紫花苜蓿病毒病癥狀類型及病原檢測(cè)

周其宇，梁巧蘭，韓 亮

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅省草業(yè)工程實(shí)驗(yàn)室，中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州 730070)

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紫花苜蓿病毒病癥狀類型及病原檢測(cè)

周其宇，梁巧蘭，韓 亮

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅省草業(yè)工程實(shí)驗(yàn)室，中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州 730070)

摘要：本研究為了探明甘肅省蘭州市紫花苜蓿(Medicago sativa)侵染病毒病的癥狀類型、病原種類以及寄主范圍，進(jìn)行了田間調(diào)查和室內(nèi)酶聯(lián)免疫檢測(cè)。田間調(diào)查確定了苜蓿病毒病在蘭州市安寧區(qū)和皋蘭縣以及白銀市景泰縣均有發(fā)生，其中景泰縣的發(fā)病率和病情指數(shù)均最高，分別為43.33%和26.08；共采樣90份，檢查30份，檢查比例為30%。檢測(cè)到的病原有苜蓿花葉病毒(AMV)、白三葉草花葉病毒(WCMV)、菜豆黃花葉病毒(BYMV)和豇豆花葉病毒(CPMV)4種，檢出率分別為100.00%、50.00%、75.00%和75.00%，且存在復(fù)合侵染現(xiàn)象，復(fù)合侵染率達(dá)50.00%；寄主范圍測(cè)定供試植物共6科17屬18種，經(jīng)測(cè)定，AMV可以侵染6科15種植物，WCMV可以侵染4科8種植物，BYMV和CPMV可以侵染3科7種植物，4種病毒可復(fù)合侵染6科14種植物。

關(guān)鍵詞：紫花苜蓿；病毒??；癥狀類型；寄主范圍

苜蓿(Medicagosativa)是全世界最重要的豆科牧草，被譽(yù)為“牧草之王”[1]，不僅產(chǎn)草量高、草質(zhì)優(yōu)良，而且具有營(yíng)養(yǎng)豐富、栽培規(guī)模大等優(yōu)勢(shì)，是苜蓿產(chǎn)業(yè)化和發(fā)展節(jié)糧畜牧業(yè)的重要選擇之一[2-4]，在退耕還林還草、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)結(jié)構(gòu)調(diào)整中是首選牧草。目前，我國(guó)苜蓿種植面積居各種牧草之首，達(dá)2 000萬hm2，居世界第2位，甘肅省紫花苜蓿種植面積居全國(guó)第1，草產(chǎn)品不僅遠(yuǎn)銷上海、廣東等省(市)，還出口日本、韓國(guó)等地[5]，特別是近幾年隨著我國(guó)草地畜牧業(yè)的發(fā)展、退耕還林還草政策實(shí)施、農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整以及一些國(guó)營(yíng)、私營(yíng)企業(yè)以獨(dú)立經(jīng)營(yíng)或公司加農(nóng)戶等不同形式的參與，大力發(fā)展苜蓿產(chǎn)業(yè)是一項(xiàng)符合我國(guó)農(nóng)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略、獲取生態(tài)效益和社會(huì)效益的“朝陽產(chǎn)業(yè)”；在改善生態(tài)環(huán)境、優(yōu)化農(nóng)牧結(jié)構(gòu)、提高土地資源及提高農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益中發(fā)揮著重要的作用；2012年1月中央1號(hào)文件“實(shí)施振興奶業(yè)苜蓿發(fā)展行動(dòng)”頒布，使我國(guó)草畜產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)趨于合理化、高效化、規(guī)?；痆6-7]。

隨著苜蓿種植面積的擴(kuò)大，苜蓿病毒病發(fā)生越來越嚴(yán)重，已限制了苜蓿的生產(chǎn)及其產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。田間發(fā)病率超過了80%，感病植株嚴(yán)重矮化、葉片皺縮變黃、逐漸脫落，牧草蛋白質(zhì)含量下降、牧草干重降低37%～66%(田間)、根瘤數(shù)降低31%～67%(溫室)、花粉萌發(fā)率降低21.5%(盆栽)[8]，植物雌激素積累，嚴(yán)重影響了牧草的產(chǎn)量、品質(zhì)，還可對(duì)動(dòng)物采食牧草的用量及頻率產(chǎn)生重大影響，甚至?xí)?duì)人或者動(dòng)物產(chǎn)生或多或少的損害。

