脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌及轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌中的表達及意義

王順民，張曉燕，張惠琴，杜國義

（會寧縣中醫(yī)院，甘肅 會寧 730700）

脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌及轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌中的表達及意義

王順民，張曉燕，張惠琴，杜國義

（會寧縣中醫(yī)院，甘肅 會寧 730700）

目的 檢測脂聯(lián)素在結(jié)直腸黏膜中的表達，探討其與結(jié)直腸癌、轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組織化學SP法檢測脂聯(lián)素在正常結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸癌原發(fā)灶、結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達。結(jié)果脂聯(lián)素在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤、結(jié)直腸癌原發(fā)灶中的表達依次下調(diào)，其在正常結(jié)直腸黏膜與腺瘤中的陽性表達率均明顯高于結(jié)直腸癌原發(fā)灶中的陽性表達率（P〈0.01）；在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中脂聯(lián)素的陽性表達率與結(jié)直腸癌原發(fā)灶中脂聯(lián)素的陽性表達率比較，無顯著性差異（P＞0.05）；脂聯(lián)素的陽性表達與結(jié)直腸癌是否有漿膜浸潤、分化程度有關(guān)（P〈0.05）；脂聯(lián)素表達陽性組的結(jié)直腸癌患者生存時間較脂聯(lián)素表達陰性組的患者長（P〈0.05）。結(jié)論 脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的過程中可能起到一定的作用，可作為判斷結(jié)直腸癌是否有漿膜浸潤及分化程度的一個分子生物學標志，為結(jié)直腸癌的藥物治療提供嶄新的思路。

脂聯(lián)素；結(jié)直腸癌；轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌

研究表明，肥胖是許多惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的獨立危險因素［1-3］。脂肪組織的炎癥變化可以使脂肪因子的產(chǎn)生發(fā)生失衡：具有抗炎作用的脂肪因子（如脂聯(lián)素）產(chǎn)生減少，這種失衡可能對腫瘤的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生重要的影響。國內(nèi)外研究提示，血清脂聯(lián)素可以抑制乳腺癌細胞和結(jié)腸癌細胞的增殖和轉(zhuǎn)移［4-5］。目前對于組織中脂聯(lián)素的表達與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的研究不多，本研究旨在通過研究組織中脂聯(lián)素在結(jié)腸癌及直腸癌中的表達情況，探討其在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移過程中的作用及其與預(yù)后的關(guān)系，從而為臨床尋找一個對結(jié)直腸癌診斷及預(yù)后的判斷有意義的指標，現(xiàn)介紹如下。

1　臨床資料和方法

1.1臨床資料

選取2003—2014年在甘肅省會寧縣中醫(yī)院行手術(shù)或病理確診的147例患者，其中腺瘤46例（結(jié)直腸息肉狀腺瘤20例，結(jié)直腸絨毛狀腺瘤26例），腺癌63例，癌旁正常黏膜38例（均取自結(jié)直腸癌標本距腫物10 cm以上的結(jié)直腸黏膜）。病理分型中，高分化型腺癌18例，中分化型腺癌25例，低分化型腺癌20例；管狀腺癌46例，絨毛狀腺癌9例，黏液腺癌8例；癌灶侵及漿膜48例，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例，伴肝轉(zhuǎn)移10例；男性86例，女性61例；年齡45～80歲，中位年齡55.8歲?；颊咭话阗Y料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。所有患者術(shù)前均未做化療、放療，有完整的臨床資料，其中52例結(jié)直腸癌患者有完整的隨訪資料。

1.2方法

脂聯(lián)素（Adiponectin）的單克隆抗體均購自英國Abeam公司，均按照試劑盒說明書進行操作。

1.3結(jié)果判定

脂聯(lián)素蛋白表達陽性的細胞，其細胞漿染成棕黃色顆粒，呈黃色時為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。每張切片隨機選取5個高倍（×400）視野觀察，計數(shù)100個細胞，陽性細胞≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，大于75%為4分。將二者積分相乘，結(jié)果0～1分為陰性（-），2～7分為陽性（+），8～12分為強陽性（++）。將陽性和強陽性歸為表達陽性組，計算陽性率。

1.4統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0軟件處理數(shù)據(jù)，率的比較采用χ2檢驗或四格表確切概率法，P〈0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1脂聯(lián)素在不同組織中的表達

