最為寒冷的阿勒泰地區(qū)，在極端的氣候中，生長(zhǎng)在青河縣的沙棘最為出名。新疆沙棘具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，產(chǎn)品在全疆十分暢銷，并遠(yuǎn)銷全國(guó)各地。據(jù)測(cè)定，沙棘含有豐富的維生素，特別是維生素C的含量極高，每百克鮮果含量達(dá)1000～1600mg，是橘子、梨、蘋(píng)果的幾十倍乃至幾百倍，堪稱維生素之王。另外還含有亞油酸、蛋白質(zhì)、黃酮類物質(zhì)，是當(dāng)今高級(jí)食品和上乘飲料中不可缺少的原料[2-7]。為了有效控制阿勒泰沙棘葉中異鼠李素的含量，建立了阿勒泰沙棘葉中異鼠李素的含量測(cè)定方法，提高了阿勒泰沙棘葉產(chǎn)品質(zhì)量的可控性。

1 儀器與材料

1.1 儀器 島津LC-2010AHT高效液相色譜儀；梅特勒MS205DU電子天平。

1.2 材料 異鼠李素對(duì)照品（批號(hào)：110860-201109，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；阿勒泰沙棘葉樣品（均采自阿勒泰地區(qū)各縣市，均由巴哈爾古麗副主任藥師鑒定）；甲醇為色譜純；水為超純水；其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 色譜柱為Ulmimate C18（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-0.4%磷酸溶液（53∶47）為流動(dòng)相，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為370nm，柱溫30℃；進(jìn)樣體積為10μL。取空白溶劑做為陰性對(duì)照溶液，記錄色譜圖，結(jié)果表明空白溶劑對(duì)樣品測(cè)定無(wú)干擾，理論板數(shù)按異鼠李素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000[1]。

2.2 溶液配制

2.2.1 對(duì)照品溶液 取異鼠李素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL約含10μg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液 精密稱取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇50mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，減失的重量用乙醇補(bǔ)足，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25mL，置具塞錐形瓶中，加鹽酸3.5mL，在75℃水浴中加熱水解1h，立即冷卻，轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，用適量乙醇洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得[1-3]。

2.3 線性考察 分別精密吸取“2.2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液15、20、25、30、35μL注入液相色譜儀，按“2.1”的方法測(cè)定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，得沙棘葉中異鼠李素回歸方程為Y=38654X-54716 （R2=0.9984），結(jié)果表明異鼠李素進(jìn)樣量在0.075～0.175μg范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系。見(jiàn)表1。

2.4 精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果：異鼠李素峰面積的RSD=0.447%，表明儀器進(jìn)樣精密度良好。見(jiàn)表2。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取含量測(cè)定項(xiàng)下的6號(hào)供試品溶液，分別在室溫放置0、6、12、18、24h進(jìn)行測(cè)定異鼠李素的峰面積，結(jié)果：異鼠李素峰面積的RSD=0.895%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。見(jiàn)表3。

2.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取1號(hào)樣品6份，每份約0.25g，精密稱定，依次分別精密加入異鼠李素對(duì)照品溶液（755.37μg/mL）1mL，按擬定的方法測(cè)定異鼠李素的含量并計(jì)算回收率，結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確性良好。見(jiàn)表4。

2.7 樣品檢測(cè) 按“2.1”的方法對(duì)十批樣品的異鼠李素含量進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表5（每批樣品平行取2份樣）。10份樣品異鼠李素平均含量為0.38%。

3 討論

3.1 流動(dòng)相的選擇 分別以甲醇-0.4%磷酸溶液（58∶42），甲醇-0.4%磷酸溶液（60∶40），甲醇-0.4%磷酸溶液（55∶45），甲醇-0.4%磷酸溶液（54∶46）為流動(dòng)相考察，分離度與塔板數(shù)均不符合擬定實(shí)驗(yàn)要求。再以甲醇-0.4%磷酸溶液（53∶47）為流動(dòng)相，其它條件同上，異鼠李素對(duì)照品在21min左右出峰，峰面積為723782，理論板數(shù)4976>3000，供試品也在21min左右出峰，峰面積為1226601，且分離度為1.937>1.5，塔板數(shù)3867>3000，故確定以此流動(dòng)相比例進(jìn)行含量測(cè)定[1，8]。

3.2 通過(guò)10批沙棘葉樣品的含量測(cè)定，結(jié)果顯示：不同采集地、不同環(huán)境下的沙棘葉中異鼠李素含量有所差異，根據(jù)測(cè)試結(jié)果，暫定異鼠李素含量不得少于0.20%，有利于各沙棘葉加工生產(chǎn)企業(yè)較全面地監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量的整體穩(wěn)定性。為阿勒泰沙棘葉開(kāi)發(fā)利用提供質(zhì)量保證。

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（收稿日期：2016.05.05）