研究發(fā)現(xiàn)，已經(jīng)有十多種病毒可以侵染苜蓿，即苜蓿花葉病毒(alfalfa mosaic virus，AMV)、三葉草黃葉脈病毒(clover yellow vein virus，CYVV)、白三葉花葉病毒(white clover mosaic virus，WCMV)、菜豆黃花葉病毒(bean yellow mosaic virus，BYMV)、豇豆花葉病毒(cowpea mosaic virus，CPMV)、花生矮化病毒(peanut stunt virus，PSV)、紅三葉草明脈花葉病毒(red clover vein mosaic virus，RCVMV)等[9-13]；目前對(duì)于苜蓿病毒病病原僅限于侵染苜蓿的豇豆花葉病毒、苜?；ㄈ~病毒生物學(xué)特性等研究[14-22]。為此，對(duì)甘肅省苜蓿病毒病發(fā)生情況、病原種類及寄主范圍等問題進(jìn)行研究，以期為有效防治苜蓿病毒病，提高苜蓿產(chǎn)量和品質(zhì)，抗病毒品種選育，發(fā)展畜牧業(yè)和牧草種植業(yè)提供基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1苜蓿病毒病田間發(fā)生情況調(diào)查

在2015年6月10日-15日，采用五點(diǎn)取樣法，按以下分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分別對(duì)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)苜蓿試驗(yàn)田、皋蘭縣及景泰縣苜蓿種植田、蘭州北濱河路綠化帶苜蓿綠化帶中苜蓿病毒病的發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查，每樣點(diǎn)調(diào)查5個(gè)樣方，每個(gè)樣方面積為0.5 m2，每個(gè)樣方調(diào)查10株，共50株，記錄所調(diào)查苜蓿植株發(fā)病數(shù)，并計(jì)算發(fā)病率及病情指數(shù)。然后將具有明顯癥狀的苜蓿病葉采集并裝入無菌塑料袋帶回實(shí)驗(yàn)室，每種癥狀的病葉采集3份，將其中一份短時(shí)間保存于4 ℃冰箱、一份保存于-20 ℃冰箱，將另外一份于-70 ℃冰箱長(zhǎng)時(shí)間保存，最后移回一部分苜蓿病株于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，并種植于防蟲網(wǎng)室內(nèi)。

表1　苜蓿病毒病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Table 1　Alfalfa virus disease classification standard

1.2苜蓿病毒病癥狀類型

于2015年5月-6月分別在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)校園、皋蘭縣、景泰縣以及蘭州北濱河路綠化帶等苜蓿種植區(qū)采集的病樣，進(jìn)行癥狀類型歸類記載。

1.3苜蓿病毒病病原種類檢測(cè)

采用雙抗體夾心法(Double Antibody Sandwich ELISA，DAS-ELISA)對(duì)從甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)苜蓿試驗(yàn)田、皋蘭縣及景泰縣苜蓿苜蓿種植田、蘭州北濱河路綠化帶苜蓿綠化帶采集的表現(xiàn)為皺縮、花葉、花葉皺縮、黃斑花葉等癥狀的32份苜蓿病毒病病葉，進(jìn)行AMV、WCMV、BYMV和CPMV的帶毒情況檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)不同病樣的帶毒率以及不同病毒的檢出率。具體檢測(cè)方法按天根生化科技(北京)有限公司提供的AMV、WCMV、BYMV和CPMV的DAS-ELISA試劑盒試驗(yàn)步驟進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)樣品重復(fù)3次；用ELX800型酶聯(lián)免疫測(cè)定儀(Bio-Tek廠家產(chǎn)品)，分別測(cè)定450 nm下各孔的A值，并按照樣品的A值≥臨界值者為陽性(+)帶毒；樣品A值<臨界值為陰性(-)不帶毒的標(biāo)準(zhǔn)，判斷樣品是否帶毒，臨界值(CUT OFF)=陰性對(duì)照A平均值+0.15。并按下式計(jì)算病毒的檢出率及復(fù)合侵染率。

