BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)采后灰霉病的影響及機(jī)理

龍清紅，高 梵，李曉安，金 鵬，鄭永華*（南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，江蘇 南京 210095）

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BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)采后灰霉病的影響及機(jī)理

龍清紅，高 梵，李曉安，金 鵬，鄭永華*
（南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，江蘇 南京 210095）

以‘巨峰’葡萄果實(shí)為實(shí)驗(yàn)材料，研究β-氨基丁酸（β-aminobutyric acid，BABA）處理對(duì)葡萄果實(shí)灰霉病、抗病相關(guān)酶活性和總酚含量的影響。葡萄果實(shí)先用75 mmol/L的BABA溶液處理后刺傷接種灰霉葡萄孢菌，然后轉(zhuǎn)入25 ℃貯藏60 h。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，BABA處理有效抑制了‘巨峰’葡萄果實(shí)的腐爛和病斑的擴(kuò)展；同時(shí)BABA處理還誘導(dǎo)了果實(shí)中幾丁質(zhì)酶、β-1，3葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶、4-香豆酸輔酶A連接酶和肉桂酸羥化酶等抗病相關(guān)酶活性以及總酚含量的提高。結(jié)果表明，BABA可誘導(dǎo)葡萄果實(shí)產(chǎn)生抗病性，從而減少灰霉病的發(fā)生。

葡萄果實(shí)；β-氨基丁酸；灰霉??；抗病相關(guān)酶；誘導(dǎo)抗病性

葡萄屬于漿果類果實(shí)，果實(shí)皮薄多汁，酸甜可口，營(yíng)養(yǎng)豐富［1］。但葡萄成熟于高溫多雨的夏季，采后易遭受灰霉葡萄孢等病原菌的侵染而發(fā)生腐腐爛，同時(shí)貯藏期間也易發(fā)生果梗變色和果粒脫落等現(xiàn)象［2］，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前國(guó)內(nèi)外主要采用冷藏結(jié)合SO2熏蒸技術(shù)對(duì)葡萄果實(shí)進(jìn)行長(zhǎng)期保鮮，但SO2處理易產(chǎn)生果實(shí)漂白和對(duì)人體健康可能造成傷害［3］，許多歐美國(guó)家逐漸限制SO2在葡萄采后保鮮中的應(yīng)用。因此，尋找安全、有效的葡萄果實(shí)采后保鮮方法顯得尤為必要。

β-氨基丁酸（β-aminobutyric acid，BABA）是一種具有多種生理活性的非蛋白質(zhì)氨基酸，它可誘導(dǎo)多種植物產(chǎn)生胼胝質(zhì)、活性氧和病程相關(guān)（pathogenesis related，PR）蛋白等抗性相關(guān)物質(zhì)，從而提高植物的抗病性［4-5］。已有研究表明，BABA處理可誘導(dǎo)辣椒［6］、馬鈴薯［7］和黃瓜［8］等多種作物對(duì)多種病害產(chǎn)生抗性。在采后果蔬方面的研究發(fā)現(xiàn)，BABA處理可誘導(dǎo)采后葡萄柚［9］、砂糖橘［10］和香蕉［11］等果實(shí)分別對(duì)綠霉病、青霉病和炭疽病菌等產(chǎn)生抵抗力；同時(shí)BABA處理誘導(dǎo)了采后蘋果中幾丁質(zhì)酶（chitinase，CHI）、β-1，3葡聚糖酶（β-1，3-glucanase，GLU）及苯丙氨酸解氨酶（phenylalnine ammonialyase，PAL）等抗病相關(guān)酶活性的提高［11］，誘導(dǎo)提高了采后芒果中PAL等防御酶的活性［13］，從而增強(qiáng)了這些果實(shí)的抗病性，有效減輕貯藏病害的發(fā)生。但有關(guān)BABA對(duì)葡萄果實(shí)抗病保鮮的作用的研究鮮見報(bào)道。為此，本實(shí)驗(yàn)以‘巨峰’葡萄果實(shí)為實(shí)驗(yàn)材料，研究了BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)灰霉病發(fā)生和抗病相關(guān)酶活性的影響，以探究BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)灰霉病的抑制作用及其可能機(jī)理，為BABA處理在葡萄果實(shí)采后保鮮中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與菌種