脂聯(lián)素在正常結(jié)直腸黏膜、腺瘤、結(jié)腸癌原發(fā)灶中的陽性表達率依次下調(diào)，其在正常結(jié)直腸黏膜與腺瘤中的陽性表達率均明顯高于結(jié)直腸癌原發(fā)灶中的陽性表達率（P〈0.01），在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的陽性表達率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。進一步比較發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌原發(fā)灶與肝轉(zhuǎn)移灶及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的陽性表達率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表1　脂聯(lián)素在不同組織中的表達情況

2.2脂聯(lián)素表達與結(jié)直腸癌臨床特征的關(guān)系

脂聯(lián)素的陽性表達與患者的性別、年齡、腫瘤大小、Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肝臟轉(zhuǎn)移無關(guān)（P＞0.05），與是否有漿膜浸潤、分化程度有關(guān)（P＜0.05），見表2。

表2　脂聯(lián)素表達與結(jié)直腸癌臨床特征的關(guān)系

2.3脂聯(lián)素表達與生存期的關(guān)系

應(yīng)用Kaplan-Meier法對52例隨訪資料齊全的病例進行生存分析，繪出生存曲線，見圖1。由圖1可見，脂聯(lián)素表達陽性組的患者生存時間相對較長，隨著生存期的延長，兩曲線距離增大，經(jīng)Log-Rank檢驗，χ2值=8.969，P=0.003。

圖1　生存曲線

3　討論

3.1脂聯(lián)素的表達下調(diào)在結(jié)直腸癌的發(fā)展過程中可能起到一定作用

本研究顯示，脂聯(lián)素在正常結(jié)直腸黏膜中高表達，從正常結(jié)直腸黏膜到結(jié)直腸腺瘤再到結(jié)直腸癌，脂聯(lián)素的表達水平依次下調(diào)。脂聯(lián)素在正常結(jié)直腸黏膜與腺瘤中的陽性表達率均明顯高于結(jié)直腸癌原發(fā)灶中的陽性表達率（P〈0.01），表明脂聯(lián)素的表達下調(diào)在正常結(jié)直腸黏膜向腺瘤、結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能起到一定作用。而在結(jié)直腸癌伴肝轉(zhuǎn)移及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例中，脂聯(lián)素陽性表達率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。進一步比較結(jié)直腸癌原發(fā)灶與肝轉(zhuǎn)移灶及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中脂聯(lián)素的表達情況，同樣顯示脂聯(lián)素陽性表達率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。我們的研究結(jié)果提示，結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展以及轉(zhuǎn)移是個復(fù)雜的過程，是多基因、多因素參與的事件，一個基因不能說明其全部的機制。

3.2脂聯(lián)素與結(jié)直腸癌是否有漿膜浸潤及分化程度有關(guān)

本組資料顯示，脂聯(lián)素的陽性表達與患者的性別、年齡、腫瘤大小、Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肝臟轉(zhuǎn)移無關(guān)（P＞0.05），而與是否有漿膜浸潤、分化程度呈明顯相關(guān)性（P〈0.05），提示脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌中隨著腫瘤浸潤漿膜及惡性分化程度的增加而呈逐步下調(diào)的趨勢。由此可以看出，脂聯(lián)素可作為判斷結(jié)直腸癌是否有漿膜浸潤及分化程度的一個分子生物學標志。

3.3脂聯(lián)素的陽性表達與生存期有關(guān)

對本組資料進行生存分析發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素表達陽性組患者生存時間較脂聯(lián)素表達陰性組長（P〈0.05），說明脂聯(lián)素可抑制結(jié)直腸癌的發(fā)展，從而延長生存期。

4　結(jié)語

脂聯(lián)素是由脂肪細胞生成的30 kDa糖蛋白，含有244個氨基酸，可能在腫瘤的發(fā)生中具有保護作用，其主要通過脂聯(lián)素受體1（Adipo-R1）和脂聯(lián)素受體2（Adipo-R2）而激活受體和信號傳導(dǎo)通路的下游，或者通過抗血管生成等抑制腫瘤細胞的增殖和誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡［6］。體外細胞實驗［7］證實脂聯(lián)素可以通過抑制STAT3信號通路的激活來抑制白介素-6誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌細胞的增殖。外周血中脂聯(lián)素水平的降低與多種腫瘤的發(fā)病風險有關(guān)，如乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、甲狀腺癌［8-9］，國外文獻報道人體結(jié)腸癌組織脂聯(lián)素水平表達明顯下降，而結(jié)腸癌組織脂聯(lián)素水平與結(jié)腸癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期有關(guān)［10］。脂聯(lián)素可作為判斷結(jié)直腸癌患者預(yù)后及生存期的一項有意義的臨床指標，并為結(jié)直腸癌的藥物治療提供嶄新的思路和途徑。

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1671-1246（2016）16-0111-03