1.4苜蓿病毒病病原提純及寄主范圍測(cè)定

以田間采集的苜蓿病毒病樣(-70 ℃保存)為試材，分別對(duì)苜?；ㄈ~病毒(AMV)、菜豆黃花葉病毒(BYMV)、豇豆花葉病毒(CPMV)、白三葉花葉病毒(WCMV)進(jìn)行提純[16,18,23-25]，將提純的病毒保存于-20 ℃，備用。

供試寄主植物：挑選籽粒飽滿的莧色藜(Chenopodiumamaranticolor)、心葉煙(Nicotianaglutinosa)、普通煙(Nicotianatabacum)、番茄(Lycopersiconesculentum)、辣椒(Capsicumannuum)、馬鈴薯(Solanumtuberosum)、菜豆(Phusvolusvulguris)、豇豆(Vignasinensis)、苜蓿(Medicagosativa)、黃豆(Glycinemax)、豌豆(Pisumsativum)、萵苣(Lactucasativa)、向日葵(Helianthusannuus)、黃瓜(Cucumissativus)、千日紅(Comphrenaglobosa)、雞冠花(Celosiacritata)、大白菜(Brassicapekinensis)等植物種子，消毒催芽后，種植于營(yíng)養(yǎng)缽(直徑15 cm×高10 cm)中，并置于防蟲網(wǎng)室內(nèi)，每種植物種植25盆，每盆3株；待幼苗長(zhǎng)至2～3葉期時(shí)，采用摩擦接種法[26]分別將提純的AMV、WCMV、BYMV、CPMV及這4種病毒按1∶1∶1∶1混合物與磷酸緩沖液(pH=7.0)按1∶4混合，然后接種于黑暗處理12 h的幼苗葉片上，每種病毒接種5盆，以接種磷酸緩沖液為對(duì)照，將接種處理幼苗置于防蟲網(wǎng)室中，逐日觀察寄主植物發(fā)病情況。

1.5數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0軟件對(duì)所測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示測(cè)定結(jié)果，采用Excel 2010制作三線表。

2結(jié)果與分析

2.1苜蓿病毒病田間發(fā)病情況

通過對(duì)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)苜蓿試驗(yàn)田、皋蘭縣及景泰縣苜蓿種植田、蘭州北濱河路綠化帶苜蓿種植區(qū)病毒病發(fā)生情況調(diào)查，發(fā)現(xiàn)隨著苜蓿種植年限的增長(zhǎng)，苜蓿病毒病的發(fā)病率和發(fā)病指數(shù)均升高，其中皋蘭縣8年齡的苜蓿病毒病發(fā)病率和病情指數(shù)最高，分別為43.33%和26.08，而甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2年齡的苜蓿病毒病最低，為16.08%和6.25，其它兩個(gè)地區(qū)的發(fā)病率和病情指數(shù)都介于二者之間，所調(diào)查地區(qū)的平均發(fā)病率和發(fā)病指數(shù)分別為32.15%和16.27；方差分析表明，不同種植年限的苜蓿病毒病病情指數(shù)之間存在極顯著差異(P<0.01)(表2)。

2.2田間癥狀類型

在經(jīng)過田間實(shí)地調(diào)查之后發(fā)現(xiàn)，病毒病原感染苜蓿后主要有以下幾種癥狀類型(圖1)。皺縮：葉片扭曲皺縮，葉片還尚未變色并且葉片不能展平，呈直立狀態(tài)(癥狀代號(hào)為SH，圖1A)；卷葉矮化：沿葉片主脈，整個(gè)葉片沿葉邊緣向下卷起，并呈卷筒狀、葉片褪綠、葉尖變鈍；或者葉片不能完全展開(癥狀代號(hào)為L(zhǎng)R，圖1B)；皺縮褪綠：葉片扭曲皺縮，葉片逐漸由心葉向植株下部褪綠(癥狀代號(hào)為SHCH，圖1C)；斑駁花葉：沿著葉脈兩側(cè)有黃綠相間的花葉形成，或者在葉片局部有黃綠斑點(diǎn)(癥狀代號(hào)為MOM，圖1D)；花葉皺縮：沿葉脈產(chǎn)生褪綠條點(diǎn)，葉片扭曲皺縮，葉片逐漸由心葉向植株下部褪綠(癥狀代號(hào)為MOSH，圖1E)；黃斑花葉：沿主葉脈產(chǎn)生褪綠相間條點(diǎn)，連接起來為褪綠黃條

表2　甘肅省蘭州市苜蓿病毒病發(fā)病情況Table 2　Incidence of alfalfa virus disease in Lanzhou City, Gansu Province

注：同列不同小寫、大寫字母分別代表0.05和0.01水平上差異顯著。

Note: Diffierent lower case and capital letters represent significant difference at 0.05 and 0.01 level, respectively.