供試材料為‘巨峰’葡萄（Vitis vinifera L.×Vitis labrusca L.‘Kyoho'），采摘于江蘇省南京市江心洲葡萄園，采后立即運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。選擇無病害、無機(jī)械損傷、大小均勻、色澤統(tǒng)一和成熟度一致的果穗，攤晾去除田間熱后將葡萄果粒剪下。

灰霉病原菌（Botrytis cinerea）分離于腐爛的葡萄果實(shí)，經(jīng)鑒定后回接實(shí)驗(yàn)室，從發(fā)病的葡萄果實(shí)病健交界處再次分離純化，挑取單孢進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，接入到馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基試管斜面的培養(yǎng)基上，置于25 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 周，取出后置于4 ℃冰箱中保存待用。接種前，將斜面菌種活化2 周后用滅菌生理鹽水調(diào)整至1×105個(gè)/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 試劑與儀器

碳酸鈉、β-巰基乙醇、昆布多糖、3，5-二硝基水楊酸、二硫蘇糖醇、檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；過氧化氫、福林酚試劑 南京壽德試劑器材有限公司；氮藍(lán)四唑、核黃素、l-苯丙氨酸、L-蛋氨酸 上海瑞永生物科技有限公司；BABA、幾丁質(zhì)、p-香豆酸、反式肉桂酸 美國(guó)Sigma公司；丙酮、冰醋酸、三氯化鋁、無水乙醇、乙酸乙酯均為國(guó)產(chǎn)分析純。

GL-20G-H型冷凍離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠；UV-1600型分光光度計(jì) 上海美普達(dá)儀器有限公司；FA1104N電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 處理分組

將葡萄果粒隨機(jī)分成2 組。先用70%的酒精溶液擦拭果實(shí)表面需要接種的位置，然后用滅菌的移液槍槍頭在果實(shí)赤道部位刺尺寸深2 mm、直徑2 mm的孔，處理組用微量移液槍注入20 μL濃度為75 mmol/L的BABA溶液（在預(yù)實(shí)驗(yàn)中采用0、25、50、75、100 mmol/L的BABA處理葡萄果實(shí)，然后接種灰霉葡萄孢菌，發(fā)現(xiàn)75 mmol/L 的BABA處理抑制果實(shí)灰霉病的效果最好，故本實(shí)驗(yàn)采用此濃度研究相關(guān)機(jī)理），24 h后用微量移液槍向孔中注入15 μL預(yù)先配制好的濃度為1×105個(gè)/mL的灰霉葡萄孢子懸浮液。接種結(jié)束后將葡萄果粒分裝到塑料盒中，貯藏于室溫（25±1） ℃條件下60 h，每12 h觀察果粒的發(fā)病率和病斑直徑。同時(shí)取果實(shí)病斑外圍2～10 mm的果肉樣品，切碎混勻后用液氮速凍并置于-80 ℃保存，以測(cè)定其他指標(biāo)。每個(gè)處理選用350 個(gè)果粒，重復(fù)3 次。

1.3.2 發(fā)病率和病斑直徑的測(cè)定

病斑直徑用游標(biāo)卡尺測(cè)量果實(shí)病斑的直徑大小。葡萄接種處病斑直徑大于1 mm即為發(fā)病。

1.3.3 總酚和總黃酮含量的測(cè)定

總酚含量采用Folin-Ciocalteu法［14］測(cè)定，總黃酮含量測(cè)定參照Toor等［15］的方法，單位均為mg/kg（以鮮質(zhì)量計(jì)）。

1.3.4 活性氧代謝相關(guān)酶活性和H2O2含量的測(cè)定

過氧化氫酶（catalase，CAT）活性測(cè)定參照Cakmak等［16］的方法，以每分鐘在240 nm波長(zhǎng)處吸光度變化0.001 為1 個(gè)酶活性單位，單位為U/mg pro；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性測(cè)定參照Rao等［17］的方法，以抑制NBT光還原50%為1 個(gè)酶活性單位，單位為U/mg pro；抗壞血酸過氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）活性測(cè)定參照Amako等［18］的方法測(cè)定，以反應(yīng)溶液的吸光度在290 nm波長(zhǎng)處每分鐘變化0.001定義為1 個(gè)酶活性單位，單位為U/mg pro。H2O2含量測(cè)定參照Patterson等［19］的測(cè)定方法，單位為μmol/g（以鮮質(zhì)量計(jì)）。

