屠宰豬常見病毒隱性感染情況的監(jiān)測與分析

王衛(wèi)國，何世成，王昌建，袁田慧子，林 源，郭 威，唐小明，魯杏華，邱立新（湖南省動物疫病預(yù)防控制中心，湖南長沙 410014）

?

屠宰豬常見病毒隱性感染情況的監(jiān)測與分析

王衛(wèi)國，何世成，王昌建，袁田慧子，林 源，郭 威，唐小明，魯杏華，邱立新
（湖南省動物疫病預(yù)防控制中心，湖南長沙 410014）

摘 要：為評估常見豬病原的隱性感染情況，使用熒光PCR檢測技術(shù)對采自13個(gè)屠宰場的1 224份健康豬淋巴結(jié)、1 194份健康豬扁桃體進(jìn)行高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HPPRRSV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒（PRV）等主要豬病病原進(jìn)行核酸檢測。結(jié)果顯示，屠宰場內(nèi)健康豬群中的病原陽性率分別為PRV 7.5%、PRRSV 4.5%、HPPRRSV 1.4%、CSFV 0.2%，表明健康豬群中有部分豬攜帶有致病性病原。

關(guān)鍵詞：淋巴結(jié)；扁桃體；豬繁殖與呼吸綜合征病毒；豬瘟病毒；豬偽狂犬病毒

近年來，我國養(yǎng)豬業(yè)迅猛發(fā)展，但隨著生豬的頻繁流動和引種，疫病形勢日趨復(fù)雜，免疫失敗、新老疫病的混合感染時(shí)有發(fā)生［1-6］。除了場外致病性病原的入侵因素外，場內(nèi)病原的循環(huán)隱性感染、毒力返強(qiáng)也是生豬疫情突發(fā)或持續(xù)發(fā)生的主要因素。為評估外觀健康豬群內(nèi)主要病原感染情況，對從13個(gè)屠宰場采集的1 224份淋巴結(jié)、1 194份扁桃體進(jìn)行了豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HPPRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒（PRV）等主要豬傳染病病原開展了熒光RT-PCR或熒光PCR病原學(xué)監(jiān)測。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品。2014年1—12月，在湖南省7個(gè)市（州）13個(gè)屠宰場，按月采集生豬屠宰生產(chǎn)線上的扁桃體、淋巴結(jié)（扁桃體和淋巴結(jié)無對應(yīng)關(guān)系），全年采集檢測的總量為豬淋巴結(jié)1 224份、扁桃體1 194份。

1.1.2 主要檢測儀器與試劑。ABI 7500 熒光PCR儀、組織研磨儀、全自動核酸提取儀；PRRSV、HPPRRSV、CSFV、PRV等病毒核酸熒光RT-PCR檢測試劑盒，均為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司產(chǎn)品；核酸提取試劑盒（磁珠法），為江蘇天隆生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 樣本處理與實(shí)驗(yàn)室檢測。用消毒眼科手術(shù)剪從每份組織的三個(gè)不同位置分別取樣約0.2 g放入滅菌離心管中，用手術(shù)剪剪碎，加入1.5 mL 生理鹽水和小鋼珠，放入組織研磨器中勻漿3 min，離心取上清200 μL進(jìn)行核酸提取。提取后的核酸及時(shí)進(jìn)行熒光RT-PCR或熒光PCR檢測。核酸提取和熒光PCR檢測均按試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 總體情況

對來自13個(gè)屠宰場的1 224份淋巴結(jié)、1 194份扁桃體共2 418份樣品進(jìn)行了豬常見病病原學(xué)監(jiān)測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)病原學(xué)陽性率最高的是PRV，其次分別是PRRSV、HPPPRV和CSFV，具體結(jié)果見表1。

表1 屠宰場豬主要傳染病病原檢測結(jié)果

2.2 組織分布

對淋巴結(jié)和扁桃體的檢測結(jié)果進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示，PRRSV、CSFV等病原在淋巴結(jié)和扁桃體上的帶毒率較一致，但PRV在扁桃體上的帶毒率遠(yuǎn)高于淋巴結(jié)，具體結(jié)果見表2。

表2 不同樣品類型檢測結(jié)果

2.3 時(shí)間分布

根據(jù)農(nóng)歷季節(jié)，對不同時(shí)期樣品的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示，PRRSV、PRV一年四季均有較高的帶毒率。其中，PRRSV帶毒率在冬季為高峰，PRV帶毒率在春季為高峰；CSFV在夏、秋、冬三個(gè)季節(jié)中均有陽性帶毒健康豬出現(xiàn)，但在秋季為帶毒高峰，具體結(jié)果見表3。

表3 不同時(shí)期樣品檢測結(jié)果

2.4 地域分布

本次檢測的樣品來自湖南省長沙、株洲、湘潭、岳陽、邵陽、婁底、懷化等7個(gè)市（州）的13個(gè)屠宰場，各地樣品檢測結(jié)果見表4。結(jié)果顯示，不同地區(qū)的病原分布差異較大。PRRSV主要分布于婁底、湘潭、株洲等地區(qū)；CSFV僅在婁底和長沙地區(qū)出現(xiàn)；PRV在懷化的感染率最高，在婁底、岳陽、湘潭也有一定的感染率；PCV2除在婁底未檢出外，其他各地區(qū)均有28%以上的檢出率，懷化的陽性率最高，達(dá)到91.7%。