圖1　苜蓿病毒病田間癥狀類型Fig.1　Symptom types of alfalfa virus disease in the field

注：A,皺縮；B,卷葉矮化；C,皺縮褪綠；D,斑駁花葉；E,花葉皺縮；F,黃斑花葉；G,叢簇矮化；H,黃化；CK,健康。

Note:A, shrinkage; B, leaf roll dwarfing; C, shrinkage chlorosis; D, mottle mosaic; E, mosaic shrinkage; F, macular mosaic; G, rosetting stunt; H, etiolation; CK, healthy.

斑，并形成黃色條紋或不標(biāo)準(zhǔn)的花葉(癥狀代號(hào)為MAMO，圖1F)；叢簇矮化：頂部葉片皺縮不能正常展平，有的葉片沿葉脈扭曲壞死，整個(gè)植株矮化嚴(yán)重(癥狀代號(hào)為ROST，圖1G)；黃化：頂部葉片完全黃化變得黃亮色，葉脈也被黃化(癥狀代號(hào)為ET，圖1H)。

2.3苜蓿病毒病病原種類檢測(cè)

通過采用DAS-ELISA對(duì)4種癥狀類型30份苜蓿病樣病毒病原帶毒情況檢測(cè)，結(jié)果表明,不同癥狀類型的病葉病毒病原種類有一定差異，其中圖1B和圖1E的病樣中檢出了AMV、BYMV、CPMV和WCMV 4種病毒，帶毒率都為100.00%；圖1A的病樣以AMV和BYMV為主，帶毒率為50.00%；圖1F以AMV、BYMV和CPMV為主，帶毒率為75.00%(表3)。

通過對(duì)AMV、WCMV、BYMV、CPMV四種病毒的檢檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，它們的檢出率分別為100%、50.00%、75.00%、75.00%，并發(fā)現(xiàn)這4種病毒存在著復(fù)合侵染的現(xiàn)象，其中AMV和WCMV，AMV和BYMV，AMV和CPMV，WCMV和BYMV，WCMV和CPMV，BYMV和CPMV，AMV、WCMV和BYMV，AMV、WCMV和CPMV，AMV、BYMV和CPMV，WCMV、BYMV和CPMV及4種病毒的復(fù)合侵染率分別為50.00%，100.00%，75.00%，50.00%，50.00%，75.00%，50.00%，50.00%，75.00%，50.00%及50.00%(表3)。

表3　苜蓿病毒病原DAS-ELISA檢測(cè)結(jié)果Table 3　Detection of the alfalfa viral pathogens by DAS-ELISA

注：(+)為陽性反應(yīng)；(-)為陰性反應(yīng)。

Note：(+) means positive reaction;(-) means negative reaction.

2.4寄主范圍測(cè)定

通過寄主范圍測(cè)定和接種寄主DAS-ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，AMV可侵染心葉煙、普通煙、番茄、辣椒、馬鈴薯、莧色藜、菜豆、豇豆、黃豆、苜蓿、豌豆、向日葵、雞冠花、千日紅、黃瓜共6科15種植物；WCMV可侵染心葉煙、莧色藜、菜豆、豇豆、黃豆、苜蓿、豌豆、黃瓜共4科8種植物；BYMV和CPMV可侵染莧色藜、菜豆、豇豆、黃豆、苜蓿、豌豆、黃瓜共3科7種植物；AMV、WCMV、BYMV、CPMV四種病毒混合液可復(fù)合侵染心葉煙、普通煙、馬鈴薯、莧色藜、黃豆、向日葵、雞冠花、辣椒、豌豆、菜豆、豇豆、苜蓿、番茄、黃瓜共6科14種植物，且癥狀表現(xiàn)不同。其中AMV、WCMV、BYMV、CPMV均可侵染黃瓜、大豆、豌豆、莧色藜、豌豆、菜豆和豇豆，且接種后黃瓜接種葉出現(xiàn)黃綠斑點(diǎn)；大豆、豌豆、莧色藜葉片出現(xiàn)局部枯斑；豌豆葉片出現(xiàn)局部枯斑、植株萎蔫；菜豆和豇豆葉片呈現(xiàn)局部褐色病斑，苜蓿表現(xiàn)花葉皺縮；除此以外AMV還可侵染心葉煙、普通煙和向日葵、千日紅、雞冠花，分別出現(xiàn)系統(tǒng)花葉和局部枯斑等癥狀；WCMV、BYMV、CPMV不侵染番茄、辣椒、馬鈴薯、向日葵、千日紅、雞冠花、萵苣、白菜等植物。