1.3.5 抗病相關(guān)酶活性的測(cè)定

CHI活性參照Abeles等［20］的方法測(cè)定，稱取1.0 g果肉，加入5 mL pH 5.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液，冰浴條件下研磨，4 ℃、12 000×g離心20 min，取上清液測(cè)定酶活性，以每分鐘增加0.001光密度值所需要的酶量為1 個(gè)CHI活力單位，單位為U/mg pro；GLU活性參照Abeles等［20］的方法測(cè)定，以每小時(shí)生成1 mg葡萄糖為1 個(gè)GLU活力單位，結(jié)果以U/mg pro表示。

1.3.6 苯丙烷代謝相關(guān)酶活性的測(cè)定

PAL活性參照Assis等［21］的方法測(cè)定，略有改動(dòng)，以反應(yīng)液每小時(shí)在290 nm波長(zhǎng)處吸光度變化0.001為1 個(gè)酶活單位，結(jié)果用U/mg pro表示；4-香豆酸輔酶A連接酶（4-coumarate coenzyme A ligase，4-CL）活性測(cè)定參照Knobloch等［22］的方法測(cè)定，以333 nm波長(zhǎng)處每分鐘吸光度變化0.01為1 個(gè)酶活單位，結(jié)果以U/mg pro表示；肉桂酸4-羥化酶（cinnamate-4-hydroxylase，C4H）活性測(cè)定參照Lamb等［23］的方法測(cè)定，酶活性以反應(yīng)液在340 nm波長(zhǎng)處的吸光度每分鐘變化0.01為1 個(gè)酶活性單位，結(jié)果以U/mg pro表示。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Origin 8.5統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，用鄧肯氏多重比較方法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，5%為顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)發(fā)病率與病斑直徑的影響

圖1 BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)發(fā)病率（A）和病斑直徑（B）的影響Fig.1 Effects of BABA treatment on disease incidence （A） and lesion diameter （B） of grapes during storage

如圖1所示，葡萄果實(shí)在接種病菌12 h后即發(fā)病，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，葡萄果實(shí)的發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)，BABA處理能夠抑制接種葡萄果實(shí)的腐爛，在25 ℃條件下貯藏60 h后，BABA處理組果實(shí)發(fā)病率為88%（圖1A），顯著低于對(duì)照組的100%（P＜0.05）。葡萄果實(shí)接種病菌后，病斑直徑隨貯藏時(shí)間的推移逐漸增大，BABA處理可顯著抑制果實(shí)病斑的擴(kuò)展，在25 ℃條件下貯藏60 h后，BABA處理組的病斑直徑為6.17 cm（圖1B），顯著低于對(duì)照組的11.03 cm（P＜0.05）。

2.2 BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)總酚和總黃酮含量的影響

如圖2所示，總酚含量在貯藏期間出現(xiàn)先急劇上升后下降的趨勢(shì)，在12 h時(shí)出現(xiàn)快速增長(zhǎng)，處理組在36 h達(dá)到277.8 mg/kg，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；BABA處理后，葡萄果實(shí)中總黃酮含量的下降速率降低，貯藏60 h后，處理組總黃酮含量為對(duì)照組的1.25倍，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），說明BABA處理增加了總酚含量，延緩了總黃酮含量的降低。

圖2 B ABA 處理對(duì)葡萄果實(shí)在貯藏期間總酚 （ A）和總黃酮（ B）含量的影響Fig.2 Effects of BABA treatment on total phenolics （A） and flavonoid （B）contents of grapes during storage

2.3 BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)SOD、CAT、APX活性和H2O2含量的影響

圖3 B A B A處理對(duì)葡萄果實(shí)在貯藏期間 S O D （A ）、C A T （B ）、A PX （ C）活性和H2O2含量 （D ）的影響Fig.3 Effects of BABA treatment on of SOD （A）， CAT （B） and APX （C）activities and H2O2content （D） of grapes during storage

