Livin基因與宮頸癌前病變及宮頸癌關(guān)系的研究

曾艷　梁桂云

【摘要】 目的 探討凋亡抑制基因 Livin與宮頸癌前病變及宮頸癌的關(guān)系。方法 64例宮頸癌、56例宮頸上皮內(nèi)瘤變和 32例正常宮頸患者作為研究對(duì)象。用免疫組織化學(xué) SABC法進(jìn)行Livin 基因表達(dá)檢測(cè)， 比較三者之間表達(dá)的差異， 探討Livin 表達(dá)與正常宮頸、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌患者的病理相關(guān)關(guān)系。結(jié)果 宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織中 Livin的表達(dá)率分別為70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Livin在宮頸癌組織與宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Livin基因表達(dá)與宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮頸癌的臨床分期具有相關(guān)性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表達(dá)與宮頸癌的病理分型、病理分級(jí)、患者年齡無(wú)明顯相關(guān)性（P>0.05）。結(jié)論 Livin 基因在宮頸癌的發(fā)生中具有抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的作用， 可以做為宮頸癌診斷及預(yù)后的相關(guān)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 Livin基因；宮頸上皮內(nèi)瘤變；宮頸癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.070

Livin是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的人類(lèi)凋亡抑制蛋白 （IAP）家族的新成員之一， 認(rèn)為與腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展及預(yù)后有密切聯(lián)系。Livin蛋白能夠與 Caspase蛋白結(jié)合， 抑制細(xì)胞凋亡， 對(duì)Livin研究在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有著重要的作用[1]。本研究擬采用免疫組化方法探討 Livin在宮頸癌組織中及正常宮頸組織中的表達(dá)， 并研究其與年齡、組織類(lèi)型、病理分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床生物學(xué)行為及預(yù)后之間的關(guān)系和其臨床意義， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取 2004～2012年本院治療的 64例宮頸癌患者， 年齡 35～72歲， 平均年齡 （51.7±6.8）歲， 組織學(xué)分型為宮頸鱗癌；臨床分期：Ⅱa期14例， Ⅱb期8例， Ⅲa期42例；病理分型：潰瘍型 8例， 結(jié)節(jié)型16例， 菜花型 24例， 混合型16例。宮頸上皮內(nèi)瘤變患者56例， 另選取 32例正常宮頸組織患者作為對(duì)照。

1. 2 實(shí)驗(yàn)方法 切取活組織檢查標(biāo)本， 用 10%甲醛固定， 石蠟包埋后切片。采用SABC。一抗為兔抗人 Livin多克隆抗體 （武漢博士德公司）， 用 PBS液作為陰性對(duì)照。采用免疫組化染色。免疫組化方法參照 SABC試劑盒說(shuō)明進(jìn)行， Livin 多克隆抗體按 1∶50 稀釋?zhuān)?主要試劑為 Livin 多克隆兔抗人抗體， SABC試劑盒 （武漢博士德公司）。

1. 3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 觀察宮頸上皮組織或?qū)m頸癌組織切片病變位置染色， 參考 Kawasaki 等[2]報(bào)道的方法計(jì)算各指標(biāo)表達(dá)程度， 依染色程度將陽(yáng)性信號(hào)分為 3類(lèi) ：染色強(qiáng)度弱、染色強(qiáng)度強(qiáng)、染色強(qiáng)度中等。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率 （%）表示， 采用 χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用 Spearman相關(guān)分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 Livin表達(dá)情況 Livin的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色陽(yáng)性反應(yīng)， 在細(xì)胞胞漿及少部分胞核也有不同程度著色。宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織中 Livin的表達(dá)率分別為70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Livin在宮頸癌組織與宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2. 2 Livin的相關(guān)性 Livin基因表達(dá)與宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮頸癌的臨床分期具有相關(guān)性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表達(dá)與宮頸癌的病理分型、病理分級(jí)、患者年齡無(wú)明顯相關(guān)性 （P>0.05）。

3 討論

Livin是新發(fā)現(xiàn)的人類(lèi)凋亡抑制蛋白， 同其他凋亡抑制蛋白相似， Livin可通過(guò)抑制凋亡抑制通路中 Caspase 3、7的活性， 發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的作用， 在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的一些腫瘤組織如乳腺癌、胃腸癌等腫瘤組織中高表達(dá)。凋亡抑制蛋白是細(xì)胞凋亡抑制因子家族新成員， 它能夠抑制細(xì)胞凋亡， 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞形成及增長(zhǎng)[3]。

本文通過(guò)對(duì)宮頸癌 Livin基因表達(dá)與臨床病理的關(guān)系研究表明， 宮頸癌的腫瘤病理分型、病理分級(jí)與 Livin基因表達(dá)程度無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系（P>0.05）；Livin基因表達(dá)與宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮頸癌的臨床分期具有相關(guān)性（P<0.05）， 說(shuō)明Livin在宮頸癌的細(xì)胞凋亡過(guò)程中產(chǎn)生重要抑制作用， 并促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的不斷增殖。對(duì)于宮頸良性病變發(fā)展為上皮內(nèi)瘤變的病例， 應(yīng)密切監(jiān)測(cè) Livin表達(dá)情況， 有利于指導(dǎo)臨床早期診斷及早期治療。

在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌病例中， 宮頸癌組織中 Livin 高表達(dá)， 提示對(duì)于宮頸癌組織中 Livin 高表達(dá)的病例， 應(yīng)實(shí)施手術(shù)、化療、生物治療等綜合治療， 最大程度提高腫瘤生存率。凋亡抑制蛋白 Livin在宮頸癌的演近過(guò)程中， 抑制細(xì)胞凋亡活動(dòng)增強(qiáng)， 對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)可以做為判定宮頸癌發(fā)生及預(yù)后的重要指標(biāo)。目前對(duì) Livin 的研究仍有許多問(wèn)題尚未闡明， 通過(guò)反義阻斷或 Si-RNA技術(shù)， 降低 Livin 表達(dá)， 能否逆轉(zhuǎn)宮頸癌細(xì)胞增殖， 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡， 成為宮頸癌治療的新途徑， 有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

總之， Livin 基因在宮頸癌的發(fā)生中具有抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的作用， 可以做為宮頸癌診斷及預(yù)后的相關(guān)指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1] Ka H， Hunt JS. Temporal and spatial patterns of expression of inhibitors of apoptosis in human placentas. Am J Pathol， 2003， 163（2）：413-422.

[2] Kawasaki H， Altieri DC， Lu CD， et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer. Cancer Res， 1998， 58（22）：5071-5074.

[3] 吳曉梅， 袁濤. Survivin、Livin、CD44v6在宮頸癌以及癌前病變中的表達(dá)及其臨床意義. 中國(guó)老年學(xué)雜志， 2014， 34（3）：660-662.

[收稿日期：2016-01-26]