AMV、WCMV、BYMV、CPMV病毒按1∶1∶1∶1混合接種后，心葉煙、普通煙葉片為系統(tǒng)花葉，辣椒、番茄接種葉為枯斑，心葉畸形；馬鈴薯、莧色藜、黃豆、向日葵、雞冠花為局部枯斑；菜豆、豇豆接種葉片為局部褐色枯斑；豌豆為局部枯斑、植株萎蔫；苜蓿為花葉皺縮且葉片發(fā)黃；黃瓜為黃綠斑點(diǎn)；4種病毒混合液不能侵染萵苣、千日紅、大白菜 (表4、表5)；其中紫花苜蓿接種AMV后，其癥狀為部分葉片呈花葉，且葉片邊緣發(fā)黃；接種WCMV后其癥狀為部分葉片變小，葉片褪綠，并有黃色斑點(diǎn)產(chǎn)生；接種BYMV后其癥狀為部分葉片皺縮，且葉邊緣稍向上卷起；接種CPMV后其癥狀為部分葉片皺縮，葉片有褪綠現(xiàn)象發(fā)生，而同時(shí)接種4種病毒后，苜蓿部分葉片皺縮，花葉且葉片發(fā)黃，并伴有植株矮化現(xiàn)象發(fā)生(圖2)。

表4　AMV、WCMV、BYMV、CPMV及4種病毒混合液寄主范圍及癥狀類型Table 4　The host plant of AMV,WCMV,BYMV,CPMV and mixture of four kinds of virus and symptoms

3討論與結(jié)論

通過對(duì)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)苜蓿試驗(yàn)田、皋蘭縣及景泰縣苜蓿種植田、蘭州北濱河路綠化帶苜蓿種植區(qū)苜蓿病毒病癥狀表現(xiàn)和發(fā)病情況調(diào)查，發(fā)現(xiàn)在調(diào)查區(qū)苜蓿病毒病普遍發(fā)生，平均發(fā)病率和病情指數(shù)分別為32.15%和16.27；且隨著苜蓿種植年限的增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)；苜蓿病毒病癥狀表現(xiàn)復(fù)雜多樣，可歸納為皺縮、卷葉、皺縮褪綠、斑駁花葉、花葉皺縮、黃斑花葉、叢簇矮化、黃化8種，花葉型和花葉皺縮型較為普遍，占58.65%。DAS-ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)AMV、WCMV、BYMV、CPMV是引起蘭州市苜蓿病毒病的病原；其中AMV為主要病原，其檢出率為100%，其余3種病毒的檢出率均在66.67%以上；4種病毒的復(fù)合侵染率為40.74%。這與已報(bào)道的AMV、CPMV為苜蓿病毒病病原的結(jié)果相一致[14,16,21-22]。寄主范圍測(cè)定發(fā)現(xiàn),侵染苜蓿的AMV、WCMV、BYMV和CPMV均可侵染豆科、藜科、葫蘆科的植物，4種病毒混合液可復(fù)合侵染豆科、茄科、藜科、葫蘆科、菊科、莧科的植物。除此之外AMV還可侵染茄科和菊科的植物，WCMV可侵染茄科的植物。

表5　AMV、WCMV、BYMV、CPMV及病毒復(fù)合侵染寄主DAS-ELISA檢測(cè)Table 5　The result of AMV,WCMV,BYMV,CPMV and mixed virus infection hosts detected by DAS-ELISA

注：(+)為陽性反應(yīng)；(-)為陰性反應(yīng)。 Note：(+) means positive reaction；(-) means negative reaction.