如圖3所示，在整個(gè)貯藏期間，葡萄果實(shí)SOD活性在24 h內(nèi)達(dá)到最大值，CAT的活性也達(dá)到頂峰（107.7 U/mg pro）；隨時(shí)間逐漸延長(zhǎng)，BABA處理顯著延緩了SOD和CAT活性的降低（P＜0.05），其活性始終高于對(duì)照組。APX活性在貯藏12 h內(nèi)迅速上升，貯藏后期逐漸下降，經(jīng)BABA處理的葡萄果實(shí)下降速率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。果實(shí)刺傷以后，H2O2的含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)而上升，對(duì)照組在48 h時(shí)出現(xiàn)峰值，是BABA處理組的1.33 倍（圖3D），說明BABA處理明顯抑制了葡萄果實(shí)中H2O2的積累。

2.4 BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)GLU和CHI活性的影響

圖4 B AB A 處理對(duì)葡萄果實(shí)在貯藏期間 G L U （A ）和 C H I（B ）活性的影響Fig.4 Effects of BABA treatment on GLU （A） and CHI （B） activities of grapes during storage

由圖4可知，在整個(gè)貯藏期間，BABA處理組的GLU 和CHI活性都逐漸上升，而對(duì)照組的則上升緩慢；在60 h時(shí)，BABA處理組的GLU活性為23.3 U/mg pro，為對(duì)照組的1.38倍，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；而BABA處理組CHI活性在貯藏期開始就被迅速激活，高于對(duì)照組。在接菌60 h后，對(duì)照組的GLU活性僅為BABA處理組的72.1%，而BABA處理組果實(shí)的CHI的活性更是對(duì)照組的2.54 倍。

2.5 BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)苯丙烷代謝相關(guān)酶活性的影響

圖5 B A B A處理對(duì)葡萄果實(shí)在貯藏期間 P A L （A ）、4-C L （B ）和C4H（ C）活性的影響Fig.5 Effects of BABA treatment on PAL （A），4-CL （B） and C4H （C）activities of grapes during storage

如圖5所示，PAL活性在貯藏過程呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，而且BABA處理組的增長(zhǎng)顯著快于對(duì)照組（P＜0.05），在24 h時(shí)BABA處理組的PAL活性為對(duì)照組的2.78 倍；4-CL在貯藏過程中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，貯藏60 h后，處理組的4-CL活性為25.6 U/mg pro，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），說明BABA處理有效地抑制了其活性的降低；C4H活性整體呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，與PAL的變化相呼應(yīng)，且BABA處理組的C4H活性始終高于對(duì)照組（圖5C）。

3 討 論

誘導(dǎo)抗病性是植物一種重要的抗病機(jī)制，采用各種物理、化學(xué)或生物激發(fā)子處理可誘導(dǎo)植物組織CHI等抗病相關(guān)酶合成并提高其活性，同時(shí)刺激苯丙烷代謝途徑促進(jìn)總酚、木質(zhì)素等抗病相關(guān)物質(zhì)的合成，從而提高植物的抗病性［24］。近年來的研究發(fā)現(xiàn)BABA作為一種新型的化學(xué)激發(fā)子，可誘導(dǎo)采后果蔬產(chǎn)生抗病性。如Zhang Changfeng等［12］發(fā)現(xiàn)BABA處理可以顯著誘導(dǎo)提高蘋果果實(shí)CHI、GLU和POD等抗病相關(guān)酶活性，增強(qiáng)果實(shí)對(duì)青霉病的抗病能力。在本研究中，BABA處理提高了CHI、GLU和PAL等抗病相關(guān)酶的活性和總酚含量，同時(shí)抑制了葡萄果實(shí)的腐爛，說明BABA處理能誘導(dǎo)提高葡萄果實(shí)的抗病性，從而減輕灰霉病的發(fā)生。

果蔬在受到病原菌侵染時(shí)，常產(chǎn)生一些PR蛋白以抵御病原菌的進(jìn)一步侵染，而CHI和GLU就是兩種重要的PR蛋白［25］。Porat等［9］發(fā)現(xiàn)BABA處理葡萄柚后，抗病相關(guān)酶的活性迅速升高，從而增加了果實(shí)對(duì)指狀青霉侵染的抵抗力；譚衛(wèi)萍等［11］研究證明了BABA處理可以不同程度地誘導(dǎo)提高CHI和GLU等的活性，增強(qiáng)香蕉果實(shí)對(duì)于炭疽病菌的抵抗力。Marcucci等［26］研究表明，BABA處理可誘導(dǎo)洋薊CHI和GLU活性的提高，增強(qiáng)了其抗病能力。本研究發(fā)現(xiàn)，BABA處理抑制了葡萄果實(shí)灰霉病的發(fā)生和病斑直徑的擴(kuò)展，同時(shí)誘導(dǎo)了葡萄果實(shí)中CHI和GLU活性的上升。這些結(jié)果表明，BABA處理誘導(dǎo)葡萄果實(shí)抗病相關(guān)酶活性的提高，從而抑制了灰霉病原菌的侵染。