表4 不同地域樣品的檢測陽性率（%）

3 討論

近年來，我國豬病以豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、豬流行性腹瀉、豬偽狂犬病以及細(xì)菌性疫病為主，在流行特點(diǎn)上以多重感染、繼發(fā)感染、呼吸道癥候、繁殖障礙癥候、免疫抑制等為主要表征。整體而言，豬偽狂犬病疫情呈上升態(tài)勢，豬流行性腹瀉日趨平穩(wěn)，豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟多為散發(fā)。另外，對部分疫病的免疫措施存在較大分歧，使豬場疫病防控形勢不容樂觀［1-5］。對屠宰場內(nèi)外觀健康豬群中主要傳染病病原的監(jiān)測結(jié)果顯示，PRV感染率最高，達(dá)7.5%，其次為PRRSV（4.5%）和CSFV（0.2%），表明外觀健康豬群中存在主要疫病病原的帶毒感染，各病原陽性率的高低也與目前各疫病的流行形勢相一致［5-11］。

目前，豬病病原學(xué)監(jiān)測一般以扁桃體、淋巴結(jié)、整套內(nèi)臟組織為靶向組織，大多為多個(gè)組織臟器同

時(shí)取樣混檢，工作量大，污染率高，給檢測工作帶來諸多不便。本次組織檢測結(jié)果顯示，PRRSV、CSFV在扁桃體和淋巴結(jié)中均能檢出，無明顯差異，PRV在扁桃體中的檢出率遠(yuǎn)高于淋巴結(jié)，表明扁桃體可作為靶向組織用于PRRSV、CSFV、PRV的病原學(xué)監(jiān)測。

從三種主要豬病病原的季節(jié)分布結(jié)果看，冬春季節(jié)健康豬群的病原帶毒率較高，具有一定的示病意義。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 楊漢春.目前我國規(guī)模化豬場疫病流行特點(diǎn)與控制對策［J］.動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)，2004（2）：1-3.

［2］ 衛(wèi)秀余.規(guī)模豬場豬病流行現(xiàn)狀和防控對策［J］.養(yǎng)豬，2015（2）：103-104.

［3］ 萬遂如.目前動物疫病發(fā)生流行的原因與防控對策［J］.獸醫(yī)導(dǎo)刊，2015（7）：29-33.

［4］ 羅智華.豬病近年來流行情況及防治要點(diǎn)［J］.南方農(nóng)業(yè)，2015（6）：143-144.

［5］ 田克恭.高致病性藍(lán)耳病的流行歷程及趨勢分析［J］.今日養(yǎng)豬業(yè)，2015（2）：51-52.

［6］ 亢文華，原霖，汪葆玥，等.2014年我國豬病流行特點(diǎn)及防控措施［J］.中國豬業(yè)，2015，（2）：40-44.

［7］ 鄒敏，楊旭兵，鄭輝，等.2012—2013年我國部分地區(qū)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國動物檢疫，2015（4）：1-5.

［8］ 衛(wèi)秀余，沈強(qiáng)，何海紅，等.2014年豬病診斷回顧［J］.今日養(yǎng)豬業(yè)，2015（1）：42-43.

［9］ 張浩吉.豬瘟國內(nèi)流行情況及凈化技術(shù)［J］.獸醫(yī)導(dǎo)刊，2015（1）：28-32.

［10］ 周展波，林亦孝.湖南省規(guī)?；i場豬病流行特點(diǎn)與防控對策［J］.豬業(yè)科學(xué)，2015，（1）：100-102.

［11］ 張顯浩，陳瑞愛，李冰，等.2012年—2013年我國集約化豬場豬偽狂犬病病毒感染情況的調(diào)查［J］.動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2015（3）：133-136.

（責(zé)任編輯：朱迪國）

Surveillance and Analysis on Silent Infection of Common Viruses in Slaughtered Pigs

Wang Weiguo，He Shicheng，Wang Changjian，Yuantian Huizi，Lin Yuan，Guo Wei，Tang Xiaoming，Lu Xinghua，Qiu Lixin
（Hunan Animal Disease Prevention and Control Center，Changsha，Hunan 410014）

Abstract：In order to evaluate the silent infection of the main pathogens in pigs，1 224 lymph nodes and 1 194 tonsils were collected from 13 pig slaughterhouses to detect porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV），high pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus（HPPRRSV），classical swine fever virus（CSFV）and pseudorabies virus（PRV）by using fl uorescent PCR technology.The results showed that the PRV infection rate in healthy swine herds was the highest，up to 7.5%，and the following was PPRSV（ 4.5%），HPPRRSV （1.7%），CSFV （0.2%）.The results indicated that some pigs in clinical healthy swine herds carryed pathogenic pathogens.

Key words：lymph nodes；tonsils；PRRSV；CSFV；PRV

中圖分類號：S851.3

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1005-944X（2016）03-0010-03

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.03.003

通訊作者：何世成