圖2　苜蓿接種AMV、WCMV、BYMV、CPMV的癥狀反應(yīng)Fig.2　The symptom reaction of alfalfa was inoculated with AMV,WCMV,BYMV,CPMV

據(jù)報(bào)道，侵染苜蓿的病毒有10多種[9-13]，蚜蟲、葉蟬、飛虱、薊馬和白粉虱均可傳播植物病毒，田間調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，薊馬是危害紫花苜蓿的主要害蟲，可加重苜蓿病毒病癥狀表現(xiàn)。吳永敷等[27]研究認(rèn)為,薊馬危害癥狀與苜蓿病毒病的癥狀是有所區(qū)別的，薊馬危害的葉片不但皺縮，而且中下部?jī)蓚?cè)向內(nèi)卷曲；而病毒病的葉片只皺縮，兩側(cè)不向內(nèi)卷曲，且對(duì)著太陽觀察，葉片上有黃色的花斑；叢簇矮化癥狀表現(xiàn)與劉濤等[28]研究發(fā)現(xiàn)的苜蓿叢枝病癥狀表現(xiàn)相似，如嚴(yán)重矮化、葉片皺縮、變小，葉片褪綠等。而本研究?jī)H對(duì)AMV、WCMV、BYMV和CPMV這4種病毒進(jìn)行了檢測(cè)和寄主范圍測(cè)定，對(duì)于薊馬和其它昆蟲能否傳播苜蓿病毒病原以及表現(xiàn)為叢簇矮化癥狀的病樣是否含有支原體等問題還有待于進(jìn)一步探討。

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(責(zé)任編輯武艷培)

DOI:10.11829/j.issn.1001-0629.2015-0652

*收稿日期：2015-11-23接受日期：2016-02-24

基金項(xiàng)目：草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(CYZS-2011006)；甘肅省財(cái)政廳項(xiàng)目(甘財(cái)教2013(116))

通信作者：梁巧蘭(1968-)，女，甘肅崇信人，副教授，博士，主要從事作物保護(hù)和生物防治研究。E-mail：liangql@gsau.edu.cn

中圖分類號(hào)：S435.4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-0629(2016)7-1297-09*

Corresponding author:Liang Qiao-lanE-mail：liangql@gsau.edu.cn

Symptoms and pathogen detection of alfalfa virus disease

Zhou Qi-yu, Liang Qiao-lan, Han Liang

(College of Grassland Science of Gansu Agricultural University, Key Laboratory of Grassland Ecosystem of MOE, Sino-U.S. Centers for Grazing Land Ecosystem Sustainability, Pratacultural Engineering Laboratory of Gansu Province, Lanzhou 730070, China)

Abstract:In order to investigate the symptoms, pathogen and host range of alfalfa virus diseases in Lanzhou City, Gansu Province, alfalfa virus diseases were investigated in field and pathogens were tested by DAS-ELISA. The results showed that the viral disease of alfalfa widely spread in Anning District and Gaolan County of Lanzhou and Jingtai County of Baiyin City and the highest incidence and disease index were 43.33% and 26.08, respectively, which were in Jingtai. A total of 90 sample were collected and 30 of them were detected which brought the detection ratio of 30%. Alfalfa mosaic virus (AMV), white clover mosaic virus(WCMV), bean yellow mosaic virus (BYMV) and cowpea mosaic virus (CPMV) were main viral pathogen which had detection rates of 100.00%, 50.00%, 75.00%, 75.00%, respectively, and their mixed infection rate of 50.00%. There were 6 families, 17 genera and 18 species for host range testing. AMV can infect 6 families, 15 species, WCMV can infect 4 families, 8 species, BYMV and CPMV could infect 3 families, 7 species, and four kinds of virus could co-infect 6 families, 14 species of plants.

Key words:alfalfa; virus diseases; symptoms of type; host range

周其宇，梁巧蘭，韓亮.紫花苜蓿病毒病癥狀類型及病原檢測(cè).草業(yè)科學(xué),2016,33(7)：1297-1305.

Zhou Q Y,Liang Q L,Han L.Symptoms and pathogen detection of alfalfa virus disease.Pratacultural Science,2016,33(7)：1297-1305.

第一作者：周其宇(1988-)，男，甘肅榆中人，在讀碩士生，主要從事植物保護(hù)研究。E-mail：zhouqiyu251725@foxmail.com