苯丙烷代謝是許多植物次生代謝物質(zhì)（如木質(zhì)素、酚類、黃酮類物質(zhì)等）的生物合成途徑，這些次生代謝物質(zhì)有著重要的抗菌作用，PAL、4-CL和C4H則是苯丙烷代謝途徑的關(guān)鍵酶，在果蔬抵御病原菌侵害過程中起著重要的作用。弓德強(qiáng)等［13］研究發(fā)現(xiàn)，BABA處理芒果誘導(dǎo)了PAL等苯丙烷代謝關(guān)鍵酶的活性以及總酚等抗性物質(zhì)含量，有利于增強(qiáng)果實(shí)對(duì)采后病害的抗性；Yin等［27］研究表明，BABA處理可誘導(dǎo)馬鈴薯PAL的活性，增強(qiáng)了馬鈴薯的抗病性；王華東等［28］也發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過熱處理的枇杷果實(shí)PAL的活性增加迅速，而自然腐爛率和接種后腐爛率都受到抑制，說明PAL活性的提升有助于抑制果實(shí)腐爛。本研究中，BABA處理顯著提高了葡萄果實(shí)中PAL和C4H的活性，促進(jìn)了果實(shí)中總酚和總黃酮物質(zhì)的積累，從而增強(qiáng)了果實(shí)對(duì)灰霉病的抗性。但是BABA處理對(duì)提高苯丙烷代謝相關(guān)酶活性的機(jī)理還有待進(jìn)一步探討。

3 結(jié) 論

75 mmol/L BABA處理顯著降低了接種灰霉病菌葡萄果實(shí)在25 ℃貯藏時(shí)的發(fā)病率和病斑直徑，從而減輕灰霉病的發(fā)生。BABA處理可顯著促進(jìn)葡萄果實(shí)GLU、CHI、PAL、4-CL和C4H等抗病相關(guān)酶活性的上升，提高總酚含量，從而提高葡萄果實(shí)對(duì)灰霉病的抗性，減輕果實(shí)腐爛發(fā)生。

［1］ 李桂芬， 劉廷松.葡萄貯藏生理研究進(jìn)展［J］.果樹科學(xué)， 2000， 17（1）：63-69.DOI：10.3969/j.issn.1009-9980.2000.01.014.

［2］ 秦丹， 石雪暉， 胡亞平， 等.葡萄采后貯藏保鮮研究進(jìn)展［J］.保鮮與加工， 2006， 6（1）： 9-12.DOI：10.3969/j.issn.1009-6221.2006.01.006.

［3］ 姜璐璐， 朱虹， 焦鳳， 等.乙醇處理對(duì)葡萄果實(shí)常溫保鮮的效果［J］.食品科學(xué)， 2013， 34（18）： 285-289.DOI：10.7506/spkx1002-6630-201318059.

［4］ COHEN Y， RUBIN A E， KILFIN G.Mechanisms of induced resistance in lettuce against Bremia lactucae by DL-β-amino-butyric acid （BABA）［J］.European Journal of Plant Pathology， 2010， 126： 553-573.DOI：10.1007/s10658-009-9564-6.

［5］ HAMIDUZZAMAN M M， JAKAB G， BARNAVON L， et al.β-Aminobutyric acid-induced resistance against downy mildew in grapevine acts through the potentiation of callose formation and jasmonic acid signaling［J］.Molecular Plant-Microbe Interactions，2005， 18（8）： 819-29.DOI：10.1094/MPMI-18-0819.

［6］ 李惠霞， 謝丙炎， 馮蘭香.β-氨基丁酸誘導(dǎo)辣椒產(chǎn)生PR蛋白及其酶活性的變化［J］.園藝學(xué)報(bào)， 2006， 33（6）： 1335-1337.DOI：10.3321/ j.issn：0513-353X.2006.06.033.

［7］ 王靜， 王海霞， 田振東.β-氨基丁酸誘導(dǎo)馬鈴薯對(duì)晚疫病的抗性組織化學(xué)及信號(hào)傳導(dǎo)途徑分析［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2014（13）： 2571-2579.DOI：10.3864/j.issn.0578-1752.2014.13.009.

［8］ JEUN Y C， KIM K W， KIM K D， et al.Comparative ultrastructure of cucumbers pretreated with plant growth-promoting rhizobacteria，DL-3-aminobutyric acid or amino salicylic acid after inoculation with Colletotrichum orbiculare［J］.Journal of Phytopathology， 2007，155（7/8）： 416-425.DOI：10.1111/j.1439-0434.2007.01252.x.

［9］ PORAT R， VINOKUR V， WEISS B， et al.Induction of resistance to penicillium digitatum in grapefruit by β-aminobutyric acid［J］.European Journal of Plant Pathology， 2003， 109（9）： 901-907.DOI：10.1023/B：EJPP.0000003624.28975.45.

［10］ 徐蘭英， 汪躍華， 龐學(xué)群， 等.BTH和BABA處理對(duì)采后沙糖桔病害和品質(zhì)的影響［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2010， 37（8）： 256-258.DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2010.08.103.

［11］ 譚衛(wèi)萍， 龐學(xué)群， 張昭其， 等.BABA誘導(dǎo)香蕉果實(shí)抗病性與貯藏期活性氧積累的關(guān)系［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2014（16）： 3290-3299.DOI：10.3864/j.issn.0578-1752.2014.16.014.

［12］ ZHANG Changfeng， WANG Jiamin， ZHANG Jiaguo， et al.Effects of β-aminobutyric acid on control of postharvest blue mould of apple fruit and its possible mechanisms of action［J］.Postharvest Biology and Technology， 2011， 61（2/3）： 145-151.DOI：10.1016/ j.postharvbio.2011.02.008.

［13］ 弓德強(qiáng)， 梁清志， 黃光平， 等.BABA處理對(duì)采后芒果果實(shí)抗病性的影響［J］.熱帶作物學(xué)報(bào)， 2015， 36（11）： 2067-2072.DOI：10.3969/ j.issn.1000-2561.2015.11.024.

［14］ WANG K T， JIN P， CAO S F.Methyl Jasmonate reduces decay and enhances antioxidant capacity in Chinese bayberries［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2009， 57（13）： 5809-5815.DOI：10.1021/jf900914a.

［15］ TOOR R K， SAVAGE G P.Antioxidant activity in different fractions of tomatoes［J］.Food Research International， 2005， 38（5）： 487-494.DOI：10.1016/j.foodres.2004.10.016.

［16］ CAKMAK I， STRBAC D， MARSCHNER H.Activities of hydrogen peroxide-scavenging enzymes in germinating wheat seeds［J］.Journal of Experimental Botany， 1993， 44（1）： 127-132.DOI：10.1093/ jxb/44.1.127.

［17］ RAO M V， PALIYATH G， ORMROD D P.Ultraviolet-B and ozoneinduced biochemical changes in antioxidant enzymes of Arabidopsis thaliana［J］.Plant Physiology， 1996， 110（1）： 125-136.DOI：10.1104/ pp.110.1.125.

［18］ AMAKO K， CHEN G X， ASADA K.Separate assays specific for ascorbate peroxidase and guaiacol peroxidase and for the chloroplastic and cytosolic isozymes of ascorbate peroxidase in plants［J］.Plant and Cell Physiology， 1994， 35（3）： 497-504.DOI：10.1006/abbi.1997.0612.

［19］ PATTERSON B D， MACRAE E A， FERGUSON I B.Estimation of hydrogen peroxide in plant extracts using titanium （Ⅳ）［J］.Analytical Biochemistry， 1984， 139（2）： 487-492.DOI：10.1016/0003-2697（84）90039-3.

［20］ ABELES F B， BOSSHART R P， FORRENCE L E， et al.Preparation and purifcation of glucanase and chitinase from bean leaves［J］.Plant Physiology， 1971， 47（1）： 129-134.DOI：10.1104/pp.47.1.129.

［21］ ASSIS J S， MALDONADO R， MU?OZ T， et al.Effect of high carbon dioxide concentration on PAL activity and phenolic contents in ripening cherimoya fruit［J］.Postharvest Biology and Technology，2001， 23（1）： 33-39.DOI：10.1016/S0925-5214（01）00100-4.

［22］ KNOBLOCH K H， HAHLBROC K.4-Coumarate： CoA ligase from cell suspension culture of Petroselinum hortense Hoffm.Partial purication， substrate specificity， and further properties［J］.Archives of Biochemistry and Biophysics， 1977， 184（1）： 233-248.DOI：10.1016/0003-9861（77）90347-2.

［23］ LAMB C Y， RUBERY P H.A spectrophotometric assay for trapscinnamic acid 4-hydroxylase activity［J］.Analytical Biochemistry，1975， 68（2）： 554-561.DOI：10.1016/0003-2697（75）90651-X.

［24］ HAMMERSCHMIDT R.Challenge inoculation reveals the benefts of resistance priming［J］.Physiological and Molecular Plant Pathology，2008， 73（4）： 59-60.DOI：10.1016/j.pmpp.2009.06.002.

［25］ MAUCH F， MAUCH-MANI B， BOLLER T.Antifungal hydrolases in pea tissue： Ⅱ.Inhibition of fungal growth by combinations of chitinase and-1，3-glucanase［J］.Plant Physiology， 1988， 88（3）： 936-942.DOI：10.1104/pp.88.3.936.

［26］ MARCUCCI E， ALEANDRI M P， CHILOSI G， et al.Induced resistance by β-aminobutyric acid in artichoke against white mould caused by Sclerotinia sclerotiorum［J］.Journal of Phytopathology，2010， 158（10）： 659-667.DOI：10.1111/j.1439-0434.2010.01677.x.

［27］ YIN Y， LI Y C， BI Y， et al.Postharvest treatment with β-aminobutyric acid induces resistance against dry rot caused by Fusarium sulphureum in potato tuber［J］.Agricultural Sciences in China， 2010， 9（9）： 1372-1380.DOI：10.1016/S1671-2927（09）60228-5.

［28］ 王華東， 王慧倩， 鄭聰， 等.采后熱空氣處理對(duì)枇杷果實(shí)抗病性的誘導(dǎo)［J］.食品科學(xué)， 2014， 35（16）： 227-231.DOI：10.7506/spkx1002-6630-201416044.

Effect and Mechanism of β-Aminobutyric Acid on Incidence of Grey Mold Decay in Postharvest Grapes

LONG Qinghong， GAO Fan， LI Xiao'an， JIN Peng， ZHENG Yonghua*
（College of Food Science and Technology， Nanjing Agricultural University， Nanjing 210095， China）

The effects of β-aminobutyric acid （BABA） treatment on postharvest grey mold decay， the activities of defenserelated enzymes and total phenolics content in Kyoho grapes were investigated.The grape fruits were pretreated with 75 mmol/L BABA， inoculated with Botrytis cinerea， and then stored at 25 ℃ for 60 h.The results showed that BABA treatment resulted in significantly lower disease incidence and smaller lesion diameter compared with the control fruit.Meanwhile， BABA treatment enhanced the activities of defense-related enzymes including chitinase， β-1，3 glucanase，phenylalanine ammonia-lyase， 4-coumarate coenzyme A ligase and cinnamate-4-hydroxylase and increased the content of total phenolics.These results suggest that BABA treatment can reduce the incidence and severity of gray mold decay by inducing disease resistance in grapes.

grape fruit； β-aminobutyric acid； gray mold decay； defense-related enzymes； induced disease resistance

10.7506/spkx1002-6630-201614039

TS255.3

A

1002-6630（2016）14-0213-06

龍清紅， 高梵， 李曉安， 等.BABA處理對(duì)葡萄果實(shí)采后灰霉病的影響及機(jī)理［J］.食品科學(xué)， 2016， 37（14）: 213-218.

DOI:10.7506/spkx1002-6630-201614039. http://www.spkx.net.cn

LONG Qinghong， GAO Fan， LI Xiao'an， et al.Effect and mechanism of β-aminobutyric acid on incidence of grey mold decay in postharvest grapes［J］.Food Science， 2016， 37（14）: 213-218.（in Chinese with English abstract） DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201614039. http://www.spkx.net.cn

2016-01-12

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（31172003）

龍清紅（1987—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏。E-mail：2013108072@njau.edu.cn

*通信作者：鄭永華（1963—），男，教授，博士，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏。E-mail：zhengyh@njau.edu.cn